Study the relationship between vitamin D levels and the amount of IgE in adults with allergic disease in Tehran

زمینه و هدف: کمبود ویتامین D از مشکلات شایع جهان است که عوارض زیادی به خصوص در بزرگسالان دارد. مطالعات، حاکی از ارتباط سطح پایین ویتامین D و بیماری های آلرژیک است. با توجه به نقش ویتامین D در تنظیم سیستم ایمنی، کمبود این فاکتور می تواند یکی از عوامل تشدید بیماری های آلرژیک باشد. مطالعه حاضر ارتباط بین سطح سرمی ویتامین D و میزان IgE در بزرگسالان مبتلا به آلرژی نوع یک در شهر تهران را بررسی می کند. روش بررسی: در یک مطالعه مقطعی، 80 فرد مبتلا به آلرژی (28 نفر مرد و 52 نفر زن) بزرگ تر از 16 سال مراجعه کننده به کلینیک آسم و آلرژی خورشید در تهران بررسی شدند. سطح سرمی ویتامین D و IgE تام با روش الایزا تعیین شد. ویتامین D در سه سطح کمبود (کمتر از 20 نانوگرم بر میلی لیتر)، ناکافی (30- 20 نانوگرم بر میلی لیتر) و کافی (بالاتر از 30 نانوگرم بر میلی لیتر) طبقه بندی شد. به منظور تأیید وجودIgE اختصاصی از تست پوستی پریک استفاده و در نهایت داده ها توسط SPSS آنالیز شدند. یافته ها: میانگین سطح ویتامین D در جامعه مورد مطالعه 59/21 نانوگرم بر میلی لیتر بود که در محدوده ناکافی (کمتر از30 نانوگرم بر میلی لیتر) قرار می گیرد. 25/76 افراد سطح ویتامینD غیر طبیعی (65 کمبود و 25/11 ناکافی) و 75/23 سطح ویتامین D کافی داشتند، همچنین نتایج نشان داد سطح غیر طبیعی ویتامینD در زنان بیشتر از مردان است (21/67 نسبت به 78/32). علاوه بر این، کمبود ویتامین D با جنسیت زن ارتباط معنی داری داشت (01/0P=). نتیجه گیری: به دلیل شیوع کمبود ویتامین D، شناسایی فاکتورهای مؤثر بر کمبود ویتامین D و تأثیر آن بر بیماری های آلرژیک، بررسی میزان نقص ویتامین D و روش های پیشگیری از بروز آن ضروری است

Study of relationship between serum vitamin D level and IgE in allergic children

زمینه و هدف: در سال های اخیر، نقش کمبود ویتامین D در بروز و تشدید انواع آلرژی مورد توجه قرار گرفته و مطالعاتی در این زمینه انجام شده است. از آنجاییکه کمبود ویتامین D و نیز شیوع آلرژی از مسائل مهم حوزه سلامت است، هدف این مطالعه بررسی ارتباط سطح سرمی ویتامین D و IgE کودکان مبتلا به آلرژی نوع یک در شهر تهران می باشد. روش بررسی: در یک مطالعه مقطعی، 112 کودک زیر 12 سال آلرژیک (48 دختر و 64 پسر) در شهر تهران بررسی شدند. سطح سرمی ویتامین D و IgE تام با روش الایزا تعیین شد. ویتامین D در 3 سطح کمبود (20> نانوگرم بر میلی لیتر)، ناکافی (30-20 نانوگرم بر میلی لیتر) و کافی (30< نانوگرم بر میلی لیتر) طبقه بندی شد. جهت تأیید IgE اختصاصی از تست پوستی پریک استفاده شد. سپس داده ها توسط نرم افزار SPSS آنالیز شد. یافته‌ها: میانگین سطح ویتامین D 64/17±14/27 نانوگرم بر میلی لیتر بود که در محدوده ناکافی قرار می گیرد. 4/38 افراد دارای ویتامین D طبیعی و 9/61 غیر طبیعی (5/20 ناکافی و 4/41 کمبود) بودند. کمبود ویتامین D با جنسیت دختر ارتباط داشت (03/0=P). اگرچه کمبود ویتامین D با افزایش سن افزایش می یافت اما میانگین آن بین گروه های سنی اختلاف معنی داری نداشت. هرچند در 8/43 سطح IgE تام بالاتر از سطح طبیعی بود اما بین سطح ویتامین D و IgE ارتباطی وجود نداشت. نتیجه گیری: با توجه به شیوع ویتامین D غیر طبیعی در کودکان و تأثیر آن در بروز بیماری های آلرژیک، طراحی پروژه ملی و بررسی میزان نقص ویتامین D و ریسک فاکتورهای مرتبط با آن در کشور و آزمایشات غربالگری لازم به نظر می رسد

Cloning, bioinformatics study and evaluation expression of gene of enterotoxigenic Escherichia coli CFA/I major subunit (CfaB)

زمینه و هدف: اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (ETEC) عامل اصلی اسهال کودکان در کشورهای در حال توسعه و مسافران به این مناطق می‌باشد. از طریق ساختارهای سطحی به نام فاکتورهای کلونیزاسیون به سلول‌های میزبان متصل می شود. اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک در بسیاری از مناطق شیوع فاکتور کلونیزاسیون نوع یک (CFA/I) از سایر فاکتورهای کلونیزاسیون بیشتر می باشد و این ترکیب به عنوان ترکیب کلیدی در تولید واکسن محسوب می‌گردد. مولکول کد کننده زیر واحد اصلی آنتی ژن فاکتور کلونیزاسیون (CfaB) به عنوان زیر واحد اصلی این فیمبریه کاندیدای مناسبی برای واکسن می‌باشد. این مطالعه با هدف همسانه سازی ژن CfaB و بررسی تولید پروتئین نوترکیب انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی اطلاعات مربوط به ژن فاکتور کلونیزاسیون CfaB از بانک ژن استخراج شد و پرایمرهای مناسب آن طراحی شدند. با استفاده از واکنش PCR، ژن مورد نظر تکثیر و سپس درون ناقل همسانه‌سازی (pTZ57R/T) و سپس در ناقل بیانی (pET28a(+)) همسانه سازی شد و بیان ژن CfaB مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته‌ها: صحت همسانه سازی با استفاده از واکنش هضم آنزیمی و تعیین توالی تایید شد. بیان این توالی در شرایط مختلف مانند دما، میزبان و محیط کشت های مختلف بررسی گردید اما توالی طبیعی در pET 28a بیان نداشت. نتیجه‌گیری: در طول توالی ژن کد کننده زیر واحد اصلی آنتی ژن فاکتور کلونیزاسیون کدون های نادر پشت سرهم وجود دارد که باعث کاهش بیان این پروتئین می شود

Survey of protection role of selenium in reduction of T-2 toxin effect on phagocytosis function of human neutrophil

زمینه و هدف:مایکوتوکسین T-2 اثرات جدی بر سلول های سیستم ایمنی می گذارد. این مطالعه با هدف بررسی اثر سم T-2 بر روی فعالیت فاگوسیتوزی نوتروفیل خون محیطی انسان و نقش حفاظتی سلنیم بر این فرآیند طراحی و اجرا شده است. روش بررسی:در این مطالعه تجربی، نوتروفیل خون محیطی انسان با استفاده از روش دکستران- فایکول خالص سازی گردید. برای تعیین میزان فعالیت فاگوسیتوزی نوتروفیل ها از روش شمارش تعداد بلع مخمرهای کاندیدا آلبیکانس اپسونیزه استفاده شد. سپس میزان فعالیت فاگوسیتوزی نوتروفیل در حضور غلظت های مختلف سم T-2 مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت، اثر غلظت های مختلف سلنیم در کاهش اثرات سم T-2مطالعه شد. از روش آماری آنالیز واریانس در نرم افزارStata جهت تجزیه و تحلیل داده ها استفاده شد. یافته ها:سم T-2 در غلظت µg/ml 100بر فعالیت کاندیدا کشی نوتروفیل تأثیر گذاشته و این فعالیت را تقریباً به نصف کاهشداد. سلنیم در غلظت µg/ml100 بهترین اثر را داشت و فعالیت کاندیداکشی را نزدیک به 90 درصد بهبود بخشید. نتیجه گیری:براساس نتایج این مطالعه سم T-2 موجب کاهش شدید فعالیت فاگوسیتوزی نوتروفیل ها می گردد و سلنیم اثر حفاظت بخش دارد و می تواند فعالیت فاگوسیتوزی را تقریبا به حالت طبیعی بازگردان

Shigella dysentery stxA mutant (R170L-A231D-G234E) gene design and optimization of recombinant protein expression and purification

زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از مهمترین باکتری های بیماریزا‌ی روده‌ای انسان است. شیگاتوکسین (سم این باکتری) با ورود به سلول های اپیتلیال باعث مهار سنتز پروتئین و مرگ سلولی می شود. علیرغم مطالعات فراوان جهت تولید واکسن علیه آن، هنوز ضرورت تداوم مطالعه در حصول به پروتئین نوترکیب شیگاتوکسین نوع A (stxA) وجود دارد. این مطالعه با هدف بررسی و تعیین جایگاه های مناسب جهش و طراحی ژن سینتتیک زیر واحد stxA و سپس بیان و بهینه سازی آن و در نهایت بررسی روش تخلیص آن جهت مطالعات بعدی ایمنی زایی انجام شد. روش بررسی: در این مطالعه توصیفی-آزمایشگاهی پس از طراحی و تهیه ژن صناعی pET28a/stxA موتانت (G234E– R170L -A231D)، واکنش PCR جهت کنترل صحت حضور این ژن انجام گردید. پس از انتقال این وکتور به سلول میزبان Bl21 DE3، بیان، بهینه سازی و نهایتاً تخلیص پروتئین حاصل بررسی گردید. یافته ها: نتیجه مطالعات اولیه منجر به طراحی ژن stxA موتانت گردید. نتایج واکنش PCR با استفاده از پلاسمید سنتتیک نشان از صحت ژن مورد مطالعه داشت. پس از بیان این ژن در سلول میزبان Bl21 DE3، بهینه سازی آن نیز بررسی گردید. در نتیجه تولید مقادیر زیادی از این پروتئین به شکل اجسام توده ای نشان داده شد. تخلیص انکلوژن بادی و سپس محلول سازی پروتئین های مربوطه با استفاده از روش های تلفیقی صورت گرفت. نتیجه گیری: با توجه به مکانیسم اثر شیگاتوکسین و طراحی جهش های انتخابی با آرایش جدید در این ژن، پیش بینی می شود که این پروتئین بیانی، دارای اثر سمیت کمتری نسبت به سایر موتانت های قبلی داشته باشد، در نتیجه می تواند به عنوان کاندید واکسن برتر مطرح گردد

Evaluation and comparison of immunization level between recombinant proteins of binding subunit of entrotoxigenic Escherichia coli and botulinum toxin

زمینه و هدف: در میان عوامل باکتریایی، شایع ترین عامل بیماری اسهال، باکتری اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک است. زیر واحد LTB سم این باکتری قادر به ایجاد مصونیتی شش ماهه است. کلستریدیوم بوتولینوم نیز عامل بیماری کشنده بوتولیسم می باشد و زیر واحد BoNT/A-Hc سم آن می تواند تا دو سال در برابر این بیماری مصونیت ایجاد کند. میزان ایمنی زایی که هر یک از این زیر واحدهای نوترکیب ایجاد می کنند، می تواند از عواملی باشد که در به وجود آمدن مصونیتی با ماندگاری متفاوت تأثیرگذار باشد. هدف از این مطالعه بررسی و مقایسه میزان تولید آنتی بادی ناشی از استفاده از دو پروتئین LTB و BONT/A-Hc در موش آزمایشگاهی بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی از باکتری Bl21DE3 E. Coli تراریخت شده با وکتور pET28aاستفاده گردید. این وکتور حاوی ژن نوترکیب LTB اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک و ژن نوترکیب BONT/A-Hc بوتولینوم به طور جداگانه بود. پس از بهینه سازی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب LTB از فاز نامحلول و BoNT/A-Hc از فاز محلول عصاره سلولی، محصولات آن ها بر روی ژلSDS-PAGE بررسی گردید. موش های آزمایشگاهی به وسیله پروتئین های حاصل، ایمنی زایی شدند. تیتر آنتی بادی حاصل از هر دو نوع پروتئین نوترکیب با استفاده از آزمون آماری t-Test در نرم افزار SPSS ارزیابی و مورد مقایسه قرار گرفت. یافته ها: پروتئین های نوترکیب بیان شده BoNT/A-Hc و LTB با ستون نیکل تخلیص شدند. پس از ایمنی زایی موش های آزمایشگاهی، تفاوت معناداری در تیتر آنتی بادی برای دو پروتئین BoNT/A-Hc و LTB مشاهده گردید (01/0>P). نتیجه گیری: اختلاف کمی بین تیتر آنتی بادی برای دو پروتئین BoNT/A-Hc و LTB مشاهده گردید که می تواند به دلیل خاصیت قوی ادجوانسیتی LTBو ایمنی زایی ایجاد شده تقریباً یکسان، در فاصله زمانی محدود باش

Fabrication of a Novel Highly Sensitive and Selective Immunosensor for Botulinum Neurotoxin Serotype A Based on an Effective Platform of Electrosynthesized Gold Nanodendrites/Chitosan Nanoparticles

In this work, a novel nanocomposite consisting of electrosynthesized gold nanodendrites and chitosan nanoparticles (AuNDs/CSNPs) has been prepared to fabricate an impedimetric immunosensor based on a screen printed carbon electrode (SPCE) for the rapid and sensitive immunoassay of botulinum neurotoxin A (BoNT/A). BoNT/A polyclonal antibody was immobilized on the nanocomposite-modified SPCE for the signal amplification. The structure of the prepared nanocomposite was investigated by transmission electron microscopy (TEM), scanning electron microscopy (SEM), X-ray diffraction (XRD), Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy, cyclic voltammetry (CV), and electrochemical impedance spectroscopy (EIS). The charge transfer resistance (RCT) changes were used to detect BoNT/A as the specific immuno-interactions at the immunosensor surface that efficiently limited the electron transfer of Fe(CN)63−/4− as a redox probe at pH = 7.4. A linear relationship was observed between the %∆RCT and the concentration logarithm of BoNT/A within the range of 0.2 to 230 pg·mL−1 with a detection limit (S/N = 3) of 0.15 pg·mL−1. The practical applicability of the proposed sensor was examined by evaluating the detection of BoNT/A in milk and serum samples with satisfactory recoveries. Therefore, the prepared immunosensor holds great promise for the fast, simple and sensitive detection of BoNT/A in various real samples

Synthesis and Immunogenisity Evaluation of Tetanus Toxoid Encapsulated Trimethyl Chitosan Nanoparticles

Background and purpose: In recent years nanotechnology has a significant impact on various fields of human life, especially in pharmaceutical and medical needs. Some biopolymers such as chitosan which is also biocompatible are low cost and abundantly found, so, their application for vaccine production is cost benefit. Trimethyl chitosan is a deacetylated derivative of chitosan that could be used to increase the induction of immune response. In this study, trimethyl chitosan nanoparticles containing tetanus protein were used to stimulate the immune system. Materials and methods: In this experimental study, synthesis of the tetanus toxoid loaded nanoparticles was done by ion gelation method. Physical features of the nanoparticles were investigated using scanning electron microscopy (SEM). The nanoparticles were then injected subcutaneously into mice. After the sampling process, the immune system stimulation was evaluated using indirect ELISA. Data was analyzed using one-way ANOVA and significance level of P< 0.05. Results: The purity of protein was confirmed by SDS-PAGE and encapsulated proteins were loaded up to 80 percent. ELISA results showed that the immune system was stimulated significantly compared with Freund adjuvant, and antibody titer increased. Conclusion: Tetanus toxoid loaded Trimethyl chitosan nanoparticles increase the stimulation of immune system and are more effective in comparison with Freund's adjuvant

A novel shiga based immunotoxin against Fn-14 receptor on colorectal and lung cancer

Immunotoxins are regarded as a type of targeted therapy for killing cells by highly potent bacterial, fungal or plant toxins. Shiga like toxins (SLTs) are a group of bacterial AB5 protein toxins that inhibit host cell protein synthesis through the removal of a single adenine residue from the 28S rRNA and lead to apoptosis. Here, we described the design and usage of a Stx-based immunotoxin that can induce the selective cytotoxicity and apoptosis in Fn-14-positive cells related to the colon and lung cancer. In the present study, the Stx2a-PE15-P4A8 fusion protein was expressed efficiently in E. coli (DE3) system when driven from inclusion bodies by 8 M urea. The Stx2a-PE15-P4A8 fusion protein was expressed efficiently in E. coli (DE3) system and then purified. The purified fusion protein could specifically target Fn-14 receptor existed on colon and lung cancer cell lines and suppress these cells in a dose-dependent manner. In addition, the protein was able to nearly 50 % of apoptotic cell death and maintains about 54 % of its stability after 24 h of incubation in mouse serum at 37 °C. Compared to PE38-P4A8 construct in our previous study, these results showed that the Stx2a-PE15-P4A8 construct can be an efficient therapeutic candidate for cancer immunotherapy