IN VITRO ANTIDIABETIC POTENTIALS OF SIDA ACUTA, ABUTILON INDICUM AND MALVASTRUM COROMANDELIANUM

Objective: Starch metabolizing enzyme inhibitors are able to retard postprandial glucose absorption. This study aimed to investigate the in vitro inhibitory activities of alpha-glucosidase and alpha-amylase of three Malvaceous weeds i.e. Sidaacuta Burm. f., Abutilon indicum (Linn.) Sweet and Malvastrumcoromandelianum (Linn.) Garcke. Methods: The stems, roots and leaves of S. acuta, A. indicum and M. coromandelianum were sequentially extracted in dichloromethane and methanol, respectively. All fractions were tested for the inhibitory activities on yeast alpha-glucosidase, rat intestinal alpha-glucosidase and porcine alpha-amylase. p-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside and 2-chloro-4 nitrophenol-α-D- maltotrioside were used as the substrate for glucosidase and amylase respectively. Results: The dichloromethane fraction of the roots and stems from A. indicum and dichloromethane as well as methanolic fractions of the stems of M. coromandelianum could inhibit yeast alpha-glucosidase compared to 1-deoxynojirimycin with the IC50 of 0.36, 0.45, 0.48, 0.48 and 0.58 mg/ml respectively. A. indicum root methanolic fraction had the highest inhibitory effect on rat alpha-glucosidase activity compared to 1-deoxynojirimycin with the IC50 of 0.08 and 0.11 mg/ml respectively. M. coromandelianum, the dichloromethane fraction of roots and the methanolic fraction of stems, showed the strongest effect on alpha-amylase inhibition compared to acarbose with the IC50 of 0.07, 0.07 and 2.7 mg/ml, respectively. Conclusion: S. acuta, A. indicum and M. coromandelianum dichloromethane and methanolic fractions of the root, stem and leaf parts demonstrated an appreciable inhibitory activity on alpha-amylase from porcine, alpha-glucosidase from Saccharomyces cerevisiae and from rat intestine compared to 1-deoxynojirimycin and acarbose

Pharmacognostic Specification and Coumarin Content of Alyxia reinwardtii Inner Bark

Alyxia reinwardtii Blume is used in traditional medicine for a long time. This study was carried out to investigate the standardization parameters by qualitative and quantitative analyses as well as coumarin content of A. reinwardtii inner bark. Loss on drying, total ash, acid-insoluble ash, water soluble extractives, ethanol soluble extractives and moisture contents were found to be 8.1 ± 0.2, 7.6 ± 0.1, 1.4 ± 0.1, 16.5 ± 0.1 , 8.9 ± 0.3 and 11.9 ± 0.2% by dry weight, respectively. Coumarin in dichloromethane extract of A. reinwardtii inner bark was analysed by thin layer chromatography (TLC) using silica gel 60 F254 as stationary phase, hexane and ethyl acetate (1 : 1) as mobile phase. The content was evaluated by image analysis using image J software. The regression line of method was polynomial in range of 0.075 - 1.2 mg/spot, and correlation coefficients (R2) were 0.99. The repeatability and intermediate precisions were between 0.5 - 7.1% RSD. The percent recovery was found to be 96.8 - 107.3%. The robustness evaluated by slightly variation in mobile phase ratio was 1.3% RSD. Limit of detection (LOD) and limit of quantitation (LOQ) were 0.05 and 0.16 mg/spot respectively. The coumarin content in A. reinwardtii inner bark crude drug was found to be 0.75 ± 0.01% by dry weight. This study provided pharmacognostic specification toward fundamental standardization of A. reinwardtii inner bark. Additionally, the simple TLC with image analysis can be applied to quantitatively determine coumarin in plant material

ปริมาณวิเคราะห์สารเควอซีติน และเควอซิตริน ในใบของพืชสกุลชงโค ที่พบในประเทศไทยโดยวิธี RP-HPLC RP-HPLC Preliminary Analysis of Quercetin and Quercitrin Contents in Bauhinia spp. Leaves Distributed in Thailand

