Starting Anti-COVID-19 Drug Discovery with Natural Products

COVID-19 was characterized as a pandemic regarding its rapid international spread and severity on March 2020. The Coronaviridae family receives this name regarding the organization of the spike glycoprotein located in the envelope, which resembles a stellar corona when observed under a microscope. Coronaviruses undergo frequent mutations in their genome due to errors made by RNA-dependent RNA polymerase (RdRp). The SARS-CoV-2 was characterized by high infectivity and person to person transmission, with an incubation period of up to fourteen days. Potent antiviral activities of several natural products such as alkaloids, chalcones, triterpenoids have been reported but with unconfirmed efficacy or safety in the clinic as well as the complete underlying mechanisms. Also, CQ, HCQ and Ivermectin, remdesivir, lopinavir, ritonavir, favipiravir and pegylated interferon with ribavirin have been tested to develop both an effective therapy and a vaccine to treat COVID-19.  This study presents the antiviral effects of the natural products against SARS-CoV, HCoV-NL63, HCoV-229E and HCoV-OC43 showing that Lycorine, Emodin, Promazine, Saikosaponins B2, Silvestrol, Cepharanthine, Fangchinoline, Tetrandrine, Caffeic acid, Chlorogenic acid, Gallic acid and Emetine are a good candidates on treatment of coronaviruses infections.La COVID-19 se caracterizó como una pandemia debido a su rápida propagación y severidad en marzo de 2020. La familia Coronaviridae recibe su nombre de la organización de la glucoproteína 'espigas' ubicada en el sobre, en forma de corona cuando se observa al microscopio. . Los coronavirus sufren mutaciones frecuentes en su genoma debido a errores cometidos por la ARN polimerasa dependiente de ARN (RdRp, RDR). El SARS-CoV-2, el agente causal del COVID-19, es un virus altamente infeccioso y puede transmitirse de persona a persona. Se han informado actividades antivirales potentes de varios productos naturales, como alcaloides, chalcones, triterpenoides, pero sin eficacia ni seguridad clínicamente confirmadas, así como con los mecanismos subyacentes completos. Este artículo de revisión presenta los efectos antivirales de los productos naturales contra el SARS-CoV, HCoV-NL63, HCoV-229E y HCoV-OC43, mostrando que el licorino, emodina, promazina, saikosaponinas B2, silvestrol, la cefarantina, fangchinolina, tetrandrina, el ácido cafeico, el ácido clorogénico, el ácido gálico y la emetina son buenos candidatos para el tratamiento de las infecciones por coranavirus.Le COVID-19 a été caractérisé comme une pandémie en raison de sa propagation internationale rapide et de sa gravité en mars 2020. La famille des Coronaviridae reçoit ce nom concernant l'organisation de la glycoprotéine 'pointes' située dans l'enveloppe, en forme une couronne lorsqu'elle est observée au microscope. Les coronavirus subissent de fréquentes mutations dans leur génome en raison d'erreurs commises par l'ARN polymérase ARN-dépendante (RdRp, RDR). Le SARS-CoV-2 a un pouvoir infectieux élevé et une transmission d'une personne à l'autre. De puissantes activités antivirales de plusieurs produits naturels tels que les alcaloïdes, les chalcones, les triterpénoïdes ont été signalées mais avec une efficacité ou une sécurité non confirmée en clinique ainsi que les mécanismes sous-jacents complets. Cette étude présente les e ets antiviraux des produits naturels contre le SARS-CoV, le HCoV-NL63, le HCoV-229E et le HCoV-OC43 montrant que la lycorine, l'émodine, la promazine, les saikosaponines B2, le silvestrol, la cépharanthine, la fangchinoline, la tétrandrine, l'acide caféique, l'acide chlorogénique , L'acide gallique et l'émétine sont de bons candidats pour le traitement de l'infection par le coranaviruses infections.A COVID-19 foi caracterizada como uma pandemia devido à sua rápida disseminação e severidade em março de 2020. A família Coronaviridae recebe esse nome em relação à organização da glicoproteína 'spikes' localizada no envelope, em forma de uma coroa quando vista sob um microscópio. Os coronavírus sofrem mutações frequentes em seu genoma devido a erros cometidos pela RNA polimerase dependente de RNA (RdRp, RDR). O SARS-CoV-2, agente causador da COVID-19, é um vírus altamente infeccioso e pode ser transmitido de pessoa para pessoa. Foram relatadas atividades antivirais potentes de vários produtos naturais, como alcalóides, chalconas, triterpenóides, mas com eficácia ou segurança não confirmada clinicamente, bem como com os mecanismos subjacentes completos. O presente artigo de revisão apresenta os efeitos antivirais de produtos naturais contra SARS-CoV, HCoV-NL63, HCoV-229E e HCoV-OC43, mostrando que a licorina, emodina, promazina, saikosaponinas B2, silvestrol, la cefarantina, fangchinolina, tetrandrina, ácido cafeico, ácido clorogênico, ácido gálico e emetina são bons candidatos ao tratamento de infecções por coranavírus

