In vitro infection of human cells with Mycobacterium tuberculosis

Se ha estimado que aproximadamente el 50% de los individuos expuestos a Mycobacterium tuberculosis nunca llegan a ser prueba de la tuberculina positiva. Esto indica que el éxito de las respuestas inmunológicas humanas son capaces no sólo de inhibir crecimiento de micobacterias, sino también para matar las bacterias. También se incluye un comentario acerca de los métodos estadísticos que pueden mejorar la detección de efectos biológicos relevante

Cytokines as immunomodulators in tuberculosis therapy

El uso de las citocinas con fines terapéuticos está limitado por su alto costo y toxicidad. Sin embargo, la aparición de la tuberculosis extremadamente resistente (XDR TB), para el que la quimioterapia es ineficaz, ha hecho de nuevo la terapia de las citoquinas como una de las últimas opciones disponibles.La validez de estas patentes necesita ser reevaluada a partir de un punto de vista clínico, y las nuevas aplicaciones de patentes en relación con las citoquinas potencialmente útiles en el tratamiento de TB XDR deben ser animado

Detection of inhibition of antimicrobial activity by mycobacterial lysates in human monocytes infected with Legionella pneumophila

No se detecta actividad antimicrobiana in vitro en monocitos humanos infectados con Mycobacterium tuberculosis, y los mecanismos moleculares que permiten a las bacterias sobrevivir intracelularmente son desconocidos. Como un medio para probar la influencia de productos bacterianos en la actividad microbicida de los monocitos hemos desarrollado una modelo de infección por Legionella pneumophila, que se mató por interferón gamma células activadas. Se demuestra que este modelo es útil porque M. tuberculosis lisados inhiben cien veces la actividad inducida por interferón gamma frente a L. pneumophila. grados comparables de inhibición, sin embargo, se detecta que cuando utilizamos lisados de menos patógena M. gordonae, el aureus Staphylococcus patógena y el no patógeno Escherichia coli, lo que sugiere la participación de un mecanismo común. Esta hipótesis es apoyada por el hecho de que el patrón de secreción de citoquinas es similar en todos casos. Una diferencia significativa es, sin embargo, observó para E. coli lisados, que induce la muerte de las células de L. pneumophila infectado monocito

Human phagocytes lack the ability to kill Mycobacterium gordonae, a non-pathogenic mycobacteria

Se ha desarrollado un modelo de infección en fagocitos humanos para poner a prueba su capacidad de matar dos cepas de M. Gordonae, HL184G y una variedad atenuada, HL184Gat. Como controles se incluyeron una cepa de M.Tuberculosis (HL186T) y otro de L. Pneumophila (ATCC13151). Se observa que los fagocitos humanos carecen de la capacidad intrínseca de eliminar ya sea M. Gordonae o M. Tuberculosis, pero matan a la cepa atenuada. Pudimos observar una relación entre la patogenicidad y el patrón de producción de citoquinas. Así, tanto el patógeno M. tuberculosis y L. Pneumophila, pero no la no patógeno M. Gordonae, induce la producción de niveles significativamente diferentes de IL-1A, IL-6 y TNF-C en monocitos y IL-8 en los neutrófilos. Aunque tanto monocitos y neutrófilos mataron HL184Gat, pero no HL184G, los patrones de la producción de citoquinas inducida por cualquiera de las cepas eran idénticas. La adición de INF-D y / o TNF-C no mejoró la actividad antimicobacteriana de los fagocito

Preparation of inocula for experimental infection of blood with Streptococcus pneumoniae

Las infecciones experimentales de cualquiera de las células requieren la preparación de buena calidad inóculos. Desafortunadamente, el patógeno pulmonar Streptococcus pneumoniae es un microorganismo que sufre un proceso de autolisis cuando se cultiva in vitro. La suplementación de caldo de Todd-Hewitt con un tampón biológico (20 mM Tris-HCl, pH = 7.8) promueve un retraso de seis horas en el comienzo del proceso de autólisis. Hay mejoras cuando hay lavado de bacterias antes de la congelación, evitando manipulaciones después dedescongelación, y el uso de glicerol ( 70% de la bacterias congeladas era viable después de 28 semanas a -80 ° C, y las alícuotas fueron altamente homogéneo. Hemos probado su utilidad en un modelo de infección de la sangre entera y tienen encontró que el plasma humano exhibe una actividad microbicida superior a la sangre entera, una resultado de que no hemos encontrado informado anteriorment

CCL20 is overexpressed in Mycobacterium tuberculosis infected monocytes and inhibits the production of reactive oxygen species (ROS)

CCL20 es una quimiocina que atrae las células dendríticas inmaduras. Se demuestra que los monocitos, células características de la respuesta inmune innata, infectadas con Mycobacterium la tuberculosis expresan el gen CCL20 a nivel mucho más alto que las mismas células infectadas con microbacterias no tuberculosas. INFE, una citoquina fundamental en la respuesta inmune a la tuberculosis, inhibe fuertemente tanto la transcripción y la traducción de CCL20. También hemos confirmado que las células dendríticas son un huésped adecuado para la proliferación de microbacterias, aunque no parece CCL20 de influir en su intracelular tasa de multiplicación. La quimioquina, sin embargo, regula a la baja la característica producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) inducida por M. tuberculosis en monocitos, que pueden afectar a la actividad de las células. La apoptosis mediada por las micobacterias, posiblemente ROS-dependiente, también fue inhibido por CCL2

Apoptosis and oxidative burst in neutrophils infected with Mycobacterium spp.

Los neutrófilos son las especies reactivas de oxígeno (ROS) y la inducción de apoptosis. Su importancia en las infecciones por micobacterias es el objetivo a analizar Se analizó de forma simultánea en los neutrófilos infectados con cualquiera M. tuberculosis o la no patógena M. gordonae. Ninguna de las dos especies se elimina por neutrófilos, pero el patrón exhibido para ambas actividades es completamente diferente. La tuberculosis induce la producción de ROS y la apoptosis y la M. Gordonae no lo hace. La evidencia adicional fue proporcionada por una cepa atenuada de M. gordonae que, aunque se ha convertido en susceptibles a la actividad antimicrobiana de los neutrófilos, todavía no hace promover la producción de ROS o apoptosis. Por lo tanto no se pudo establecer ninguna relación entre cualquiera de estas actividades y la capacidad de los neutrófilos para matar las micobacterias. Hemos observado que la concentración de neutrófilos, una variable que es importante en la actividad antimicrobiana frente a otros patógenos, no tiene ninguna influencia en el micobacteriana crecimiento intracelula

Selección de un algoritmo para la clasificación de Nódulos Pulmonares Solitarios

En los últimos años la comunidad científica internacional ha dedicado considerables recursos a la investigación y desarrollo de sistemas de diagnóstico asistidos por ordenador, utilizados por los médicos en el proceso de diagnóstico. Se ha prestado especial atención en algunas áreas médicas, como las especialidades oncológicas, por los altos índices de mortalidad provocados por algunas enfermedades como el cáncer de pulmón. El diagnóstico temprano de este padecimiento puede reducir en gran medida estos indicadores y mejorar la calidad de vida de los pacientes. El objetivo que se pretende con el desarrollo de esta investigación, es la selección adecuada de un algoritmo de clasificación, para ser utilizado en la fase que lleva el mismo nombre como parte de un sistema de diagnóstico asistido por ordenador para la clasificación de nódulos pulmonares solitarios. Para la selección adecuada del algoritmo de clasificación, se realiza un experimento utilizando las herramientas Weka v3.7.10 y Matlab 2013. Para determinar cuál de las técnicas estudiadas arroja mejores resultados de rendimiento, se utilizó el mismo conjunto de datos para las fases de entrenamiento, prueba y validación del clasificador, disponible en la base de datos internacional The Lung Image Database Consortium Image Collection. Palabras Clave: algoritmo de clasificación, aprendizaje automatizado, nódulos pulmonares solitarios, precisión

Microarray analysis of Mycobacterium tuberculosis-infected monocytes reveals IL-26 as a new candidate gene for tuberculosis susceptibility

Las diferencias en la actividad de los monocitos / macrófagos, células importantes de Mycobacterium tuberculosis, podría influir en la progresión de la tuberculosis. Con el propósito de identificar genes candidatos para la susceptibilidad de la tuberculosis se infectaron monocitos de ambos, individuos sanos de edad avanzada (un grupo de susceptibilidad tuberculosis) y los pacientes con tuberculosis de edad avanzada con M. tuberculosis, y realizado un microarray experimentar. Se encontró que los monocitos de pacientes con tuberculosis mostraron similares patrones de expresión de estos genes, independientemente de la edad de los pacientes. Sólo uno de los genes detectados correspondían a una citoquina: IL-26, un miembro de la familia de las citocinas IL-10 que encontramos que pueden ser regulados a la baja en los monocitos infectados de los pacientes con tuberculosis. No infectado monocitos secretan IL-26 constitutivamente pero reaccionaron fuertemente con M. infección tuberculosa por la disminución de la producción de IL-26. Además, la concetración del suero de IL-26 parecían ser menor en los pacientes con tuberculosis. Cuando la sangre entera era infectada, IL-26 inhibe la capacidad de observar el patógeno que mata. A pesar de que linfocitos expresó IL26R, el ARNm del receptor no se detectó en cualquiera de los dos monocitos o neutrófilos, lo que sugiere que la inhibición de la actividad antimicobacterial puede ser mediada por los linfocitos. Adicionalmente, IL-2 concentraciones en sangre infectada fueron inferiores en presencia de IL-26. La influencia negativa de IL-26 en la actividad antimicobacteriana y su presencia constitutiva tanto en el suero y monocitos sobrenadantes nos llevan a proponer la IL-26 como un gen candidato para la susceptibilidad de tuberculosi

Non-chemotactic influence of CXCL7 on human phagocytes. Modulation of antimicrobial activity against L. pneumophila

Hemos investigado el papel de CXCL7 en la respuesta inmune de los fagocitos humanos contra las bacterias intracelulares Mycobacterium tuberculosis y Legionella pneumophila. Observando que los neutrófilos polimorfonucleares (PMN) quimiotaxis inducida por los sobrenadantes de los macrófagos derivados de monocitos infectados (MDM) puede ser atribuido a CXCL8 en lugar de CXCL7, aunque ambas quimiocinas están presentes en grandes cantidades. También hemos encontrado que CXCL7 está presente no sólo en los sobrenadantes de MDM, sino también en los sobrenadantes de PMN de algunos, pero no todos, los individuos. El análisis de transferencia reveló que, en ambos sobrenadantes de MDM y PMN apareció dos bandas con pesos moleculares consistentes con la proteína básica de plaquetas (PBP) y la proteína activadora de neutrófilos-2 tamaños (NAP-2). En cuanto a la influencia en las células infectadas, NAP-2 recombinante mejora la actividad antimicrobiana de IFNI activa MDM contra L. pneumophila, pero no contra M. tuberculosis. Además, las células U937 transfectadas con una construcción de NAP-2 inhibe la multiplicación intracelular de L. pneumophila, apoyando su papel en la modulación de la actividad antimicrobiana. Finalmente, Las células U937 transfectadas con el constructo NAP-2 mostraron una adhesión que fue aumenta drásticamente cuando se fibronectina sustrato. Se concluye que la humana fagocitos producen variantes CXCL7 que pueden tener una influencia significativa en el respuesta inmune contra los patógenos bacteriano