บทคัดย่อ วัตถุประสงค์: การศึกษาเบื้องต้นเพื่อหาปริมาณสารเควอซีติน และเควอซิตริน ในใบของพืชสกุลชงโค 20 สายพันธุ์ในประเทศไทย วิธีการศึกษา: เก็บใบเพสลาดของพืชสกุลชงโคทั้ง 20 สายพันธุ์ นำมาทำความสะอาด อบแห้ง และสกัดด้วยเอทานอล (ร้อยละ 95) โดยการสกัดแบบต่อเนื่อง แยกสารโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส โดยใช้คอลัมน์ Inersil® ODS-3 C18 เป็นเฟสคงที่ และใช้สารละลายของกรดฟอสฟอริก (ร้อยละ 0.5) กับเมทานอล ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1 เป็นเฟสเคลื่อนที่ ตรวจวัดปริมาณเควอซีติน และเควอซิตรินด้วยดีเทคเตอร์ชนิดโฟโต้ไดโอดอาเรย์ที่ 255 นาโนเมตร ผลการศึกษา: ส้มเสี้ยวเถาให้ปริมาณสิ่งสกัดมากที่สุด (36.13 กรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง) และเสี้ยวดอกขาวให้น้อยที่สุดใน (16.06 กรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง) กาหลง ใบไม้สีทอง กาหลงดอกแดง เถาไฟ ส้มเสี้ยวเถา ส้มเสี้ยว ปอเกี๋ยน ชงโคดำ ชงโค เถากระไดลิง สร้อยสยาม สิรินธรวัลลี เถาขยัน และคิ้วนาง พบทั้งสารเควอซีติน และเควอซิตริน ส้มเสี้ยวพบสารเควอซีติน และเควอซิตรินมากที่สุดเท่ากับ 191.81 and 373.97 มิลลิกรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง สารเควอซีตินไม่พบในแสลงพัน ชงโคนา เสี้ยวป่า และโยทะกา ส่วนสารเควอซิตรินไม่พบในแสลงพันเถา และเสี้ยวดอกขาว การตรวจสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ได้ถูกทดสอบเพื่อยืนยันความแม่นยำ และถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ สรุป: วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงโดยดีเทคเตอร์ชนิดโฟโต้ไดโอดอาเรย์มีประสิทธิภาพดีในการแยกและวิเคราะห์ปริมาณสารเควอซีติน และเควอซิตรินในพืชสกลุชงโคทั้ง 20 สายพันธุ์ คำสำคัญ: สกุลชงโค, เควอซีติน, เควอซิตริน, วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงAbstract Objective: To preliminarily quantitate quercetin and quercitrin in mature leaves of Bauhinia species distributed throughout Thailand using RP-HPLC analysis. Methods: Mature leaves of 20 Bauhinia species were collected, cleaned and exhaustively extracted with 95% ethanol using Soxhlet apparatus. The ethanolic extracts were injected to Inertsil® ODS-3 C18 column at 35 ºC. The elution solvent was 0.5% phosphoric acid:methanol (1:1) at the flow rate of 1.0 ml/min. Photo-diode array detector was set at 255 nm. Results: The highest yield was found in B. lakhonensis (36.13 g/100 g dried leaves) and the lowest yield in B. variegata (16.06 g/100 g dried leaves). B. acuminata, B. aureifolia, B. galpinii, B. integrifolia, B. lakhonensis, B. malabarica, B, ornata, B. pottsii, B. purpurea, B. scandens, B. siamensis, B. sirindhorniae, B. strychnifolia and B. winitii were found to have both quercetin and quercitrin. The highest contents of quercetin and quercitrin were found in B. malabarica as 191.81 and 373.97 mg/100 g dried leaves, respectively. Quercetin was not found in B. pulla, B. racemosa, B. saccocalyx, and B. tomentosa. Quercitrin was not found in B. bracteata, and B. variegata. The validity of the analysis was in the acceptable range. Conclusion: RP-HPLC with PDA detector performed a good separation and could quantitate quercetin and quercitrin content in selected 20 Bauhinia species distributed throughout Thailand. Keywords: Bauhinia spp., quercetin, quercitrin, RP-HPL

ปริมาณวิเคราะห์สารเควอซีติน และเควอซิตริน ในใบของพืชสกุลชงโค ที่พบในประเทศไทยโดยวิธี RP-HPLC RP-HPLC Preliminary Analysis of Quercetin and Quercitrin Contents in Bauhinia spp. Leaves Distributed in Thailand

