Estudio de los procesos fotosintéticos, del metabolismo de azúcares y la expresión génica durante la aclimatación a estrés salino y sequía en Lycopersicon chilense

158 p.El estrés salino y la sequía son los factores abióticos que provocan mayor perjuicio en el crecimiento y desarrollo de las plantas, lo que se traduce en un bajo rendimiento de los cultivos. El incremento en la aridez y salinidad de los suelos tanto por prácticas inadecuadas de irrigación como por factores climáticos, hacen que el estudio de los mecanismos de tolerancia que poseen las especies nativas a estos tipos de estrés adquiera especial relevancia. La planta nativa Lycopersicon chilense es una especie silvestre de tomate cuyo hábitat natural es el desierto de Atacama, sitio en el cual está expuesta a severas condiciones de sequía y salinidad. La alta plasticidad fenotípica que posee esta especie le permite adecuarse a las restricciones impuestas por el medio. Esto la convierte en un interesante modelo para el estudio de los mecanismos de tolerancia al estrés salino que operan en especies glicófitas. En este trabajo se ha determinado..

Estudio estructural y funcional de glutation S-transferasa 3 de V. vinifera (VvGST3) como transportador de flavonoides.

114 p.Glutation S-Transferasa (GST) es una superfamilia de proteínas presentes en eucariontes y procariontes, involucradas en el metabolismo primario y secundario, detoxificación de compuestos xenobióticos y defensa ante patógenos. Se dividen en diez grupos de acuerdo a su porcentaje de identidad de secuencia, de los cuales dos, denominados tau y phi, participan en el transporte de flavonoides desde el retículo endoplasmático hasta el tonoplasto de vacuolas para su depósito. Dentro de ellas, la proteína TT19 de Arabidopsis y varias de sus homólogas, como AN9 en petunia, BZ2 en maíz, VvGST4 y VvGST1 en vid, se involucran en el transporte de antocianinas. Se ha evidenciado que TT19 además participa en el transporte de PAs.En esta memoria, la proteína VvGST3 fue estructural y funcionalmente caracterizada. El modelo estructural de calidad presentó dos sitios de unión a flavonoides, afines a antocianinas y/o PAs, similares a los de TT19. Uno de estos sitios se estructura por los aminoácidos F10, A11, S12, V52, V53, E65, E66, H107, D111 e I115 y el otro por A175, D176, E185, K191, W194, D195, S198, S199, W203, K204 y F207, entre otros. Además, se evaluó el papel del aminoácido W203, mediante la mutación Trp203Leu. Este resultó ser fundamental para mantener la afinidad por PAs, tal como ha sido reportado experimentalmente en TT19. Funcionalmente, se evaluaron los niveles de transcritos del gen VvGST3 en distintos tejidos y etapas de desarrollo de la baya de vid. El gen presentó una expresión significativa en semillas, correlacionado con los periodos, lugares de síntesis y acumulación de PAs en frutos. Finalmente, se evaluó la capacidad de VvGST3, para complementar el fenotipo del mutante tt19-1 de A. thaliana, mostrando su participación en el transporte de PAs en semillas./ ABSTRACT: Glutathione S-transferase (GST) is a superfamily of proteins in prokaryotes and eukaryotes, involved in primary and secondary metabolism, detoxification of xenobiotics and defense against pathogens. They are divided into ten groups according to their percent identity, two of which, called tau and phi, are involved in the transport of flavonoids from the ER to the tonoplast of vacuoles for his deposit. Among them, the Arabidopsis TT19 protein and several of its counterparts, as AN9 in petunia, maize BZ2, VvGST4 and VvGST1 on vine, are involved in the anthocyanins transport. While TT19 also had been shown to be involved in the Pas transport. Herein, the protein VvGST3 was structurally and functionally characterized. The structural model presented two flavonoids binding sites, related to anthocyanins and/or PAs, similar to the TT19. The amino acids, present in both, were: F10, A11, S12, V52, V53, E65, E66, H107, D111 and I115, and the other: A175, D176, E185, K191, W194, D195, S198, S199, W203, K204 and F207, respectively. Moreover, the role of the amino acid W203 was evaluated through of Trp203Leu mutation. This proved to be critical for maintaining affinity for PAs, as has been reported experimentally in TT19. Functionally, the levels of transcripts of the VvGST3 gene were evaluated in different grape tissues and developmental stages. The gene expression was significantly seeds correlated with periods and sites of synthesis and accumulation of PAs in fruit. Finally, the capacity of VvGST3 was evaluated, to complement the mutant phenotype tt19-1from A. thaliana, showing their participation in the PAs transport in seeds

Evaluación de la expresión constitutiva del gen SchSDD1-like sobre la densidad estomática y su efecto en la respuesta frente a déficit hídrico en plantas heterólogas

142 p.Los estomas desempeñan un papel fundamental en la regulación del intercambio gaseoso y del control del contenido hídrico de las plantas. Los complejos estomáticos se distribuyen en toda la extensión de la epidermis de los tejidos aéreos, aunque en hojas, el patrón de distribución en muy variable entre las especies, pero altamente regulados por un mecanismo que mantienen una distancia mínima, y necesaria, para su correcto funcionamiento. Estudios realizados en Arabidopsis, han permitido identificar una serie de componentes genéticos implicados en este mecanismo, incluyendo ligandos proteicos y receptores de membrana involucrados en la activación de una cascada de señalización de MAP quinasas que actúan de manera negativa sobre los factores de transcripción maestros que controlan secuencialmente las etapas del desarrollo de estomas: SPCH, MUTE y FAMA. Sin embargo, a la fecha, la ruta de desarrollo estomático observada en Arabidopsis no ha sido estudiada en otra especie de plantas. Inicialmente se pensaba que el número de estomas en la superficie de las hojas dependía exclusivamente de factores genéticos, sin embargo, recientes resultados han mostrado que la abundancia estomática varía en respuesta a señales fisiológicas y también frente a factores ambientales, tales como la baja disponibilidad de agua; por lo que intervenir el desarrollo de estomas con el objetivo de modular la densidad estomática y de esta forma, controlar la tasa de pérdida de agua, podría ser una promisoria herramienta para la generación de plantas con un incremento en la tolerancia frente al estrés por déficit hídrico. Entre los genes descritos involucrados en el desarrollo de los complejos estomáticos, existe evidencia de que el gen SDD1 de Arabidopsis thaliana, el cual codifica para una subtilisina, está involucrado en el control del número de estomas. Sin embargo, escaso es el conocimiento respecto de su expresión bajo condiciones de estrés abiótico y tratamiento con ABA. Por otra parte, se ha descrito que en plantas de tomate silvestre (Solanum chilense) –especie tolerante a la sequía- bajo condiciones de estrés salino, reducen el número de estomas en las hojas, y sobre-expresan un gen que codifica para una subtilisina. Estos resultados abren la posibilidad de que un putativo gen homólogo a AtSDD1 en tomate podría estar involucrado en el control del número de estomas, aumentando su probabilidad de supervivencia.Por lo anterior, en esta tesis se determinó el comportamiento transcripcional de AtSDD1 y de los “genes maestros” implicados en el desarrollo estomático en Arabidopsis bajo condiciones de sequía y tratamiento con ABA. Asimismo, se aisló y caracterizó parcialmente al gen SchSDD1-like, el cual comparte una alta homología con secuencias de otros miembros de la familia de serino-proteasas de la familia de las subtilisinas al igual que AtSDD1. El análisis de expresión de este gen en tomate silvestre, indicó que sus transcritos son mayormente acumulados en hojas en desarrollo, lo que estaría relacionado con su función en la abundancia estomática. Análisis experimentales demostraron que la expresión de SchSDD1-like en hojas de tomate silvestre, es inducida en respuesta a estrés salino, sequía y ABA. Así, este gen es un candidato para controlar la frecuencia estomática frente a condiciones de estrés. Para determinar si SchSDD1-like cumple similares funciones que AtSDD1, SDD1-like de S. chilense fue sobreexpresado en plantas mutantes sdd1-3 de Arabidopsis thaliana. Esta mutante presenta un fenotipo que exhibe gran cantidad de estomas y agrupaciones de ellos en la superficie de sus hojas. Sin embargo, las plantas mutantes que sobreexpresan SchSDD1-like, revierten el fenotipo a la condición silvestre de A. thaliana (Col-0), sin afectar ninguna otra característica fenotípica aparente. Por otra parte, la sobreexpresión de SchSDD1-like en plantas de A. thaliana (col-0) produjo una significativa reducción de la densidad estomática en las hojas en comparación a las plantas silvestres. El análisis de los posibles genes afectados por la actividad de SchSDD1-like, mostró una represión de los factores de transcripción maestros que controlan los pasos secuenciales de desarrollo de estomas en Arabidopsis. Además, estas plantas fueron sometidas a deshidratación y estrés por sequía evidenciando un aumento en la tolerancia al estrés comparado con las plantas control (col-0). Para validar la función de SchSDD1-like en la tolerancia a la pérdida de agua en un cultivo de interés agro-económico, SchSDD1-like fue sobre-expresado en plantas de tomate cultivado (“Moneymaker”), las que exhibieron una reducción en la frecuencia estomática en sus hojas y una menor tasa de deshidratación comparado con la planta control. Estos resultados permiten concluir que