Characterization of a new albendazole resistant Fasciola hepatica isolate

Characterization of a new albendazole resistant Fasciola hepatica isolateMaría Martínez-Valladares11,2, Elora Valderas-García1,2, Verónica Castilla Gómez de Agüero1,2, Marta González-Warleta3, Laura Ceballos4, Juan P. Lirón4, Rodrigo Sanabria5, Cesar Pruzzo5, Luis I. Alvarez4.1Instituto de Ganadería de Montaña (CSIC-Universidad de León), Departamento de Sanidad Animal (Department of Animal Health), León, Spain.2Departamento de Sanidad Animal (Department of Animal Health), Facultad de Veterinaria, University of Leon, Leon, Spain.3Laboratorio de Parasitología, Centro de Investigaciones Agrarias de Mabegondo, AGACAL, Abegondo, A Coruña, Spain.4Laboratorio de Farmacología, Centro de Investigación Veterinaria de Tandil (CIVETAN), UNCPBA-CICPBA-CONICET, Facultad de Ciencias Veterinarias, Tandil, Argentina.5Laboratorio de Parasitología, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de la Plata (UNLP), La Plata, Argentina.The infection by Fasciola hepatica affects mainly ruminants although is present in a wide variety of species including humans. Fasciolosis control is mainly based on triclabendazole administration, the main drug indicated in humans. Albendazole (ABZ) is used against nematode and liver fluke infections in ruminants. The misuse of these drugs has led to the appearance of anthelmintic resistance. In this study, we characterized an ABZ resistant isolate and evaluate the use of a combined treatment to improve treatment efficacy. The isolate was collected from a slaughterhouse in Argentina, maintained under laboratory conditions and identified by means of the egg hatch test (EHT). Using these eggs metacercariae were produced to infect sheep artificially. When flukes reached the adult stage, animals were divided into two groups, one treated with ABZ (7.5 mg/kg bw) and another with a placebo. All sheep were slaughtered at day 14 post-treatment to collect and count the number of flukes. The resistance of ABZ was confirmed with a reduction of 44% of adult flukes in the treated group. At the necropsy, adult flukes from the livers and eggs from the gall bladders, both from sheep treated with the placebo, were collected. Adult flukes were maintained alive in RPMI medium to let them to excrete eggs for 24 hours. EHT was conducted and different results were observed with the two egg sets. The EHT performed with eggs collected directly from gall bladder confirmed the resistant status of the isolate. However, the EHT with eggs recovered from flukes resulted in a susceptible phenotype, showing that only previously laying eggs (in bile) can express the resistant phenotype. After producing more metacercariae from this resistant isolate, we are testing in vivo the efficacy of a combined treatment to improve its efficacy. The results will be presented during the WAAVP meeting.Fil: Martínez Valladares, María. Universidad de Leon. Facultad de Veterinaria; ArgentinaFil: Valderas García, Elora. Universidad de Leon. Facultad de Veterinaria; ArgentinaFil: Castilla Gómez de Agüero, Verónica. Universidad de Leon. Facultad de Veterinaria; ArgentinaFil: González Warleta, Marta. Universidad de Leon. Facultad de Veterinaria; ArgentinaFil: Ceballos, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Liron, Juan Pedro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Sanabria, Rodrigo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Alvarez, Luis Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina28th International Conference of tha World Association for the Advancement of Veterinary ParasitologyDublinIrlandaWorld Association for the Advancement of Veterinary ParasitologyUniversity College Dubli

A Vaccine Based on Kunitz-Type Molecule Confers Protection Against Fasciola hepatica Challenge by Inducing IFN-γ and Antibody Immune Responses Through IL-17A Production

Fasciola hepatica is helminth parasite found around the world that causes fasciolosis, a chronic disease affecting mainly cattle, sheep, and occasionally humans. Triclabendazole is the drug of choice to treat this parasite. However, the continuous use of this drug has led to the development of parasite resistance and, consequently, the limitation of its effectiveness. Hence, vaccination appears as an attractive option to develop. In this work, we evaluated the potential of F. hepatica Kunitz-type molecule (FhKTM) as an antigen formulated with a liquid crystal nanostructure formed by self-assembly of 6-O-ascorbyl palmitate ester (Coa-ASC16) and the synthetic oligodeoxynucleotide containing unmethylated cytosine-guanine motifs (CpG-ODN) during an experimental model of fasciolosis in mice, and we further dissected the immune response associated with host protection. Our results showed that immunization of mice with FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16 induces protection against F. hepatica challenge by preventing liver damage and improving survival after F. hepatica infection. FhKTM/CpG-ODN/Coa-ASC16-immunized mice elicited potent IFN-γ and IL-17A with high levels of antigen-specific IgG1, IgG2a, and IgA serum antibodies. Strikingly, IL-17A blockade during infection decreased IgG2a and IgA antibody levels as well as IFN-γ production, leading to an increase in mortality of vaccinated mice. The present study highlights the potential of a new vaccine formulation to improve control and help the eradication of F. hepatica infection, with potential applications for natural hosts such as cattle and sheep.Fil: Silvane, Leonardo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Celias, Daiana Pamela. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Romagnoli, Pablo Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Grupo Vinculado Centro de Investigación en Medicina Traslacional Severo R. Amuchástegui - Cimetsa | Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Grupo Vinculado Centro de Investigación en Medicina Traslacional Severo R. Amuchástegui - Cimetsa | Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Grupo Vinculado Centro de Investigación en Medicina Traslacional Severo R. Amuchástegui - Cimetsa.; Argentina. Instituto Universitario de Ciencias Biomédicas de Córdoba; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Sánchez Vallecillo, María Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Chiapello, Laura Silvina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Palma, Santiago Daniel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Allemandi, Daniel Alberto. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Sanabria, Rodrigo Eduardo Fabrizio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Motran, Claudia Cristina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Cervi, Laura Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

A murine model to assess anthelmintic resistance in Fasciola hepatica: Preliminary study

Fasciola hepatica (Fh) infection produce important loss in livestock industry, and is also an increasing concern for human public health1 . Additionally, the spread of anthelmintic resistance (AR) lead to treatments failure2 , with a direct impact on humans’ endemic regions3 . Thus, advances in AR assessment are welcome, particularly those who allow a human´s extrapolation.Fil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Ceballos, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Alvarez, Luis Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Sanabria, Rodrigo Eduardo Fabrizio. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentina4th Scientific Meeting of the Research Network Natural Products against Neglected DiseasesBuenos AiresArgentinaUniversidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del FármacoUniversidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímic

Prolonged survival of venereal Tritrichomonas foetus parasite in the gastrointestinal tract, bovine fecal extract, and water

Bovine tritrichomonosis is a venereal disease that causes economic losses around the world. Over the last 100 years, the life cycle of the protozoan Tritrichomonas foetus in bovines has only considered venereal transmission, almost exclusively through natural mating from an infected animal to a healthy animal. Here, we provide the first direct evidence that T. foetus can survive the passage through the gastrointestinal tract in bovines. We demonstrated that the parasite can be discharged by feces in orally infected animals and contaminate the cow’s reproductive tract. We showed that the parasite is capable of surviving at pH conditions usually found along the bovine gastrointestinal tract, and our findings suggest that the parasites could survive in bovine feces and water for several days, probably through the formation of resistant pseudocysts or cyst-like structures. Taken together, our results demonstrate that T. foetus is more resistant to adverse external conditions than previously considered, which could be relevant for the life cycle of this parasite in bovines.Fil: Martínez, Cristian I.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Iriarte, Lucrecia Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Salas, Nehuen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Alonso, Andrés Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata; ArgentinaFil: dos Santos Melo, Tuanne. No especifíca;Fil: Pereira Neves, Antonio. No especifíca;Fil: de Miguel, Natalia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Cóceres, Verónica Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; Argentin

Diagnosis of albendazole resistance in fasciola hepatica

The increasing widespread development of drug resistance in the liver fluke Fasciola hepatica has motivated the need for alternative diagnostic tools. The work reported here describes the validation of an egg hatch test (EHT) as an in vitro technique to detect albendazole (ABZ) resistance in F. hepatica. The validation includes the intra-assay, inter-assay and intra-herd variations, and the comparison of results obtained after performing the EHT and a controlled efficacy test. Additionally, the development of the protocol included the adjustment of different critical factors to improve the simplicity of the assay. The greatest uniformity between results within the assay and over time until 8 weeks after gallbladder eggs collection (the deadline proposed for egg analysis), was obtained after incubation with an ABZ concentration of 0.5 µM. The length of exposure to ABZ was shown to be critical, as prolonged (15 days) ABZ incubation led to a reversal of drug resistance. There was a close agreement between the outcome of the EHT and that obtained for the in vivo assays. Moreover, the same level of resistance was observed when eggs and faeces were collected from animals of four (4) different farms and analyzed with both the EHT and the faecal egg count reduction test. A 0.5 µM drug level is confirmed as the discriminating concentration to predict ABZ resistance by the EHT in F. hepatica.Fil: Alvarez, Luis Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Ceballos, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Cantón, Candela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Sanabria, Rodrigo Eduardo Fabrizio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Moreno Torrejon, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Sanchis, Jaime. Universidad de la República. Centro Universitario del Litoral Norte. Centro Universitario de Salto; UruguayFil: Ortiz, Pedro. Universidad Nacional de Cajamarca; PerúFil: Fairweather, Ian. The Queens University of Belfast; IrlandaFil: Lanusse, Carlos Edmundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Martinez Valladares, María. Universidad de León; España27th Conference of the World Association for the Advancement of Veterinary ParasitologyMadisonEstados UnidosWorld Association for the Advancement of Veterinary Parasitolog

Antibody detection against Kunitz-type protein in Fasciola hepatica experimentally infected sheep using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)

Fasciolosis is a parasitic disease considered as emerging and neglected by the WHO. Sheep are highly susceptible to this disease, and affected flocks experience decreased productivity due to increased mortality, and the reduced quality of their products, such as wool and meat. To effectively control this disease, reliable and early diagnosis is essential for making decisions regarding antiparasitic application and/or the removal of affected animals. Currently, the diagnosis of F. hepatica in sheep relies on the detection of parasite eggs in faeces, a method that becomes reliable from week 10 post-infection. Consequently, there is a need for earlier diagnostic tools based on immune response. However, obtaining antigens for antibody detection has proven to be difficult and expensive. The aim of this study was to evaluate members of the Kunitz protein family of F. hepatica expressed in the form of a fusion protein in the serological diagnosis of F. hepatica in sheep. The performance of three recombinant F. hepatica Kunitz-type inhibitors (FhKT1.1, FhKT1.3, and FhKT4) was compared with a synthetic Kunitz-type peptide (sFhKT) in sera from sheep experimentally infected with F. hepatica, using an ELISA. Of these, FhKT1.1 showed the most promising diagnostic indicators, exhibiting high precision and low cross-reactivity, and thus potential for standardized production. The results of our study demonstrated that the application of FhKT1.1 is a valuable tool for early-stage diagnosis of F. hepatica in sheep. Such an early diagnosis can aid in implementing timely interventions and effectively managing the disease in sheep populations.Fil: Ahumada, Maria Lujan. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Manfredi; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Godino, Agustina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; ArgentinaFil: Guasconi, Lorena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Deheza, Carla. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Amaranto, Marilla. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; ArgentinaFil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Epizootiología y Salud Pública; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clínica. Centro de Diagnóstico e Investigaciones Veterinarias; ArgentinaFil: Vitulli Moya, Gabriel Rodrigo. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clínica. Centro de Diagnóstico e Investigaciones Veterinarias; ArgentinaFil: Chiapello, Laura Silvina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Carrizo, María Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; ArgentinaFil: Barra, Jose Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica; ArgentinaFil: Cervi, Laura Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentin

The egg hatch test: a useful tool for albendazole resistance diagnosis in Fasciola hepatica

In the current study, the egg hatch test (EHT) has been evaluated as an in vitro technique to detect albendazole(ABZ) resistance in Fasciola hepatica. The intra- and inter-assay variations of the EHT were measured by means ofthe coefficient of variation in different fluke isolates and over time; then, the results of the EHT were comparedwith the ?gold standard? controlled efficacy test, which assesses the in vivo anthelmintic efficacy. The EHT wasused later to evaluate the intra-herd variability regarding the level of ABZ resistance in calves infected by thesame fluke isolate. Finally, several factors of the initial protocol were modified to improve the simplicity of theassay, including the incubation time of eggs with the drug and the use of eggs collected from faeces. The greatestuniformity between results within the assay and over time until 8 weeks after gallbladder collection (thedeadline proposed for egg analysis) was obtained with an ABZ concentration of 0.5 μM. The length of exposureto ABZ was shown to be critical, as prolonged incubation (15 days) led to a change of ovicidal activity. The ABZconcentration of 0.5 μM is suggested as a possible discriminating dose to predict ABZ resistance, due to the closeagreement between the results of the EHT at an ABZ concentration of 0.5 μM and those of the in vivo assays.Fil: Ceballos, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Cantón, Candela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Pruzzo, Cesar Ivan. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Sanabria, Rodrigo Eduardo Fabrizio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Moreno Torrejon, Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Sanchis, Jaime. Universidad de la República; UruguayFil: Suárez, Gonzalo. Universidad de la República; UruguayFil: Ortiz, Pedro. Universidad Nacional de Cajamarca. Facultad de Ciencias Veterinarias; PerúFil: Fairweather, Ian. The Queens University of Belfast; IrlandaFil: Lanusse, Carlos Edmundo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Alvarez, Luis Ignacio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Valladares, María Martinez. Universidad de León; España. Consejo Superior de Investigaciones Científicas; Españ