250 research outputs found
Fluorescence-based proteasome activity profiling
With the proteasome emerging as a therapeutic target for cancer treatment, accurate tools for monitoring proteasome (inhibitor) activity are in demand. In this chapter, we describe the synthesis and use of a fluorescent proteasome activity probe that allows for accurate profiling of proteasomal activity in cell lysates, intact cells, and murine and human patient-derived material, with high sensitivity using SDS-PAGE. The probe allows for direct scanning of the gel for fluorescent emission of the distinct proteasomal subunits and circumvents the use of Western blot analysis. Due to its suitable biochemical and biophysical properties, the fluorescent probe can also be used for confocal laser scanning microscopy and flow cytometry-based experiments
Development of a hypersensitive periodate-cleavable amino acid that is methionine- and disulfide-compatible and its application in MHC exchange reagents for T cell Characterisation
Incorporation of cleavable linkers into peptides and proteins is of particular value in the study of biological processes. Here we describe the synthesis of a cleavable linker that is hypersensitive to oxidative cleavage as the result of the periodate reactivity of a vicinal amino alcohol moiety. Two strategies directed towards the synthesis of a building block suitable for solid-phase peptide synthesis were developed: a chemoenzymatic route, involving l-threonine aldolase, and an enantioselective chemical route; these led to Ξ±,Ξ³-diamino-Ξ²-hydroxybutanoic acids in diastereoisomerically mixed and enantiopure forms, respectively. Incorporation of the 1,2-amino alcohol linker into the backbone of a peptide generated a conditional peptide that was rapidly cleaved at very low concentrations of sodium periodate. This cleavable peptide ligand was applied in the generation of MHC exchange reagents for the detection of antigen-specific T cells in peripheral blood cells. The extremely low concentration of periodate required to trigger MHC peptide exchange allowed the co-oxidation of methionine and disulfide residues to be avoided. Conditional MHC reagents hypersensitive to periodate can now be applied without limitations when UV irradiation is undesired or less practical
Low repetition rate 343 nm passively Q-switched solid-state laser for time-resolved fluorescence spectroscopy
ΠΡΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡ ΠΌΠ΅ΠΆΠΊΡΠ»ΡΡΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ Π² ΠΎΠ±ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΠΈΠ½ΠΎΡΡΡΠ°Π½Π½ΡΡ Π³ΡΠ°ΠΆΠ΄Π°Π½
340nm UV LED excitation in time-resolved fluorescence system for europium-based immunoassays detection
Π’ΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΠΈ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ°ΠΈ ΡΡΡΠΊΠΌΠ΅Π½ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΡΠΎΠ΄Π° Π² ΠΏΡΠΎΡΠ»ΠΎΠΌ ΠΈ Π½Π°ΡΡΠΎΡΡΠ΅ΠΌ
ΠΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΡΠΌΠΈ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠ΅ΡΡΠ°ΠΌΠΈ ΡΡΠ½ΠΎΡΠ° ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ ΠΏΡΠΈΡΡΡΠΈΠ΅ Π΅ΠΌΡ ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΠΈ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ°ΠΈ. Π‘ΡΠΎΡΠΌΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π° ΡΠ°Π½Π½ΠΈΡ
ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡΡ
ΡΠ°Π·Π²ΠΈΡΠΈΡ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΡΠ²Π°, ΠΎΠ½ΠΈ ΡΠΎΡ
ΡΠ°Π½ΡΡΡ ΡΠ²ΠΎΡ ΠΈΡΡΠΎΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ Π·Π½Π°ΡΠΈΠΌΠΎΡΡΡ, ΡΠ²Π»ΡΡΡΡΡ ΡΠ°ΡΡΡΡ ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ, Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½ΡΡ Π²ΠΎΡΠΏΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ, ΡΡΡΠ΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΈ, ΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Ρ Π²Π»ΠΈΡΠ½ΠΈΠ΅ Π½Π° ΠΌΠΈΡΠΎΠ²ΠΎΠ·Π·ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΏΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²ΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΡΠΎΠ΄Π°.
