El Fenómeno El Niño 1992-93: Su influencia en la biología reproductiva de Tagelus dombeii

The El Niño 1992-93 phenomena incremented the number of matures males and females, and induced the spawning of Tagelus dombeii, due to the rise of the sea water temperature. The sex proportion was 1.2:1.0, (female:male). In the accelerated gametogenesis, we differentiated : oogonias and oocytes (previtelogenesis), ovocytes I (primary vitelogenesis) and ovocytes II (secondary vitelogenesis). The maturity scale, with high percentage of matures specimens and in spawning, and scarce immaturity and in development, were classificated in : non differentiated, immaturity, mature and spawn.El fenómeno El Niño 1992-93, indujo un incremento en la cantidad de ejemplares maduros y en desove de gametos de Tagelus dombeii, debido al aumento de la temperatura superficial del mar. La proporción de sexos fue de 1,2:1,0 a favor de las hembras. En la gametogénesis acelerada, sediferenció: ovogonias y ovocitos (en previtelogénesis) ovocitos I (en vitelogénesis primario) y ovocitos II (en vitelogénesis secundario). La escala de madurez gonadal, con altos porcentajes de ejemplares maduros y en desove ve, y pocos inmaduros y en desarrollo, se clasificó en: Indiferenciados, inmaduros, en desarrollo, maduros y desovados

Biología reproductiva del pulpo Octupus mimus (Mollusca: Cephalopoda) de la región de Matarani, Arequipa, Perú

Monthly random samplings (n = 25) were taken from May 1995 to April 1996 in Matarani port, Arequipa (10°59'40" South and 72° 06'13" West). They were shown to be gonochoric and to have sexual dimorphism (the male has an arm for copulation). The sex proportion was 2,1:1,0 (male: female); eight stages of the oocyte development were also found during oogenesis. According to their reproductive behavior, the following maturity gonadic scale was established: a) undifferentiated, b) immature, c) maturation beginning, d) developing, e) mature, f) copula, g) postcopula, autofecundation and evacuation, h) postevacuation. Mature females were preferentially found in spring and summer; mature males at the end of the spring and summer; copulation occurred during summer; autofecundation and evacuationof the eggs were evident in August (50%), October (50%), November (71,4%), December (33%) and January (33%). The first maturity in males was found at 9,5 cm and in the females at 12,5 cm of dorsal length of the body. Some females showed oocytes in lysis and with advanced oogenesis beginning of a new cycle, which demonstrates that not all female die after taking care of the eggs until the final hatching.De mayo de 1995 a abril de 1996, se realizaron al azar muestreos mensuales de 25 ejemplares de Octopus mimus de los desembarques del puerto de Matarani, Arequipa (16° 59'40"S y 72° 06'13"W). Son animales gonocóricos, presentan dimorfismo sexual, y los machos tienen el brazo ectocotilizado o copulador. La proporción de sexos fue de 2,1:1,0 a favor de los machos; se determinaron ocho estadios de desarrollo de los ovocitos, durante la ovogénesis. De acuerdo a su comportamiento reproductivo, se estableció la siguiente escala de madurez gonadal: a) indiferenciado, b) inmaduro, c) inicio de maduración, d) en desarrollo, e) maduros, f)l cópula, g) postcópula, autofecundación y evacuación, h) postevacuación. Las hembras maduras se encontraron preferentemente, en la primavera y verano; los machos maduros a fines de la primavera y en el verano; la cópula se realizó preferentemente durante el verano; la autofecundación y evacuación de los huevos, se evidenciaron en agosto (50%), octubre 50%), noviembre (71,4%), diciembre (33%) y enero (33%). La primera madurez en los machos se encontró a los 9,5 cm y en las hembras a los 12,5 cm de la longitud dorsal del cuerpo. Se observó algunas hembras con ovocitos maduros en lisis y con inicio de ovogénesis avanzada de un nuevo ciclo, que evidencia que no todas las hembras mueren después de cuidar los huevos hasta el final de la eclosión

HERMAFRODITISMO EN MOLUSCOS AULACOMYA ATER (MOLINA) Y ENOPLOCHITON NIGER (BARNES)