SchSDD1-like es el ortólogo a AtSDD1 y sugieren que ambos controlan el número de estomas en las hojas, en respuesta a sequía y ABA en sus respectivas especies; que el modelo descrito para el desarrollo de estomas en Arabidopsis, también es válido para tomate; y que la modulación de la expresión génica de SchSDD1-like sería suficiente para aumentar la tolerancia al déficit hídrico en especies cultivadas de tomate./ABSTRACT: Stomata play a key role in the regulation of gas exchange and control of water content in plants. Stomatal complexes are distributed throughout the extent of the epidermis of the aerial tissues, although in leaves, the distribution pattern varies among species, but highly regulated by a mechanism that maintains a minimum distance, and necessary for appropriate operation. Studies performed in Arabidopsis have identified a set of genetic components involved in this mechanism, including protein ligands and membrane receptors involved in the activation of a signaling cascade of MAP kinases which act negatively on master transcription factors that control sequentially the stages of stomata development: SPCH, MUTE and FAMA. However, the stomatal development pathway observed in Arabidopsis has not been studied in other species of plants to date. Initially it was thought that the number of stomata on the leaf surface depended exclusively on genetic factors, however, recent results have shown that the stomatal abundance changes in response to physiological signals and environmental factors, such as low water availability. In this sense, the tervention of stomatal development in order to modulate their density; and thus control the water loss rate, could be a promising tool to generate plants with increased water deficit stress tolerance. Among the described genes involved in the development of stomatal complex, there is evidence that the SDD1 gene of Arabidopsis thaliana, which encodes a subtilisin, is involved in the control of stomatal number. However, few is the knowledge about its expression under abiotic stress conditions and treatment with ABA. Moreover, it was reported that wild tomato plants (Solanum chilense) – a drought tolerant specie- under salt stress conditions, reduce the stomatal number on the leaves, and overexpress a gene encoding a subtilisin. These results open the possibility that a putative gene homologous to AtSDD1 from tomato may be involved in the control of the stomatal number, increasing its chance of survival. Therefore, in this thesis the transcriptional behavior of AtSDD1 and “master genes” involved in stomatal development in Arabidopsis under drought and ABA treatment conditions was determined. Also, SchSDD1-like gene was isolated and partially characterized, which shares a high sequence homology with other serine proteases members of subtilisin family, similar to AtSDD1. The analysis of expression of this gene in wild tomato, indicated that its transcripts are mostly accumulated in developing leaves, which would be related to its role in stomatal abundance. Experimental analysis showed that SchSDD1-like expression in of wild tomato leaves, is induced in response to salt stress, drought and ABA. Thus, this gene is a candidate to control stomatal frequency to cope with stress conditions. To determine whether SchSDD1-like performs a similar functions that AtSDD1, SDD1-like from S. chilense was overexpressed in sdd1-3 mutant plants of Arabidopsis thaliana. This mutant has a phenotype with lots of stomata and clusters of them on the surface of leaves. However, SchSDD1-likeoverexpressing mutant plants, reversed the phenotype to wild-type condition of A. thaliana (Col-0) without affecting any other apparent phenotypic trait. Moreover, overexpression of SchSDD1-like in A. thaliana plants (col-0), produced a significant reduction in stomatal density in leaves compared to wildtype lants. The analysis of possible genes affected by SchSDD1-like activity showed a down-regulation of master switch transcription factors that control the sequential steps of stomatal development in Arabidopsis. Moreover, these plants were subjected to drought and dehydration stress showing increased stress tolerance compared to control plants (Col-0). To validate the SchSDD1-like function in tolerance to water loss in crops of agro-economic interest, SchSDD1-like was overexpressed in cultivated tomato plants ('Moneymaker'), which showed a reduction in stomatal frequency in its leaves and a lower rate of dehydration compared to control plant. These results allow to conclude that: SchSDD1-like is the orthologue gene to AtSDD1 and suggest that both genes control the stomatal number in leaves in response to drought and ABA in their species. The model described of stomatal development in Arabidopsis is also valid in tomato; and that modulation of gene expression of SchSDD1-like would be sufficient to increase tolerance to water deficit in cultivated species of tomato