Π’ΡΡΠΊΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡΠ°Π½ β ΡΡΡΠ°Π½Π°, Π² ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΉ ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎ Π±Π΅ΡΠ΅ΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡΡ ΠΊ Π΄ΠΎΡΠ΅Π΄ΡΠΈΠΌ Π΄ΠΎ Π½Π°ΡΡΠΎΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΡΠΌ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ°ΡΠΌ, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ
ΡΠ»ΠΎΠΆΠΈΠ»ΠΈΡΡ ΠΏΠΎΠ΄ Π²Π»ΠΈΡΠ½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ΅Π»ΠΈΠ³ΠΈΠΈ. Π ΡΡΠΎ Π½Π΅ ΡΠ»ΡΡΠ°ΠΉΠ½ΠΎ: Π² Π’ΡΡΠΊΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡΠ°Π½Π΅ Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ ΡΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΠ±Π»ΡΠ΄Π°ΡΡΡΡ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½Ρ ΡΠ°ΡΠΈΠ°ΡΠ°, ΡΠ»ΡΠΆΠ°ΡΠΈΠ΅ ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π·Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈ, ΠΎΠ±ΡΠ·Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ Π²ΡΠ΅Ρ
. ΠΡΠ»Π°ΠΌΡΠΊΠ°Ρ ΡΠ΅Π»ΠΈΠ³ΠΈΡ ΠΈΠ³ΡΠ°Π»Π° Π²Π°ΠΆΠ½Π΅ΠΉΡΡΡ ΡΠΎΠ»Ρ Π² ΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ ΡΡΡΠΊΠΌΠ΅Π½ΡΠΊΠΈΡ
ΡΡΠ°Π΄ΠΈΡΠΈΠΉ Π½Π° ΠΏΡΠΎΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π²Π΅ΠΊΠΎΠ². ΠΠ½Π° ΠΈ ΡΠ΅ΠΉΡΠ°Ρ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Ρ ΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ Π½Π°ΡΠ΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ, Π² ΡΠΎΠΌ ΡΠΈΡΠ»Π΅ ΠΈ ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π΅ΠΆΠΈ. ΠΡΡΡΠ»ΡΠΌΠ°Π½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΎΠ±ΡΡΠ΄Ρ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ°ΠΈ ΡΡΠ°Π»ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π½Π°ΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΈ ΡΠΎΠ±Π»ΡΠ΄Π°ΡΡΡΡ ΠΏΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π²ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ Π½Π°ΡΠ΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π’ΡΡΠΊΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡΠ°Π½Π°
ΠΡΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠ²Π°Π΄Π΅Π±Π½ΡΡ ΠΎΠ±ΡΡΠ΄ΠΎΠ² Π°Π·Π΅ΡΠ±Π°ΠΉΠ΄ΠΆΠ°Π½ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΡΠΎΠ΄Π°
Π Π°Π·Π΅ΡΠ±Π°ΠΉΠ΄ΠΆΠ°Π½ΡΠΊΠΎΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ ΡΠΎΠ»Ρ ΡΠ΅ΠΌΡΠΈ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎ
ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡΡ. Π ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ Π½Π°ΡΠΎΠ΄Π° Ρ Π΄Π°Π²Π½ΠΈΡ
ΠΏΠΎΡ Π·Π°Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΎ
ΠΎΡΠΎΠ·Π½Π°Π½ΠΈΠ΅ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΠΉΠ½ΡΡ
ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠ΅ΠΉ ΠΈ ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΠΉΠ½ΡΡ
ΡΡΡΠΎΠ΅Π²,
ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎΠ²Π°Π²ΡΠΈΡ
Π½Π° ΠΏΡΠΎΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΡΡΠΎΠ»Π΅ΡΠΈΠΉ, ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ
ΠΈ
Π½ΡΠ½Π΅.