บทคัดย่อ วัตถุประสงค์: การศึกษาเบื้องต้นเพื่อหาปริมาณสารเควอซีติน และเควอซิตริน ในใบของพืชสกุลชงโค 20 สายพันธุ์ในประเทศไทย วิธีการศึกษา: เก็บใบเพสลาดของพืชสกุลชงโคทั้ง 20 สายพันธุ์ นำมาทำความสะอาด อบแห้ง และสกัดด้วยเอทานอล (ร้อยละ 95) โดยการสกัดแบบต่อเนื่อง แยกสารโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส โดยใช้คอลัมน์ Inersil® ODS-3 C18 เป็นเฟสคงที่ และใช้สารละลายของกรดฟอสฟอริก (ร้อยละ 0.5) กับเมทานอล ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1 เป็นเฟสเคลื่อนที่ ตรวจวัดปริมาณเควอซีติน และเควอซิตรินด้วยดีเทคเตอร์ชนิดโฟโต้ไดโอดอาเรย์ที่ 255 นาโนเมตร ผลการศึกษา: ส้มเสี้ยวเถาให้ปริมาณสิ่งสกัดมากที่สุด (36.13 กรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง) และเสี้ยวดอกขาวให้น้อยที่สุดใน (16.06 กรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง) กาหลง ใบไม้สีทอง กาหลงดอกแดง เถาไฟ ส้มเสี้ยวเถา ส้มเสี้ยว ปอเกี๋ยน ชงโคดำ ชงโค เถากระไดลิง สร้อยสยาม สิรินธรวัลลี เถาขยัน และคิ้วนาง พบทั้งสารเควอซีติน และเควอซิตริน ส้มเสี้ยวพบสารเควอซีติน และเควอซิตรินมากที่สุดเท่ากับ 191.81 and 373.97 มิลลิกรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง สารเควอซีตินไม่พบในแสลงพัน ชงโคนา เสี้ยวป่า และโยทะกา ส่วนสารเควอซิตรินไม่พบในแสลงพันเถา และเสี้ยวดอกขาว การตรวจสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ได้ถูกทดสอบเพื่อยืนยันความแม่นยำ และถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ สรุป: วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงโดยดีเทคเตอร์ชนิดโฟโต้ไดโอดอาเรย์มีประสิทธิภาพดีในการแยกและวิเคราะห์ปริมาณสารเควอซีติน และเควอซิตรินในพืชสกลุชงโคทั้ง 20 สายพันธุ์ คำสำคัญ: สกุลชงโค, เควอซีติน, เควอซิตริน, วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงAbstract Objective: To preliminarily quantitate quercetin and quercitrin in mature leaves of Bauhinia species distributed throughout Thailand using RP-HPLC analysis. Methods: Mature leaves of 20 Bauhinia species were collected, cleaned and exhaustively extracted with 95% ethanol using Soxhlet apparatus. The ethanolic extracts were injected to Inertsil® ODS-3 C18 column at 35 ºC. The elution solvent was 0.5% phosphoric acid:methanol (1:1) at the flow rate of 1.0 ml/min. Photo-diode array detector was set at 255 nm. Results: The highest yield was found in B. lakhonensis (36.13 g/100 g dried leaves) and the lowest yield in B. variegata (16.06 g/100 g dried leaves). B. acuminata, B. aureifolia, B. galpinii, B. integrifolia, B. lakhonensis, B. malabarica, B, ornata, B. pottsii, B. purpurea, B. scandens, B. siamensis, B. sirindhorniae, B. strychnifolia and B. winitii were found to have both quercetin and quercitrin. The highest contents of quercetin and quercitrin were found in B. malabarica as 191.81 and 373.97 mg/100 g dried leaves, respectively. Quercetin was not found in B. pulla, B. racemosa, B. saccocalyx, and B. tomentosa. Quercitrin was not found in B. bracteata, and B. variegata. The validity of the analysis was in the acceptable range. Conclusion: RP-HPLC with PDA detector performed a good separation and could quantitate quercetin and quercitrin content in selected 20 Bauhinia species distributed throughout Thailand. Keywords: Bauhinia spp., quercetin, quercitrin, RP-HPL

ปริมาณวิเคราะห์สารเควอซีติน และเควอซิตริน ในใบของพืชสกุลชงโค ที่พบในประเทศไทยโดยวิธี RP-HPLC RP-HPLC Preliminary Analysis of Quercetin and Quercitrin Contents in Bauhinia spp. Leaves Distributed in Thailand

