Association between levels of synovial anti-citrullinated peptide antibodies and neutrophil response in patients with rheumatoid arthritis

Rheumatoid arthritis (RA) is characterized by the presence of anti-citrullinated peptide antibodies (ACPAs) and neutrophils infiltrating the synovial fluid (SF) of the affected joints. The aim of this work was to analyze whether the presence of ACPAs in SF is associated with neutrophil infiltration and with their phenotype in the inflamed joints of RA patients. We found that in the presence of ACPAs, the number of synovial neutrophils correlated with severe disease activity. The SF were divided according to synovial ACPA levels in negative- (<25 U/mL), low- (25–200 U/mL) and high level (˃200 U/mL; ACPA high ). We observed that IL-6, IL-17, and IL-8 were significantly elevated in ACPA high SF and that IL-8 levels correlated positively with neutrophil counts and with worse clinical manifestations. Additionally, in vitro incubation of neutrophils with ACPA high SF resulted in an increased ROS production and extracellular DNA release compared to neutrophils incubated with ACPA-negative SF. These exacerbated effector functions were associated with a fraction of ICAM-1-positive neutrophils, which were induced by ACPA high SF. Likewise, in in vivo, we could also detect this subset among neutrophils present in ACPA high SF. In conclusion, the data presented here shed light on the role of SF-ACPAs as inductors of a proinflammatory profile in neutrophils.Fil: Gorlino, Carolina Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico Matemáticas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis; ArgentinaFil: Dave, Mabel Noemí. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico Matemáticas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis; ArgentinaFil: Blas, Rodrigo. Centro Médico Medici; ArgentinaFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Lavanchy, Alicia. Centro Médico Cenyr; ArgentinaFil: Tamashiro, Héctor. Clínica Bolívar; ArgentinaFil: Pardo Hildalgo, Rodolfo. Centro de Rehabilitación Médica Cer; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Di Genaro, Maria Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - San Luis. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis. Universidad Nacional de San Luis. Facultad de Ciencias Físico Matemáticas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Investigaciones Biológicas de San Luis; Argentin

Relación entre ácidos grasos dietarios y la concentración salival de inmunoglobulina a secretoria

OBJETIVO: analizar la relación entre los ácidos grasos (AG) dietarios y la concentración salival de inmunoglobulina A secretoria (IgAs) en adultos sanos de diferentes edades.MÉTODOS: participaron 49 personas que fueron divididas en cuatro grupos según sexo y edad: mujeres de 20-39 años (G1; n=12) y de 40-60 años (G2; n=11); hombres de 20-39 años (G3; n=14) y de 40-60 años (G4; n=12). Se aplicó una encuesta de frecuencia de consumo alimentario cuali-cuantitativo validada, cuya información fue procesada con el programa Interfood v.1.3 a fin de determinar el valor energético total (VET), grasa total (GT), colesterol (C), AG saturados (AGS), monoinsaturados (AGMI) y poliinsaturados (AGPI), ácido linoleico (AL), alfa linolénico (ALA) y araquidónico (AA). Se recolectaron muestras de saliva mixta no estimulada para determinar los valores de IgAs mediante la técnica de inmunodifusión radial simple. Se aplicaron las pruebas de Kruskal Wallis para comparar las variables según los grupos y de Pearson para correlacionar los valores de IgAs con las variables mencionadas, con un nivel de significación del 5%. Se utilizó el programa Infostat.RESULTADOS: la IgAs presentó valores inferiores en G1 con respecto a los otros grupos, pero la diferencia no fue significativa (p=0,23). El consumo de C fue mayor en G3 que en G1 y G2 y la ingesta de ALA fue superior en G4 que en G2 (p<0,05). Se observó una correlación negativa significativa entre VET e ingesta de AGS y la concentración salival de IgAs en G3 (p<0,05). Al analizar independientemente los valores de IgAs inferiores a los normales, se encontraron correlaciones negativas con VET (-0,59; p=0,01), AGS (-0,66; p=0,01), GT (-0,49; p=0,04) y C (-0,51; p=0,03) en general, y con C (-0,78; p=0,04) y AGS (-0,76; p=0,04) en G1.CONCLUSIÓN: la ingesta de AGS se relaciona con una menor concentración salival de IgAs en hombres y mujeres sanos de 20-39 años. El consumo de grasas tendría influencia sobre la concentración salival de IgAs, pero es importante continuar investigando en este sentido.Fil: Costantino, Evangelina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Anatomía B; Argentina.Fil: Costantino, Evangelina. Universidad Nacional de Córdoba. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.Fil: Escandriolo Nackauzi, Jorge Dario. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Anatomía B; Argentina.Fil: Escandriolo Nackauzi, Jorge Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Bertolotto, Patricia Isolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía y Física; Argentina.Fil: Heinze, VM. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina.Fil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Actis, Adriana Beatríz. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Secretaría de Ciencia y Técnica; Argentina.Fil: Actis, Adriana Beatriz. Universidad Nacional de Córdoba. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

