Production of live larvae following in vitro maturation of zebrafish oocytes.

This study aimed to assess the effects of carp pituitary extract (CPE), follicle stimulating hormone (FSH) and luteinizing hormone (LH) on zebrafish oocyte maturation and the ability of these mature oocytes to be fertilized and developed until hatching. Stage III follicles were matured in eight treatments: five concentrations of CPE (16, 32, 48, 64 and 80 μg/mL), one of FSH (0.5 μg/mL), one of LH (0.5 μg/mL), or one combination of FSH (0.5 μg/mL) and LH (0.5 μg/mL). Maturation rates in CPE treatments were 12.8% (16 μg/mL), 24.8% (32 μg/mL), 27.0% (48 μg/mL), 22.7% (64 μg/mL) and 9.6% (80 μg/mL); in FSH was 15.7% (0.5 μg/mL), in LH was 31.8% (0.5 μg/mL) and in FSH (0.5 μg/mL) combined with LH (0.5 μg/mL) it was 50.4%. In vitro fertilization was performed in all treatments; however, only the treatment combining FSH and LH resulted in fertilized oocytes. After maturation using FSH combined with LH, the cleavage rate was 33.3% and hatching rate of live larvae was 20.0%. These results showed that FSH combined with LH was effective in IVM of zebrafish oocyte

Diversidade genética de estoques de reprodutores de Colossoma macropomum Genetic diversity of Colossoma macropomum broodstocks

Analisou-se a diversidade genética de estoques de reprodutores de Tambaqui (Colossoma macropomum), mediante o uso de marcador RAPD, utilizando-se 10 primers para analisar 30 amostras do estoques de reprodutores das pisciculturas de Boa Esperança e Vale Verde, localizadas no Estado de Rondônia. A porcentagem de fragmentos polimórficos e o índice de diversidade genética de Shannon foram altos nos dois estoques de reprodutores. O estoque de reprodutores de Boa Esperança apresentou um fragmento exclusivo. A diferenciação genética foi baixa e o número de migrantes por geração foi alto entre os estoques de reprodutores. O dendrograma não separou os indivíduos dos estoques de reprodutores em grupos distintos. Há alta variabilidade genética nos estoques de reprodutores, um pouco inferior no estoque de Vale Verde, e há grande proximidade genética entre os indivíduos dos estoques de reprodutores.The genetic diversity of tambaqui (Colossoma macropomum) broodstocks from two hatchery station in Rondônia State was studied by the RAPD marker. Ten primers were used to analyze 30 broodstocks samples from the hatchery stations of Boa Esperança and Vale Verde. The polymorphic fragments percentage and Shannon genetic diversity index were high in the two broodstocks. The Boa Esperança broodstock presented an exclusive fragment. The genetic differentiation was low and the number of migrants per generation was high among the broodstocks. The dendrogram did not separate the broodstocks individuals in different groups. The results indicate a high genetic variability in the broodstocks, being a little bit lower in the Vale Verde broodstock. Besides, there is a genetic proximity among the broodstocks

Dose inseminante para fertilização artificial de ovócitos de dourado Insemination dose for artificial fertilization of dourado oocytes

Objetivou-se determinar a dose inseminante adequada para uso na fertilização artificial de ovócitos de dourado (Salminus brasiliensis). Os ovócitos foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado, e fertilizados com uma das relações espermatozoides/ovócito 6,0×10³; 6,0×10(4); 6,0×10(5); 6,0×10(6) ou 3,0×10(7), cada uma com quatro repetições. Considerou-se unidade experimental uma incubadora de volume útil de 2,5 L, contendo 2,0 mL de ovócitos não-hidratados. As taxas de fertilização foram mensuradas 8 horas após o início da fertilização. Com intuito de verificar possíveis efeitos da diluição seminal na movimentação dos espermatozoides, realizou-se a mensuração do tempo de duração da motilidade espermática dos espermatozoides de dourado, ativados por meio de diferentes relações de diluição: 6,8×10-5; 6,8×10-4; 6,8×10-3; 6,8×10-2; 3,4×10-1 e 1,0 mL de sêmen por mL de água. O tempo de duração da motilidade foi avaliado em delineamento inteiramente casualizado composto de seis tratamentos e três repetições. As taxas de fertilização apresentaram relação quadrática com o número de espermatozoides por ovócito. As relações de diluição do sêmen tiveram efeito inversamente proporcional sobre a duração da motilidade espermática. A relação que proporcionou melhores taxas de fertilização artificial de ovócitos de dourado (Salminus brasiliensis) foi de 30.722 espermatozoides por ovócio.<br>The objective of the present study was to determine the proper insemination dose of dourado (Salminus brasiliensis) oocytes. The oocytes were placed in a randomized complete design and fertilized with one of the spermatozoa.oocytes-1 ratio, 6.0×10³, 6.0×10(4), 6.0×10(5), 6.0×10(6), 3.0×10(7) SPZ:OOC, each one with four replications. An experimental unit was considered to be an incubator with a 2.5L useful volume containing 2.0 mL non-hydrated oocytes. The fertilization rates were measured eight hours after the start of fertilization. In order to ascertain the possible effects of seminal dilution on the spermatozoa motility, the duration time of the spermatic motility of the dourado spermatozoa was measured when activated by different dilution ratios 6.8×10-5; 6.8×10-4; 6.8×10-3; 6.8×10-2; 3.4×10-1 and 1.0 mL semen.mL water-1. The motility duration time was assessed in a randomized complete design, with six treatments and three repetitions. The fertilization rates showed a quadratic relationship with the number of spermatozoids per oocyte. The semen dilution ratios had an inversely proportional affect on the spermatic motility time. The spermatozoa:oocytes ratio that provided the best artificial fertilization rates of dourado (Salminus brasiliensis) oocytes was 30,722 spermatoids per oocyte

Microsatellite analysis of the parental contribution of Piaractus mesopotamicus to the production of offspring in the semi-natural system of reproduction

The objective of this study was to evaluate the genetic diversity and the parental contribution of Piaractus mesopotamicus in the production of offspring in the semi-natural system of reproduction. Twenty parental fishes (eleven males and nine females) and the total of 100 larvae were evaluated by microsatellite marker. The parents and offspring had thirty-one alleles and heterozygosity of 0.550 and 0.563, respectively. The females were fertilised by two up to six males while the males fertilised three up to five females. The contribution of the females and males to the offspring were 66.6 and 58%, respectively. Such results indicated no loss in the genetic variability in the offspring, and the parents had multiple paternity and reasonable contribution to the offspring production.<br>O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade genética e a contribuição parental de Piaractus mesopotamicus na produção de descendência no sistema seminatural de reprodução. Vinte peixes parentais (onze machos e nove fêmeas) e o total de 100 larvas foram avaliados por meio do marcador microssátelite. Os parentais e a progênie tiveram trinta e um alelos e heterozigosidade de 0,550 e 0,563, respectivamente. As fêmeas foram fertilizadas por dois até seis machos enquanto machos fertilizaram três até cinco fêmeas. A contribuição de fêmeas e machos para a descendência seja 66,6 e 58,0%, respectivamente. Tais resultados não indicam diminuição da variabilidade genética na progênie e os parentais apresentaram paternidade múltipla e razoável contribuição à produção de descendência