Estudio de los factores infección con trypanosoma cruzi y nutrición sobre receptores innatos tipo toll y scavenger, adipocinas y otros mediadores de inflamación asociados a la obesidad en modelos experimentales

En el modelo experimental in vivo en ratones C57BL/6 wild type tratados con streptozotocina y alimentados con una dieta grasa/fructosa se inducirá obesidad (IR) y DM2, con el propósito de: 1-Investigar la influencia de la infección con Trypanosoma cruzi como un potencial factor sinérgico pro-aterogénico. Se evaluará a distintos tiempos post infección, el tejido adiposo visceral y las repercusiones en aorta y corazón principalmente, por estudios histopatológicos. En plasma, se determinará el perfil de lípidos, lipoproteínas y otros parámetros metabólicos: glucosa e insulina, estos últimos para calcular el índice HOMA-IR, que refleje el grado de insulino- resistencia. Asimismo, se evaluarán ácidos grasos libres y proteínas de fase aguda circulantes como respuesta al proceso inflamatorio. 2- Evaluar la expresión de receptores tipo Toll (TLR 2, 4 y 9) y scavenger clase B (CD36) en el tejido adiposo visceral y aorta principalmente e identificar los tipos celulares que participan en las lesiones vasculares (macrófagos -M-, granulocitos y linfocitos T). 3- Determinar las citocinas inflamatorias: TNF, IL1-, IL12, IL18, IFN e IL6 y la quimiocina atractante de monocitos (CCL2; MCP-1) y adipocinas (leptina, resistina y adiponectina) en plasma y otros mediadores inflamatorios como óxido nítrico, especies reactivas del oxígeno (ROS) y metaloproteasas (MMPs) en tejido adiposo visceral y aorta. Se cuantificarán además las moléculas de adhesión intercelular ICAM-1 y VCAM-1, involucradas en otros modelos de obesidad e insulino-resistencia. En el modelo in vitro 1- Investigar la influencia de la infección con T. cruzi y ácidos grasos saturados y monoinsaturado (C18, oleico) y el efecto de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) oxidadas y agregadas frente a LDL nativas (control) en una línea celular de adipositos. Se estudiará la expresión basal y post-estímulo de los receptores innatos tipo Toll y CD 36. 2- Cuantificar las adipocinas pro- inflamatorias (leptina, resistina y MCP-1)y adiponectina (antiinflamatoria) en el sobrenadante de cultivos frente a los estímulos propuestos y la expresión de las moléculas de adhesión ICAM-1 y VCAM-1.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Estudio de los factores infección con trypanosoma cruzi y nutrición sobre receptores innatos tipo toll y scavenger, adipocinas y otros mediadores de inflamación asociados a la obesidad en modelos experimentales

En el modelo experimental in vivo en ratones C57BL/6 wild type tratados con streptozotocina y alimentados con una dieta grasa/fructosa se inducirá obesidad (IR) y DM2, con el propósito de: 1-Investigar la influencia de la infección con Trypanosoma cruzi como un potencial factor sinérgico pro-aterogénico. Se evaluará a distintos tiempos post infección, el tejido adiposo visceral y las repercusiones en aorta y corazón principalmente, por estudios histopatológicos. En plasma, se determinará el perfil de lípidos, lipoproteínas y otros parámetros metabólicos: glucosa e insulina, estos últimos para calcular el índice HOMA-IR, que refleje el grado de insulino- resistencia. Asimismo, se evaluarán ácidos grasos libres y proteínas de fase aguda circulantes como respuesta al proceso inflamatorio. 2- Evaluar la expresión de receptores tipo Toll (TLR 2, 4 y 9) y scavenger clase B (CD36) en el tejido adiposo visceral y aorta principalmente e identificar los tipos celulares que participan en las lesiones vasculares (macrófagos -M-, granulocitos y linfocitos T). 3- Determinar las citocinas inflamatorias: TNF, IL1-, IL12, IL18, IFN e IL6 y la quimiocina atractante de monocitos (CCL2; MCP-1) y adipocinas (leptina, resistina y adiponectina) en plasma y otros mediadores inflamatorios como óxido nítrico, especies reactivas del oxígeno (ROS) y metaloproteasas (MMPs) en tejido adiposo visceral y aorta. Se cuantificarán además las moléculas de adhesión intercelular ICAM-1 y VCAM-1, involucradas en otros modelos de obesidad e insulino-resistencia. En el modelo in vitro 1- Investigar la influencia de la infección con T. cruzi y ácidos grasos saturados y monoinsaturado (C18, oleico) y el efecto de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) oxidadas y agregadas frente a LDL nativas (control) en una línea celular de adipositos. Se estudiará la expresión basal y post-estímulo de los receptores innatos tipo Toll y CD 36. 2- Cuantificar las adipocinas pro- inflamatorias (leptina, resistina y MCP-1)y adiponectina (antiinflamatoria) en el sobrenadante de cultivos frente a los estímulos propuestos y la expresión de las moléculas de adhesión ICAM-1 y VCAM-1.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Estudio de los factores infección con trypanosoma cruzi y nutrición sobre receptores innatos tipo toll y scavenger, adipocinas y otros mediadores de inflamación asociados a la obesidad en modelos experimentales