En nuestro país no se ha reportado ningúrn caso de hermafroditismo en moluscos con sexos separados(dioicos, posiblemente debido a los pocos trabajos que se realizan utilizando métodos histológicos, técnica que permite determinar con mayor presición los estadios de madurez gonadal, facilita la observación microscópica de las carácterísticas de las células sexuales y permite detectar los posibles casos de hermafroditismo que pasan desapercibidos con las observaciones macroscópicas

Intraluminar testicular colonization and differentiation of the inner cell mass in mice (Mus Musculus)

Cuando las células germinales primordiales (CGPs) son trasplantadas al testículo de otro individuo de la misma especie; colonizan el lumen de los túbulos seminíferos, buscando su nicho para diferenciarse en espermatozoides. Nuestro objetivo fue evaluar la colonización intraluminal de una suspensión de células de la masa celular interna (MCI) obtenidas de blastocistos de ratones. Una suspensión de MCI obtenidos mediante una inmunocirugía en la red testicular de animales tratados previamente con ciclofosfamida para disminuir su propia espermatogénesis fueron trasladados a animales receptores. Se comprobó la presencia de minitúbulos intraluminales en 2 de 100 túbulos seminíferos, lo que demuestra que el trasplante de una suspensión de células de la masa celular interna pueden colonizar los túbulos seminíferos y además mantener una espermatogénesis xenogénica de manera sincrónica con el receptor.Primordial germ cells (PGC`s) are transplanted to testicle of other individual of the same species, they colonize the lumen of the seminiferous tubules, seeking a niche to differentiate into sperm. Our objective was to evaluate the intraluminal colonization of a suspension of cells in the inner cell mass (IMC`s) of blastocysts obtained from mice, using a novel technique. It was transplanted a suspension of ICM by mean of inmunosurgery into the rete testis of recipient animals which were previously treated with cyclophosphamide to reduce their own spermatogenesis. We confirmed the presence of intraluminal minitubules in 2 of 100 seminiferous tubules, demonstrating that transplantation of a suspension of cells from the inner cell mass can colonize the seminiferous tubules and also maintain a synchronously xenogenic spermatogenesis with the receiver

HISTOLOGIA DEL PEDÍCULO DE LA “EXTERNA” DE BRIAROSACCUS CALLOSUS (CIRRIPEDIA, PELTOGASTRIDAE) PARÁSITO DE PARALOMIS LONGIPES (CRUSTACEA, DECAPODA)

Briarosaccus callosus (Boschma, 1930) causa castración y reduce la velocidad de crecimiento de Paralomis longipes Faxon, 1893, “centolla”, crustáceo con un gran potencial económico el Perú. Se procesó el pedículo de la bolsa ovígera (externa) mediante técnicas histológicas con el propósito de caracterizar dicha estructura. Se estableció que estaba constituida por una cutícula fibrilar externa fuertemente eosinófila (107,8 μm) y una interna menos eosinófila (60,5 μm), a menudo con ornamentaciones basófilas. Se discute la conformación de dicho pedículo en función a la relación con el huésped y las implicancias con el ciclo reproductivo de la centolla

Aplicación de dos biomarcadores para el análisis de lesiones en el DNA de bivalvos marinos

El presente trabajo describe la estandarización de las técnicas del Test de Micronúcleo (MN) y Ensayo Cometa para la evaluación del daño en el DNA de bivalvos marinos. La importancia de estas técnicas radica en que permiten evaluar la respuesta temprana al estrés ocasionado por agentes contaminantes y cambios ambientales. Tejidos branquiales de Semimytilus algosus y Aulacomya ater fueron utilizados para tratamientos in vivo e in vitro. Los tejidos fueron expuestos a los agentes mutagénicos Mitomicina C en concentraciones de 0,02; 0,04 y 0,06 x 10-6 M y H2 O2 en una concentración de 100 μM con tiempos de evaluación de 1, 3, 6, 24 y 48 h. Diferentes soluciones para la colecta del tejido y aislamiento celular fueron evaluados obteniendo una mayor viabilidad celular en la solución salina CMFS, pH 7,3; en frío. El Test de Micronúcleo se modificó en la forma de obtener el disgregado celular, realizando la hipotonización en Citrato de sodio 0,9%, fijación en metanol por segundos posterior al frotis y la tinción con Giemsa 2%. La estandarización del Ensayo Cometa Alcalino, descrita por Wilson et al. (1998), se realizó modificando la suspensión celular en agarosa LMP (1% en solución Kenny, pH 7,5), la exposición a solución de lisis (pH 10 con DMSO y Tritón) con variaciones en el tiempo de 1 a 16 h, y la electroforesis en solución alcalina pH 13,7 y tinción con Bromuro de etidio y Nitrato de plata para geles de agarosa. Los cambios realizados en ambas técnicas permitieron obtener un alto número celular con morfología definida, observándose macrolesiones como la formación de MN y aberraciones nucleares, y la determinación cualitativa de microlesiones observadas por fragmentación y migración del DNA