Concentración salival de inmunoglobulina A secretoria según la ingesta de fitoquímicos dietarios

OBJETIVO: analizar la influencia de los fitoquímicos (Fq) dietarios sobre la concentración salival de inmunoglobulina A secretoria (IgAs) en personas sanas de diferentes edades.MÉTODOS: se incluyeron 49 personas que fueron agrupadas en: mujeres de 20-39 años (G1; n=12) y de 40-60 años (G2; n=11); hombres de 20-39 años (G3; n=14) y de 40-60 años (G4; n=12). Mediante una encuesta de frecuencia de consumo alimentario cuali-cuantitativo validada se determinó la ingesta habitual de alimentos fuente de Fq -vegetales, frutas frescas y secas, derivados del tomate, cereales y legumbres- y el consumo de los siguientes Fq: antocianos, daidzeína, flavanoles, flavanonas, flavonas, flavonoles, genisteína, isoflavonas, licopeno y polifenoles. La información fue procesada por el programa informático Interfood v.1.3. Se obtuvieron muestras de saliva mixta no estimulada y se determinaron los valores de IgAs por inmunodifusión radial simple. Se compararon las variables según los grupos (prueba de Kruskal Wallis) y se correlacionaron los valores de IgAs con las variables mencionadas (coeficiente de correlación de Spearman) (p<0,05).RESULTADOS: la ingesta total de alimentos fuente de Fq fue menor en G3 que en G1 (p=0,043) y el consumo de frutas frescas fue menor en G3 que en los demás grupos (p=0,002). La ingesta de antocianos fue menor en G3 (p=0,007) y la de flavanonas mayor en G1 (p=0,037), ambos con respecto a los otros grupos. El consumo de flavonas fue superior en G1 que en G3 (p=0,025), y el de polifenoles fue mayor en G1 y G3 con relación a G2 y G4 (p=0,0002). Se halló una correlación negativa entre la ingesta del total de alimentos fuente de Fq y la concentración salival de IgAs en G3 (-0,61; p=0,03), y correlaciones positivas entre el consumo de flavanonas (0,59; p=0,05) y polifenoles (0,62; p=0,04) y los valores de IgAs en G1.CONCLUSIÓN: según estos resultados, el consumo de flavanonas y polifenoles se relaciona con una mayor concentración salival de IgAs en mujeres sanas de 20 a 39 años, en tanto que en hombres de esa edad la ingesta de alimentos fuente de Fq se asocia a una disminución de IgAs salival.Fil: Costantino, Evangelina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Anatomía B; Argentina.Fil: Costantino, Evangelina. Universidad Nacional de Córdoba. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.Fil: Escandriolo Nackauzi, Jorge Dario. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Cátedra de Anatomía B; Argentina.Fil: Escandriolo Nackauzi, Jorge Dario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Bertolotto, Patricia Isolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Matemática, Astronomía y Física; Argentina.Fil: Heinze, Verónica. Universidad Nacional de Córdoba; Argentina.Fil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Actis, Adriana Beatríz. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Odontología. Secretaría de Ciencia y Técnica; Argentina.Fil: Actis, Adriana Beatriz. Universidad Nacional de Córdoba. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentina.Otras Ciencias de la Salu