Objetivo General: contribuir a dilucidar el efecto de la infección con Trypanosoma cruzi y una dieta grasa/fructosa y su impacto sobre las repercusiones cardiovasculares y metabólicas, demostradas en nuestro modelo de obesidad. Este objetivo se abordará en modelos in vivo e in vitro y nuestro interés es abocarnos a establecer el compromiso de los receptores innatos tipo Toll 2 y 4 (TLR2) y scavenger (basurero) CD 36 y otros mediadores inflamatorios sobre las lesiones cardiovasculares y metabólicas, previamente descriptas en este interesante modelo. El estudio se focalizará en las células del tejido graso visceral (abdominal) y en adipocitos de una línea celular/ o explantos de tejido adiposo visceral (TAV). Esta investigación permitiría avanzar en el conocimiento de la patogénesis inflamatoria de las co-morbilidades asociadas a la obesidad experimental y potencialmente aportaría las bases para sustentar la implementación de novel estrategias terapéuticas destinadas a minimizar o contrarrestar sus complicaciones, entre ellas, el Síndrome metabólico, la Diabetes Mellitus tipo 2 y la enfermedad cardiovascular, con serias implicancias para la Salud Pública regional y mundial.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Estudio de los factores infección con trypanosoma cruzi y nutrición sobre receptores innatos tipo toll y scavenger, adipocinas y otros mediadores de inflamación asociados a la obesidad en modelos experimentales

Objetivo General: contribuir a dilucidar el efecto de la infección con Trypanosoma cruzi y una dieta grasa/fructosa y su impacto sobre las repercusiones cardiovasculares y metabólicas, demostradas en nuestro modelo de obesidad. Este objetivo se abordará en modelos in vivo e in vitro y nuestro interés es abocarnos a establecer el compromiso de los receptores innatos tipo Toll 2 y 4 (TLR2) y scavenger (basurero) CD 36 y otros mediadores inflamatorios sobre las lesiones cardiovasculares y metabólicas, previamente descriptas en este interesante modelo. El estudio se focalizará en las células del tejido graso visceral (abdominal) y en adipocitos de una línea celular/ o explantos de tejido adiposo visceral (TAV). Esta investigación permitiría avanzar en el conocimiento de la patogénesis inflamatoria de las co-morbilidades asociadas a la obesidad experimental y potencialmente aportaría las bases para sustentar la implementación de novel estrategias terapéuticas destinadas a minimizar o contrarrestar sus complicaciones, entre ellas, el Síndrome metabólico, la Diabetes Mellitus tipo 2 y la enfermedad cardiovascular, con serias implicancias para la Salud Pública regional y mundial.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

La calidad nutricional, un factor clave que modula la composición de la microbiota intestinal y la respuesta inmune-metabólica en modelos de obesidad. Impacto en la progresión/prevención de enfermedades crónicas no transmisibles de alta prevalencia social