Aplicación de dos biomarcadores para el análisis de lesiones en el DNA de bivalvos marinos

This work describes the standardization of Micronucleus Assay (MN) and Comet Assay techniques used for the evaluation of the DNA damage on marine bivalves. These techniques are important because they can evaluate the early stress response caused by pollutant agents and environmental changes. Branchial tissues of Semimytilus algosus and Aulacomya ater were used for in vivo and in vitro treatments. Tissues were exposed to the mutagenetic agents Mitomicine C in concentrations of 0,02; 0,04 and 0,06 x 10-6 M and H2 O2 in concentration of 100 μM evaluated at 1, 3, 6, 24 and 48 h. Different solutions for the tissue collection and cell isolation were evaluated, obtaining more cell viability with cold CMFS pH 7,3 saline solution. Micronucleus Assay were modified in the obtaining of suspension cell, we used 0,9% Sodium citrate hipotonic solution, fixation in methanol for seconds after the spread and dyed with 2% Giemsa. The Alkaline Comet Assay protocol described by Wilson et al. (1998) was standardized modifying the single-cell suspension embedded in LMP Agarose (1% in Kenny solution, pH 7,5), the exposure at lysing solution (pH 10 with DMSO and Triton) with changes from 1 to 16 h, electrophoresis in alkaline solution pH 13,7 and dyed with Ethidium bromide and Silver nitrate for agarose gels. Changes made at both techniques allowed us to obtain a high cell number with a defined morphology, recognizing macrolessions like the MN formation and nuclear aberrations, and the qualitative determination of microlessions observed by the fragmentation and migration of the DNA.El presente trabajo describe la estandarización de las técnicas del Test de Micronúcleo (MN) y Ensayo Cometa para la evaluación del daño en el DNA de bivalvos marinos. La importancia de estas técnicas radica en que permiten evaluar la respuesta temprana al estrés ocasionado por agentes contaminantes y cambios ambientales. Tejidos branquiales de Semimytilus algosus y Aulacomya ater fueron utilizados para tratamientos in vivo e in vitro. Los tejidos fueron expuestos a los agentes mutagénicos Mitomicina C en concentraciones de 0,02; 0,04 y 0,06 x 10-6 M y H2 O2 en una concentración de 100 μM con tiempos de evaluación de 1, 3, 6, 24 y 48 h. Diferentes soluciones para la colecta del tejido y aislamiento celular fueron evaluados obteniendo una mayor viabilidad celular en la solución salina CMFS, pH 7,3; en frío. El Test de Micronúcleo se modificó en la forma de obtener el disgregado celular, realizando la hipotonización en Citrato de sodio 0,9%, fijación en metanol por segundos posterior al frotis y la tinción con Giemsa 2%. La estandarización del Ensayo Cometa Alcalino, descrita por Wilson et al. (1998), se realizó modificando la suspensión celular en agarosa LMP (1% en solución Kenny, pH 7,5), la exposición a solución de lisis (pH 10 con DMSO y Tritón) con variaciones en el tiempo de 1 a 16 h, y la electroforesis en solución alcalina pH 13,7 y tinción con Bromuro de etidio y Nitrato de plata para geles de agarosa. Los cambios realizados en ambas técnicas permitieron obtener un alto número celular con morfología definida, observándose macrolesiones como la formación de MN y aberraciones nucleares, y la determinación cualitativa de microlesiones observadas por fragmentación y migración del DNA

Unique cyclophosphamide doses in male mice decrease the spermatic quality and germinal epithelium