บทคัดย่อ วัตถุประสงค์: การศึกษาเบื้องต้นเพื่อหาปริมาณสารเควอซีติน และเควอซิตริน ในใบของพืชสกุลชงโค 20 สายพันธุ์ในประเทศไทย วิธีการศึกษา: เก็บใบเพสลาดของพืชสกุลชงโคทั้ง 20 สายพันธุ์ นำมาทำความสะอาด อบแห้ง และสกัดด้วยเอทานอล (ร้อยละ 95) โดยการสกัดแบบต่อเนื่อง แยกสารโดยวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส โดยใช้คอลัมน์ Inersil® ODS-3 C18 เป็นเฟสคงที่ และใช้สารละลายของกรดฟอสฟอริก (ร้อยละ 0.5) กับเมทานอล ในอัตราส่วน 1 ต่อ 1 เป็นเฟสเคลื่อนที่ ตรวจวัดปริมาณเควอซีติน และเควอซิตรินด้วยดีเทคเตอร์ชนิดโฟโต้ไดโอดอาเรย์ที่ 255 นาโนเมตร ผลการศึกษา: ส้มเสี้ยวเถาให้ปริมาณสิ่งสกัดมากที่สุด (36.13 กรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง) และเสี้ยวดอกขาวให้น้อยที่สุดใน (16.06 กรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง) กาหลง ใบไม้สีทอง กาหลงดอกแดง เถาไฟ ส้มเสี้ยวเถา ส้มเสี้ยว ปอเกี๋ยน ชงโคดำ ชงโค เถากระไดลิง สร้อยสยาม สิรินธรวัลลี เถาขยัน และคิ้วนาง พบทั้งสารเควอซีติน และเควอซิตริน ส้มเสี้ยวพบสารเควอซีติน และเควอซิตรินมากที่สุดเท่ากับ 191.81 and 373.97 มิลลิกรัมต่อ 100 กรัมโดยน้ำหนักแห้ง สารเควอซีตินไม่พบในแสลงพัน ชงโคนา เสี้ยวป่า และโยทะกา ส่วนสารเควอซิตรินไม่พบในแสลงพันเถา และเสี้ยวดอกขาว การตรวจสอบความใช้ได้ของวิธีวิเคราะห์ได้ถูกทดสอบเพื่อยืนยันความแม่นยำ และถูกต้องของวิธีวิเคราะห์ สรุป: วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงโดยดีเทคเตอร์ชนิดโฟโต้ไดโอดอาเรย์มีประสิทธิภาพดีในการแยกและวิเคราะห์ปริมาณสารเควอซีติน และเควอซิตรินในพืชสกลุชงโคทั้ง 20 สายพันธุ์ คำสำคัญ: สกุลชงโค, เควอซีติน, เควอซิตริน, วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงAbstract Objective: To preliminarily quantitate quercetin and quercitrin in mature leaves of Bauhinia species distributed throughout Thailand using RP-HPLC analysis. Methods: Mature leaves of 20 Bauhinia species were collected, cleaned and exhaustively extracted with 95% ethanol using Soxhlet apparatus. The ethanolic extracts were injected to Inertsil® ODS-3 C18 column at 35 ºC. The elution solvent was 0.5% phosphoric acid:methanol (1:1) at the flow rate of 1.0 ml/min. Photo-diode array detector was set at 255 nm. Results: The highest yield was found in B. lakhonensis (36.13 g/100 g dried leaves) and the lowest yield in B. variegata (16.06 g/100 g dried leaves). B. acuminata, B. aureifolia, B. galpinii, B. integrifolia, B. lakhonensis, B. malabarica, B, ornata, B. pottsii, B. purpurea, B. scandens, B. siamensis, B. sirindhorniae, B. strychnifolia and B. winitii were found to have both quercetin and quercitrin. The highest contents of quercetin and quercitrin were found in B. malabarica as 191.81 and 373.97 mg/100 g dried leaves, respectively. Quercetin was not found in B. pulla, B. racemosa, B. saccocalyx, and B. tomentosa. Quercitrin was not found in B. bracteata, and B. variegata. The validity of the analysis was in the acceptable range. Conclusion: RP-HPLC with PDA detector performed a good separation and could quantitate quercetin and quercitrin content in selected 20 Bauhinia species distributed throughout Thailand. Keywords: Bauhinia spp., quercetin, quercitrin, RP-HPL

The effects of Litsea cubeba essential oil inhalation on brainwave activity

Litsea cubeba is a dioecious tree found in Asia, including Thailand. It is known for its therapeutic properties in aromatherapy. This study aims to investigate the effect of L. cubeba essential oil on EEG recordings. Sweet almond oil was used as the essential oil diluent. Twenty-five healthy participants aged 20–35 were recruited. First, the participants inhaled sweet almond oil; then, after a 7-day washout period, they inhaled 10% of the essential oil via face mask (2 L/min). Brainwaves were recorded using Nicolet EEG v32 from Natus Neurology Company (USA). The absolute powers of 4 main frequency bands (delta, theta, alpha, and beta waves) were compared during three conditions i.e., resting-state, sweet almond oil inhalation and L. cubeba inhalation. The results indicated that the absolute powers of alpha (8–12.9 Hz) and beta (13–30) activity increased significantly after L. cubeba inhalation. In conclusion, the inhalation of L. cubeba essential oil induced effects on the central nervous system (brainwave activity). L. cubeba essential oil activated both alpha and beta waves, representing calmness and alertness, respectively. This study has demonstrated the effect of L. cubeba essential oil inhalation in complement with well-being and aromatherapeutic applications