Π‘Π΅ΠΌΠ΅ΠΉΠ½ΡΠΉ Π±ΡΡ Π°Π·Π΅ΡΠ±Π°ΠΉΠ΄ΠΆΠ°Π½ΡΠ΅Π² Π²ΡΠ΅Π³Π΄Π° ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ°Π»ΡΡ
Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΈΠΌ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎΠΌ ΠΏΠ°ΡΡΠΈΠ°ΡΡ
Π°Π»ΡΠ½ΡΡ
ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ. ΠΡΠΆΡΠΈΠ½Π° β
Π³Π»Π°Π²Π° ΡΠ΅ΠΌΡΠΈ β Π±ΡΠ» ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠ²Π»Π°ΡΡΠ½ΡΠΌ ΡΠ°ΡΠΏΠΎΡΡΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ Π΄Π²ΠΈΠΆΠΈΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ
Π½Π΅Π΄Π²ΠΈΠΆΠΈΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠΌΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π°, ΠΈΡΠΊΠ»ΡΡΠ°Ρ ΠΏΡΠΈΠ΄Π°Π½ΠΎΠ΅ ΠΆΠ΅Π½Ρ. ΠΠ΅ΡΠΈ
Π²ΠΎΡΠΏΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ Π² ΡΡΡΠΎΠ³ΠΎΠΌ ΠΏΠΎΠ²ΠΈΠ½ΠΎΠ²Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΎΡΡΡ ΠΈ ΡΡΠ°ΡΡΠΈΠΌ
ΠΌΡΠΆΡΠΈΠ½Π°ΠΌ. ΠΠ΅Π½Π° Π½Π°Ρ
ΠΎΠ΄ΠΈΠ»Π°ΡΡ Π² Π±Π΅ΡΠΏΡΠ΅ΠΊΠΎΡΠ»ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΌ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠΈ Ρ
ΠΌΡΠΆΠ°, Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠ²Π΅ΠΊΡΠΎΠ²ΠΈ ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ
ΡΡΠ°ΡΡΠΈΡ
ΠΆΠ΅Π½ΡΠΈΠ½ Π² Π΄ΠΎΠΌΠ΅ ΠΌΡΠΆΠ°
Π‘ΠΎΠΏΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ΡΠΊΡΠ°ΠΈΠ½ΡΠΊΠΈΡ ΠΈ ΡΠ·Π±Π΅ΠΊΡΠΊΠΈΡ ΠΏΠΎΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΎ Π ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π΅
ΠΠΎΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ ΠΈ ΠΏΠΎΠ³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΊΠΈ ΠΆΠΈΠ²ΡΡ Π² Π½Π°ΡΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΡΠΈ ΠΈ ΡΠΎΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠΆΠ΄Π°ΡΡ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°
Π½Π° ΠΏΡΠΎΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π²ΡΠ΅ΠΉ Π΅Π³ΠΎ ΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ. ΠΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·Π½ΡΠ΅ Π²ΡΡΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΎΡΡΠ°ΠΆΠ°ΡΡ Π²ΡΠ΅ ΡΡΠΎΡΠΎΠ½Ρ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π±ΡΡΠΈΡ, Π·Π°ΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠ»Π΅Π²Π°ΡΡ ΠΈΡΡΠΎΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠΎΠ±ΡΡΠΈΡ, ΠΎΡΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ°ΡΡ ΠΌΠΈΡΠΎΠ²ΠΎΡΠΏΡΠΈΡΡΠΈΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΡΠΎΠ΄Π°. ΠΠΎΠ΄ ΠΏΠΎΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡΡΡ ΠΊΡΠ°ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΈΠ·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ, ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΡΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠΌΡΡΠ» ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π°ΡΡΠΈΠ΅ΡΡ Π½Π°ΡΠΎΠ΄ΠΎΠΌ ΠΈΠ· ΠΏΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅Π½ΠΈΡ Π² ΠΏΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅.
ΠΡΠΈ ΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Π΄ΠΎΠΊΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠΉΡΠ΅ ΡΡΡΠ»ΠΊΡ http://essuir.sumdu.edu.ua/handle/123456789/3283
- β¦