Principais medidas de tratamento para acidentes envolvendo aranhas das espécies latrodectus, loxosceles e phoneutria – uma revisão de literatura

This article is a literature review on treatment measures applied in cases of accidents with spiders of the genera Latrodectus, Phoneutria and Loxosceles, including articles in Portuguese and English. In Brazil, accidents involving venomous animals occupy the second position as a cause of human poisoning, behind only poisoning by the use of medicines, due to the great ecological diversity of the national territory. There are about 40 thousand species of spiders in the world, 12 thousand of which are present in the Brazilian territory. Between 2007 and 2017, 27,125 cases of spider accidents were recorded in Brazil, with 36 cases evolving to death. The genus Loxosceles is the one that causes the most accidents in Brazil, its bite can be treated symptomatically or with antiarachnid serum. The genera Latrodectus and Phoneutria cause less accidents, and the moderate sting of Latrodectus requires antiarachnid serum and Phoneutria only requires the use of serum, apart from specific cases, in children or the elderly. The review showed a diversity of studies involving the treatment of Loxosceles, while for the genus Latrodectus, the literature is quite limited. Regarding the Phoneutria spider, there is a lack of standardization of documents guiding the number of ampoules used in moderate and severe accidents.Objetivo: descrever os principais tratamentos para acidentes envolvendo os gêneros Latrodectus, Phoneutria e Loxosceles, visando descrever as medidas de tratamento convencional,assim como novas medidas de tratamento. Metodologia: A revisão de literatura foi realizada nas bases Google Acadêmico, Scielo, Pubmed, além de manuais/protocolos de tratamento disponíveis nas plataformas do Ministério da Saúde. Foram considerados artigos publicados em português e inglês, entre janeiro de 2001 a setembro de 2020, sendo incluídos 25 artigos/protocolos para a revisão. Resultados: Para casos leves, independente do gênero, o tratamento é sintomático com foco na assepsia da ferida e uso de analgésicos. Para casos moderados e graves, a administração de soro é recomendada, o número de ampolas dependerá da gravidade. A utilização rápida do soro específico é ideal, e o soro antiaracnídico (SAA) é uma alternativa em casos de falta. Conclusão: Os gêneros Loxoceles e Latrodectus possuem soro específico. A utilização do óleo de copaíba e compostos que inibem a ação da esfingomielinase-D demonstraram ação cicatrizante e de controle da lesão dermonecrótica por Loxoceles. Para os acidentes envolvendo o gênero Latrodectus o tratamento também inclui benzodiazepínicos e nos acidentes por Phoneutria pode ser necessário infiltração anestésica, além do SAA

Avaliação da atividade antibacteriana de extratos de espécies vegetais do cerrado (Cnidoscolus vitifolius e Croton spica)

O uso de substâncias antimicrobianas é milenar, sendo um marco a descoberta da penicilina e seus usos clínicos. Nesse sentido, a estagnação nas descobertas de novas classes e a crescente resistência bacteriana conduz à busca de novos princípios bioativos por toda a biosfera, sendo eles sintéticos ou naturais. Dessa maneira, o objetivo deste estudo é avaliar o potencial farmacológico de extratos de Cnidoscolus vitifolius e Croton spica sobre S. aureus, E. coli e P. aeruginosa, pois são plantas com metabólitos secundários pouco conhecidos, as quais compõem o Cerrado, o segundo maior complexo vegetacional do país. A presente análise é de caráter experimental, com investigação de extratos dos frutos, separados em hexânico, acetado de etila e etanólico, e do caule, em extrato etanólico, sobre o inóculo microbiano a partir dos métodos disco difusão e microdiluição. Sendo assim, espera-se identificar a possível atividade dos extratos contra as bactérias supracitadas, para oferecer tal estudo como uma resposta à resistência bacteriana e uma ampliação da vasta gama de plantas que possuem atividade farmacológica

Análise da influência terapêutica medicamentosa nos índices plaquetários

O uso indiscriminado de medicamentos destinados ao tratamento de doenças crônicas como hipertensão, diabetes, hipercolesterolemia e problemas agudos de saúde como infecções e inflamações é bastante frequente pela população brasileira. Tratamentos prolongados ou ocasionais com medicamentos podem acarretar em consequências a saúde, provocando por exemplo, alterações hematológicas significativas relacionadas à plaquetas. Diante disso, o objetivo deste estudo foi avaliar os índices plaquetários em pacientes em farmacoterapia convencional. Foram analisados 2023 resultados de hemograma de pacientes atendidos pelo SUS disponíveis no laboratório de análises clínicas do Centro Universitário de Anápolis UniEvangélica – Anápolis – Goiás – Brasil no ano de 2017. Foram incluídos os escrutínios que apresentavam o plaquetograma completo contendo VPM, PDW, PLT e PCT e informações referentes ao uso de medicamentos, sexo e idade dos pacientes. As análises estatísticas foram realizadas utilizando a metodologia ANOVA. Dos 2023 escrutínios analisados, 1032 casos (51,01%) utilizavam medicamentos e foram denominados grupo de estudo e 991 casos (48,99%) não faziam o uso de medicamentos, sendo referenciados como grupo controle. Os resultados do presente estudo demonstraram diversas classes de medicamentos que alteram de maneira significativa o plaquetograma. Os índices plaquetários apresentaram-se alterados para pacientes que faziam o uso ocasional de antibióticos e para aqueles que faziam o uso prolongado de anti-hipertensivos, hipoglicemiantes, psicotrópicos, hipolipemiantes, anticoncepcionais e antiagregantes plaquetários. Os dados apresentados reforçam a necessidade de acompanhamento farmacoterapêutico em pacientes que utilizam medicação, especialmente de modo contínuo, visando a redução dos riscos de eventos adversos relacionados com a série plaquetária

PERFIL DE SUSCETIBILIDADE AOS ANTIMICROBIANOS EM INFECÇÕES COMUNITÁRIAS DO TRATO URINÁRIO EM MULHERES DA CIDADE DE ANÁPOLIS/GO

Introdução: A infecção do trato urinário (ITU) é a segunda infecção mais comum na população em geral e apresenta uma alta prevalência em mulheres. As enterobactérias são os agentes mais envolvidos. Objetivo: Avaliar o perfil de suscetibilidade antimicrobiana in vitrode enterobactérias isoladas de uroculturas. Métodos: Estudo descritivo transversal realizado no período de agosto a dezembro de 2017 no Laboratório de Análises Clínicas da UniEVANGÉLICA. Amostras de urina de jato médio de 333 pacientes do sexo feminino,com pedidos de urocultura foram semeadas nos meios de cultura apropriados para isolamento. A identificação dos bacilos Gram negativos foi realizada por meio do Sistema Bactray® e o antibiograma foi realizado pelo método Kirby–Bauer. Resultados: Foram isoladas enterobactérias em 13,2% (n=44) das amostras analisadas. Com relação a identificação, a maioria dos isolados foram de E. coli (65,9%; 29/44), seguidos por Klebsiella sp. (9,1%; 4/44), Acinetobacter baumannii (9,1%; 4/44), Morganella morganii (9,1%; 4/44) e Hafnia alvei (6,8%; 3/44). O maior percentual de resistência das enterobactérias isoladas foi observado para ampicilina, seguido da celafosporina de primeira geração (cefalotina), norfloxacina e ciprofloxacina. Das enterobactérias isoladas, 40% (12/30) apresentaram resistência a dois ou mais fármacos de classes diferentes, sendo que oito isolados de E. colidemonstraram multirresistência. Conclusões: A E. coli foi a enterobactéria mais frequentemente isolada e com perfil de resistência a múltiplos fármacos

Hemograma: correlação entre a hemoglobina e os índices hematimétricos / Blood count: correlation between hemoglobin and hematimetric índices

Introdução: A análise da série eritrocitária realizada a partir do hemograma fornece informações importantes sobre os índices hematimétricos encontrados na composição sanguínea, assim é possível verificar o real estado hematológico do paciente. Objetivo: Correlacionar a dosagem de hemoglobina com os demais índices hematimátricos, com intuito de identificar a relação entre os mesmos e o estado anêmico. Procedimentos: Foram analisados 2023 resultados de hemograma de pacientes atendidos no Laboratório de Análises Clínicas da Universidade Evangélica de Goiás, situada na cidade de Anápolis/GO durante o período 01/01/2017 a 18/12/2017. Para as análises estatísticas, utilizou-se o programa Epi Info 3.5.1 e o teste χ2 adotando o intervalo de confiança de 95% para aceitação de diferenças nos testes estatísticos e um p-value < 0,05. Resultados e Discussão: O processo anêmico foi visualizado em 417 do total dos laudos estudados, podendo verificar que as reduções das taxas de Hb estiveram fortemente relacionadas com a diminuição do número absoluto de eritrócitos, VCM, HCM e elevação do RDW. Conclusão: Deste modo, como a determinação de hemoglobina esteve correlacionada aos índices hematimétricos, esses achados podem ser facilitadores na clínica para a descoberta da casuística e tratamento de anemia

A influência da Microbiota intestinal na patogênese da doença de Alzheimer: uma revisão integrativa / The influence of the intestinal Microbiota on the pathogenesis of Alzheimer's disease: an integrative review

Introdução: A patogênese da Doença de Alzheimer (DA) é marcada pela perda cognitiva e de memória de curto e longo prazo. Dentre os fatores envolvidos na progressão da DA, está a microbiota intestinal (que é um biomarcador característico de doenças crônicas não-transmissíveis), através de citocinas, bactérias e agentes pró-inflamatórios. À vista disso, este estudo objetivou discorrer a relação da microbiota intestinal com a DA, assim como caracterizar as substâncias e microrganismos que influenciam na patogênese da doença, descrever o processo de neuroinflamação desencadeado pela disbiose intestinal e analisar os efeitos dos métodos reguladores da microbiota. Métodos: Trata-se de uma revisão integrativa da literatura, realizada a partir das bases de dados U. S. National Library of Medicine (PUBMED) e Biblioteca Virtual de Saúde (BVS), a partir de 21 artigos científicos completos, publicados no período entre 2017 e 2022  nos idiomas português e inglês, que abordam a relação entre a microbiota intestinal e a DA. Resultados: Em grupos afetados, houve o acúmulo de placas beta amiloide (Aβ) e proteína tau (p-tau) no córtex e hipocampo e ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) diminuídos - particularmente o butirato. Os filos bacterianos estavam desregulados, sendo Firmicutes, Faecalibacterium e Proteobacteria diminuídos e Bacteroidetes aumentados. Actinobacteria também estava em disbiose. Essas variações geram respostas inflamatórias no eixo microbiota-intestino-cérebro com indução de citocinas e agentes pró-inflamatórios, o que acarreta comprometimento cognitivo. Ademais, foi constatada melhora significativa em testes cognitivos após procedimentos de modulação do microbioma. Conclusão: Em conclusão, esta revisão aponta a importância da microbiota intestinal para a patogênese da DA, bem como propor a avaliação e tratamentos relacionados, por exemplo o transplante de microbiota fecal (TMF), como forma de interferir positivamente na progressão da patogênese da doença e até reverter estados cognitivos deficitários

Farmacovigilância em idosos: observações acerca da prática de polifarmácia / Pharmacovigilance in the elderly: observations about the practice of polypharmacy

A elevação da expectativa de vida nos tempos modernos trouxe desafios como o aumento de doenças crônico-degenerativas e a ampla utilização de medicamentos. O objetivo do artigo foi avaliar a prática de polifarmácia, categorizar os medicamentos utilizados e pesquisar o uso de medicamentos potencialmente inapropriados em idosos (PIM). O estudo incluiu 23 indivíduos maiores de 60 anos. A coleta de dados foi realizada através de entrevista oral, com aplicação de questionário padrão e tabulação dos dados na plataforma Excel. Dentre os 23 indivíduos, 15 (65,2%) estavam submetidos à polifarmácia. Os grupos terapêuticos mais utilizados foram relacionados ao aparelho cardiovascular, seguido do aparelho digestivo e metabólico e do sistema nervoso, sendo os anti-hipertensivos a classe medicamentosa mais utilizada (em 78,2 % dos entrevistados). Dentre os fármacos relatados, 14,4% foram considerados PIM e 52,2% da amostra faziam uso contínuo de pelo menos um PIM. Nota-se portanto a importância de um acompanhamento multiprofissional no manejo terapêutico do paciente idoso, que está submetido à práticas e à medicações que podem ser iatrogênicas

Leprosy: searching for diagnosis and prognosis markers

Submitted by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2016-12-27T11:53:11Z No. of bitstreams: 2 Tese - Emerith Mayra Hungria Pinto - 2016.pdf: 2353103 bytes, checksum: b1bbe820e4f67491cf8298bcd67dc8b5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2016-12-27T11:57:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Emerith Mayra Hungria Pinto - 2016.pdf: 2353103 bytes, checksum: b1bbe820e4f67491cf8298bcd67dc8b5 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)Made available in DSpace on 2016-12-27T11:57:22Z (GMT). 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The M. leprae specific cellular immunity was evaluated by WBA using heparinized tubes containing different antigen combinations: 46f+LID-1 and ML0276+LID-1; controls: PBS, PHA, MLCS-M. leprae cell sonicate, PPD. After 24 hours incubation (37°C, 5% CO₂) plasma was collected and ELISA used to detect IFNγ (QuantiFERON/Qiagen, cut-off: 50pg/mL) and CXCL10 (Sigma-Aldrich®, St. Louis, Missouri, USA, cut-off: 500 pg/mL). Newly diagnosed, untreated leprosy patients (MB, n=30, PB, n=38) and controls (27 household contacts/HHC, 61 endemic controls/EC) were tested. The new platform in tube validated previous IFNγ results obtained in culture plates. Production of IFNγ to 46f+LID-1 was detected in 84% PB patients, 55% HHC; for ML0276+LID-1: 71% PB, 55% HHC. For both antigen combinations, the IFNγ response of PB leprosy patients differed from the EC (p0.05). Studies in tuberculosis/TB have shown that the CXCL10 response differentiate individuals with active TB from those with latent Mycobacterium tuberculosis infection. In leprosy, CXCL10 levels did not differentiate PB leprosy from HHC. Despite this limitation, our results show that WBA in tube could be a supplementary tool in assessing M. leprae infection rates and evaluating the impact of control measures. The application of leprosy serology as a predictor for the occurrence of leprosy reactions observed during clinical monitoring post treatment was evaluated by ELISA tests to detect M. leprae-specific antibodies, IgM anti PGL-I, IgG anti LID-1 and IgM and IgG anti ND-O-LID. Serum samples from 452 patients were tested and these patients participated of Clinical Trial for Uniform Multidrug Therapy Regimen for Leprosy Patients in Brazil/U-MDT/CT-B who were clinically monitored for more than six years post treatment for the development of leprosy reactions. Serological tests were performed in samples collected in untreated patients at diagnosis (baseline) and the results were analyzed taking into account the clinical outcome post treatment (reaction and reaction-free). Reactional patients (RR and ENL) had higher seropositivity rates and optical density/OD medians for PGL-I, LID-1 and ND-O-LID compared to reaction-free patients (p0=3): 66% reactional patients. The serological results stratified according to the BI showed: in BI negative patients higher anti-PGL-I levels in RR patients compared to reaction-free ones (p=0.014); group IB> 0 3: patients who developed ENL showed higher levels of anti-LID-1 antibodies (p=0.028) when compared with reaction-free ones. The accuracy of a serological test to predict the occurrence of leprosy reactions as determined by ROC curve showed that only anti-PGL-I serology provided limited value to predict RR (area-under-the-curve/AUC=0.702). The anti-PGL-I serology showed low sensitivity for RR prognosis, indicating the need to identify other plasma biomarkers for prediction of RR. In patients who developed ENL during follow-up was observed high positivity in the anti-LID-1 serology at diagnosis indicating the potential application of serology in the identification of patients at higher risk of developing ENL.Esta tese aborda dois temas imunológicos importantes para o controle da hanseníase: diagnóstico laboratorial da hanseníase paucibacilar/ PB e valor prognóstico da sorologia específica para Mycobacterium leprae para reações hansênicas. O diagnóstico laboratorial da hanseníase PB se baseia em testes que avaliam a imunidade celular e este estudo avaliou um protótipo de ensaio de sangue total/EST com combinações antigênicas do M. leprae em pacientes multibacilares-MB e PB e controles de duas regiões endêmicas (Goiânia/GO e Fortaleza/CE). A avaliação da imunidade celular específica se baseou em EST em tubos heparinizados contendo diferentes combinações de antígenos do M. leprae: 46f+LID-1 e ML0276+LID-1; controles: PBS, PHA, MLCS-M. leprae cell sonicate, PPD. Após 24 horas de cultura (37ºC, 5% CO₂), o plasma foi coletado e ELISA utilizado para mensurar IFNγ (QuantiFERON/Qiagen, cut-off: 50pg/mL) e CXCL10 (Sigma-Aldrich®, St. Louis, Missouri, USA, cut-off: 500 pg/mL). Pacientes com hanseníase, recém diagnosticados, não tratados (30 MB, 38 PB) e controles (27 contatos domiciliares/CD, 61 controles saudáveis/CS) foram avaliados. A nova plataforma de tubos foi validada demonstrando produção de IFNγ similar a obtida em placas de cultura. A produção específica de IFNγ para a combinação 46f+LID-1 foi: 84% pacientes PB, 55% CD; para ML0276+LID-1: 71% PB, 55% CD. Para ambas as combinações antigênicas a resposta de IFNγ em pacientes PB diferiu da obtida para os CS (p0,05). Estudos em tuberculose/TB mostraram que a produção de CXCL10 discrimina indivíduos com TB ativa daqueles com infecção latente pelo Mycobacterium tuberculosis. Avaliamos na hanseníase se a produção de CXCL10 é capaz de diferenciar pacientes PB/infecção ativa de CD com infecção “latente”, assintomática. Nossos resultados mostraram produção de CXCL10 induzida por combinações antigênicas do M. leprae, entretanto sem diferenciar resposta de infecção ativa em PB de infecção assintomática em CD. Apesar desta limitação, nossos resultados mostram que o EST em tubo poderia ser uma ferramenta para avaliar as taxas de infecção PB pelo M. leprae e o impacto das medidas de controle. A aplicabilidade da sorologia específica para hanseníase como ferramenta preditora de reações hansênicas foi avaliada por ELISA para detectar anticorpos para específicos do M. leprae, IgM anti PGL-I, IgG anti LID-1 e IgM e IgG anti ND-O-LID Utilizamos amostras de soro de 452 pacientes que participaram do Ensaio Clínico para Avaliação da Eficácia de um Esquema Único de Multidrogaterapia em pacientes com hanseníase no Brasil (U-MDT/ CT-BR) que foram monitorados por mais de 6 anos após o tratamento quanto ao desenvolvimento de reações. Resultados da sorologia realizada em amostras coletadas ao diagnóstico, antes do início da terapia (baseline) foram analisados segundo os desfechos clínicos (ocorrência ou não de reações hansênicas). Independente do tipo de reação (reação reversa/RR ou eritema nodoso hansênico/ENH), pacientes reacionais apresentaram maior soropositividade e medianas de D.O para PGL-I, LID-1 e ND-O-LID comparados com pacientes não reacionais (p03, 66% de pacientes reacionais. Os resultados da sorologia, estratificados de acordo com o IB mostrou no grupo com IB negativo que pacientes que desenvolveram RR apresentaram maiores níveis de anticorpos anti PGL-I comparados com pacientes não reacionais (p=0,014); Grupo com IB>03: pacientes que desenvolveram ENH apresentaram maiores níveis de anticorpos anti LID-1 comparados com pacientes não reacionais (p=0,028). De acordo com resultados da curva ROC para avaliar a acurácia de um teste sorológico para prever o desenvolvimento de reações durante o monitoramento, a sorologia anti PGL-I apresentou limitado valor para prever o desenvolvimento futuro de RR (área sob a curva/AUC=0,702). A sorologia para LID-1 mostrou capacidade de prever o desenvolvimento de ENH (AUC= 0,85). A sorologia anti-PGL-I apresentou baixa sensibilidade para prognóstico da RR, indicando a necessidade da identificação outros biomarcadores plasmáticos para predição da RR. Já em pacientes que desenvolveram ENH durante o seguimento apresentaram alta positividade na sorologia anti LID-1 ao diagnóstico, indicando a potencial aplicação da sorologia na identificação de pacientes com maior risco de desenvolver ENH

Seroreactivity to new Mycobacterium leprae protein antigens in different leprosy endemic regions in Brazil

Submitted by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2014-11-28T12:32:36Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Emerth Mayra Hungria Pinto - 2013.pdf: 1722909 bytes, checksum: e6a82b8a35ca4753b2bb8ca10dd21280 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Approved for entry into archive by Luciana Ferreira ([email protected]) on 2014-11-28T13:14:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Emerth Mayra Hungria Pinto - 2013.pdf: 1722909 bytes, checksum: e6a82b8a35ca4753b2bb8ca10dd21280 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)Made available in DSpace on 2014-11-28T13:14:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Emerth Mayra Hungria Pinto - 2013.pdf: 1722909 bytes, checksum: e6a82b8a35ca4753b2bb8ca10dd21280 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-02-27Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqThe development of laboratory tests applicable for the diagnosis/classification of the different clinical forms of leprosy is considered a research priority. The completion of Mycobacterium leprae genome together with new gene cloning/expression techniques and new bioinformatic tools have promoted the production and availability of new M. leprae recombinant proteins for immunologic assessment. Goal: This study assessed the serologic reactivity to M. leprae recombinant proteins among leprosy patients and controls from two hiperendemic regions in Brazil: “Rondonópolis/MT” and “Vila do Prata/Igarapé-Açú/PA” (former leprosy colony). Material and Methods: IgG antibodies to M. leprae recombinant proteins (92f, 46f, LID-1, ML0405 e ML1213; 2 g/ml) and IgM antibodies for the PGL-I synthetic trissacaride (NT-P-BSA; 0.01 g/ml) were detected by ELISA. The following study groups were included (n=847): newly diagnosed untreated leprosy patients (paucibacillary- PB and multibacillary- MB), household contacts of MB patients (HHC), healthy endemic controls (EC) and former MB that concluded leprosy multidrug therapy (MDT) (post MDT). Results: Among participants from Rondonópolis/MT (n=764), the seropositivity of MB patients (n=58) was 59% for 92f, 81% for 46f, 89% for LID-1, 84% for ML0405; 83% were anti-PGL-I positives. Among 10 anti PGL-I negative MB patients, 5 recognized LID-1 e 4 had IgG antibodies to 92f, 46f and ML0405. Among PB leprosy patients (n=93) seropositivity rates to M. leprae recombinant proteins ranged from 5-16%; 8% were anti PGL-I positives. In the HHC (n=192) and in the EC groups (n=282) low reactivity rates were detected ranging from 3-7%. For the post MDT group, positivity rates ranged from 17-45%. Among participants from “Vila do Prata” 3-8% of HHC were seropositives for recombinant proteins; 11% were anti- PGL-I positives. In the post MDT group from “Vila do Prata” (n=47) 33-50% were seropositives for recombinant proteins. Conclusion: High positivity rates to M. leprae- 46f, ML0405 e LID-1 were detected among MB leprosy patients with different genetic/ethnic profiles from distinct geographical regions. These results indicate that the development of a serologic test for leprosy employing both M. leprae recombinant proteins and PGL-I can potentially detect the majority of MB patients from different hiperendemic regions. The use of this diagnostic tool by the public health system can contribute for the early diagnosis and treatment of MB disease which are crucial for the control/elimination of leprosy in Brazil.O desenvolvimento de testes laboratoriais para o diagnóstico/classificação das diferentes formas clínicas da hanseníase é tema prioritário em pesquisa. O sequenciamento completo do genoma do Mycobacterium leprae, avanços em técnicas de clonagem e expressão gênica e novas ferramentas de bioinformática promoveram a produção e a disponibilidade de novas proteínas recombinantes para avaliação imunológica. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar reatividade sorológica a proteínas recombinantes do M. leprae em pacientes com hanseníase e controles de duas áreas hiperendêmicas para hanseníase do Brasil: Rondonópolis/MT e Vila do Prata/Igarapé-Açú/PA. Materiais e Métodos: A presença de anticorpos IgG para as proteínas recombinantes do M. leprae (92f, 46f, LID-1, ML0405 e ML1213; 2 g/ml) e IgM para o trissacarídeo sintético do PGL-I (NT-P-BSA; 0.01 g/ml) foi avaliada por ELISA. Os grupos de estudo incluíram (n=847): pacientes recém diagnosticados com hanseníase (paucibacilar- PB e multibacilar- MB) virgens de tratamento, contatos domiciliares de MB (CD), controles saudáveis de área endêmica (CS) e casos antigos de hanseníase MB que concluíram a multidrogaterapia (MDT) (pós MDT). Resultados: Entre os participantes de Rondonópolis/MT (n=764), a soropositividade de pacientes MB (n=58) foi de 59% para 92f, 81% para 46f, 89% para LID-1, 84% para ML0405; 83% apresentaram IgM para PGL-I. Dentre 10 pacientes MB soronegativos para PGL-I, 5 reagiram com LID-1 e 4 reconheceram 92f, 46f e ML0405. Entre os pacientes PB (n=93) as taxas de sororeatividade para as proteínas recombinantes variaram de 5-16% e 8% apresentaram sorologia anti- PGL-I positiva. Nos CD (n=192) e CS (n=282) as taxas de reatividade variaram de 3-7%. No grupo pós MDT as taxas de positividade variaram de 17-45%. Na Vila do Prata a taxa de positividade para as proteínas recombinantes nos CD (n=36) variou de 3-8% e 11% dos CD apresentaram anticorpos anti-PGL-I. Entre os indivíduos pós MDT (n=47) as taxas de reatividades variaram de 33-50%. Conclusões: Taxas de positividade acima de 80% foram detectadas para proteínas recombinantes do M. leprae- 46f, ML0405 e LID-1 em pacientes com hanseníase MB com diferentes características genéticas/ étnicas de distintas regiões geográficas. Estes resultados indicam que o desenvolvimento de um teste sorológico para hanseníase que associe proteínas recombinantes e PGL-I tem o potencial de detectar a grande maioria dos pacientes MB provenientes de diferentes regiões hiperendêmicas. O uso deste teste pelo sistema de saúde pública poderá contribuir para o diagnóstico e tratamento precoces da hanseníase MB que são cruciais para o controle/eliminação da doença no Brasil