P2 purinoceptors signaling in fibroblasts of rat subcutaneous tissue

Mestrado em Biologia Molecular e CelularO tecido conjuntivo parece estar envolvido na génese de diversas condições patológicas. O aumento da rigidez do tecido conjuntivo, resultante da fibrose, pode constituir um factor importante no mecanismo patogénico da dor crónica resistente a fármacos (Langevin & Sherman, 2007). Por outro lado, os nucleótidos extracelulares parecem estar envolvidos na fisiopatologia da dor crónica (Burnstock, 2001). Assim, este estudo teve como objectivo averiguar o efeito dos nucleótidos de adenina e uridina na proliferação e síntese de colagénio tipo I de fibroblastos do tecido subcutâneo de rato em cultura. Os resultados obtidos mostram que a incubação com UTP (0.3-100 M, n=5) induz um aumento da proliferação e da produção de colagénio tipo I, o qual é dependente da concentração. Contrariamente, o agonista selectivo dos receptores P2Y2, o MRS 2768 (10 μM, n=3), não teve qualquer efeito no que se refere à proliferação, mas diminuiu significativamente (P<0.05) a síntese de colagénio tipo I. Uma vez que o aumento da produção de colagénio induzida pelo UTP (100 μM) foi proporcional ao aumento do número de células (proliferação celular),podemos especular que este aumento se deve ao aumento do número de células per si do que a uma maior actividade sintética de cada célula. Assim, ao normalizar os valores do colagénio tipo I em relação aos valores obtidos do MTT para os mesmos momentos/dias, deixamos de observar diferenças estatisticamente significativas entre o controlo e as células expostas ao UTP. Uma vez que os receptores P2Y2 não parecem estar envolvidos nesta resposta do UTP (100 μM), esta poderá estar a ser mediada pela activação dos receptores P2Y4 e/ou P2Y6. Considerando que o RB-2 (10 μM, n=5), um antagonista não selectivo que actua preferencialmente no subtipo de receptores P2Y4, não foi capaz de modificar a resposta induzida pelo UTP (100 μM), os receptores P2Y4 parecem também não estar envolvidos. Por outro lado, o MRS 2578 (100 nM), um antagonista selectivo dos receptores P2Y6, atenuou de forma significativa o aumento induzido pelo UTP (100 μM). A corroborar os nossos resultados, uma análise imunocitoquímica mostrou uma imunorreactividade positiva contra os receptores P2Y2 e P2Y6, mostrando um padrão de marcação citoplasmático/membranar, o qual é típico para este tipo de receptores, ao contrário do padrão nuclear exibido pelo anticorpo contra os receptores P2Y4. Relativamente ao envolvimento dos receptores sensíveis ao ADP, os resultados obtidos mostraram que o ADPβS (10-100 μM, n=3-6), um análogo estável do ADP, não parece induzir efeitos significativamente diferentes (P>0.05) na proliferação celular. Contudo, a sua incubação continuada aumentou a produção de colagénio tipo I de forma dependente da concentração (P<0.05). De modo a identificar os receptores purinérgicos envolvidos neste efeito, testamos o ADPβS (100 μM) na presença do MRS 2179 (0.3 μM), do AR-C 66096 (0.1 μM), e do MRS 2211 (10 μM), os quais antagonizam selectivamente os receptores P2Y1, P2Y12 e P2Y13, respectivamente. O efeito facilitatório induzido pelo ADPβS (100 μM) foi atenuado de forma significativa na presença do antagonista dos receptores P2Y1, o MRS 2179 (0.3 μM, n=3), sem ser afectado pelo antagonista dos receptores P2Y12, o AR- C 66096 (0.1 μM, n=3). Pelo contrário, o MRS 2211 (10 μM, n=2) potenciou o aumento da produção de colagénio induzida pelo ADPβS (100 μM), indicando assim que a síntese de colagénio tipo I induzida pelo receptor P2Y1 pode estar a ser parcialmente influenciada por uma activação síncrona do receptor inibitório P2Y13. Por último, uma análise por imunocitoquímica mostrou que estas células apresentam imunorreactividade positiva para os receptores P2Y1 e P2Y13, exibindo um padrão citoplasmático/membranar, contrariamente ao padrão nuclear dos receptores ostentado pelo anticorpo contra os receptores P2Y12. Concluindo, a remodelação da fáscia superficial induzida pelos fibroblastos parece ser regulada por um balanço entre a activação dos receptores P2Y2 e P2Y6, assim como dos receptores P2Y13 e P2Y1. Clarificar as vias que conduzem ao processo de fibrose pode representar uma oportunidade para esclarecer o seu envolvimento na patogénese da dor crónica musculo-esquelética, bem como ser útil no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas.Connective tissue may be involved in the pathogenesis of a wide variety of disease conditions. Increased connective tissue stiffness due to fibrosis may be an important link to the pathogenic mechanism leading to drug-resistant chronic pain (Langevin & Sherman, 2007). In addition, extracellular nucleotides seem to be involved in the pathophysiology of chronic pain (Burnstock, 2001). Therefore, we aimed at investigating the effect of adenine and uridine nucleotides on the proliferation and synthesis of type I collagen by rat fibroblasts from subcutaneous connective tissue. The results showed that continuous incubation of UTP (0.3-100 M, n=5) concentration-dependently increased fibroblasts proliferation, as also increased the synthesis of type I collagen above the control levels. Conversely, the selective P2Y2 agonist, MRS 2768 (10 μM, n=3), was devoid of effect in what concerns proliferation, but significantly (P<0.05) decreased type I collagen synthesis. Since the increase in type I collagen synthesis induced by UTP (100 μM) was proportional to the increase in the amount of cells in the culture (fibroblasts proliferation), we speculated that such an increase could be related to the increase in the cell number rather than a higher synthetic activity. Thus, we performed a more detailed data analysis, in which we normalized type I collagen production taking into consideration the MTT values obtained at the same time points, and we observed no longer significant differences between control and UTP-exposed cells. Discounting the contribution of MRS 2768-sensitive P2Y2 receptors, UTP (100 μM)-induced increase in cells proliferation could be due to P2Y4 and/or P2Y6 receptor activation. Since RB-2 (10 μM, n=5), a non-selective antagonist that acts preferentially on the P2Y4 subtype, did not modify the effect of UTP (100 μM), P2Y4 does not seem to be involved. In turn, MRS 2578 (100 nM), which is a selective P2Y6 antagonist, significantly attenuated UTP (100 μM)-induced increase. To corroborate our results, an immunocytochemistry analysis showed a positive immunoreactivity against the P2Y2 and P2Y6 receptors exhibiting a cytoplasmic/membrane labeling pattern, which is typical for those receptors in many different cells, conversely to the nuclear labeling pattern exhibited by the antibody against the P2Y4. To investigate the involvement of ADP-sensitive P2 receptors on cell proliferation and extracellular matrix production, fibroblast cultures were continuously incubated with the stable ADP analogue, ADPβS (10-100 μM). Results obtained with ADPβS (10-100 μM, n=3-6) showed no significant (P>0.05) differences in fibroblast cells proliferation. However, a continuous incubation with ADPβS (10-100 μM, n=2-5) concentration-dependently increased type I collagen production by fibroblasts (P<0.05). In order to identify which purinoceptor(s) that could be mediating this effect, we tested ADPβS (100 μM) in the presence of MRS 2179 (0.3 μM), AR-C 66096 (0.1 μM), and MRS 2211 (10 μM), which antagonize selectively ADP-sensitive P2Y1, P2Y12 and P2Y13 receptors, respectively. The facilitatory effect of ADPβS (100 μM) was significantly attenuated in the presence of the P2Y1 antagonist, MRS 2179 (0.3 μM, n=3), without being affected by the P2Y12 antagonist, AR- C 66096 (0.1 μM, n=3). In contrast, MRS 2211 (10 μM, n=2) potentiated the effect of ADPβS (100 μM) on type I collagen synthesis, thus indicating that the P2Y1-receptor-induction of type I collagen synthesis may be partially counteracted by synchronous activation of the inhibitory P2Y13 receptor. Finally, an immunocytochemistry analysis showed that these cells exhibit immunoreactivity to P2Y1 and P2Y13 receptors with a cytoplasmic/membrane staining pattern, conversely to the nuclear pattern of P2Y12. Concluding, a delicate balance between the activation of P2Y2 and P2Y6, as well as P2Y13 and P2Y1 purinoceptors, might regulate fibroblast’s induced superficial fascia remodeling. Targeting the pathways leading to fibrosis may represent an opportunity to clarify its involvement in the pathogenesis of musculoskeletal chronic pain and it may be useful for designing novel therapeutic strategies to overcome this disease

Stock returns and foreign investment in Brazil

We examine the relationship between stock returns and foreign investment in Brazil, and find that the inflows of foreign investment boosted the returns from 1995 to 2005. There was a strong contemporaneous correlation, although not Granger-causality. Foreign investment along with the exchange rate, the influence of the world stock markets, and country risk can explain 73 percent of the changes that occurred in the stock returns over the period. We also find that positive feedback trading played a role, and that the market promptly assimilated new information.stock returns; foreign investment; Brazilian economy

A constitucionalidade da incidência do Imposto sobre a Propriedade de Veículos Automotores - IPVA - sobre embarcações e aeronaves

TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Jurídicas. Direito.A presente monografia tem por objeto analisar a constitucionalidade da incidência do Imposto sobre a Propriedade de Veículos Automotores sobre embarcações e aeronaves. Essa temática já foi motivo de ponderação pelo Supremo Tribunal Federal, notadamente nos Recursos Extraordinários n. 134.509-8/AM, n. 255.111-2/SP e n. 379.572-4/RJ, o qual concluiu pela não incidência do referido imposto sobre embarcações e aeronaves. O que se pretende demonstrar, no presente estudo, é o equívoco no entendimento da Corte Suprema, pois o julgamento deu extrema relevância aos aspectos históricos e a escolhas políticas acerca do Imposto sobre a Propriedade de Veículos Automotores, em detrimento da interpretação mais adequada e da análise sistêmica do ordenamento jurídico brasileiro sobre o tema

The Grimm legacy in portuguese children’s literature : the case of Little Red riding hood

Neste artigo, procede-se a uma análise intertextual de diversas obras portuguesas que possuem como matriz o célebre conto da menina do Capuchinho Vermelho.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, UM (UI 317 da FCT

The presence of Luísa Ducla Soares in portuguese children’s literature: childhood and diversity representations

Luísa Ducla Soares (Lisboa, 1939) es una de las autoras más importantes de la literatura infantil portuguesa. Después de haber publicado más de 100 libros - algunos de ellos traducidos y premiados - Luísa Ducla Soares ficcionaliza, de una manera única, temas como la infancia, la intolerancia, la inclusión, la diferencia o la diversidad, el multiculturalismo, la inmigración y la convivencia social, entre otros, por el uso frecuente de estrategias humorísticas como la ironía y la parodia. Sus personajes principales, especialmente los niños y los animales, que actúan como los humanos, representan los comportamientos sociales y algunos de ellos constituyen figuraciones críticas. Tras una breve presentación general de la producción literaria de Luísa Ducla Soares, se reflexiona en este ensayo sobre la representación de la diversidad, de la lectura “cruzada” intertextual de un corpus textual que incluye textos como Os Ovos Misteriosos, A Festa de Anos y Desejos de Natal [Los huevos misteriosos, La fiesta de cumpleaños y Deseos de Navidad]. El propósito de este breve estudio es analizar los elementos específicos relacionados con los temas mencionados, con su construcción diegética y discursiva, así como sus personajes. Por otra parte, este enfoque se centra también en cuestiones relacionadas con las ilustraciones y la relación entre imagen y texto, dado que algunos de los textos seleccionados se inscriben en el género textual conocido como álbum narrativo (picture story book).Luísa Ducla Soares (Lisboa, 1939) is one of the most relevant author of portuguese children’s literature. Having published more than 100 books – some of them translated and recognised with some awards –, Luísa Ducla Soares fictionalizes, in a singular way, themes like childhood, tolerance, inclusion, difference or diversity, multiculturalism, immigration, social coexistence, among others, frequently recurring to humor strategies like irony or parody. Their main characters, specially children or animals which act like people, represent social behaviours and some of them are critical figurations. After presenting a brief overview of Luísa Ducla Soares literary oeuvre, this paper will reflect upon diversity representations by cross-reading a body of texts which includes works such Os Ovos Misteriosos, A Festa de Anos e Desejos de Natal, among others. The aim of this paper is to analyse specific elements related to the referred themes, to its diegetic and discursive construction as well as to the characters. Furthermore, this essay pays special attention to aspects related to illustrations and to the relationship between image and text as some of the selected books can be situated in picture story book genre.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, UM (UI 317 da FCT

Compósitos poliméricos para imageamento óptico e por raios-x em tanques de simulação hidráulica

Este trabalho de pesquisa está relacionado com a investigação de novas abordagens de imageamento não-invasivo que permitam registrar a arquitetura interna de depósitos sedimentares gerados em tanques de simulação hidráulica. Estas simulações são realizadas para melhor compreensão do comportamento das correntes de densidade, que constituem uma das principais responsáveis pela deposição de sedimentos em águas oceânicas profundas. Para isto foi proposta deste trabalho o preparo de nanocompósito polimérico com carga inorgânica para ensaios não destrutivos, com as propriedades e características semelhantes ao Carvão 205, material atualmente utilizado nas simulações. Como matriz polimérica foi utilizada a resina poliéster, preparada por polimerização em massa, com corantes de diferentes cores e inserção de carga inorgânica em diferentes concentrações. Como carga inorgânica foi utilizado o sulfato de bário. Por ensaios de tomografia de raios-X, observou-se que o sulfato de bário disperso na matriz de resina poliéster oferece a opacidade necessária para detecção pela técnica e se mostra potencial para uso nas simulações e imageamento não-invasivo. Por meio de microscopia eletrônica de varredura (MEV) foi possível avaliar a forma da matriz polimérica preparada e classifica-la com forma semi-angular e semi-arredondada. Também foi possível observar nas micrografias obtidas por MEV que a carga de sulfato de bário preparada apresentou dimensões nanométricas. Os compósitos preparados apresentaram valores de peso específico e velocidade de queda comparáveis com os do Carvão 205 e observou-se que a incorporação de corante e carga não influencia significativamente as características desejadas. Desta forma, os compósitos preparados se mostram com potencial para uso nas simulações de correntes de densidade não conservativas.This research is related to the investigation of new approaches for noninvasive imaging that allow registering the internal architecture of sedimentary deposits generated in hydraulic simulation tanks. The simulations are conducted to better understand the behavior of turbiditic currents, one of the principal process responsible for the deposition of sediments in deep oceanic waters. For this reason it is purpose of this work the preparation of polymer nanocomposite with inorganic filler for non-destructive testing, with properties and characteristics similar to Coal 205, material currently used in these simulations. As polimeric matrix it was used an orthophthalic polyester resin prepared by mass polymerization, with dyes in different colors and inserting inorganic filler at different concentrations. Barium sulfate was used as the inorganic filler. Using the X-ray tomography tests, it was observed that barium sulfate provides the opacity needed for detection technique and shows potential to be used in non-invasive imaging at the simulations. Through scanning electron microscopy (SEM) it was possible to assess the prepared polymer matrix and classify it as semi-angular and semi-rounded shape. Also was observed at the SEM micrographs that the barium sulfate prepared it was in nanometer dimension. The prepared composites presented specific weight and settling velocity speed values similar to Coal 205 and it was observed that the incorporation of the filler and the different dyes did not affected significantly the desired characteristics

Leonor Praça’s writing and illustration for children: an example of what images can do

O presente artigo centra-se na ilustração portuguesa para a infância. Coloca-se especial ênfase no trabalho artístico de Leonor Praça (1936-1971), designadamente na criação pioneira do álbum narrativo (picturebook) Tucha e Bicó (1969) e na composição visual que assinou em obras de autores relevantes da História da Literatura Portuguesa de potencial recepção infantil, em particular Alves Redol, Lília da Fonseca, Manuel Ferreira, Isabel da Nóbrega e António Torrado. Na análise e interpretação textuais das obras seleccionadas, pretende-se, a partir de uma abordagem de aspectos relativos à configuração ideotemática e às próprias estratégias técnico-discursivas, destacar as principais singularidades do registo ilustrativo de Leonor Praça, em consonância e em articulação estreita com o discurso literário que o motivou. Acentua-se, ainda, exemplificando, a especial concepção de obra/livro/literatura para a infância deixada transparecer pelo trabalho estético original e sensível da ilustradora em estudo.This article focuses on Portuguese illustration for children. It emphasis the work of Leonor Praça (1936-1971), particularly in her pioneering creation of the picturebook entitled Tucha e Bicó (1969) and in the visual composition she has signed for works by relevant authors of Portuguese Children’s Literature History, in particular Alves Redol, Lília da Fonseca, Manuel Ferreira, Isabel da Nóbrega and António Torrado. In the text analysis and interpretation of the selected books, we intended to highlight the main peculiarities of the illustrative composition of Leonor Praça, in line and in close connection with the literary speech which motivated it. The special conception of work / book / literature for childhood is also stressed, which is shown by the original and sensitive aesthetic work of the illustrator under study.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, IE, UMinho (UI 317 da FCT), PortugalFundos Nacionais através da FCT (Fundação para a Ciência e a Tecnologia) e cofinanciado pelo Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional (FEDER) através do COMPETE 2020 – Programa Operacional Competitividade e Internacionalização (POCI) com a referência POCI-01-0145-FEDER-007562info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Poetry anthologies for children: “old” and “new” verses together

Com uma longa tradição, a poesia para a infância tem sido cultivada por alguns dos mais importantes poetas da história da literatura portuguesa. De assinalar, por exemplo, os casos de Quental (1842-1891) e As Fadas, Pessoa (1888-1935) e certos poemas, ou Andrade (1923-2005) e Aquela Nuvem e Outras. A selecção de sete antologias, todas editadas por relevantes escritores/distintos antologiadores (Sophia de Mello Breyner, José António Gomes e Alice Vieira, por exemplo), é o ponto de partida da nossa análise crítica. Procurando caracterizar o objecto editorial particular que é a antologia e algumas das suas singularidades no âmbito específico da poesia, analisaremos: Poemas de que as Crianças Gostam (1980) (coord. Catarina Ferreira), Verso Aqui Verso Acolá. Antologia para Jovens (1990) (coord. Natércia Rocha), Primeiro Livro de Poesia (1991) (coord. Sophia de Mello Breyner), Conto Estrelas em Ti (2000) (coord. José António Gomes), O Meu Primeiro Álbum de Poesia (2007) (coord. Alice Vieira), Verso a Verso. (2009) e Versos de Não Sei Quê. (2011) (ambas coordenadas por João Manuel Ribeiro). As selecções textuais e a sua organização, bem como as tendências temáticas e formais possibilitarão concluir acerca das principais linhas de força da poesia portuguesa contemporânea para a infância.With a long tradition, poetry for children has been cultivated by some of the most important poets in the history of Portuguese literature. Pointed out, for example, the cases of Quental (1842-1891) and As Fadas, Pessoa (1888-1935) and certain poems, or Andrade (1923-2005) and Aquela Nuvem e Outras. A selection of seven anthologies, all edited by relevant writers (Sophia de Mello Breyner, José António Gomes and Alice Vieira, for example), is the starting point of our critical analysis. In order to characterize the particular editorial object that is the anthology and some of its singularities in the specific context of poetry, we will analyze: Poemas de que as Crianças Gostam (1980) (ed. Catarina Ferreira), Verso Aqui Verso Acolá. Antologia para Jovens (1990) (ed. Natércia Rocha), Primeiro Livro de Poesia (1991) (ed. Sophia de Mello Breyner), Conto Estrelas em Ti (2000) (ed. José António Gomes), O Meu Primeiro Álbum de Poesia (2007) (ed. Alice Vieira), Verso a Verso. (2009) e Versos de Não Sei Quê. (2011) (both edited by João Manuel Ribeiro). The textual selections and its organization, as well as formal and thematic trends allows us to conclude about the main trends of contemporary Portuguese poetry for children.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, UM (UI 317 da FCT