Class-B CpG-ODN formulated with a nanostructure induces type I interferons-dependent and CD4+T cell-independent CD8+T-Cell response against unconjugated protein antigen

There is a need for new vaccine adjuvant strategies that offer both vigorous antibody and T-cell mediated protection to combat difficult intracellular pathogens and cancer. To this aim, we formulated class-B synthetic oligodeoxynucleotide containing unmethylated cytosine-guanine motifs (CpG-ODN) with a nanostructure (Coa-ASC16 or coagel) formed by self-assembly of 6-0-ascorbyl palmitate ester. Our previous results demonstrated that mice immunized with ovalbumin (OVA) and CpG-ODN formulated with Coa-ASC16 (OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16) elicited strong antibodies (IgG1 and IgG2a) and Th1/Th17 cellular responses without toxic systemic effects. These responses were superior to those induced by a solution of OVA with CpG-ODN or OVA/CpG-ODN formulated with aluminum salts. In this study, we investigated the capacity of this adjuvant strategy (CpG-ODN/Coa-ASC16) to elicit CD8+ T-cell response and some of the underlying cellular and molecular mechanisms involved in adaptive response. We also analyzed whether this adjuvant strategy allows a switch from an immunization scheme of three-doses to one of single-dose. Our results demonstrated that vaccination with OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16 elicited an antigen-specific long-lasting humoral response and importantly-high quality CD8+ T-cell immunity with a single-dose immunization. Moreover, Coa-ASC16 promoted co-uptake of OVA and CpG-ODN by dendritic cells. The CD8+ T-cell response induced by OVA/CpG-ODN/Coa-ASC16 was dependent of type I interferons and independent of CD4+ T-cells, and showed polyfunctionality and efficiency against an intracellular pathogen. Furthermore, the cellular and humoral responses elicited by the nanostructured formulation were IL-6-independent. This system provides a simple and inexpensive adjuvant strategy with great potential for future rationally designed vaccines.Fil: Chiodetti, Ana Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Sánchez Vallecillo, María Fernanda. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Dolina, Joseph S.. La Jolla Institute for Allergy and Immunology; Estados UnidosFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Marin, Constanza. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Schoenberger, Stephen P.. La Jolla Institute for Allergy and Immunology; Estados UnidosFil: Allemandi, Daniel Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Palma, Santiago Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Moron, Victor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica; Argentin

Double-layered rotavirus-like particles are efficient carriers to elicit strong CTL responses to delivered heterologous antigens

The first 92 amino acids of VP2 of rotavirus are dispensable for VLP assembly and can be replaced by heterologous reporter proteins without affecting either self-assembly of chimeric VP2 or the interaction with VP6 to render chimeric VP2/6 VLPs. In this study, we constructed recombinant baculoviruses expressing GFP or OVA fused to the amino terminus of a truncated VP2 sequence and produced chimeric VLPs by co-infection with a baculovirus expressing VP6. The results showed that these chimeric VLPs were efficiently uptaken by murine dendritic cells and that the heterologous sequences contained in the core of these VLPs seemed to be able to reach the MHC-I pathway as they elicited strong and specific CTL responses. Therefore, the data presented here suggest that chimeric VLPs could be used as excellent carriers to elicit CTL responses to antigens transported inside the VLPs.Instituto de BiotecnologíaFil: Molinari, Maria Paula. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Peralta, Andrea Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Pistoresi Palencia, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Moron, Victor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Taboga, Oscar Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Oxidative stress, cell cycle arrest and differentiation contribute toward the antiproliferative action of BSO and calcitriol on Caco-2 cells

The prognosis and incidence of colon cancer are linked to vitamin D3 serum levels. To evaluate the effects of D,L-buthionine-S,R-sulfoximine (BSO), 1,25(OH)2D3 and their combination on intestinal Caco-2 cell growth, to elucidate the possible cellular mechanisms involved in their antiproliferative action, and to determine whether BSO acts as a sensitizer to 1,25(OH)2D3 treatment, enabling minimization of the toxic effects caused by high doses of the steroid. Human colon cancer Caco-2 cells were treated with 1,25(OH)2D3, BSO, both, or vehicle. Cell proliferation was evaluated by crystal violet staining. Cell cycle and mitochondrial membrane potential were measured by flow cytometry. Total glutathione, catalase, superoxide dismutase, superoxide anion levels, and alkaline phosphatase activities were analyzed by spectrophotometry. DNA fragmentation was evaluated using the terminal dUTP nick end labeling assay. BSO and 1,25(OH)2D3 inhibited Caco-2 cell growth, an effect that was higher with the combined treatment. The antiproliferative effect produced by the combination could be protected by ascorbic acid. BSO plus 1,25(OH)2D3 induced cell cycle arrest and suppressed cell division. Total glutathione decreased and superoxide anion increased with BSO and BSO plus 1,25(OH)2D3. Catalase activity increased with the combined treatment. Mitochondrial membrane potential and alkaline phosphatase activity were altered by 1,25(OH)2D3 alone or plus BSO. The percentage of terminal dUTP nick end labeling-positive cells was increased. BSO increases the antiproliferative effect of 1,25(OH)2D3 on Caco-2 cells through induction of oxidative stress, which occurs simultaneously with DNA breakage. The antioxidant system can partially compensate the damage induced by BSO plus 1,25(OH)2D3. Cell differentiation induction is also involved in the response to the combined treatment.Fil: Liaudat, Ana Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Tolosa, Nori Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Picotto, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentin

TLR7 triggering with Polyuridylic acid promotes cross-presentation in CD8a+ conventional dendritic cells by enhancing antigen preservation and MHC Class I antigen permanence on the dendritic cell surface

ssRNA can interact with dendritic cells (DCs) through binding to TLR7, inducing secretion of proinflammatory cytokines and type I IFN. Triggering TLR7 enhances cross-priming of CD8+ T cells, which requires cross-presentation of exogenous Ag to DCs. However, how TLR triggering can affect Ag cross-presentation is still not clear. Using OVA as an Ag model, we observed that stimulation of TLR7 in DCs by polyuridylic acid (polyU), a synthetic ssRNA analog, generates a strong specific cytotoxic response in C57BL/6 mice. PolyU stimulate CD8a+ DCs to cross-prime naive CD8+ T cells in a type I IFN–dependent fashion. This enhanced cross-priming is accompanied by a higher density of OVA256-264/H-2Kb complexes on CD8a+ DCs treated with polyU, as well as by upregulation of costimulatory molecules and increased secretion of proinflammatory cytokines by DCs. Crosspriming of CD8+ T cells by DCs treated with polyU requires proteasome and Ag translocation to cytosol through the Sec61 channel in DCs. The observed enhancement in OVA cross-presentation with polyU in DCs could be mediated by a limited Ag degradation in endophagosomal compartments and a higher permanence of OVA peptide/MHC class I complexes on DCs. These observations clearly reveal that key steps of Ag processing for cross-presentation can be modulated by TLR ligands, opening new avenues for understanding their mechanisms as adjuvants of the immune response.Fil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Zacca, Estefanía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Núñez, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Ranocchia, Romina Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Maccioni, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Moron, Victor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

SUMOylation and deimination of proteins: two epigenetic modifications involved in Giardia encystation