<em>In vitro</em> antidiabetic, antioxidation and cytotoxicity activities of ethanolic extract of <em>Aquilaria crassna</em> leaves and its active compound; mangiferin

144-150Degenerative diseases have been considered as a major public health problem in many countries, thus, findingmedicines to treat these diseases without undesirable side effects is required. This study aimed to investigate the antidiabetic, anti-oxidation and cytotoxicity activities of the ethanolic extract of Aquilaria crassna leaves (ACE) and its active metabolite; mangiferin. The yeast α-glucosidase inhibitory assay was performed, and the IC50 of ACE and mangiferin were found to be 0.1840±0.0032 and 0.5714±0.0044 mg/mL, respectively. In addition, these samples were analyzedin term of the in vitro antioxidant activities using standard antioxidant assays. The results showed that ACE and mangiferin do possess anti-oxidant properties. Moreover, the cytotoxicity of ACE and mangiferin was also evaluated against three human cancer cell lines using MTT assay. The ACE could inhibit cell viability of MDA-MB-231; breast cancer cells (IC50 = 33.89±0.50 μg/mL) greater than HT-29; colorectal cancer cells (IC50= 51.74±1.42 μg/mL) and HepG2; hepatic cancer cells (IC50 = 53.63±1.54 μg/mL) Mangiferin could also reduce the viability of these three cell lines, but the IC50 was greater than 100 μg/mL. In conclusion, our findings may provide some evidence for understanding the indigenous use of A. crassna leaves

Antidiabetic and anticancer activities of Mangifera indica cv. Okrong leaves

Diabetes and cancer are a major global public health problem. Plant-derived agents with undesirable side-effects were required. This study aimed to evaluate antidiabetic and anticancer activities of the ethanolic leaf extract of Mangifera indica cv. Okrong and its active phytochemical compound, mangiferin. Antidiabetic activities against yeast α-glucosidase and rat intestinal α-glucosidase were determined using 1 mM of p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside as substrate. Inhibitory activity against porcine pancreatic α-amylase was performed using 1 mM of 2-chloro-4 nitrophenol-α-D-maltotroside-3 as substrate. Nitrophenol product was spectrophotometrically measured at 405 nm. Anticancer activity was evaluated against five human cancer cell lines compared to two human normal cell lines using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. Mango leaf extract and mangiferin exhibited dose-dependent inhibition against yeast α-glucosidase with the IC 50 of 0.0503 and 0.5813 mg/ml, respectively, against rat α-glucosidase with the IC 50 of 1.4528 and 0.4333 mg/ml, respectively, compared to acarbose with the IC 50 of 11.9285 and 0.4493 mg/ml, respectively. For anticancer activity, mango leaf extract, at ≥200 μg/ml showed cytotoxic potential against all tested cancer cell lines. In conclusion, mango leaf possessed antidiabetic and anticancer potential in vitro

Pharmacognostic evaluation with reference to catechin content and antioxidant activities of pale catechu in Thailand

Pale catechu, a well-known crude drug, has been widely used for anti-diarrhea. Due to its medicinal usage, this study was performed to evaluate the pharmacognostic and antioxidant properties as well as catechins contents of pale catechu in Thailand. Twenty samples of pale catechu collected from traditional drug stores throughout Thailand were investigated. Antioxidant activities, total phenolic, nontannin phenolic, and total tannin contents were evaluated. (+)-catechin and (−)-epicatechin were quantitatively analyzed by high performance liquid chromatography. The results revealed that most of pale catechu samples were adulterated according to high ash values. Qualified pale catechu in Thailand were demonstrated for their average contents of total ash, acid insoluble ash, loss on drying, and moisture as 5.20 ± 0.19, 1.61 ± 0.17, 13.14 ± 0.10, and 13.20 ± 1.07 g/100 g of dry weight, respectively. The ethanol and water soluble extractive matters were 91.66 ± 5.16 and 44.59 ± 3.18 g/100 g of dry weight respectively. (+)-catechin in theses samples was 478.87 ± 2.77 μg/mg of crude drug, whereas (−)- epicatechin was found to be trace (< limit of quantitation). The promising antioxidant activities were demonstrated compared to (+)- catechin hydrate