Este proyecto propone contribuir a dilucidar la influencia de la calidad de la dieta en su contenido en macronutrientes grasos sobre la génesis de obesidad e insulino-resistencia, mediante la administración de dietas con contenido graso 15% a base de ácidos grasos saturados (DA, patogénica) y 11% de grasas, suplementada con ácidos grasos poliinsaturados omega 6/ 3 y fructosa 5% (DO, preventiva de complicaciones CV). Se usará un grupo experimental basal (B o Control) alimentado con dieta con 3-4% de grasas. Nuestro objetivo es estudiar los cambios en la composición/diversidad de la microbiota intestinal (GM) a través de metodología de secuenciamiento del gen rRNA 16 S en materia fecal de los distintos grupos experimentales e investigar su impacto sobre la modulación de sus complicaciones cardiovasculares (CV). En el contexto nutricional obesogénico, evaluaremos la influencia de un factor de riesgo CV no tradicional- el Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas, hoy globalizada. El estudio se abordará en modelos de obesidad in vivo desarrollados en nuestro laboratorio y ex vivo, investigando la participación de receptores de la inmunidad innata y metabólicos (TLR-2 y 4, SR-CD36, PPARg, GPR-120), citocinas pro-inflamatorias y adipocinas (leptina/adiponectina), quimiocina MCP-1 y otros mediadores inflamatorios comprometidos en la patogénesis de la obesidad. Nos focalizaremos en las células del tejido adiposo visceral (TAV abdominal) y adipocitos procesados ex vivo. Esta investigación permitiría avanzar en el conocimiento de la patogénesis y desregulación de la respuesta inmune-metabólica asociada a sus complicaciones, en función de cambios en la dieta que promuevan la prevención de la salud CV. La composición de una dieta con características protectoras aportaría las bases para sustentar la implementación de nuevas estrategias de intervención nutricional con un efecto beneficioso sobre la composición/diversidad de la GM y/o terapéuticas destinadas a contrarrestar sus devastadoras complicaciones CV, principal causa de morbi-mortalidad global. Estamos convencidos que sería posible producir una obesidad metabólicamente saludable, que al menos en parte, modularía la resolución de la inflamación crónica de grado bajo, el mecanismo patogénico común de la obesidad y enfermedades metabólicas, de alta prevalencia social.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Chronic Trypanosoma cruzi infection potentiates adipose tissue macrophage polarization toward an anti-inflammatory M2 phenotype and contributes to diabetes progression in a diet-induced obesity model

Chronic obesity and Chagas disease (caused by the protozoan Trypanosoma cruzi) represent serious public health concerns. The interrelation between parasite infection, adipose tissue, immune system and metabolism in an obesogenic context, has not been entirely explored. A novel diet-induced obesity model (DIO) was developed in C57BL/6 wild type mice to examine the effect of chronic infection (DIO+I) on metabolic parameters and on obesity-related disorders. Dyslipidemia, hyperleptinemia, and cardiac/hepatic steatosis were strongly developed in DIO mice. Strikingly, although these metabolic alterations were collectively improved by infection, plasmatic apoB100 levels remain significantly increased in DIO+I, suggesting the presence of pro-atherogenic small and dense LDL particles. Moreover, acute insulin resistance followed by chronic hyperglycemia with hypoinsulinemia was found, evidencing an infection-related-diabetes progression. These lipid and glucose metabolic changes seemed to be highly dependent on TLR4 expression since TLR4-/- mice were protected from obesity and its complications. Notably, chronic infection promoted a strong increase in MCP-1 producing macrophages with a M2 (F4/80+CD11c-CD206+) phenotype associated to oxidative stress in visceral adipose tissue of DIO+I mice. Importantly, infection reduced lipid content but intensified inflammatory infiltrates in target tissues. Thus, parasite persistence in an obesogenic environment and the resulting host immunometabolic dysregulation may contribute to diabetes/atherosclerosis progression.Fil: Cabalén, María Eugenia. Universidad Católica de Córdoba; ArgentinaFil: Cabral, Maria Fernanda. Universidad Católica de Córdoba; ArgentinaFil: Sanmarco, Liliana Maria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Andrada, Marta Cecilia. Universidad Católica de Córdoba; ArgentinaFil: Onofrio, Luisina Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Ponce, Nicolás Eric. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Aoki, Maria del Pilar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Gea, Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Cano, Roxana Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

