Eritropoetinin gürültü uygulaması sonrası kokleada S100 proteini ekspresyonuna etkisi: Deneysel çalışma

Amaç: Çalışmamızda Eritropoetinin, gürültü ile uyarılmış sıçan spiral gangion nöronlarında S100 proteini dağılımına etkisinin, immunohistokimyasal yöntem ile araştırılması amaçlandı. Gereç ve Yöntem: Yirmi-iki Wistar albino sıçan üç gruba ayrıldı: sağlıklı kontrol grup (n=7), Serum fizyolojik enjeksiyon grubu (n=7) ve Eritropoetin enjeksiyon grubu (n=8). Serum fizyolojik ve Eritropoetin enjeksiyon gruplarına 3 saat süre ile beyaz gürültü (100 dB SPL) uygulandı. Koklea kesitleri gümüşleme yöntemi ile histokimyasal olarak ve S100 antikoru ile immunohistokimyasal olarak boyandı. Bulgular: Gümüşleme yöntemine göre sağlıklı kontrol grubu spiral ganglion nöronlarında normal yapı ve zayıf bir boyanma gözlendi. Serum fizyolojik enjeksiyon grubu ganglion nöronlarının sitoplazmasında koyu-siyah boyanma ve dejeneratif görünüm belirlendi. Eritropoetin enjeksiyon grubunda ise az sayıda nöronun koyu boyandığı izlendi. S100 immunohistokimyasal boyamasına göre, sağlıklı kontrol grubunda Schwann hücrelerinde ve myelin lamellerde kuvvetli reaksiyon gözlendi (p<0.05). Serum fizyolojik enjeksiyon grubunda Schwann hücrelerinde orta şiddetli S100 reaksiyonu izlenirken spiral ganglion nöronlarının diğer bölgelerde zayıf reaksiyon vardı (p<0.05). Eritropoetin enjeksiyon grubunda yer yer bazı bölgelerde azalma olsa da, doku genelinde sağlıklı kontrole benzer kuvvetli S100 ekspresyonu tespit edildi. Tartışma: Eritropoetin sıçan kokeasında gürültü ile indüklenmiş SGN dejenerasyonunu, Schwann hücrelerini koruyarak engeleyebilir.Aim: To investigate the efect of Erythropoietin on acoustically overstimu- ated rat spiral ganglion neurons (SGNs) using S100 protein immunostaining. Material and Method: Twenty-two Wistar albino rats were divided into three groups: healthy control group (n=7), Saline solution (n=7) and Erythropoietin njection groups (n=8). Saline solution and Erythropoietin injection groups re- ceived white noise (100 dB SPL) for 3 hours. Cochlear sections were stained by silver staining technique and immunostained by S100 antibody. Results: Histochemical analysis of silver staining sections revealed normal structure and a weak staining in SGNs of healthy control group. However, dark-black cytoplasmic staining, cellular shrinkage and degeneration were detected n saline injection group. On the other hand, a few weakly stained neurons were observed in erythropoietin injection group. S100 staining demonstrated strong reaction in Schwann cells and myelin sheaths of SGNs in healthy con- trol group (p&lt;0.05). In saline solution injection group, Schwann cells showed moderate S100 reaction and other regions of SGNs showed weak reaction (p&lt;0.05). In erythropoietin injection group, strong S100 expression almost similar to the healthy control group was determined, although there was an occasional decrease. Discussion: Erythropoetin may prevent noise induced SGN degeneration via protecting the Schwann cells in rat cochlea

Ultrastructural and immunohistochemical examination of the protective effects of various antioxidants on chemotherapy applied rat ovarium follicules.

Kanser tedavilerinde kemoterapötik olarak sıklıkla kullanılan ajanlardan biri olan Siklofosfamid, üreme organlarına toksik etki ederek döllenmenin bozulmasına neden olur. Çalı&#290;mamızda kemoterapotik ajan Siklofosfamid&#8217;in normal ovaryum dokusunda olaylandırdığı dejeneratif etkiler üzerine askorbik asit, &#945;-tokoferol ve selenyum&#8217;un olası antioksidan etkilerini immünohistokimyasal ve elektron mikroskobik düzeyde değerlendirmeyi amaçladık. Bu nedenle ya&#290;am ve geli&#290;im sinyal moleküllerinden TGF-&#946;1, GDF-9, PCNA, apoptozis sinyal moleküllerinden kaspaz-3, APAF-1 primer antikorları ve hücrelerdeki DNA hasarını belirlemek için TUNEL yöntemi kullandık. Siklofosfamid uygulamasından sonra ovaryum dokusunda tüm geli&#290;im a&#290;amasındaki folliküllerin granüloza hücrelerinde TGF-&#946;1, PCNA, oositlerde ise GDF-9 tutulumlarının kontrol grubuna kar&#290;ın oldukça azaldığı ve kaspaz-3, APAF-1 tutulumlarının ise belirgin olarak arttığı belirlendi. Ayrıca TUNEL yöntemi ile bu grupta atretik folliküllerin sayısının arttığı ve bazı Graaf folliküllerde DNA hasarı olan hücrelerin kontrol grubuna göre kuvvetli tutulum gösterdiği saptandı. Siklofosfamid ile birlikte antioksidan uygulanan grupların geli&#290;mekte olan folliküllerinde ise TGF-&#946;1, PCNA, oositte ise GDF-9 immünreaksiyonun kontrol grubuna yakın olarak arttığı, kaspaz-3, APAF-1, TUNEL tutulumlarının belirgin olarak azaldığı ve doku genelinde atretik folliküllerin sayısının anlamlı derecede azaldığı saptandı.Elektron mikroskobik bulgularımız da immünohistokimyasal bulgularımızla e&#290;de&#290; olarak; Siklofosfamid uygulanmı&#290; ovaryum dokularında özellikle çok sıralı primer folliküllerin granüloza hücrelerinde kontrol grubuna kar&#290;ın yoğun dejeneratif deği&#290;iklikler saptandı. Antioksidan uygulanan 3 grupta ise ovaryumun yapısının korunduğu gözlendi. Çalı&#290;mamızda elde ettiğimiz bulgulara göre, kemoterapi tedavisi sırasında normal ovaryum dokusunda olu&#290;an serbest radikallerin neden olduğu dejeneratif etkilerin antioksidanlar ile en az düzeye indirilerek baskılanabileceği ve toksik etkilerden korunabileceği sonucuna varıldı.One of the most common chemotherapeutic agents that is used in cancer treatment is cyclophosphamide; that toxic effects on female reproductive organs and causes fertilization failure. In our study, we aimed to immunohistochemically and electron microscobically evaluate the possible antioxidant effects of ascorbic acid, &#945;-tocopherol and selenium, on the degenerative effects of cyclophosphamide on normal ovarian tissue. To this end we used TGF-&#946;1, GDF-9, PCNA as developmental signal molecules; Caspase-3, APAF-1 as apoptotic signal molecules. TUNEL method is used in order to evaluate the DNA damage caused at the cell level. Following cyclosphamide application, we observed a decrease in TGF-&#946;1, PCNA immunoreaction in the granulosa cells of developing follicules and a decrease in GDF-9 immunoreaction in oocytes and a distinctive increase in caspase-3 and APAF-1 immunoreaction when compared to control group. Besides an increase in athretic follicules and in some Graaf follicules&#8217;s cells with DNA damage had showed a strong immunopositive reaction when compared to control group in TUNEL analysis. TGF-&#946;1 and PCNA immunoreactivity of developing follicules and GDF-9 immunoreaction of oocytes was similiar to the control group whereas Caspase-3 and APAF-1 immunoreaction in TUNEL analysis showed a distinctive decrease in both cyclosphamide and antioxidant treated group. Again in the same group the number of athretic folicules have found out to decrease significantly. Following electron microscobic examinations, we have observed intense degenerative changes in the multi layer primary follicles&#8217;s granulosa cells in cyclophosphamide treated group, which is an alike finding with immunohistochemical part of the study. In all of the three antioxidant treated groups, both ovaries and zona pellucida of the oocytes remained the same. Degeneration at the granulosa cells was moderately inhibited and there was quite a few decrease in the number of cells with dark cytoplasm. According to our observations, we have concluded that, degenerative changes at the ovaries caused by the free radicals during the chemotherapy treatment can be repressed or degraded to minimum by the help of antioxidants and may maintain a protection from the toxic side effects at the same time