Desenvolvimento de protocolos de inseminação artificial em tempo fixo em vacas da raça localmente adaptada Curraleiro Pé-Duro

Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o efeito de dois indutores da ovulação e da gonadotrofina coriônica equina (eCG) na dinâmica folicular e luteal, em um protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) em vacas localmente adaptadas da raça Curraleiro Pé-Duro. No experimento 1, vacas pluríparas receberam um dispositivo intravaginal contendo 1g de progesterona (P4) durante oito dias e 2mg de benzoato de estradiol (BE) intramuscular (IM) no momento da inserção do dispositivo (dia zero). Na retirada do dispositivo (dia oito), as vacas receberam 0,150mg de D-cloprostenol sódico IM e foram separadas aleatoriamente para receber 1mg de BE IM (BE8) ou 1mg de cipionato de estradiol IM (CE8), ou nenhum indutor da ovulação (controle). Todos os animais participaram de todos os tratamentos (crossover). O intervalo entre a retirada da P4 e a ovulação foi menor e menos variável no tratamento BE8 (P≤0,05). O momento da ovulação foi mais precoce e mais concentrado nos animais do grupo BE 8. No experimento 2 (crossover), vacas pluríparas receberam o mesmo tratamento hormonal do grupo BE8 do experimento1. Na retirada do dispositivo (dia 8), as vacas foram separadas aleatoriamente para receberem 300UI de eCG IM, enquanto o controle não. Não houve diferença nos parâmetros foliculares e luteais avaliados no experimento 2 (P>0,05). Em conclusão, o BE pode ser utilizado como indutor da ovulação (experimento 1) em protocolos de IATF em vacas Curraleiras Pé-Duro. Entretanto, o eCG (experimento 2) não foi capaz de estimular o desenvolvimento folicular e luteal. Esse resultado é devido provavelmente à capacidade adaptativa das vacas Curraleiras Pé-Duro em manter uma condição corporal satisfatória mesmo em condições de clima seco e quente.Two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of two ovulatory inducers (Exp.1) and equine chorionic gonadotropin (eCG; Exp.2) on follicular and luteal dynamics in a fixed-time AI (FTAI) protocol in locally adapted Curraleiro Pé-Duro cows. In Exp. 1 multiparous cows (n=12) received an intravaginal device containing 1g of progesterone (P4) for 8 days and 2mg of estradiol benzoate (EB) intramuscularly (IM) at device insertion (Day 0). At device removal (Day 8) 0.150mg of Sodium D-Cloprostenol was administered IM and the cows were randomly assigned to receive 1mg of EB (EB8) or 1mg of estradiol cypionate (EC8) IM, or to not receive any ovulatory inducer (Control). All the animals participated in all treatments (crossover). The interval from P4 removal to ovulation was shorter and less variable in the EB8 treatment group (P≤0.05). In Exp. 2 (crossover), multiparous cows (n=12) received the same hormonal treatment as the EB8 group in Exp.1. At device removal (Day 8) cows were randomly assigned to receive 300UI of eCG IM or to not receive eCG (Control). No difference was ascertained on follicular and luteal parameters in Exp. 2 (P>0.05). We concluded that EB can be used as the ovulatory inducer (Exp. 1) in a FTAI protocol in Curraleiro Pé-Duro cows. However, eCG (Exp. 2) was not able to stimulate follicular and luteal development. This result is probably due to the adaptive capacity of Curraleiro Pé-Duro cows that maintained a satisfactory body condition score even in dry and hot environments

INFLUÊNCIA DA ALTA INGESTÃO DE MATÉRIA SECA NA RESPOSTA SUPEROVULATÓRIA EM VACAS MESTIÇAS

Objetivou-se avaliar o efeito da alta ingestão de matéria seca (AIMS) sobre a resposta superovulatória de vacas mestiças Nelore x Simental. Quatorze vacas não lactantes, com escore de condição corporal (ECC) igual a 4,0 (escala de 1 a 5), foram divididas aleatoriamente em dois grupos (Manutenção=M ou alta ingestão de matéria seca=AIMS). De sete dias antes do início da superovulação (SOV) até o final das aplicações de FSH, as vacas do grupo AIMS receberam dieta com 180% da manutenção. O grupo M recebeu dieta de manutenção. Sete dias após a IA, os embriões foram colhidos e avaliados. Quarenta dias após, inverteram-se os tratamentos e realizou-se uma nova SOV. Para comparação entre os grupos, utilizou-se o teste t pareado. Os resultados estão apresentados em média ± erro-padrão. O número de folículos recrutados detectados por ultrassonografia (19,6±1,8 e 16,4±2,0) e ovulados (15,0±1,6 e 13,0±1,6) não diferiu entre os grupos M e AIMS, respectivamente (P>0,10). Entretanto, os números de estruturas totais (14,1±2,3 e 9,5±1,5) e embriões viáveis (10,1±2,1 e 6,7±1,5) colhidos foram maiores no grupo M (

Identification of bacteria in the semen in different breeding systems and the effect of Kilol-L®

O objetivo deste trabalho foi identificar e quantificar as bactérias do sêmen fresco de ovino, avaliar o uso do higienizante Kilol-L® antes da coleta do sêmen e testar a sensibilidade das cepas bacterianas frente ao antibiograma. Foram selecionados 24 ovinos machos, clinicamente sadios, com idade média de quatro anos, da raça Santa Inês, agrupados em dois sistemas de criação: a pasto (n=12) e confinamento (n=12). Dos 120 ejaculados coletados, 99 tiveram crescimento bacteriano correspondendo a 82,5% das amostras. Os gêneros bacterianos isolados com maior frequência foram Staphylococcus spp., Bacillus spp., Streptococcus spp., Corynebacterium spp., Listeria spp.e Escherichia coli. Dos antibióticos testados, a amicacina e a gentamicina foram 100% eficazes para Bacillus spp. e E. coli. O ceftiofur foi efetivo para todas as bactérias isoladas, exceto Rodococcus equi. Streptococcus spp. foram sensíveis à ampicilina e eritromicina, Staphylococcus spp. foram sensíveis à gentamicina. O uso Kilol-L® reduziu o número de unidades formadoras de colônias (UFC/mL) do ejaculado sem prejudicar a sua qualidade. Dos antibióticos testados, ceftiofur e gentamicina foram os mais efetivos frente às cepas bacterianas isoladas. Dessa forma, a utilização desses antibióticos no meio diluidor do sêmen ovino é uma alternativa para controlar o crescimento bacteriano.The objective of this study was to identify and quantify bacteria from fresh ram semen, evaluate the use of sanitizer Kilol-L® prior to semen collection, and test the sensitivity of bacterial strains against antibiotics. We selected 24 Santa Inês rams clinically healthy, at 4 years of aged, and grouped them into two systems: on pasture (n=12) and confined (n=12). The microbiological results indicated that of the total of 120 ejaculates, 99 had bacterial growth, representing 82.5% of the samples. The most frequently isolated bacteria were Bacillus spp., Corynebacterium spp., Escherichia coli, Listeria spp., Staphylococcus spp., and Streptococcus spp. From the tested antibiotics, amicacin and gentamicin were 100% effective for Bacillus spp. and E. Coli. Ceftiofur was effective for all isolates except for Rodococcus equi. Streptococcus spp. were susceptible to ampicillin and erythromycin and Staphylococcus spp. were sensitive to gentamycin. The use of Kilol-L® reduced the number of Colony Forming Units (CFU/mL) from ejaculate without damaging semen quality. From the tested antibiotics, ceftiofur and gentamicin were more effective against the isolated bacterial strains; thus the use of these antibiotics in the ram semen extender is an alternative to control bacterial growth

Seasonal influence on seminal pattern and freezability of pantaneiro bull semen

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito da época do ano sobre a biometria testicular e qualidade do sêmen fresco e congelado de touros Pantaneiros. Seis touros foram submetidos, mensalmente, durante um ano, à mensuração testicular e à coleta e congelamento do sêmen, utilizando-se meio à base de tris-gema-glicerol. O comprimento e o volume testiculares foram maiores (P 0,05). Conclui-se que touros Pantaneiros, na região do Distrito Federal, podem ser utilizados em programas de acasalamento natural em todas as épocas do ano. Visando ao enriquecimento do Banco Brasileiro de Germoplasma Animal com maior número de doses, sugere-se o congelamento do sêmen entre os meses de junho e agosto, embora este não apresente perda de qualidade nas diferentes épocas do ano.The purpose of this paper was to investigate the effect of the season of the year on testicular morphology, fresh and frozen/thawed semen quality from Pantaneiro bulls bred in Brasilia, DF. Six bulls were submitted, once a month for one year, to evaluation of testicular measurements, semen collection using an artificial vagina and cryopreserved with medium containing Tris-based, egg yolk and glycerol. The testicular length and volume were greater (P 0.05). In conclusion, Pantaneiro bulls, bred in the Midwest region of Brazil, can be used in natural mating programs in all seasons. Aiming to improve the Brazilian Animal Germplasm Bank with a higher number of samples collected, we suggest that the freezing of the semen is done between June and August, although there will be no losses of semen quality at any time

Composição de fosfolipídios e resistência à vitrificação de blastocistos produzidos in vivo de uma raça de suíno naturalizada brasileira

Blastocistos de suínos foram submetidos ao MALDI-TOF para se identificarem os principais fosfolipídios (PL). Depois, parte destes embriões (D6) foram vitrificados (n=52), ou permaneceram frescos (grupo controle, n=42). Após o aquecimento, os blastocistos foram cultivados in vitro para se avaliar a reexpansão e a eclosão (BE) às 24 e 48 horas. Finalmente, às 48 horas, os BE foram submetidos ao RT-qPCR em busca dos genes BCL2A1, BAK, BAX e CASP3. No MALDI-TOF, a intensidade do íon foi expressa em unidades arbitrárias. O desenvolvimento embrionário foi comparado por qui-quadrado (P0,05) entre blastocistos frescos ou vitrificados às 24 (33,3%, 32,7%) e 48 horas (2,4%, 13,5%). As taxas de eclosão foram maiores (P 0.05) between fresh or vitrified blastocysts at 24 (33.3%; 32.7%) or 48 hours (2.4%; 13.5%). Hatching rates were higher (P< 0.05) for fresh compared to vitrified at 24 (66.7%; 15.4%) and 48 hours (97.6%; 36.0%). BAX was overexpressed (P< 0.05) after vitrification. In conclusion, Piau blastocysts can be cryopreserved by Cryotop. This study also demonstrated that the apoptotic pathway may be responsible for the low efficiency of porcine embryo cryopreservation

Embryo production in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Superovulatory response and embryo yield in 19 Morada Nova and 20 Somalis Brasileira ewes was analyzed. All animals were synchronized with the insertion of an intravaginal device (CIDR(r)) on Day 0, replaced by a new device on Day 7, which remained in place until Day 14 and superovulated with 133mg of porcine FSH (pFSH) in decreasing doses at 12h intervals from Day 12 until Day 15 of the treatment, and a single dose of equine chorionic gonadotropin (eCG, 200UI) on Day 14 (i.e., administered in CIDR removal). Fifty hours after CIDR(r) removal, females were inseminated by laparoscopy. All embryos were recovered by laparotomy 5 days after insemination. Sheep which responded to the superovulation protocol (P>0.05) included 74% of the Morada Nova ewes and 50% of the Somalis Brasileira ewes. Morada Nova showed better results (P<0.05) than Somalis Brasileira in number of ovulations (15.38 ± 5.24 vs. 10.56 ± 2.83), total structures (11.00 ± 7.55 vs. 3.33 ± 1.94) and embryo yields (6.79 ± 5.35 vs. 2.90 ± 2.18). Despite the high fertilization rate, degenerate embryo rate was high for both breeds, with an overall rate of 39% (57/145). In conclusion, superovulatory response and embryo yields in Morada Nova ewes were considered sufficient to justify the use of this procedure in genetic resources conservation programs. However, improvements to embryo quality and control of precocious regression of corpus luteum are necessary to produce better results in the MOET program, with minimal variations and maximum embryo yield in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Growth curve of locally adapted pantaneiro cows raised under natural conditions

The objective of this study was to use morphometric and ultrasound evaluations to estimate the growth curve of the Pantaneiro cattle breed, raised in its natural habitat, aiming at the re-insertion of this breed in production systems. One hundred and three females, aging from months to 11 years, and raised on native pastures, were evaluated. The animals belonged to the Conservation Nucleus of Embrapa Pantanal, located in the Pantanal of Mato Grosso do Sul (Brazil). Weight, thoracic perimeter (TP), body length (BL), rump height (RH), height at withers (HW), hip height (HH), depth (DP), distance between the ilia (DI) (cm) and rib-eye area (REA) were measured. To relate the measurements with the age of the animals, the univariate regression model was used, assigning the variable response to gamma distribution. The Pearson correlation between variables was also estimated. The inflection point of the growth curve was 37 months for HH; between 38 and 39 months for TP and HW; between 40 and 41 months for DI, HH and DP; and 45 months for BL. The REA results could not fit in a statistical model. The majority of the variables presented a correlation above 60% among themselves, except for REA × Age, of 15.81%; REA × HW, of 34.44%; HH × Age, of 46.19; HH × DI, of 58.07%; REA × HH, of 24.57%; and REA × TP, of 39.9%. The cows showed maturity age at 40 months, which may have occurred because they were raised in natural farming conditions. In Pantaneiro cows reared in extensive systems only on natural pastures, the use of ultrasound is not effective to estimate the curve of muscular development, perhaps because this breed was not selected for weight gain

Efeito de progesterona e benzoato de estradiol na dinâmica folicular e produção in vitro de embriões bovinos.

Exportado OPUSMade available in DSpace on 2019-08-10T04:06:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_alex_ramos.pdf: 274513 bytes, checksum: 1e8a9a8ff0bed32156aba8c6352765f5 (MD5) Previous issue date: 2O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de benzoato de estradiol (BE) e progesterona/norgestomet sobre a dinâmica folicular de novilhas aspiradas a cada sete dias, sincronizando a emergência da onda folicular para aumentar o número de folículos e qualidade dos ovócitos. Em três experimentos, novilhas meio sangue Simental x Nelore foram divididas aleatoriamente em três tratamentos, com todos os animais participando de todos os tratamentos. Nos experimentos 1 e 2, as novilhas foram sincronizadas com implante de progesterona/progestágeno por 7 d seguido da administração im de 150 µg de d-Cloprostenol e aspiração de todos os folículos maiores que 3 mm de diâmetro. No Experimento 1 (n=12), os folículos das novilhas do tratamento 2X foram aspirados duas vezes por semana, com intervalo de 3 e 4 d, e os das novilhas do tratamento 1X e 1X-BE uma vez por semana. As novilhas do tratamento 1X-BE receberam 2 mg de BE im após a aspiração. No Experimento 2 (n = 12), as novilhas do tratamento NBE não receberam BE, e as dos tratamentos 2BE e 5BE receberam 2 mg e 5 mg após a aspiração. No Experimento 3 (n = 15), as novilhas foram sincronizadas com 2 mg de BE e implante intravaginal de progesterona (DIB) por sete dias, seguido de administração de PGF2_. No dia quatro do ciclo estral subseqüente, as novilhas receberam DIB e tiveram todos os folículos maiores que 3 mm de diâmetro aspirados, seguido da administração de PGF2_ no dia sete. As novilhas do tratamento 0h-BE (n= 4), -12h-BE (n = 6) e -24h-BE (n = 5) receberam 2 mg de BE imediatamente após a aspiração, doze e vinte e quatro horas antes, respectivamente. O sêmen, meios utilizados e as condições de cultivo foram iguais para todos os tratamentos. O número de folículos maior que 3 mm e o tamanho do maior folículo foram avaliados por ultra-sonografia no momento da aspiração folicular. Todos os ovócitos aspirados foram maturados e fecundados in vitro (D0), com a taxa de clivagem e a taxa de blastocisto avaliadas no D2 e D7, respectivamente. Durante uma semana foi realizada, diariamente, a mensuração do tamanho do maior folículo, por ultra-sonografia, e coletado sangue para a quantificação da concentração de FSH. Embora o uso de 2 mg de BE associado a progestágeno/progesterona tenha alterado o padrão de crescimento folicular e a concentração de FSH, não foi capaz de sincronizar eficientemente a emergência da onda e o desvio folicular, além de não aumentar o número e a qualidade dos ovócitosrecuperados. Este estudo falhou em mostrar o efeito positivo da aspiração folicular logo após a emergência da onda folicular, quando o efeito da dominância seria menos evidente, sobre a produção in vitro de embriões bovinos. Além disso, o uso de BE associado a um dispositivo de progesterona, 12 h ou 24 h antes da aspiração folicular, prejudicou a produção de embriões in vitro, em um programa de aspiração com intervalo de sete dias entre sessões.The purpose of this study was to evaluate the effect of estradiol benzoate (EB) and progesterone/norgestomet on follicular dynamics of heifers aspirated every 7 d through synchronization of the follicular wave emergence in order to increase the number of follicles and quality of the recovered oocytes. Three experiments were designed in which crossbred Simmental x Nelore heifers were randomly divided into three groups, with all animals participating in all groups. In experiments 1 and 2, heifers were synchronized using a progestin implant for 7 d followed by a 150 µg im injection of d-Cloprostenol and aspiration of all ovarian follicles greater than 3 mm in diameter. In experiment 1 (n = 12), follicles from group 2X were aspirated twice a week with 4- and 3-day interval, and follicles from 1X and 1X-EB heifers were aspirated once a week. Heifers from group 1X-EB also received an im injection of 2 mg of EB immediately after OPU. In experiment 2 (n= 12), all heifers were aspirated once a week. Heifers from 0EB group did not receive EB, and from 2EB and 5EB received 2 mg and 5 mg of EB immediately after OPU. In experiment 3 (n = 15), heifers were synchronized with 2 mg EB and progesterone intravaginal implant (DIB) for seven d followed by an im PGF2_ injection. On day 4 of the subsequent estrous cycle, heifers received a DIB and had all ovarian follicles larger than 3 mm in diameter aspirated, followed by a PGF2_ injection on day seven. Heifers in groups 0h-EB (n = 4), -12h-EB (n = 6) and -24h-EB (n = 5) received 2 mg of EB immediately after OPU and twelve and twenty four h before, respectively. The semen, media used and culture conditions were equal for all groups. Ultrasound evaluations of number of follicles greater than 3 mm in diameter and size of the largest follicle at the time of OPU were performed. All recovered oocytes were in vitro matured and fertilized (D0). Cleavage rate on D2 and blastocyst production on D7 was evaluated. During a 7-day period, daily measurement of the size of the greatest follicle was performed by ultrasonography, and daily blood collection was done for evaluation of serum FSH concentrations. Although the use of EB in association with a norgestomet/progesterone implant seven d prior to OPU have altered follicular wave profile and FSH concentration, it was not able to efficiently synchronize the emergence of follicular wave and follicular deviation. Moreover, it was not enough to improve number and quality of the recovered oocytes. This study failed to demonstrate a positive effect of OPU earlier after wave emergence, when the effect of dominance should be less pronounced, on IVP in bovine. Moreover, the use of EB in association with a progesterone implant 12 and 24 h prior to OPU compromised the in vitro embryo production in a program of OPU with a 7 d interval between sessions