Caracterización estructural y funcional de genes que codifican para proteínas asociadas a la red regulatoria del desarrollo floral y frutal en Vitis vinifera Cv. Carménère

135 p.Vitis vinifera cv. Carménère ha sido caracterizada como una variedad con alta tendencia al desarrollo de frutos partenocárpicos, lo que redunda en la producción de bayas semilladas y bayas no semilladas dentro de un mismo racimo. Las causas de este fenómeno no están bien esclarecidas, aun cuando ha sido asociado a problemas en la capacidad germinativa del polen otorgando al proceso de desarrollo floral una relevancia particular en la manifestación de este problema. Como primera aproximación a la caracterización de los eventos genético-moleculares involucrados en tal fenómeno, los perfiles de expresión de aproximadamente 4.800 genes fueron analizados tanto en bayas semilladas como no semilladas. El análisis comparativo de los perfiles de expresión entre ambos tipos de bayas, mostró que un número importante de genes diferencialmente expresados codifican para proteínas que no han sido caracterizadas previamente en vid. Entre estos genes, en el desarrollo de este trabajo se ha escogido a aquellos representados por los ESTs VVCCGC3015D09.b y VVCCGS2117F10.b tanto por su alta tasa de represión en bayas no semilladas como por el hecho que ellos codificarían proteínas involucradas en la regulación de la expresión génica. Los genes respectivos fueron aislados y caracterizados estructural y funcionalmente. Tal análisis ha permitido identificar a los genes denominados VvPSZ3 (representado por el EST VVCCGC3015D09.b), VvFSK y VvFTK, (representados por el EST VVCCGS2117F10.b), los que codifican para proteínas con características estructurales propias de un factor de transcripción del tipo zinc finger (VvPSZ3) y dos putativos receptores con función quinasa (VvFSK y VvFTK). Por tanto, el objetivo de esta tesis fue caracterizar estructural y funcionalmente estos genes y evaluar su patrón de expresión durante el desarrollo floral/frutal de V. vinifera. VvPSZ3 es homólogo al gen ZAT4 de A. thaliana, el cual codifica para una proteína esencial para el desarrollo en esta especie. Concordante con su putativa función como factor de transcripción, el producto de ambos genes se localiza en el núcleo celular. VvPSZ3 se expresa principalmente en el polen en flores cerradas y en la semilla de bayas al estadio de envero. El gen tiene una expresión mayor en el cultivar Cabernet Sauvignon que en Carménère, siendo el primero un cultivar que no tiene tendencia al millerandaje. Además, un análisis detallado de la expresión del gen en Caménère sugiere su participación en el desarrollo reproductivo de Vitis vinifera, estando esta expresión relacionada a la presencia en la región promotora del gen tanto de elementos regulatorios en cis para factores de transcripción que regulan el desarrollo floral como elementos asociados a la expresión en polen y semillas. Adicionalmente, la expresión de este gen parece ser inducida por ABA y ácido salicílico. Si VvPSZ3 y ZAT4 corresponden a genes ortólogos debe aún ser determinado. Ello permitiría especular sobre el rol de VvPSZ3 en el desarrollo de la vid, toda vez que líneas de Arabidopsis, homocigotas para una mutación por inserción en el gen ZAT4 no son viables. Por otra parte, los genes VvFSK y VvFTK poseen homología con ScORK17, gen que codifica para un receptor quinasa asociado al desarrollo de óvulos en Solanum chacoense, y al gen At3g03770 de función desconocida en A thaliana. Ambos genes se expresan en flores de vides, pero mientras VvFSK es expresado fuertemente en semillas de bayas al estadio de pre-envero, VvFTK se expresa en zarcillos. En ambos casos su actividad transcripcional es inducida por sacarosa y por ABA. El análisis in silico de la región promotora de ambos genes reveló la presencia de secuencias regulatorias asociadas tanto a la expresión en floema así como elementos de respuesta a azúcares. La función de estos genes en el desarrollo de la vid aún no está establecida. Como primera aproximación para determinar su papel, una línea de A. thaliana homocigota para una inserción de T-DNA en el gen homólogo At3g03770 no genera un fenotipo evidentemente distinto al de plantas tipo silvestre./ABSTRACT: Vitis vinífera cv. Carménère has been characterized as a variety with high tendency to develop parthenocarpic fruits yielding seeded and seedless berries in the same cluster. Even though this phenomenon has been associated to deficiencies in pollen germination capability, thus giving to flower development special relevance to the manifestation of this problem, the real origin of this condition has not been elucidated. As a first approach to the study of the molecular/genetic events involved in this problem, expression profiles of approximately 4,800 genes were analyzed in both, seeded and seedless berries. Comparative transcriptomic analysis shows that several differentially expressed genes codes for non characterized protein in grapevine. Among these genes, ESTs VVCCGC3015D09.b and VVCCGS2117F10.b were selected for further analysis due to their high repression ratio in seedless berries and the fact that they codify for proteins putatively involved in gene expression regulation. These genes were isolated and characterized at the structural level. Such analysis allowed the identification of the VvPSZ3 (represented by the EST VVCCGC3015D09.b), VvFSK and VvFTK (represented by the EST VVCCGS211 7F10.b) genes, codifying for a protein structurally similar to a “zinc finger” transcription factor (VvPSZ3) and two putative receptor like-kinase proteins (VvFTK and VvFSK). The aim of this thesis was to characterize structurally and functionally these three genes and evaluate their expression pattern through the floral/fruit development of V. vinifera. VvPSZ3 gene is homologous to ZAT4 from A. thaliana, which encodes for an essential protein for development in this specie. Agreeing with their expected role as transcription factor, the respective encoded proteins localizes to the cell nucleus. VvPSZ3 is mainly expressed in pollen at anthesis and seeds of berries at the preveraison stage. The expression of this gene is higher in Cabernet Sauvignon than in Carmenere, being the first a cultivar with low tendency to millerandaje. In addition, a more detailed analysis of gene expression in Caménère suggest a role for this gene in grapevine reproductive development and correlates with the presence in its promoter region of cis regulatory elements recognized by transcription factors involved in regulation of flower development, as well as elements associated to expression in pollen and seeds. Additionally, VvPSZ3 seems to be induced by ABA and salicylic acid. If VvPSZ3 and ZAT4 are orthologous genes remain to be demonstrated. Since Arabidopsis lines homozygous for a T-DNA insertion in the ZAT4 gene are not viable, a similar function for VvPSZ3 gene in grapevine development could be expected. On the other hand, VvFSK and VvFTK are homologous to ScORK17, a gene coding for a receptor kinase involved in the regulation of ovule development in Solanum chacoense, and to At3g03770 a gene of unknown function in A. thaliana. Although both grapevine genes are expressed in flowers, VvFSK is strongly expressed in seeds of berries at pre-veraison stage, while VvFTK is actively transcribed in tendrils; nevertheless both genes are induced by sucrose and ABA. The in silico analysis of their promoter regions revealed the presence of cis regulatory sequences associated to response to sucrose induction as well as to phloemspecific expression. the function of these genes in grapevine development needs to be established. As a first approach to asses such role, the phenotype of the Arabidopsis thaliana line homozygous for T-DNA insertion in the homologous gene At3g03770 was analyzed. However, no evident differences were found between both lines when compared with Arabidopsis wild typ

Caracterizacion funcional de genes involucrados en el transporte de Zinc en vides y su relacion con el desarrollo de frutos en Vitis vinifera cv. Carmenere

150 p.El zinc es uno de los microelementos fundamentales para el desarrollo normal de las especies vegetales. En vides la deficiencia de zinc se manifiesta fundamentalmente a nivel de desarrollo reproductivo afectando la fructificación y el desarrollo normal de frutos, traduciéndose en la producción de racimos con bayas semilladas de tamaño normal y bayas sin semilla de pequeño tamaño. Debido a que el zinc no puede difundir pasivamente a través de las membranas celulares, éste debe ser transportado dentro de compartimentos intracelulares para todos los procesos biológicos donde es requerido, otorgando especial relevancia a proteínas transportadoras involucradas en la captación y distribución de este metal. Importantes miembros de las familias génicas que codifican para los transportadores tipo ZIP (“Zinc‐regulated transporters, Iron‐regulated transproter‐like Protein”), tipo CDF (“Cation Diffuser Facilitator”) y tipo HMA (“Heavy Metal ATPase”), han sido identificados y caracterizados en varias especies de plantas. Sin embargo, a la fecha no han sido caracterizados los genes que codifican para tales transportadores en vides. El análisis de una librería de expresión construida a partir de bayas de Vitis vinifera Cv. Carménère , ha permitido identificar, aislar y caracterizar los ADNc que codifican para transportadores putativos, denominados VvZIP3, VvMTP1 y VvHMA5.4. Las secuencias proteicas deducidas indican una fuerte homología con miembros de cada una de las respectivas familias de transportadores de Arabidopsis thaliana y otras especies vegetales. Por otra parte, el gen que codifica a VvZIP3 complementa el crecimiento defectuoso de la mutante de levadura ZHY3 (deficiente en la asimilación de zinc), en tanto que la proteína de fusión VvZIP3:GFP se localiza en la membrana plasmática, sugiriendo que esta proteína actuaría como un transportador de captación de zinc. El análisis de los perfiles transcripcionales de los genes VvZIP3, VvMTP1 y VvHMA5.4 mostró que todos ellos están principalmente expresados en tejido reproductivo. Específicamente, el gen VvZIP3 es principalmente expresado en flores, en tanto que VvMTP1 en bayas inmaduras y VvHMA5.4 en tallos e inflorescencias. Además, VvZIP3 y VVMTP1 se encuentran reprimidos en frutos partenocárpicos no semillados, en tanto que VvHMA5.4 no registra diferencia en expresión entre frutos normales y frutos partenocárpicos. El perfil de expresión de VvZIP3 se correlaciona con los patrones de acumulación de zinc, detectándose un mayor contenido de este elemento en bayas normales al estadio de “pre‐envero” y un menor contenido en bayas partenocarpicas. Los resultados sugieren que los transportadores VvZIP3, VvMTP1 y VvHMA5.4 estarían asociados a la captación y distribución de zinc y otros metales durante el desarrollo reproductivo lo que puede significar que la disponibilidad de zinc tendría relevancia para el desarrollo normal de las bayas en Vitis vinifera./ ABSTRACT: Zinc deficiency is one of the most widespread mineral nutritional problems that affect normal development in plants. Because Zn cannot passively diffuse across cell membranes, it must be transported into intracellular compartments for all biological processes where Zn is required. Several members of the Zinc‐regulated transporters, Ironregulated transporter‐like Protein (ZIP), Cation Diffuser Facilitator (CDF) and Heavy Metal ATPase’s (HMA) gene families have been characterized in plants, and have shown to be involved in metal uptake and transport. However, these transporters have not been characterized in grapevine. Unravel their function may explain important symptoms of zinc deficiency in grapevines as abscission and parthenocarpy and the production of clusters with seeded and unseeded berries. Have identified and characterized genes for putative metal transporters from an expression library of berries of Vitis vinifera Cv. Carménère, named VvZIP3, VvMTP1 and VvHMA5.4. Their predicted protein sequences show strong similarity with several members of each family of transporters from Arabidopsis thaliana and other plant species. Moreover, VvZIP3 gene complements the defective growth of a yeast Zn‐uptake mutant ZHY3, deficient in zinc‐uptake. The encoded protein is localized in the plasma membrane, indicating that VvZIP3 corresponds to an uptake Zn transporter. VvZIP3, VvMTP1 and VvHMA5.4 are mainly expressed in reproductive tissue – VvZIP3 inVvZIP3 in developing flowers, VvMTP1 in immature berries and VvHMA5.4 in stems and little clusters. These expression profiles correlate with the zinc accumulation patterns in these organs. On the other hand, the low expression of VvZIP3 and VvMTP1 in parthenocarpic berries shows a straight relationship with the low level of Zn accumulation in this tissue when compared to normal seeded berries. The above results suggest that VvZIP3, VvMTP1 and VvHMA5.4 would be associated in zinc and metal uptake and distribution during the reproductive development which may mean that the availability of zinc would be relevant for normal berry development of Vitis vinifera

Mapa de asociaciones de facies Neógenas del sector norte de la Cuenca de Teruel

El relleno sedimentario mioceno superior-cuaternario del sector norte de la Cuenca de Teruel se caracteriza por asociaciones de facies referibles a abanicos aluviales, medios lacustres, palustres y, menos frecuentes, eólicos y deltaicos. La cartografía de dichas asociaciones de facies y de las estructuras tectónicas muestra una configuración propia de cuencas extensionales asimétricas. Los abanicos aluviales, principalmente procedentes de los márgenes oriental y occidental de la cuenca, presentaban diferentes dimensiones, siendo de mayor extensión los del margen occidental, tectónicamente inactivo durante el depósito de la serie estudiada. Los abanicos aluviales conectaban con lagos poco profundos situados en áreas centrales pero más próximas al margen activo. El espacio de acomodación generado por fallas sinsedimentarias intracuencales favoreció la preservación de asociaciones de facies eólicas y deltaicas, poco frecuentes en este tipo de cuencas continentales. The Upper Miocene-Quaternary sedimentary fill of the northern sector of the Teruel Basin is characterized by facies associations corresponding to alluvial fans, lakes and palustrine areas, as well as less common aeolian and deltaic environments. The map of facies associations corresponding to different sedimentary environments, and tectonic structures, reveals asymmetrical fill architecture. Alluvial fans were mainly sourced from the eastern (tectonically active) and western (passive) basin margins, connected downstream with shallow carbonate or evaporite lakes located in central basinal areas but closer to the active margin. The accommodation space created by synsedimentary intrabasinal faults enabled preservation of aeolian and deltaic associations, not very common in this type of basins

Neolithic in ‘La Pileta’ Cave (Benaoján, Málaga)

Cueva de la Pileta es uno de los enclaves clásicos en la historiografía de la Prehistoria del sur de Iberia, sobre todo por las representaciones de arte rupestre. No obstante, el yacimiento también dispone de una amplia secuencia estratigráfica del Cuaternario reciente (p. ej., 7 m de potencia en la sala de los Murciélagos) que apenas ha recibido atención bibliográfica. Este trabajo se centra en la historiografía de los trabajos en el yacimiento y en el estudio de los materiales neolíticos. La colección cerámica y sus paralelos técnicos y estilísticos en el contexto del Mediterráneo y sur ibérico permiten integrar La Pileta dentro del primer Neolítico en Andalucía con una edad encuadrada en la segunda mitad del 8º milenio cal BP.Cave of La Pileta is a key site in southern Iberia prehistoric historiography. It’s mainly known for its rock art paintings, but the archaeological site also has a wide stratigraphic sequence of Recent Quaternary period (e.g. 7 meters in ‘Murciélagos’ Room) that has scarcely been studied. This paper focuses on historiographical analysis of worked areas and Neolithic materials. Ceramics and its stylistic and technical parallels in the Mediterranean and southern Iberian context allow us to classify Pileta in the first Neolithic period of Andalusia, second half of 8th millenium cal BP