Morphological peculiarites and functional activity of adipose-derived mesenchimal stem cells during in vitro cultivation conditions

The studies were conducted on 2-3-months-old males of C57BL/6 mice weighing 20–24 g. Obtaining and cultivating of adipose-derived mesenchimal stem cells (AD MSCs) were carried out in a sterile laminar box with compliance of conditions of asepsis and antiseptics. AD MSCs of the 2, 4, 7 and 12 passages were analyzed. Morphometric analysis was performed using a light microscopy. Morphometric parameters such as cell and nucleus area or nuclear-cytoplasmic ratio (NCR) were calculated using the Axiovision light microscope (Carl Zeiss, Germany) and ImageJ 1.45 software. Trypan blue dye used for investigation of the viability of MSC. The morphological characteristics of mesenchymal stem cells from adipose tissue during the process of cultivation changes: at the first passages of cultivation, the cells are spindle-shaped with two, at least three, long long cytoplasmic processes, located bipolar. Near the nucleus the Golgi complex is clearly visible – a sign of active cells. At later passages cells have a small cytoplasmic processes and the bipolar arrangement of processes changes by stellar arrangement. Golgi complex is also clearly visualized. The indicator of the nuclear-cytoplasmic ratio in MSC from adipose tissue is significantly reduced at 7 passage to 0.2189 ± 0.0122 (P < 0.01), and at 12 passage to 0.1111 ± 0.0086 (P < 0.001) compared to the 2 passage. The coefficient of proliferation of MSC from adipose tissue is significantly reduced at 12th passage. The viability of mesenchymal stem cells from adipose tissue with an increasing of a number of passages significantly reduces and at the 12th passage of cultivation reaches 84,67 ± 1,36* (P < 0.05). The content of apoptotic cells that exhibited sensitivity to serum-free significantly increased at 7 and 12 passages and was respectively 21.33 ± 1.36 (P < 0.05) and 23.67 ± 0.97% (P < 0.05)

Вміст жирних кислот в ліпідах мезенхімних стовбурових клітин культури жирової тканини

