Influence of decarboxylation on Cannabis sativa’s antioxidant activity and flavonoid profile: A preliminary study

Cannabis sativa L. es utilizada para el tratamiento de la epilepsia resistente a fármacos. En su composición se identificaron cannabinoides y compuestos fenólicos. Se sabe que la decarboxilación transforma a los ácidos cannabinoides en su forma neutral, que usualmente es más activa. Nuestro objetivo fue determinar el efecto de la decarboxilación de la resina de C. sativa (CSR) sobre la actividad antioxidante y su relación con cannabinoides y compuestos polifenólicos. Se determinaron la actividad eliminadora del radical DPPH, la inhibición de la peroxidación lipídica y la actividad quelante de metales para CSR cruda y decarboxilada (CSRD). La composición fitoquímica se estudió mediante HPLC. El proceso de decarboxilación modificó el perfil de flavonoides y aumentó la actividad antioxidante de la resina. La EC50 de CSRD para la actividad DPPH fue 2.5 veces menor que la de CSR (p<0.001); en la inhibición de la peroxidación lipídica CSRD presentó una EC50 2.7 veces menor que CSR (p<0.001). CSR no mostró actividad quelante de metales. Teniendo en cuenta estos resultados, podría ser interesante decarboxilar CSR para mejorar sus efectos antiepilépticos y antioxidantes.Cannabis sativa L. is used to treat drug-resistant epilepsy. Cannabinoids and phenolic compounds were identified in its composition. It is known that decarboxylation transforms acid cannabinoids into their neutral, usually more active, forms. Our aim was to determine the effect of the decarboxylation on C. sativa´s resin (CSR) antioxidant effect and its relationship with cannabinoids and polyphenolic compounds. The DPPH scavenger activity, the inhibition of lipid peroxidation and the metal chelating activities were determined for the raw CSR and decarboxylated C. sativa´s resin (CSRD). The phytochemical composition was studied by HPLC. The decarboxylation process modified the HPLC flavonoids profile and increased the resin’s antioxidant activities. The EC50 of CSRD for DPPH activity was 2.5 times lower than CSR EC50 (p<0.001); for the inhibition of lipid peroxidation, CSRD presented an EC50 2.7 times lower than CSR (p<0.001). CSR did not exert metal chelating activity. In view of these results, it could be promising to decarboxylate CSR to improve its antiepileptic and antioxidant effects.Fil: Saint Martin, Elina Malén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Marrassini, Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Peralta, Ignacio Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Cogoi, Laura Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Alonso, Maria del Rosario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Anesini, Claudia Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentin

Extractos acuoso y rico en polifenoles de Larrea divaricata Cav: Como potenciales agentes protectores de la piel

Las células de la piel se ven afectadas por el estrés oxidativo inducido por los rayos ultravioleta resultando en foto-envejecimiento y enfermedades. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de un extracto acuoso de Larrea divaricata (Aq) y una fracción rica en flavonoides (EA), obtenida por fraccionamiento líquido/líquido, sobre la proliferación de queratinocitos y fibroblastos y sobre la viabilidad celular. Se determinó también el factor de protección solar (SPF) y las actividades simil peroxidasa (Px) y superóxido dismutasa (SOD) y la composición fitoquímica por HPLC-UV y MS/MS. Aq y EA indujeron la proliferación de queratinocitos y fibroblastos, protegieron a los fibroblastos de la apoptosis inducida por H2O2 y ejercieron actividades de tipo SOD y de tipo Px con un factor de protección solar UVB alto. Por lo tanto, L. divaricata podría utilizarse para el desarrollo de nuevos dermocosméticos o adyuvantes fitoterápicos en enfermedades oxidativas de piel.Skin cells are affected by UV-induced oxidative stress resulting in photoaging and diseases. The objective of this work was to assess the effect of an aqueous extract of Larrea divaricata (Aq) and a flavonoid rich fraction (EA), obtained by liquid/liquid fractionation, on the proliferation of keratinocytes and fibroblasts by the tritiated thymidine uptake assay and on cell viability by the trypan blue exclusion assay. The in vitro sun protection factor (SPF), peroxidase (Px)-like and superoxide dismutase (SOD)-like activities were determined by kinetic spectrophotometric assays, and the phytochemical composition was determined by HPLC-UV and HPLC MS/MS. Aq and EA induced keratinocytes and fibroblast proliferation, protected fibroblasts from H2O2-induced apoptosis and exerted SOD-like and Px-like activities. Aq and EA had a high sun UVB protection factor. So, L. divaricata could be used in a future for the development of new dermocosmetic or phytotherapy adjuvant in skin oxidative damage.Fil: Marrasini, Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Martino, Renzo Fabricio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Barreiro Arcos, María Laura. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Saint Martin, Elina Malén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Cogoi, Laura Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Alonso, Maria del Rosario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Anesini, Claudia Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentin

Antioxidant effect of Cannabis sativa L. resin associated with Larrea divaricata Cav. extract: synergism, additivity and antagonism

