STORAGE OF ACTIVITY OF THE HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN HORMONE IN SOLUTION AT ADDITION OF ORGANIC COMPOUNDS TO THE PHARMACOLOGICAL COMPOSITION

The more stable among the tested samples were samples with saccharose in the concentration of 50–75 mg per cm3. While adding of L- lysine to samples the most stable activity was discovered in the experimental series of samples with the content of lysine of 10 mg per cm3 – activity increased by 54 % as compared to theoretical initial activity of HCG during 8 weeks. While storing gonadotropin with L-glycine fluctuations of hormone activity in all series of samples were observed. Adding of 0.2 mg per cm3 of L-glycine had a more expressed stabilizing effect. Adding of 0.2 mg per cm3 of L-methionine produced relatively high and stable activity of gonadotropin during the 6 weeks storage. Adding of 0.25 mg / cm3 of L- glycine and 75.50 mg / cm3 of saccharose to experimental samples during 2 weeks at 40 °C provided 69.8 % and 60.7 % saving activity of hCG respectively. Activity of gonadotropin in a series of samples with the addition of L- glycine and mannitol was significantly lower and at the end of the study was at an appropriate rate with the control series models. The highest activity of gonadotropin was detected while adding fillers – 10 mg / cm3 L-lysine and 75 mg / cm3 saccharose and mannitol – to recipes as a stabilizer

Формування і властивості полімерних наношарів для поліпшення росту клітин in vitro

Проблематика. Культивування культур клiтин на синтетичних покриттях дає можливість отримати комплексну просторово організовану клітинну систему, що підвищує прикріплення клітин і сприяє їх подальшій диференціації, проліферації та формуванню мiжклiтинного матриксу. Тому виникає потреба у вивченні властивостей покриттів, зокрема біосумісності з клітинами, оскільки вони можуть бути використанні для різних біологічних і медичних досліджень. Мета. Завданням наших досліджень є вивчення впливу наноповерхонь, модифікованих AПТЕСом, декстраном, альбуміном та їх композиціями, на проліферативну і метаболічну активність клітин B16F10. Методика реалізації. У дослідженні використовували клітини лінії B16F10, які культивували на живильному середовищі ДМЕМ із додаванням 10 % ЕТС, 1 % пеніциліну та стрептоміцину в атмосфері з вмістом 5 % CO2 при 37 °C упродовж 72 год. Клітини висівали на скельця, модифіковані наношарами у різних комбінаціях: контрольна група – скло; скло/APTES; cкло/APTES/декстран; скло/APTES/альбумін; скло/альбумін; скло/APTES/декстран/альбумін. Вплив покриттів на проліферативний ріст і життєздатність культури оцінювали кожні 24 год культивування. Для визначення активності лактатдегідрогенази кондиційне середовище відбирали на 24, 48 та 72-гу год культивування. Результати. Висока життєздатність та інтенсивність проліферативного росту клітин спостерігались при культивуванні на поверхнях, модифiкованих АПТЕСом, альбуміном, АПТЕС/декстран/альбуміном. Підвищення проліферації клітин B16F10, вирощених на нанопокриттях з альбуміном (P < 0,001) та АПТЕС/декстран/альбуміном (P < 0,001), відзначено на 48 та 72-гу год культивування, на відміну від контролю та інших дослідних груп. При культивуванні на покритті з АПТЕСом кількість клітин зростала, на відміну від клітин на поверхні скелець, тільки на 72-гу год культивування. Висновки. Досліджувані наноповерхні, модифіковані альбуміном і АПТЕС/декстран/альбуміном, покращують життєздатність та проліферацію клітин лінії B16F10 та можуть бути використані як 3D-системи для вирощування клітин різних типів

STORAGE OF ACTIVITY OF THE HUMAN CHORIONIC GONADOTROPIN HORMONE IN SOLUTION AT ADDITION OF ORGANIC COMPOUNDS TO THE PHARMACOLOGICAL COMPOSITION

The more stable among the tested samples were samples with saccharose in the concentration of 50–75 mg per cm3. While adding of L- lysine to samples the most stable activity was discovered in the experimental series of samples with the content of lysine of 10 mg per cm3 – activity increased by 54 % as compared to theoretical initial activity of HCG during 8 weeks. While storing gonadotropin with L-glycine fluctuations of hormone activity in all series of samples were observed. Adding of 0.2 mg per cm3 of L-glycine had a more expressed stabilizing effect. Adding of 0.2 mg per cm3 of L-methionine produced relatively high and stable activity of gonadotropin during the 6 weeks storage. Adding of 0.25 mg / cm3 of L- glycine and 75.50 mg / cm3 of saccharose to experimental samples during 2 weeks at 40 °C provided 69.8 % and 60.7 % saving activity of hCG respectively. Activity of gonadotropin in a series of samples with the addition of L- glycine and mannitol was significantly lower and at the end of the study was at an appropriate rate with the control series models. The highest activity of gonadotropin was detected while adding fillers – 10 mg / cm3 L-lysine and 75 mg / cm3 saccharose and mannitol – to recipes as a stabilizer

STABILIZING THE GONADOTROPIN ACTIVITY WITH THE USE OF DIFFERENT ORGANIC COMPOUNDS

Complex studies of optimum quantitative and qualitative composition of carbohydrates and amino acids necessary for gonadotropines activity stabilization were the aim of our investigations. This was determined by biological active substances - saccharose, L- lysine which stabilizes gonadotropins activity for longer use while preserving activity. As a result of the studies we found out that during 6 weeks of incubation at 40 0 ɋ, the activity of hCG was the highest in the samples with 50 and 75 mg/sm3 of saccharose. Concentration of the hormone was high at 8 week of the incubation in the group of samples with 75 mg/sm3 of saccharose. In the series of hCG samples with 10 mg/sm3 of L - lysine, the activity of hormone was 54% during 8 weeks. Compatible adding of 10 mg/cm3 of L-lysine + 75 mg/sm3 of saccharose provided the best stabilization gonadotropin activity

Формирование и свойства полимерных нанопокрытий для улучшения роста клеток in vitro

Проблематика. Культивування культур клiтин на синтетичних покриттях дає можливість отримати комплексну просторово організовану клітинну систему, що підвищує прикріплення клітин і сприяє їх подальшій диференціації, проліферації та формуванню мiжклiтинного матриксу. Тому виникає потреба у вивченні властивостей покриттів, зокрема біосумісності з клітинами, оскільки вони можуть бути використанні для різних біологічних і медичних досліджень. Мета. Завданням наших досліджень є вивчення впливу наноповерхонь, модифікованих AПТЕСом, декстраном, альбуміном та їх композиціями, на проліферативну і метаболічну активність клітин B16F10. Методика реалізації. У дослідженні використовували клітини лінії B16F10, які культивували на живильному середовищі ДМЕМ із додаванням 10 % ЕТС, 1 % пеніциліну та стрептоміцину в атмосфері з вмістом 5 % CO₂ при 37 °C упродовж 72 год. Клітини висівали на скельця, модифіковані наношарами у різних комбінаціях: контрольна група – скло; скло/APTES; cкло/APTES/декстран; скло/APTES/альбумін; скло/альбумін; скло/APTES/декстран/альбумін. Вплив покриттів на проліферативний ріст і життєздатність культури оцінювали кожні 24 год культивування. Для визначення активності лактатдегідрогенази кондиційне середовище відбирали на 24, 48 та 72-гу год культивування. Результати. Висока життєздатність та інтенсивність проліферативного росту клітин спостерігались при культивуванні на поверхнях, модифiкованих АПТЕСом, альбуміном, АПТЕС/декстран/альбуміном. Підвищення проліферації клітин B16F10, вирощених на нанопокриттях з альбуміном (P < 0,001) та АПТЕС/декстран/альбуміном (P < 0,001), відзначено на 48 та 72-гу год культивування, на відміну від контролю та інших дослідних груп. При культивуванні на покритті з АПТЕСом кількість клітин зростала, на відміну від клітин на поверхні скелець, тільки на 72-гу год культивування. Висновки. Досліджувані наноповерхні, модифіковані альбуміном і АПТЕС/декстран/альбуміном, покращують життєздатність та проліферацію клітин лінії B16F10 та можуть бути використані як 3D-системи для вирощування клітин різних типів.Background. Cultivation of cell cultures on synthetic coating makes it possible to obtain a complex spatially organized cellular system that enhances cell attachment and determines all further processes of differentiation, proliferation, and formation of extracellular matrix. It is necessary to examine properties of coatings, particularly, such as biocompatible polymers with cells, as they can be applied for various biological and medical applications. Objective. We investigated the effects of glass surfaces modified with dextran, APTES, albumin and they compositions on the proliferation and metabolic activity of B16F10 cells. Methods. Cellular line B16F10 were cultured in DMEM medium supplemented with 10 % fetal calf serum, 1 % penicillin-streptomycin in 5 % CO₂ at 37 °C for 72 h. Cells were seeded at the glass plates, which modified nanolayers in various combinations: control group – glass, glass/APTES, glass/APTES/dextran, glass/APTES/albumin, glass/albumin, glass/APTES/dextran/albumin. The influence of the surface properties on the proliferation of B16F10culture and its viability was analyzed after every 24 h of incubation. The cultural medium was collected after 24, 48, and 72 h of cultivation for investigation lactate dehydrogenase activity. Results. The high viability and proliferation growth of cells on APTES, albumin, and APTES/dextran/albumin coating were higher if compared with growth of cells on a glass surface. Improved the proliferation of the B16F10 cells was observed onto albumin (P < 0.001) and APTES/dextran/albumin (P < 0.001) nanolayers on 48 and 72 h, in contrast to to control and other experimental groups. Whereas, the difference between the number of cells grown on glass and APTES coating increases only on 72 h of cultivation. Conclusions. Obtained results have shown that the glass surface modified albumin and APTES/dextran/albumin resulted in improving the viability and cell proliferation of B16F10cell line and can be used as a 3D system for cultivation of cells of different types.Проблематика. Культивирование культур клеток на синтетических покрытиях позволяет получить комплексную пространственно организованную клеточную систему, что повышает прикрепление клеток и способствует их дальнейшей дифференциации, пролиферации и формированию междуклеточного матрикса. Поэтому возникает необходимость в изучении свойств покрытий, в частности биосовместимости с клетками, поскольку они могут быть использованы для различных биологических и медицинских исследований. Цель. Задачей наших исследований является изучение влияния нанопокрытий, модифицированных AПТЕСом, декстраном, альбумином и их композициями, на пролиферативную и метаболическую активность клеток B16F10. Методика реализации. В исследовании использовали клетки линии B16F10, которые культивировали на питательной среде ДМЕМ с добавлением 10 % ФСТ, 1 % пенициллина и стрептомицина в атмосфере с содержанием 5 % CO₂ при 37 °C в течение 72 ч. Клетки высевали на стекла, модифицированные нанослоями в различных комбинациях: контрольная группа – стекло; стекло/АПTEС; стекло/АПTEС/декстран; стекло/АПTEС/альбумин; стекло/альбумин; стекло/АПTEС/декстран/альбумин. Влияние покрытий на пролиферативный рост и жизнеспособность культуры оценивали каждые 24 ч культивирования. Для определения активности лактатдегидрогеназы кондиционную среду отбирали на 24, 48 и 72-й час культивирования. Результаты. Высокая жизнеспособность и интенсивность пролиферативного роста клеток наблюдались при культивировании на поверхностях, модифицированных АПТЕСом, альбумином и АПТЕС/декстран/альбумином. Повышение пролиферации клеток B16F10, выращенных на нанопокрытиях с альбумином (P < 0,001) и АПТЕС/декстран/альбумином (P < 0,001), отмечено на 48 и 72-й час культивирования, в отличие от контроля и других групп. При культивировании на покрытии с АПТЕСом количество клеток возрастало, в отличие от роста клеток на поверхности стекол, только на 72-й час культивирования. Выводы. Исследуемые нанопокрытия, модифицированные альбумином и АПТЕС/декстран/альбумином, улучшают жизнеспособность и пролиферацию клеток линии B16F10 и могут быть использованы как 3D-системы для выращивания клеток различных типов