Immune-metabolic balance in stressed rats during Candida albicans infection

We evaluated the host metabolic response to chronic varied stress during infection with the fungus Candida albicans. We used four groups of female Wistar rats: normal uninfected and unstressed, stressed, C. albicans infected and infected, and stressed. Infected rats reacted with rapid metabolic adjustments, evident as anorexia and body weight loss, partly mediated by glucocorticoids and TNF-á. Higher circulating levels of IL-6 and glucose (p < 0.05) revealed the progress and catabolic effect of the inflammatory response. Infected and stressed rats instead showed anorexia associated with infection and weight loss as the result of reduced food intake. This group exhibited a prompt reduction in circulating leptin on day 3 (p < 0.05), reduction in glucose levels and depletion of hepatic glycogen depots. We also evaluated the contribution of TNF-á, glucocorticoids, and food deprivation to liver damage. Lipid peroxidation in liver detected in the infected and infected-stressed groups was exacerbated by the glucocorticoid receptor antagonist RU 486, suggesting the modulatory activity of glucocorticoids, while hepatic fat accumulation and glycogen depletion decreased with anti-TNF-á treatment. Food deprivation exacerbated liver injury while the response to stress contributed to greater fungal colonization. Our findings emphasize the impact of metabolic alterations on tissue damage when the host immune activity is modulated by stress mediators.Fil: Rodriguez Galan, Maria Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Sotomayor, Claudia Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Cano, Roxana Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Cejas, Hugo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Correa, Silvia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

Trypanosoma cruzi Infection Is a Potent Risk Factor for Non-alcoholic Steatohepatitis Enhancing Local and Systemic Inflammation Associated with Strong Oxidative Stress and Metabolic Disorders

The immune mechanisms underlying experimental non-alcoholic steatohepatitis (NASH), and more interestingly, the effect of T. cruzi chronic infection on the pathogenesis of this metabolic disorder are not completely understood. We evaluated immunological parameters in male C57BL/6 wild type and TLR4 deficient mice fed with a standard, low fat diet, LFD (3% fat) as control group, or a medium fat diet, MFD (14% fat) in order to induce NASH, or mice infected intraperitoneally with 100 blood-derived trypomastigotes of Tulahuen strain and also fed with LFD (I+LFD) or MFD (I+MFD) for 24 weeks. We demonstrated that MFD by itself was able to induce NASH in WT mice and that parasitic infection induced marked metabolic changes with reduction of body weight and steatosis revealed by histological studies. The I+MFD group also improved insulin resistance, demonstrated by homeostasis model assessment of insulin resistance (HOMA-IR) analysis; although parasitic infection increased the triglycerides and cholesterol plasma levels. In addition, hepatic M1 inflammatory macrophages and cytotoxic T cells showed intracellular inflammatory cytokines which were associated with high levels of IL6, IFNγ and IL17 plasmatic cytokines and CCL2 chemokine. These findings correlated with an increase in hepatic parasite load in I+MFD group demonstrated by qPCR assays. The recruitment of hepatic B lymphocytes, NK and dendritic cells was enhanced by MFD, and it was intensified by parasitic infection. These results were TLR4 signaling dependent. Flow cytometry and confocal microscopy analysis demonstrated that the reactive oxygen species and peroxinitrites produced by liver inflammatory leukocytes of MFD group were also exacerbated by parasitic infection in our NASH model. We highlight that a medium fat diet by itself is able to induce steatohepatitis. Our results also suggest a synergic effect between damage associated with molecular patterns generated during NASH and parasitic infection, revealing an intense cross-talk between metabolically active tissues, such as the liver, and the immune system. Thus, T. cruzi infection must be considered as an additional risk factor since exacerbates the inflammation and accelerates the development of hepatic injury.Fil: Onofrio, Luisina Inés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Arocena, Alfredo Raul. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Paroli, Augusto Fabián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Cabalén, María Eugenia. Universidad Catolica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Andrada, Marta Cecilia. Universidad Catolica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Catolica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Gea, Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