Cannabis sativa L. (Cannabaceae) is used as anticonvulsant in refractory epilepsy. Convulsions induce oxidative stress in the brain.Synergistic interactions between plants could improve the therapeutic and reduce adverse effects. Larrea divaricata Cav.’s(Zygophylliaceae) antioxidant activity is well-documented. The aim of this work was to evaluate the antioxidant activity of an ethanolicextract of C. sativa (CSR), study cannabidiol’s (CBD) participation and evaluate the possible synergistic effect of CSR with an aqueousextract of L. divaricata (LE). Antioxidant activity was determined by the 1,1-diphenyl-2-picryhydrazyl (DPPH) and the lipid peroxidationassays. For the DPPH assay, the inhibitory concentration 50 (IC50) were: CSR=19.82 ±1.47 µg/ml, LE=24.18±0.54µg/ml,CBD=12.49 ± 0.79µg/ml. The IC50 values for the combinations: CSR + LE 25 µg/ml=2.91±0.10µg/ml (p<0.001), CBD + LE 25µg/ml=4.19±0.11µg/ml (p<0.01). Combination indexes (CI) were: 15 µg/ml CSR / 25 µg/ml LE=0.38 (significant synergism), 10 µg/mlCBD / 25 µg/ml LE=0.39 (significant synergism). IC50 values for the lipid peroxidation assay: CSR=30.50±3.00µg/ml,LE=630.95±63.00µg/ml, CBD=10.20±1.00µg/ml. The IC50 values of the best combinations: CSR + 500 µg/ml LE=2.39±0.10µg/ml (p<0.0001), CBD + 500 µg/ml LE=2.19±0.18 µg/ml (p<0.0001); CI values: 10 µg/ml CSR /500 µg/ml LE=0.16 (strong synergism), 3 µg/mlCSR /500 µg/ml LE=0.36 (significant synergism). Conclusions: CBD is involved in CSR antioxidant activity. LE acted synergistically withCSR in both assays. CSR-LE association at optimal concentrations could be a good option to reach a significant synergism (CI<1). Atlow doses, the combination of CSR and LE could be used as co-adjuvant for the treatment of epilepsy to manage oxidative stress.Fil: Saint Martin, Elina Malén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Marrassini, Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Silva Sofrás, Fresia Melina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Peralta, Ignacio Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Cogoi, Laura Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Van Baren, Catalina Maria. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquimica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Alonso, María R.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquimica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Anesini, Claudia Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentin

Antiproliferative activity of aqueous and polyphenol-rich extracts of Larrea divaricata Cav. upon a melanoma cell line

Abstract: Most of the deaths from skin cancer are caused by melanoma, a malignancy in which STAT3 plays a crucial role. The inhibition of STAT3 is considered a potential target to induce cell death, tumor regression and metastasis inhibition. The objective of this work was to evaluate the activity of the aqueous extract of Larrea divaricata (Aq), a fraction rich in polyphenols (EA),and the isolated compound quercetin-3-methyl ether (Q3ME) on B16F10 melanoma cells. The effects of Aq, EA and Q3ME were assessed on B16F10 cells by determining the proliferation, viability, apoptosis induction and the expression and phosphorylation of STAT3. The phytochemical composition of the extracts was determined by High Performance Liquid Chromatography. Aq, EA and Q3ME presented antiproliferative activity on B6F10 cells through p-STAT3 inhibition and early and late apoptosis induction (EC50 EA= ≤0.1 μg/ml; Aq= 316±30 μg/ml; Q3ME= <0.1 μg/ml). L. divaricata could be considered for the development of adjuvant phytotherapies in melanoma treatment

Antiproliferative activity of aqueous and polyphenol-rich extracts of Larrea divaricata Cav. on a melanoma cell line

Most of the deaths from skin cancer are caused by melanoma, a malignancy in which STAT3 plays a crucial role. The inhibition of STAT3 is considered a potential target to induce cell death, tumor regression and metastasis inhibition. The objective of this work was to evaluate the activity of the aqueous extract of Larrea divaricata (Aq), a fraction rich in polyphenols (EA),and the isolated compound quercetin-3-methyl ether (Q3ME) on B16F10 melanoma cells. The effects of Aq, EA and Q3ME were assessed on B16F10 cells by determining the proliferation, viability, apoptosis induction and the expression and phosphorylation of STAT3. The phytochemical composition of the extracts was determined by High Performance Liquid Chromatography. Aq, EA and Q3ME presented antiproliferative activity on B6F10 cells through p-STAT3 inhibition and early and late apoptosis induction (EC50 EA= ≤0.1 µg/ml; Aq= 316 ± 30 µg/ml; Q3ME= <0.1 µg/ml). L. divaricata could be considered for the development of adjuvant phytotherapies in melanoma treatment.Fil: Martino, Renzo Fabricio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Barreiro Arcos, María Laura. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Peralta, Ignacio Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Marrassini, Carla. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Saint Martin, Elina Malén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Cogoi, Laura Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Cremaschi, Graciela Alicia. Pontificia Universidad Católica Argentina "Santa María de los Buenos Aires". Instituto de Investigaciones Biomédicas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas; ArgentinaFil: Alonso, María Rosario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Anesini, Claudia Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; Argentin