The content of fatty acids in the lipids of mesenchymal stem cells of dog adipose tissue culture was studied. Mesenchymal stem cells of dog adipose tissue culture were obtained by culturing the primary material in a CO2 incubator with a content of 5 % CO2, at a temperature of 37 °C in DMEM medium with the addition of 10–15 % fetal bovine serum and 1 % antibiotic-antimycotic. When the confluency of the monolayer reached 70–80 %, the cells were transferred to a suspension and subcultivated in order to reduce the heterogeneity of the culture and obtain a sufficient amount of biological material. The lipids of the obtained stem cells were analyzed for the content of fatty acids by the method of thin-layer gas-liquid chromatography. Determination of the content of lipids of fatty acids in FSK of a cat was carried out by the Folch method. A mixture of fatty acid methyl esters was analyzed on a Trace GC Ultra gas chromatograph with a flame ionization detector on a capillary column SPTM –2560, 100 m x 0.25 mm ID, 0.20 μm film (Supelco). Identification of fatty acids was carried out using a standard sample of Supelco 37 Сomponent FAME Mix. Quantitative assessment of the LC spectrum was carried out by the method of normalization of the peak planes of methylated LC derivatives and their content was determined as a percentage of the total content of all LC. The conducted study of the content of fatty acids in lipids made it possible to reveal certain features of the lipid metabolism of mesenchymal stem cells cultured in dog adipose tissue. A high content of oleic acid, characteristic of cells resistant to apoptosis and with high proliferative potential, was determined; a high ratio of unsaturated linoleic to saturated stearic acid (С18:1/С18.0), which reflects the high activity of the stearoyl-coenzyme-desaturase enzyme and, indirectly, the active state of the Wnt/β-catenin signaling pathway; inability to lengthen the chain of saturated fatty acids; lack or low activity of de novo synthesis of omega-6 polyunsaturated fatty acids. 18 fatty acids were found in the composition of lipids of fetal stem cells of a cat, of the saturated ones - the most palmitic acid (33.70 ± 0.02 %), of the monounsaturated ones – oleic acid (21.63 ± 0.03 %), of the polyunsaturated ones – linoleic acid (6.45 ± 0.07 %). The least amount of cis-,11,14-eicosadienoic acid (0.04 ± 0.01 %) was found in the composition of cell lipids. The total amount of saturated fatty acids in dog mesenchymal stem cell lipids was 65.65 ± 0.02 %), unsaturated fatty acids – 34.35 ± 0.02 %. Monoene fatty acids were determined in the amount of 24.46 ± 0.02 %, and polyene – 9.89 ± 0.02 %. The ratio index of polyunsaturated fatty acids ω 3 to ω 6 is 0.40. Lipids of mesenchymal stem cells of adipose tissue culture were characterized by a lower content of monoene unsaturated fatty acids 24.46 ± 0.02; (P < 0.05), with a higher content of ω3 fatty acids 3.04 ± 0.02 %; (P < 0.05), with a lower content of ω6 fatty acids 6.86 ± 0.02 %; (P < 0.05) in contrast to lipids of red bone marrow stem cells.Досліджено вміст жирних кислот в ліпідах мезенхімних стовбурових клітин культури жирової тканини собаки. Мезенхімні стовбурові клітини культури жирової тканини собаки отримували шляхом культивування первинного матеріалу в СО2 інкубаторі з вмістом 5 % СО2, за температури 37 °С у середовищі DMEM з додаванням 10–15 % фетальної сироватки великої рогатої худоби та 1 % антибіотика-антимікотика. Коли конфлюетність моношару сягала 70–80 %, клітини переводили в суспензію та проводили субкультивування з метою зниження гетерогенності культури та отримання достатньої кількості біологічного матеріалу. Ліпіди отриманих стовбурових клітин  досліджували на вміст жирних кислот методом тонкошарової газорідинної хроматографії. Визначення вмісту ліпідів жирних кислот ФСК кота проводили методом Фолча. Суміш метилових ефірів жирних кислот аналізували на газовому хроматографі Trace GC Ultra з полум’яно-іонізаційним детектором на капілярній колонці SPTM–2560, 100 m × 0,25 mm ID, 0,20 μm film (Supelco). Ідентифікацію жирних кислот проводили за допомогою стандартного зразка Supelco 37 Сomponent FAME Mix. Кількісну оцінку спектру ЖК проводили методом нормування площин піків метильованих похідних ЖК і визначали їхній вміст у відсотках від сумарного вмісту усіх ЖК. Проведене дослідження вмісту жирних кислот в ліпідах дало можливість виявити певні особливості ліпідного обміну мезенхімних стовбурових клітин культури жирової тканини собаки. Визначено високий вміст олеїнової кислоти, характерний для клітин, резистентних до апоптозу та з високим проліферативним потенціалом; високе співвідношення ненасиченої лінолевої до насиченої стеаринової кислоти (С18:1/С18.0), яке відображає високу активність фермента стеарол-коензим-десатурази та опосередковано – активний стан Wnt/β-катенін сигнального шляху; нездатність до подовження ланцюга насичених жирних кислот; відсутність або низьку активність синтезу de novo омега-6 поліненасичених жирних кислот. У складі ліпідів фетальних стовбурових клітин кота виявлено 18  жирних кислот, з насичених – найбільше пальмітинової кислоти (33,70 ± 0,02 %), з мононенасичених – олеїнової кислоти (21,63 ± 0,03 %), з поліненасичених – лінолевої кислоти (6,45 ± 0,07 %). Найменше у складі ліпідів клітин виявлено ціс-,11,14-ейкозадієнової кислоти (0,04 ± 0,01 %). Сумарна кількість насичених жирних кислот у ліпідах мезенхімниї стовбурових клітин собаки становила 65,65± 0,02%), ненасичених жирних кислот – 34,35 ± 0,02 %. Моноєнові жирні кислоти визначено у кількості 24,46± 0,02%, а полієнові – 9,89± 0,02%. Індекс співвідношення поліненасичених жирних кислот ω 3 до ω 6 становить 0,40. Ліпіди мезенхімних стовбурових клітин  культури жирової тканини  характеризувалися нижчим умістом моноєнових ненасичених жирних кислот 24,46 ± 0,02; (P < 0,05), більшим вмістом ω3 жирних кислот 3,04 ± 0,02 %; (P < 0,05), меншим вмістом ω6 жирних кислот 6,86 ± 0,02 %; (P < 0,05) на противагу ліпідам стовбурових клітин культури червоного кісткового мозку

ПОРІВНЯННЯ ЕФЕКТИВНОСТІ ЗАСОБІВ ЗБОРУ КЛІЩІВ ЗАЛЕЖНО ВІД КОНСТРУКЦІЇ ПРАПОРА

The aim of the study – to compare the effectiveness of collecting ticks method, depending on the design of the flag (the number of ticks collected by the flag of 1 km route). Materials and methods. Comparison of the effectiveness of collection facilities was carried out on the territory of 5 tracts of the Ternopil region. Comparison conditions: the use of collection facilities at the same time in one place, which means the same weather conditions, the same relief, vegetation, one hour, the same distance and the same duration in time, were used to collect ticks: the traditional flag (waffle fabric in the size 100×100 cm on a wooden leg), a flag on the G-shaped holder (fluffy flannel size 100×100 cm on a metal G-shaped telescopic holder with a spring clamp), flag with parallel metal rods (a fluffy flannel measuring 100×100 cm with two metal rods on opposite parallel edges). Results and discussion. On the traditional flag, the average number of specimens per flag-kilometer was 3.9, for the flag on the G-shaped holder – 12.7, for a flag with two metal rods in the opposite parallel edges – 13.4 specimens. Provided that all requirements are met, the flag with two metal rods on the opposite parallel edges worked more efficiently. The predominant efficiency is due to a more dense adherence to the surface of the entire fabric area, that is, by increasing the area of the working flag. This is confirmed by the fact that the ticks cling to the entire area, while to the flag on a wooden arm only in places lower than 1/3-1/2 parts. The results were argued by the corresponding automated mathematical program Statistica 6.0 using Kruskal-Wallis criterion. Conclusions. A flag with two metal rods on opposite parallel edges has significant advantages over the traditional and allows you effective collecting ticks in natural biotopes.Мета роботи – порівняти ефективність засобів збору кліщів залежно від конструкції прапора (кількість зібраних за допомогою прапора екземплярів кліщів на 1 км маршруту). Матеріали і методи. Порівняння ефективності засобів збору проводилося на території 5 урочищ Тернопільської області. Умови порівняння: застосування засобів збору одночасно в одному місці, що означає однакові погодні умови, однаковий рельєф, рослинність, одну годину, однакову відстань та однакову тривалість в часі. Використовувалися засоби збору кліщів: традиційний прапор (вафельна тканина розміром 100×100 см, на дерев’яному тримачу), прапор на Г-подібному тримачу (ворсиста фланель розміром 100×100 см на металевому Г-подібному телескопічному тримачу з пружинним затискачем), прапор з паралельними металевими стержнями (ворсиста фланель розміром 100×100 см з двома металевими стержнями на протилежних паралельних краях). Результати і обговорення. На традиційний прапор середня кількість екземплярів з розрахунку на прапоро-кілометр склала 3,9 екз., на прапор на Г-подібному тримачу – 12,7 екз., на прапор з двома металевими стержнями на протилежних паралельних краях – 13,4 екз. За умови дотримання всіх вимог, більш ефективно спрацював прапор з двома металевими стержнями на протилежних паралельних краях. Переважна ефективність обумовлена щільнішим приляганням до поверхні всієї площі тканини, тобто збільшенням площі прапора, що працює. Це підтверджується тим, що кліщі чіпляються по всій площі, тоді як до прапора на дерев’яному тримачу тільки в місцях нижніх 1/3-1/2 частин. Отримані результати аргументовано відповідною автоматизованою математичною програмою Statis­tica 6.0 із застосуванням критерію Краскела-Уолліса.  Висновки. Прапор з двома металевими стержнями на протилежних паралельних краях має суттєві переваги перед традиційним прапором збору кліщів і дозволяє ефективніше їх збирати у природних біотопах

ЗАХВОРЮВАНІСТЬ НА ГОСТРИЙ ВІРУСНИЙ ГЕПАТИТ С У ДНІПРОПЕТРОВСЬКОМУ РЕГІОНІ ТА УКРАЇНІ

Purpose: to study and analyze the incidence of acute viral hepatitis C in the years 2001–2017 in the Dnipropetrovsk region in comparison with the indicators in Ukraine, and to determine the trends and rates of growth.Materials and Methods. The morbidity analysis was conducted using the epidemiological method. Trends in the incidence calculated in terms of growth and increase.Results. The dynamics of the incidence of acute viral hepatitis C in Ukraine and in the Dnipropetrovsk region as a whole and in separate territories in the period from 2004 to 2017 was wavy, with a more pronounced tendency to lower rates in Ukraine. The average incidence rate in the region was (2.04±0.11) per 100.000 population (95 % CI 1.81–2.27), the average rate of growth was (98.48±4.70) % versus (1.72±0.12) per 100 thousand population in Ukraine (p <0.05), average growth rate – (95.18±3.25) %. The high incidence of acute viral hepatitis C in the cities of the oblast was noted (2.30±0.13) per 100 thousand), which in 1.34 times exceeded its level in the city of Dnipro (p <0.01) and in 1.55 times – the corresponding indicator in rural areas (p <0.001).Conclusions. The incidence of acute viral hepatitis C in the Dnipropetrovsk region and in Ukraine tends to decrease. To implement a global WHO strategy for viral hepatitis, a comprehensive screening program is needed to plan effective prevention and anti-epidemic measures.Мета: вивчити та проаналізувати рівень захворюваності на гострий вірусний гепатит С (ВГС) у багаторічній динаміці за 2001–2017 рp. у Дніпропетровському регіоні, порівняно з показниками в Україні, та визначити тенденції й темпи приросту.Матеріали і методи. Аналіз захворюваності проведено епідеміологічним методом. Тенденції захворюваності розраховували за темпами зростання та приросту.Результати. Динаміка захворюваності на ВГС в Україні та в Дніпропетровському регіоні в цілому і на окремих територіях у період із 2004 до 2017 р. мала хвилеподібний характер з більш вираженою тенденцією до зниження показників в Україні. Середній показник захворюваності в області становив 2,04±0,11 на 100 тис. населення (95 % ДІ 1,81–2,27), середній темп зростання – (98,48±4,70) %. Показник захворюваності в Україні – 1,72±0,12 на 100 тис. населення (p<0,05), середній темп зростання – (95,18±3,25) %. Відзначено високий рівень захворюваності на ВГС у містах області (2,30±0,13 на 100 тис. населення), який в 1,34 разу перевищував її рівень у м. Дніпрі (p<0,01) та в 1,55 разу – відповідний показник у сільських районах (p<0,001).Висновки. Захворюваність на гострий вірусний гепатит С у Дніпропетровській області та в Україні має тенденцію до зниження. Для впровадження глобальної стратегії ВООЗ із вірусних гепатитів необхідно провести широку скринінгову програму при плануванні ефективних профілактичних та протиепідемічних заходів

Pluripotency reprogramming by competent and incompetent POU factors uncovers temporal dependency for Oct4 and Sox2

Oct4, along with Sox2 and Klf4 (SK), can induce pluripotency but structurally similar factors like Oct6 cannot. To decode why Oct4 has this unique ability, we compare Oct4-binding, accessibility patterns and transcriptional waves with Oct6 and an Oct4 mutant defective in the dimerization with Sox2 (Oct4(defSox2)). We find that initial silencing of the somatic program proceeds indistinguishably with or without Oct4. Oct6 mitigates the mesenchymal-to-epithelial transition and derails reprogramming. These effects are a consequence of differences in genome-wide binding, as the early binding profile of Oct4(defSox2) resembles Oct4, whilst Oct6 does not bind pluripotency enhancers. Nevertheless, in the Oct6-SK condition many otherwise Oct4-bound locations become accessible but chromatin opening is compromised when Oct4(defSox2) occupies these sites. We find that Sox2 predominantly facilitates chromatin opening, whilst Oct4 serves an accessory role. Formation of Oct4/Sox2 heterodimers is essential for pluripotency establishment; however, reliance on Oct4/Sox2 heterodimers declines during pluripotency maintenance

курс лекцій

Печенка, О. І. Міжнародні кредитно-розрахункові та валютні операції: курс лекцій для студентів за напрямом підготовки 7. 03060104 «Менеджмент ЗЕД», 8. 03060104 «Менеджмент ЗЕД» / О. І. Печенка, К. Ю. Величко, А. С. Дядін; МОН України, Харків. держ. ун-т харчування та торгівлі, Каф. міжнар. економіки. – Харків: Форт, 2015. – 170 с.Курс лекцій розкриває методологічні та практичні аспекти організації міжнародних розрахунків, техніку, проблеми підготовки, проведення та особливостей регулювання валютних операцій з урахуванням світового та вітчизняного досвіду, отримання практичних навичок з відкриття та режиму ведення валютних рахунків, визначення основних способів мінімізації валютного ризику.The course of lectures reveals the methodological and practical aspects of organizing international settlements, techniques, problems of preparation, conduct and features of regulating foreign exchange transactions, taking into account world and domestic experience, gaining practical skills in opening and maintaining foreign exchange accounts, determining the main ways to minimize foreign exchange risk.Курс лекций раскрывает методологические и практические аспекты организации международных расчетов, технику, проблемы подготовки, проведения и особенностей регулирования валютных операций с учетом мирового и отечественного опыта, получение практических навыков по открытию и режима ведения валютных счетов, определение основных способов минимизации валютного риска