Effect of the essential oil of Minthostachys verticillata (Griseb.) epling and limonene on biofilm production in pathogens causing bovine mastitis

Bovine mastitis causes large annual economic losses around the world. Different microorganisms are associated with the disease. The capacity of pathogens to adhere to bovine mammary epithelial cells is associated with biofilm production which leads to antibiotic resistance. Research is now leading to search alternative control methods and medicinal plants constitute a natural, safe, effective and inexpensive option. Minthostachys verticillata is an autochthonous medicinal plant of Argentina with multiple ethnobotanical properties. In a previous study, we demonstrated that the essential oil (EO) of this species and limonene, one of its compounds, inhibited the growth of mastitis pathogens. The objective of the present work was to determine the inhibitory effect of the essential oil of M. verticillata and limonene, on biofilm formation and on mature biofilm produced by pathogens isolated from bovine mastitis. Time kill assay and bacterial lysis were also determined. Furthermore, RAPD-PCR assays were performed to determine changes in bacterial DNA after EO and limonene exposition. Bacterial isolates were identified as Escherichia coli (EC3 and EC9), Bacillus pumilus (BP5, BP6, and BP7) and Enterococcus faecium (EF1) by rRNA 16S sequencing and MALDI-TOF MS. All the strains were able to form biofilm. Addition of both lactose and sucrose did not affect biofilm production. MIC values for EO were 3.6 mg/ml for E. faecium; 0.9 mg/ml for E. coli (EC3), 14.5 mg/ml for E. coli (EC9), 1.8 mg/ml for B. pumilus (BP7), 3.63 mg/ml for B. pumilus (BP6) and 29.0 mg/ml for B. pumilus (BP7). MIC values for limonene were 6.6 mg/ml for B. pumilus (BP6) and 105 mg/ml for B. pumilus (BP5). These results demonstrated that EO was more effective than limonene, showing also bactericidal action against E. faecium (minimal inhibitory concentration (MBC) = 29.0 mg/ml). This result was corroborated by time of death assay, observing a cell decrease after at 6 h, and then by bacterial lysis assay. Both EO and limonene affected mature biofilm of isolated strains. The results contribute to the study of EO and limonene which may serve as a therapy against bovine mastitis pathogens inhibiting the development of pathogenic bacteria.Fil: Cerioli, Maria Florencia. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moliva, Melina Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; ArgentinaFil: Reinoso, Elina Beatríz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto; Argentin

Articulación teoría-práctica, un desafío para la enseñanza de la genética microbiana

Como docentes tenemos la responsabilidad de enseñar, pero también es necesario dar el espacio para pensar, provocar el pensamiento a través de procesos reflexivos, estimulándolo y mostrando la evolución del mismo a través del tiempo y las culturas. Este es un camino difícil, hay que presentar los conocimientos básicos, pero también hay que preparar a los alumnos para pensar, estimulando el pensamiento, mostrándoles que pensaron otros, que escribieron otros, qué produjeron otros en otras culturas. El interés primordial debe pasar por recuperar los saberes existentes como saberes movilizadores para la formulación de nuevas preguntas por parte del que aprende. También debemos reflexionar acerca de cómo hacer para promover aprendizajes más duraderos. Tenemos que buscar aprendizajes emancipadores. Tenemos que indagar sobre nuestras prácticas y reflexionar si fabricamos o formamos. Resulta necesario desnaturalizar lo naturalizado. Resulta necesario hacer un análisis reflexivo, crítico y contextualizado del trabajo docente y de las prácticas de enseñar. La articulación de la teoría con la práctica es un problema generalizado en las distintas carreras universitarias. Los teóricos magistrales siguen siendo una práctica docente generalizada. Quizá uno de los principales desafíos de la docencia actual es romper con las prácticas sedimentarias. Resulta necesario abrirse y conocer las necesidades de los alumnos de hoy. Los alumnos de hoy no son los mismos que los de hace 10 o 5 años, ya que las nuevas tecnologías han moldeado su forma de pensar, vivir y comunicarse. La enseñanza no puede ser pensada como hace un tiempo atrás, ya que los tiempos cambian y cambian a la sociedad. Hoy en día resulta necesario proponer innovaciones en el aula para lograr mejores prácticas y aprendizajes. La presente propuesta de innovación de la enseñanza tiene como objetivo mejorar el aprendizaje de los estudiantes modificando la enseñanza, la manera de dar las clases teóricas a fin de despertar mayor interés en los estudiantes dejando de lado la metodología de la clase magistral, por otra que tienda a disminuir la brecha entre teórico y práctico a partir de una mejora en el desarrollo de las clases teórico-prácticas a fin de integrarlas con la teoría.Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

Rep-pcr de Staphylococcus aureus isolados a partir de mastite bovina na Argentina

The aim of this study was to assess by rep-PCR the genetic relationship of 52 S. aureus strains isolated from mammary infections collected in four herds located in the central dairy region of Argentina. Results were compared with the in vitro activity of antimicrobial drugs frequently used for treating bovine mastitis. Twelve different antimicrobials patterns were observed. Forty eight percent of the strains were susceptible to all antimicrobials tested. rep-PCR typing could successfully differentiate S. aureus strains of bovine origin. At a first level of similarity (50%), it could be defined 5 clusters namely I to V. Most of the strains (75%) were grouped in cluster I. The results may suggest that genotypes were similar in the different herds. Agreement between antibiotic patterns and rep-profiles was not observed for most isolates. The present report describes the genotypes responsible for the mastitis cases in the central dairy region of Argentina. A better knowledge of infective strains distribution in dairy herds might help in formulating strategies to control of infection. Furthermore, antimicrobial susceptibility of S. aureus should be used as guide to select effective drugs to therapy in intramammary infections.O objetivo do presente estudo foi determinar a relação genética entre rep-PCR de 52 linhagens Staphylococcus aureus isoladas de infecções mamárias em quatro fazendas leiteiras da região leiteira central da Argentina. Os resultados foram comparados com a atividade in vitro dos antimicrobianos freqüentemente utilizados no tratamento da mastite bovina. Foram observados 12 diferentes perfis de antimicrobianos. Do total de linhagens, 45% foram suscetíveis a todos os antibióticos ensaiados. A caracterizacão por rep-PCR pode diferenciar com sucesso as linhagens de S. aureus de origem bovina. Num primeiro nível de similaridade (50%) foram definidos cinco grupos denominados de I a V. A maioria das estirpes (75%) agruparam-se no grupo I. Os resultados sugerem que os genotipos foram similares. Os genotipos não foram asociados com os perfis de antimicrobianos na maioria dos isolados. O presente estudo descreve os genotipos responsáveis pelos casos de mastites na região central da Argentina. O melhor conhecimento da distribução das linhagens infectantes em fazendas leiteras poderia auxiliar na formulacão de estratégias para o controle de infecção. Além disso a suscetibilidade aos antimicrobianos de linhagens de S. aureus deve ser usada para montear a selecão de drogas efetivas para a terapia intramamária

Genetic patterns of Streptococcus uberis isolated from bovine mastitis

The aim of this study was to evaluate the genotypic relationships among 40 Streptococcus uberis isolated from bovine mastitis by using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Additionally, the association between PFGE patterns and virulence profiles was investigated. The isolates exhibited 17 PFGE patterns. Different strains were found within and among herds; however, a low number of isolates within the same herd shared an identical PFGE type. No association between PFGE patterns and virulence profiles was found. However, the detection of specific strains in some herds could indicate that some strains are more virulent than others. Further research needs to be undertaken to elucidate new virulence-associated genes that might contribute to the capability of these strains to produce infection.El objetivo del presente estudio fue evaluar las relaciones genotípicas entre 40 Streptococcus uberis aislados de mastitis bovina mediante la técnica de electroforesis de campos pulsantes (pulsed-field gel electrophoresis [PFGE]). Además, se investigó la asociación entre los patrones de PFGE y los perfiles de virulencia. Los aislamientos mostraron 17 patrones de PFGE. Se encontraron diferentes cepas dentro de los tambos y en los distintos tambos, y un bajo número de aislamientos dentro del mismo tambo compartieron un perfil idéntico de PFGE. No se encontró ninguna asociación entre los patrones de PFGE y los perfiles de virulencia. Sin embargo, la detección de cepas particulares en algunos tambos podría indicar que algunas de ellas son más virulentas que otras. Sería importante avanzar en las investigaciones para identificar nuevos genes relacionados con la virulencia que podrían contribuir a la capacidad infecciosa de estas cepas.Fil: Reinoso, Elina Beatríz. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquimicas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lasagno, Mirta C.. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquimicas y Naturales; ArgentinaFil: Odierno, Liliana M.. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquimicas y Naturales; Argentin

Screening of bacteriocin associated genes of Streptococcus uberis strains

A wide variety of contagious and environmental bacteria can cause bovine mastitis worldwide. Antibiotic therapy is currently used for the treatment of the disease, although its intensive use leads to the emergence of resistant strains. Bacteriocins arise as potential antibacterial option for mastitis treatment. The aim of this work was to analyze bacteriocin associated genes as Streptococcus uberis ubericin A (ubaA), ubericin A immunity protein (ubaI), uberolysin A (ublA), Lantibiotic nisin-U (nsuA and nsuB) in 68 S uberis strains. Furthermore, the ability of the strains to inhibit important mastitis pathogens was assayed. Results showed that genes were present in combination and all the strains carried at least one gene. Seven bacteriocion associated gene patterns were identified. S. uberis strains were able to inhibit different mastitis pathogens and the greatest inhibition was observed in CNS strains. The results obtained provide new insights on antibacterial activity produced by S. uberis strains against different mastitis pathogens and could contribute to the development of strategies to treat intramammary infections.Fil: Lasagno, Mirta Cristina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales; ArgentinaFil: Navarro, María de los Angeles. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Moliva, Melina Vanesa. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Reinoso, Elina Beatríz. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; Argentin

Manual de herramientas moleculares: Conceptos básicos y técnicas empleadas en el estudio de la genética microbiana

La Biología Molecular es un área de la Biología que se encarga de estudiar los procesos quese llevan a cabo en los seres vivos desde un punto de vista molecular. Se nutre de los aportes de la bioquímica, la biología celular y la genética. Los ácidos nucleicos y las proteínasson principalmente su objeto de estudio. El descubrimiento de la doble hélice de ADN, elconocimiento de la actividad de ciertas enzimas sobre el ADN, el uso de la PCR (del inglésPolymerase Chain Reaction) y sus variantes, el desarrollo del ADN recombinante y la ingeniería genética han revolucionado por completo la biología. El estudio molecular ha sidofundamental para múltiples adelantos científicos aplicados a la industria, la agricultura, lamedicina humana y animal. El objetivo de este Manual de Herramientas Moleculares esrealizar una síntesis de los conceptos básicos necesarios para desarrollar las principales técnicas moleculares empleadas en el estudio de la genética bacteriana.Fil: Reinoso, Elina Beatríz. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Dieser, Silvana Andrea. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Moliva, Melina Vanesa. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; Argentin

Capacidad de invasión y producción de biofilm de diferentes géneros bacterianos aislados de mastitis bovina

La mastitis es la enfermedad infecciosa más común en los rodeos lecheros y es considerada la enfermedad del ganado vacuno que causa mayores pérdidas económicas. Una amplia variedad de bacterias pueden causar la enfermedad. La formación de biofilm, adherencia bacteriana e invasión a los tejidos mamarios del huésped son cruciales para la patogénesis de estos agentes.Trabajo publicado en Cagliada, Maria del Pilar Lilia y Galosi, Cecilia Mónica (comps.). I Congreso de Microbiología Veterinaria. Libro de resúmenes. La Plata: Facultad de Ciencias Veterinarias, 2021.Facultad de Ciencias Veterinaria

Characterization of an Enterococcus faecium strain in a murine mastitis model

The aim of the study was to characterize phenotypically and genotypically Enterococcus faecium strains collected from bovine mastitis milk and to evaluate one of them for its virulence in a murine mastitis model. Methods and Results: A total of five E. faecium isolates were collected from cows with subclinical mastitis. EF-7A showed resistance to antibiotics tested, it presented alpha haemolysin and did not present gelatinase activity. It yielded cyA, efafm and gelE1 genes and it could be characterized as a moderate biofilm producer. It was able to internalize in MAC-T cells and 1×108 colony forming unit ml-1 was able to establish an intramammary infection in mice. The strain could be recovered from liver, kidney and blood samples. RAPD profiles showed different bands with respect to the inoculated strain. Histopathology analyses showed different grades of polymorphonuclear neutrophils infiltration in mammary glands. Conclusion: This is the first report that studied E. faecium strain in a lactating mouse model of mastitis and showed that the experimental inoculation was able to stimulate an inflammatory response resulting in mastitis. Results contribute to a better understanding of intramammary infections caused by E. faecium. Significance and Impact of the Study: This investigation shows that mice represent a valuable model for the study of the mastitis pathogenesis caused by E. faecium considering the high costs of using cows for mastitis research.Fil: Montironi, Ivana Dalila. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moliva, Melina Vanesa. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Campra, Noelia Anahí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas, Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Microbiología e Inmunología; ArgentinaFil: Raviolo, Jose Maria. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bagnis, Guillermo. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Agronomía y Veterinaria; ArgentinaFil: Cariddi, Laura Noelia. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; ArgentinaFil: Reinoso, Elina Beatríz. Universidad Nacional de Rio Cuarto. Facultad de Cs.exactas Fisicoquimicas y Naturales. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto de Biotecnologia Ambiental y Salud.; Argentin

Las prácticas socio-comunitarias como experiencias de extensión universitaria

Los microorganismos se encuentran presentes en todas partes. Sin embargo, a pesar de su abundancia, solo unos pocos invaden, se multiplican y provocan enfermedades en los humanos. En algún momento se ha pensado que las enfermedades transmisibles pasarían a ser parte de la historia del siglo XX, pero el problema todavía está lejos de ser resuelto, ya que la realidad nos presenta nuevos virus y nuevas enfermedades transmisibles. Durante el presente proyecto, se divulgaron conocimientos sobre microorganismos causantes de enfermedades transmisibles y los métodos de prevención primaria generando conciencia sobre la importancia de la vacunación. Asimismo, como no existen vacunas para algunas enfermedades transmisibles se propuso entender la importancia de distintos métodos de prevención. El presente proyecto se orientó hacia alumnos de nivel secundario con el fin de educar en enfermedades transmisibles desde el punto de vista microbiológico y epidemiológico para tomar conciencia sobre la importancia de la prevención y la vacunación en la comunidad. Asimismo, permitió unir la teoría con una práctica social concreta e intervenir para alcanzar una formación universitaria que apunta a desarrollar un profesional cuyo perfil esté orientado al trabajo con las realidades del entorno y a la construcción de una sociedad más equilibrada.Especialización en Docencia Universitari

Aislamiento de cepas de Bacillus spp. inhibitorias de patógenos bacterianos causantes de mastitis bovina

La mastitis bovina es una enfermedad infecciosa que afecta a las vacas lecheras provocando una reducción en la producción de leche. Para prevenir la enfermedad se utilizan actualmente diferentes procedimientos, como la desinfección de los pezones después del ordeño, el mantenimiento e higiene adecuados del equipo de ordeño, terapia con antibióticos y el sacrificio de animales con infecciones crónicas.Trabajo publicado en Cagliada, Maria del Pilar Lilia y Galosi, Cecilia Mónica (comps.). I Congreso de Microbiología Veterinaria. Libro de resúmenes. La Plata: Facultad de Ciencias Veterinarias, 2021.Facultad de Ciencias Veterinaria