SUMOylation, a post-translational modification of proteins, has been recently described as vital in eukaryotic cells. In a previous work, we analyzed the role of SUMO protein and the genes encoding the putative enzymes of the SUMOylation pathway in the parasite Giardia lamblia. Although we observed several SUMOylated proteins, only the enzyme Arginine Deiminase (ADI) was confirmed as a SUMOylated substrate. ADI is involved in the survival of the parasite and, besides its role in ATP production, it also catalyzes the modification of arginine residues to citrulline in the cytoplasmic tail of surface proteins. During encystation, however, ADI translocates to the nuclei and downregulates the expression of the Cyst Wall Protein 2 (CWP2). In this work, we made site-specific mutation of the ADI SUMOylation site (Lys101) and observed that transgenic trophozoites did not translocate to the nuclei at the first steps of encystation but shuttled in the nuclei late during this process through classic nuclear localization signals. Inside the nuclei, ADI acts as a peptidyl arginine deiminase, being probably involved in the downregulation of CWPs expression and cyst wall formation. Our results strongly indicate that ADI plays a regulatory role during encystation in which post-translational modifications of proteins are key players.Fil: Vranych, Cecilia Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Rivero, Maria Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Merino, Maria Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Mayol, Gonzalo Federico. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Zamponi, Nahuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Touz, Maria Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; ArgentinaFil: Ropolo, Andrea Silvana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra; Argentin

Aging impairs the ability of conventional dendritic cells to cross-prime CD8+ T cells upon stimulation with a TLR7 ligand

The aging process is accompanied by altered immune system functioning and an increased risk of infection. Dendritic cells (DCs) are antigen-presenting cells that play a key role in both adaptive and innate immunity, but how aging affects DCs and their influence on immunity has not been thoroughly established. Here we examined the function of conventional DCs (cDCs) in old mice after TLR7 stimulation, focusing on their ability to cross-prime CD8+ T cells. Using polyU, a synthetic ssRNA analog, as TLR7 ligand and OVA as an antigen (Ag) model, we found that cDCs from old mice have a poor ability to stimulate a CD8+ T cell-mediated cytotoxic response. cDCs from old mice exhibit alterations in Ag-processing machinery and TLR7 activation. Remarkably, CD8α+ cDCs from old mice have an impaired ability to activate naïve CD8+ T cells and, moreover, a lower capacity to mature and to process exogenous Ag. Taken together, our results suggest that immunosenescence impacts cDC function, affecting the activation of naïve CD8+ T cells and the generation of effector cytotoxic T cells.Fil: Zacca, Estefanía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Acland Strack, Rachel Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Roselli, Emiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Núñez, Nicolás. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Maccioni, Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Moron, Victor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin

Neutrophils exhibit differential requirements for homing molecules in their lymphatic and blood trafficking into draining lymph nodes

Although much is described about the molecules involved in neutrophil migration from circulation into tissues, less is known about the molecular mechanisms that regulate neutrophil entry into lymph nodes (LNs) draining a local inflammatory site. In this study, we investigated neutrophil migration toward LNs in a context of inflammation induced by immunization of BALB/c mice with OVA emulsified in CFA. We demonstrated that neutrophils can enter LNs of OVA/CFA-immunized mice not only via lymphatic vessels but also from blood, across high endothelial venules. By adoptive transfer experiments, we showed that this influx was dependent on an inflammatory-state condition and previous neutrophil stimulation with OVA/anti-OVA immune complexes. Importantly, we have demonstrated that, in the migratory pattern to LNs, neutrophils used L-selectin and P-selectin glycoprotein ligand-1, macrophage-1 Ag and LFA-1 integrins, and CXCR4 to get access across high endothelial venules, whereas macrophage-1 Ag, LFA-1, and CXCR4 were involved in their trafficking through afferent lymphatics. Strikingly, we found that stimulation with immune complexes significantly upregulated the expression of sphingosine-1-phosphate receptor 4 on neutrophils, and that treatment with the sphingosine-1-phosphate agonist FTY720 altered neutrophil LN-homing ability. These findings summarized in this article disclose the molecular pattern that controls neutrophil recruitment to LNs.Fil: Gorlino, Carolina Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Ranocchia, Romina Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Harman, María Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: García, Iris Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Crespo, Maria Ines. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Moron, Victor Gabriel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Maletto, Belkys Angélica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; ArgentinaFil: Pistoresi, Maria Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentin