Organogênese em três espécies de Annona (Annonaceae)

This study aimed to evaluate, under in vitro conditions, the regenerative potential of leaves of three species ofAnnona (Annonaceae), A. squamosa, A. bahiensis and A. glabra, and hypocotyl and epicotyl segments of A. squamosa.In the first study, organogenesis was induced by inoculating the first leaves of three species of Annona in WPM mediumsupplemented with all combinations of concentrations of BAP (2.22, 4.44, 8.88 and 17.76 μM) and NAA (0.00, 1.34, 2.68and 5.37 μM). The cotyledons and first leaves of A. squamosa were also cultivated in the same culture media. In thesecond study, hypocotyl and epicotyl segments of A. squamosa were inoculated in a medium supplemented with differentconcentrations of BAP (0.00, 2.22, 8.87, 17.74 and 35.48 μM). The results showed that organogenesis in Annona leavesis dependent on the type of explant, genotype and auxin-cytokinin balance used. In A. squamosa, the cotyledons hadhigher organogenic potential for micropropagation. Multiple shoots were regenerated from A. squamosa hypocotyls andepicotyls, but the regenerative potential of the hypocotyl was higher than that of the epicotyl.Este trabalho teve como objetivos avaliar, sobcondições in vitro, o potencial regenerativo de folhas de três espécies de Annona (Annonaceae), A. squamosa, A. bahiensise A. glabra (Annonaceae), e de segmentos de hipocótilo e epicótilo de A. squamosa. No primeiro estudo, a organogênesefoi induzida através da inoculação de primeiras folhas definitivas das três espécies de Annona em meio WPM suplementadocom todas as combinações entre as concentrações de BAP (2,22; 4,44; 8,88 e 17,76 μM) e ANA (0,00; 1,34; 2,68 e 5,37μM). Nesses mesmos meios de cultura, também foram inoculados os cotilédones e as primeiras folhas definitivas de A.squamosa. No segundo estudo, segmentos de hipocótilo e epicótilo de A. squamosa foram inoculados em meio WPMsuplementado com diferentes concentrações de BAP (0,00; 2,22; 8,87; 17,74 e 35,48 μM). Os resultados mostraram quea organogênese em folhas de Annona é dependente do tipo de explante, do genótipo e do balanço auxina-citocininautilizado. Em A. squamosa, os cotilédones apresentaram maior potencial organogênico para a micropropagação. Múltiplasbrotações adventícias foram obtidas em hipocótilos e epicótilos de A. squamosa, porém o potencial regenerativo dohipocótilo foi maior do que o do epicótilo

Influência do fechamento dos frascos e do carvão ativado na morfogênese e anatomia foliar de Annona glabra (Annonaceae) cultivada in vitro

This study evaluated the effects of the type of tube closure and the use of activated charcoal in the morphogenesisand leaf anatomy of Annona glabra (Annonaceae). Nodal segments of A. glabra were inoculated in WPM mediumsupplemented with 30 g l-1 sucrose and five concentrations of activated charcoal (0, 1, 2, 3 and 4 g l-1). During in vitroculture, nodal segments were kept in test tubes closed in one of three ways: plastic cap sealed with PVC wrap, plastic capwithout a PVC wrap and cotton plug. The results showed that the shoots obtained in tubes closed with a plastic capwithout a PVC wrap or sealed with a cotton plug had increased growth compared to those obtained in tubes sealed witha plastic cap and a PVC wrap. The presence of activated charcoal caused a reduction of leaf abscission and influenced theanatomical development of the shoots in the tubes sealed with a cotton plug and sealed with a plastic cap without a PVCwrap. The highest means for leaf tissue thickness were obtained from the shoots kept in closed tubes with a plastic lid anda PVC wrap in the absence of activated charcoal.Este trabalho buscou avaliar os efeitos do tipo de fechamento dos tubos e da utilizaçãode carvão ativado na morfogênese e anatomia foliar de Annona glabra (Annonaceae). Segmentos nodais de A. glabra foraminoculados no meio de cultura WPM suplementado com 30 g l-1 de sacarose e cinco concentrações de carvão ativado (0, 1,2, 3 e 4 g l-1). Durante o cultivo in vitro, os segmentos nodais foram mantidos em tubos de ensaio e estes foram fechadosde três formas: com tampa plástica envolvida com película de PVC, tampa plástica sem película de PVC e tampão dealgodão. Os resultados mostraram que as brotações obtidas em tubos fechados com tampa plástica sem película de PVCou fechados com tampão de algodão promoveram maior crescimento em relação às obtidas em tubos fechados com tampaplástica e película de PVC. A presença do carvão ativado promoveu a redução da abscisão foliar e influenciou nodesenvolvimento anatômico das brotações dos tubos fechados com tampão de algodão ou vedados com tampa plástica sempelícula de PVC. As maiores médias para a espessura dos tecidos foliares foram obtidas nas brotações mantidas em tubosfechados com tampa plástica e película de PVC na ausência de carvão ativado

Conservação in vitro de Erythrina velutina a partir de embriões zigóticos

Erythrina velutina is native from the Caatinga domain, which has been heavily affected by the exploitation of natural resources. Thus, the aim of this study was to evaluate the induction of buds from nodal segments of in vitro germinated plants, aiming at the conservation of E. velutina. In the experiment I, intact seeds and zygotic embryos were inoculated in WPM culture and the number of buds, leaves and roots, germination percentage, shoot length and percentage of normal plants were analyzed. In the experiment II, the nodal segments of plants from germination of zygotic embryos in vitro were inoculated in WPM culture supplemented with BAP and CIN [0.0, 10.0, 20.0, 30.0 and 40.0 µM] and percentage of responsive explants to form buds, number of shoots and leaves, shoot length and the percentage of callus formation were analyzed. The cultivation of zygotic embryos provided more vigorous and uniform plants, with more gems than those obtained from the germination of intact seeds. The concentration of 20 µM of BAP is indicated for the regeneration of plants from zygotic embryos of E. velutina; with this concentration, an average of 2.78 shoots/explant was obtained.Erythrina velutina é nativa da Caatinga, domínio fortemente impactado pela exploração de seus recursos naturais. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar a indução de brotos a partir de segmentos nodais de plantas germinadas in vitro, visando a conservação de E. velutina. No experimento I, sementes intactas e embriões zigóticos foram inoculados em meio de cultura WPM. Foram analisados então número de gemas, folhas e raízes, percentagem de germinação, comprimento da parte aérea e percentagem de plantas normais. No experimento II, os segmentos nodais de plantas oriundas da germinação de embriões zigóticos in vitro foram inoculados em meio de cultura WPM suplementado com BAP ou CIN [0,0; 10,0; 20,0; 30,0 e 40,0 µM]. Foram avaliados então percentagem de explantes responsivos para formação de brotos, número de brotos e folhas, comprimento da parte aérea e a percentagem de formação de calos. O cultivo de embriões zigóticos proporcionou plantas mais vigorosas e uniformes, com maior número de gemas do que as obtidas a partir da germinação de sementes intactas. A concentração de 20 µM de BAP é indicada para a regeneração de plantas oriundas de embriões zigóticos de E. velutina; com essa concentração, foi obtida uma média de 2,78 brotos/explante

Seed cryopreservation of the native cacti Discocactus zehntneri, Pilosocereus gounellei and Stephanocereus luetzelburgii from Bahia, Brazil

The native cacti species from Bahia, Discocactus zehntneri, Pilosocereus gounellei and Stephanocereus luetzelburgii, as other members of the Family Cactaceae, have been dramatically affected by illegal traffic, and with the destruction and fragmentation of their habitats. Considering the potential extinction risks for endangered species, and the several applications of these species, some actions on ex situ conservation of cacti are required. Thus, this work aimed to evaluate the physiological quality of seeds from D. zehntneri, P. gounellei and S. luetzelburgii stored in liquid nitrogen (-196°C) for 0, 7 and 30 days. For this purpose, seeds of the three species were transferred to cryovials and then immersed directly in liquid nitrogen for 7 or 30 days. After the storage period, the seeds were removed from the nitrogen tank, and thawed for 1 h at ambient temperature and subsequently chemically sterilized. The seeds were inoculated onto Petri dishes lined with two layers of germitest paper. The germination rate of the three species was not reduced by exposure to liquid nitrogen, as well as D. zehntneri that had the best results for speed and germination rate observed in seeds stored for 30 days.Keywords: Cacti, cryoconservation, ex situ conservation, germinationAfrican Journal of Biotechnology Vol. 12(21), pp. 3250-325

Estabelecimento in vitro e crescimento inicial de Physallis angulata (Solanaceae)

The aim of this study was to establish Physalis angulata in vitro and identify the best culture medium for germination and initial growth of the species. We assessed the germination, in vitro establishment and initial growth of its seedlings in different culture media (MS, WPM and ½MS). First, we evaluated the percentage, average time and speed index of germination 15 days after seed inoculation. Then, we evaluated the average number of roots and leaves, length of shoots and roots, and dry mass of shoots, leaves and roots of seedlings 15, 30 and 45 days after seed inoculation. Germination started four days after inoculation and the choice of culture media did not affect germination. However, significant differences among culture media were found for most growth parameters evaluated. The culture media WPM and ½MS provide better initial growth of seedlings and these are recommended for the other stages of micropropagation of this species.O objetivo deste estudo foi estabelecer Physalis angulata in vitro e identificar o meio de cultura mais adequado para a germinação e crescimento inicial da espécie. Nós avaliamos a germinação, o estabelecimento in vitro e o crescimento inicial de suas plântulas em diferentes meios de cultura (MS, WPM e ½MS). Primeiro, foram avaliados porcentagem, tempo médio e índice de velocidade de germinação 15 dias após a inoculação das sementes. Em seguida, foram avaliados número médio de raízes e folhas, comprimento da parte aérea e da raiz, e massa seca da parte aérea, foliar e da raiz de plântulas após 15, 30 e 45 dias da inoculação das sementes. A germinação iniciou-se quatro dias após a inoculação e não foi afetada pelos meios de cultura. Por outro lado, foram observadas diferenças significativas entre os tipos de meio de cultura para a maioria dos parâmetros de crescimento avaliados. Os meios de cultura WPM e ½MS foram mais adequados para o desenvolvimento inicial das plântulas, sendo recomendados para as demais etapas da micropropagação da espécie

Multiplicação in vitro de Caesalpinia pyramidalis (Leguminosae)

Caesalpinia pyramidalis is a species endemic to the Caatinga and known popularly as catingueira, which is widely used by local people, mainly for its timber and medicinal and fodder properties. This study investigated the effects of different types and concentrations of plant growth regulators on the in vitro multiplication of C. pyramidalis. In the first experiment, nodal segments were inoculated in media containing different combinations (0.0–8.0 µM) of BAP and NAA. In the second experiment, nodal segments wereinoculated in media containing different types (KIN, BAP and TDZ) and concentrations (0.0–16μM) of cytokinins. We used a WPM medium supplemented with 87.64 mM sucrose and solidified with 7.0 g L-1 agar. After 45 days, the highest number of shoots, leaf number, shoot length and dry mass of shoots were obtained when nodal segments were inoculated into a culture medium without plant growth regulators.Caesalpinia pyramidalis é uma espécie endêmica da Caatinga, conhecida popularmente como catingueira, que possui ampla utilização pelas populações locais, principalmente por suas propriedades madeireiras, medicinais e forrageiras. Este trabalho objetivou estudar os efeitos dos tipos e concentrações de reguladores de crescimento vegetal sobre a multiplicação in vitro de C. pyramidalis. No primeiro experimento, segmentos nodais foram inoculados em meio contendo diferentes combinações (0,0–8,0 µM) de BAP e de ANA. No segundo experimento, segmentos nodais foram inoculados em meio contendo diferentes tipos (KIN, BAP e TDZ) e diferentes concentrações (0,0–16 µM) de citocininas. Utilizou-se o meio de cultura WPM suplementado com 87,64 mM de sacarose e solidificado com 7,0 g L-1 de ágar. Após 45 dias registrou-se o maior número de brotos, número de folhas, comprimento da parte aérea e matéria seca da parte aérea em meio de cultura isento de regulador de crescimento vegetal

The effect of growing conditions on phenolic compounds and antimicrobial activity of Myracrodruon urundeuva Fr. Allemão

Myracrodruon urundeuva is a naturally occurring species in the Brazilian semi-arid and is widely used for anti-inflammatory and healing properties. This study evaluates the level of phenolic compounds and the antimicrobial activity in extracts of M. urundeuva obtained from greenhouse seedlings grown from seeds that were previously submitted or not to osmotic stress treatment (osmoconditioning), and from seedlings and callus grown in vitro. The Folin and Ciocalteau method was used to determine the phenolic content, whereas antimicrobial activity was evaluated by agar well diffusion and bioautography. Phytochemical analysis revealed greater concentrations of phenolic compounds in greenhouse seedlings independent of whether they originated from osmoconditioned seeds or not. Chromatography was shown to be an efficient technique for the separation of compounds. However, it was not possible to detect activity by bioautography. On the other hand, growth inhibitory activity was detected by agar well diffusion in acetone-ethyl acetate extracts taken from leaves of seedlings grown in greenhouse conditions.Key words: Myracrodruon urundeuva, antimicrobial activity, chromatography, phenolic compounds

Indução e caracterização morfológica e bioquímica de calos de Hyptis leucocephala (Lamiaceae)

Hyptis leucocephala is an aromatic herb endemic to the Brazilian semiarid region, with antimicrobial, antifungal,cytotoxic, anti-inflammatory and anti-HIV properties. In vitro cultivation makes the production of high genetic andsanitary quality cuttings possible for this species, allowing its sustainable exploitation. In the present study, the effect of 6-benzilaminopurine (BAP) and naftalenoacetic acid (NAA) on callus induction in leaf segments of this species anddifferent organic additives to WPM (Wood Plant Medium) for the callus induction was evaluated. The combination ofBAP and NAA allowed the induction of compact and undifferentiated calluses. The highest rate of callus formation andgrowth was obtained with the combination of 8.88 μM BAP and 21.48 μM NAA. Supplementing the culture medium withcoconut water, malt extract and yeast extract did not induce friable calluses. The levels of total sugars, reducing sugars,protein, and amino acids were reduced in calluses maintained in culture medium supplemented with coconut water, maltextract and yeast extract.Hyptis leucocephala é uma erva aromática endêmica da região semiárida do Brasil, com propriedadesantimicrobiana, antifúngica, citotóxica, anti-inflamatória e anti-HIV. O cultivo in vitro possibilitará a produção de mudascom elevada qualidade genética e sanitária para essa espécie, permitindo sua exploração sustentável. Neste trabalho,avaliou-se o efeito da 6-benzilaminopurina (BAP) e do ácido naftalenoacético (ANA) na indução de calos em segmentosfoliares desta espécie e de diferentes aditivos orgânicos ao meio de cultura WPM (Wood Plant Medium) na indução decalos. A utilização combinada de BAP e ANA possibilitou a indução de calos compactos e indiferenciados, sendo a maiortaxa de calogênese e de crescimento dos calos obtidas com a utilização combinada de 8,88 e 21,48 μM desses reguladores,respectivamente. A suplementação do meio de cultura com água de coco, extrato de malte e extrato de levedura nãoinduziu calos friáveis. Os teores de açúcares totais, açúcares redutores, proteína bruta e aminoácidos livres foramreduzidos nos calos mantidos em meio de cultura suplementado com água de coco, extrato de malte e extrato de levedura