Ciclofosfamida (CP) es un agente alquilante comúnmente utilizado como fármaco antineoplásico e inmunosupresor. El uso de CP, en el tratamiento de cáncer es limitado debido a su severa toxicidad. El objetivo del presente estudio fue determinar el efecto de una única dosis de CP (220 mg/kg peso corporal) administrada intraperitonealmente después de 7 días, sobre parámetros espermáticos y el epitelio germinal masculino en ratones. Se utilizó machos maduros de la cepa C57BL divididos en 2 grupos (n= 10), Grupo Control (C): NaCl 0,9 % y Grupo Tratamiento (T): CP a 220 mg/kg pc en dosis única y después de 8 días fueron eutanizados. Se registró el peso corporal y de órganos reproductivos: testículos, epidídimos y conducto deferente, se evaluaron la concentración, movilidad y morfología espermática e histología testicular. Se encontraron diferencias significativas (Prueba t- student p<0,05) en el peso corporal (T: 20,18±1,9 g vs C: 23,35±1,2 g); peso testicular (T: 59,71±5,40 mg vs C: 72,90±2,8 mg), cola del epidídimo (T: 9,83±1,54 mg vs C: 14,30±2,20mg, conducto deferente (T: 8,27±0,80 mg vs C: 10,61±0,76 mg respectivamente), concentración (T: 9,2±1,9 vs C: 14,4±3,3 x 106 espermatozoides/mL), Movilidad progresiva (T: 25,98±6,4% vs C: 42,96±5,2%). En la morfología espermática no se observó diferencias significativas (Prueba t- student p<0,05), sin embargo en anomalías de la cola y espermatozoides inmaduros se observó un aumento significativo (T vs. C: 36,24±7,8% vs 31.73±9,1%; 27,44±2,1% vs 18,51±8,6%; respectivamente) y a su vez se observó severos daños en los túbulos seminíferos. Concluimos que una dosis única de CP (220mg/kg pc) disminuye la calidad reproductiva de ratones macho.Cyclophosphamide (CP) is an alkylating agent commonly used as antineoplastic and immunosuppressive drug. The use of CP in the treatment of cancer is limited due to its severe toxicity. The aim of this study was to determine theeffectof a single dose of CP (220 mg/kg b.w.) intraperitoneally administered after 7 days,on sperm parameter and male germinal epithelium in mice. We used C57BL mature male mice divided into 2 groups (n= 10); Control Group (C): 0.9% and NaCl Treatment group (T): CP to 220 mg/kg cw in single dose. After 8 days all the mice were euthanized. The weight of the body and reproductive organs: testis, epididymis and vas deferens, were registered. Concentration, motility and sperm morphology and testicular histology were evaluated. Significant differences were found in body weight (student t-test p<0.05) (T: 20.18±1.9 g vs C: 23.35±1.2 g; testicular weight (T: 59.71±5.40 mg vs C: 72.90±2.8 mg), epididymis tail weight (T: 9.83 ± 1.54 vs C: 14.30 ± 2.20, vas deferens weight (T: 8.27±0.80 mg vs C: 10.61±0.76 mg respectively), concentration (T: 9.2±1.9 vs. C: 14.4±3.3 x 106 sperm / mL), progressive motility (T: 25.98±6,4% vs C: 42.96±5.2%). There wasn´t significant differences in sperm morphology (student t-test p<0.05), but there was a significant increase in abnormal tail and immature sperm (T vs. C: 36,24±7,8% vs 31.73±9,1%; 27,44±2,1% vs 18,51±8,6%; respectively) and also severe damage seminiferous tubules was observed. We conclude that single dose of CP (220mg/kg b.w.) decreased the reproductive quality of male mice

Citoprotective effect of camu-camu Myrciaria dubia on three celular lines of mouse exposed in vivo to potassium bromate

Se evaluó in vivo la capacidad citoprotectora del fruto de Myrciaria dubia (Kunth) McVaugh Camu-camu frente al daño mutagénico producido por bromato de potasio (68,5 mg/k) sobre tres líneas celulares de ratón (hígado, riñón y células sanguíneas). Se utilizó ratones (n= 120) divididos en tres grupos los cuales bebieron ad libitum: TI= control negativo (solo agua) y el grupo TIII (control positivo); El grupo TII bebió el extracto acuoso (2% p/v) del fruto de camu-camu. A los diez días se inyectó una dosis única de KBr03 (68,5 mg/kg peso corporal) vía intraperitoneal, a los grupos TII y TIII. El tratamiento con camu-camu continuo 35 días más, luego los ratones fueron eutanizados para determinar la frecuencia del daño al DNA mediante el protocolo del ensayo cometa alcalino. El grupo TII mostró en todas las líneas celulares el efecto citoprotector del camu-camu (p< 0,05). El efecto dañino al DNA por la acción oxidativa del KBrO3 es inhibido por el extracto acuoso del fruto de camu camu, probablemente por la presencia de los agentes antioxidantes como el Acido ascórbico y los flavonoides.It was evaluated in vivo the cytoprotective capacity of the fruit of Myrciaria dubia H.B.K. MC VAUGH "Camu- camu (Myrtacea) against mutagenic damage caused by potassium bromate (68.5 mg/k) on three mouse cell lines (liver, kidney and blood cells). Mice (n = 120) were divided into three groups which drank ad libitum: distilled water; TI (negative control) and TIII (positive control), the TII group (positive control) drank the aque- ous extract (2 %) of the fruit of Camu-camu. After ten days, only the TII and TIII groups were intraperitoneally injected with a single dose of KBr03(68.5 mg/k). The camu-camu treatment lasted 35 days more, where they were euthanized to determine the frequency of DNA damage by means of the alkaline comet assay protocol. It was observed in all cell lines a cytoprotective effect of camu-camu (p<0.05) with respect with the negative control. The DNA-damaging effects of oxidative KBrO3 action is inhibited by the 2% aqueous extract of camu- camu fruit, probably by the presence of antioxidants such as ascorbic acid and flavonoids

Identificación molecular y relaciones evolutivas de Pomacea nobilis, base para la autenticación específica del churo negro de la Amazonia peruana

In the Peruvian Amazon, freshwater snails of the Ampullariidae family are known as churos, and around 20 species have originally been described for Peru. Although they are widely used for food, traditional medicine and the object of many studies for their cultivation and industrialization, only the species Pomacea maculata is mentioned in the literature. Molecular identification was carried out based on the mitochondrial marker COI of individuals of "churo negro" apple snails (Pomacea) commercialized in the markets of Iquitos, as well as those used in restaurant dishes in the city of Lima, and contrasted with specimens from their natural habitat. It was found that these specimens, correspond to the species Pomacea nobilis (Reeve, 1856). The molecular phylogenetic analysis showed P. nobilis as the sister species of P. guyanensis, in the P. glauca group, distantly related to P. maculata. The uncorrected distances found between them, for the mitochondrial marker COI, were from 11.33% to 13.17%, while with P. maculate were from 13.67% to 15.33%. These results demonstrated the effectiveness of the DNA barcode for the identification and authentication of the species, which gives it added value for its eventual export trade.En la Amazonia Peruana los caracoles dulceacuícolas de la familia Ampullariidae son conocidos como churos y originalmente han sido descritas para Perú alrededor de 20 especies. Aunque son muy usadas para alimentación, medicina tradicional y objeto de muchos estudios para su cultivo e industrialización, solamente es mencionada en la literatura la especie Pomacea maculata. Se llevó a cabo la identificación molecular sobre la base del marcador mitocondrial COI, de individuos de churos negros (Pomacea) comercializados en los mercados de Iquitos, así como los usados en platos a la carta en la ciudad de Lima, contrastados con otros individuos de procedencia de su hábitat natural. Se encontró que estos especímenes expendidos corresponden a la especie Pomacea nobilis (Reeve, 1856). El análisis filogenético molecular mostró que P. nobilis es especie hermana de P. guyanensis, en el grupo de P. glauca, distantemente relacionada de P. maculata. Las distancias no corregidas encontradas entre ellas, para el marcador mitocondrial COI, fueron de 11.33% a 13.17%, mientras que con P. maculata fueron de 13.67% a 15.33%. Estos resultados demostraron la eficacia del código de barras de ADN para la identificación y autenticación de la especie, lo que le da un valor agregado para su eventual comercio de exportación