Efecto de la infección in vivo con trypanosoma cruzi y una dieta rica en lípidos sobre receptores toll-like en un modelo experimental de ateroesclerosis

Ateroesclerosis es una enfermedad inflamatoria crónica de arterias de mediano y gran calibre, caracterizada por activación de células endoteliales, reclutamiento de monocitos en la pared de los vasos y diferenciación de macrófagos en células espumosas cargadas de colesterol. Además de los factores de riesgo convencionales y mejor conocidos que predisponen a la ateroesclerosis, como la hiperlipemia, hipertensión y el hábito de fumar, recientemente se ha propuesto a las infecciones y la inflamación como factores de riesgo a considerar en su desarrollo. Algunas infecciones bacterianas o virales pueden ejercer una acción pro-aterogénica, probablemente como consecuencia de inflamación sistémica o un efecto directo sobre la pared vascular. Sin embargo, el papel del Trypanosoma cruzi ha sido escasamente explorado. Como objetivo principal nos propusimos, estudiar la influencia de la infección in vivo con Trypanosoma. cruzi (parásito protozoario, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas ) más una dieta rica en lípidos sobre la expresión de los receptores tipo Toll de la inmunidad innata en un modelo experimental en ratones C57BL/6 salvajes, propensos al desarrollo de ateroesclerosis. Especifícamente, nos interesa caracterizar que tipos celulares infiltran el corazón y aorta de los animales sometidos a tratamiento experimental, el perfil de citoquinas inflamatorias séricas, quimioquinas y moléculas de adhesión intercelular, así como también establecer una correlación con parámetros bioquímicos-clínicos y endocrinológicos, en especial el perfil de lípidos, lipoproteínas y apolipoproteínas, marcadores de inflamación sistémica, peso corporal, glucemia, insulina e insulino-resistencia.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin

Efecto de la infección in vivo con trypanosoma cruzi y una dieta rica en lípidos sobre receptores toll-like en un modelo experimental de ateroesclerosis

Ateroesclerosis es una enfermedad inflamatoria crónica de arterias de mediano y gran calibre, caracterizada por activación de células endoteliales, reclutamiento de monocitos en la pared de los vasos y diferenciación de macrófagos en células espumosas cargadas de colesterol. Además de los factores de riesgo convencionales y mejor conocidos que predisponen a la ateroesclerosis, como la hiperlipemia, hipertensión y el hábito de fumar, recientemente se ha propuesto a las infecciones y la inflamación como factores de riesgo a considerar en su desarrollo. Algunas infecciones bacterianas o virales pueden ejercer una acción pro-aterogénica, probablemente como consecuencia de inflamación sistémica o un efecto directo sobre la pared vascular. Sin embargo, el papel del Trypanosoma cruzi ha sido escasamente explorado. Como objetivo principal nos propusimos, estudiar la influencia de la infección in vivo con Trypanosoma. cruzi (parásito protozoario, agente etiológico de la Enfermedad de Chagas ) más una dieta rica en lípidos sobre la expresión de los receptores tipo Toll de la inmunidad innata en un modelo experimental en ratones C57BL/6 salvajes, propensos al desarrollo de ateroesclerosis. Especifícamente, nos interesa caracterizar que tipos celulares infiltran el corazón y aorta de los animales sometidos a tratamiento experimental, el perfil de citoquinas inflamatorias séricas, quimioquinas y moléculas de adhesión intercelular, así como también establecer una correlación con parámetros bioquímicos-clínicos y endocrinológicos, en especial el perfil de lípidos, lipoproteínas y apolipoproteínas, marcadores de inflamación sistémica, peso corporal, glucemia, insulina e insulino-resistencia.Fil: Cano, Roxana Carolina. Universidad Católica de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentin