Molecular biology techniques for the microbiological diagnosis of acute exougenous endophthalmitis

La documentation microbiologique systématique des infections endoculaires (ou endophtalmies) permet la confirmation du caractère infectieux de l'atteinte et l'adaptation éventuelle du traitement à l'échelle individuelle, ainsi que la caractérisation épidémiologique du spectre bactérien à l'échelle collective. Longtemps réservée au domaine de la recherche, l'utilisation des techniques de biologie moléculaire en complément des techniques de culture conventionnelle a pris une place importante dans la démarche diagnostique de ces affections au cours des dernières années. Ces techniques de diagnostic microbiologique sont particulièrement utiles pour la recherche de bactéries difficiles voire impossibles à cultiver du fait de leurs propriétés intrinsèques, de leur présence en très faible quantité, de leur séquestration sur le matériel prothétique ou de leur inactivation par une antibiothérapie préalable. Elles sont basées sur le principe commun de la Polymerase Chain Reaction (PCR) qui permet après une étape d'extraction, l'amplification puis la détection d'Acide Désoxyribo Nucléique (ADN) bactérien initialement présent en quantité infime au sein d'un prélèvement endoculaire. Ces PCR effectuées en mode conventionnel ou en temps réel permettent soit la détection d'ADN bactérien sans a priori (PCR pan bactérienne suivie en général de séquençage) soit la mise en évidence d'un fragment d'ADN spécifique de genre ou d'espèce bactérien (PCR spécifiques). En pratique, afin d'optimiser la détection des micro-organismes responsables d'endophtalmies, il est préférable dans la plupart des cas d'obtenir un prélèvement précoce de vitré et d'appliquer sur ce prélèvement une culture conventionnelle et une technique de biologie moléculaire par PCR pan bactérienne, les deux approches étant complémentaires. Pour les prélèvements effectués lors de la vitrectomie postérieure, l'analyse du vitré dilué par PCR pan bactérienne est suffisante. Les techniques de biologie moléculaire sont plus sensibles que les cultures pour l'identification de bactéries à croissance lente ou difficile (Granulicatella, Moraxella, P. acnes) et offrent une possibilité alternative de diagnostic étiologique lorsque la culture conventionnelle est mise en défaut, en particulier lorsque le patient a déjà bénéficié d'une antibiothérapie intra vitréenne. Les techniques de PCR spécifiques ciblant les genres les plus fréquemment impliqués dans les endophtalmies (Staphylococcus et Streptococcus) sont utiles en seconde intention en cas de négativité des analyses en culture et PCR pan bactérienne, en particulier lorsque seul un prélèvement d'humeur aqueuse est disponibleThe systematic microbiological documentation of endophthalmitis allows the confirmation of the infectious nature of the disease and the possible adaptation of treatment at the individual level and, at the collective level, the epidemiological characterization of the bacterial spectrum of endophthalmitis. Long reserved for research, the use of molecular biology techniques to complement conventional culture techniques has become important for the diagnosis of endophthalmitis in recent years. These new diagnostic techniques are particularly useful for the microbiological study of bacteria that are difficult or impossible to grow, due to their intrinsic properties, their presence in very small inoculum, their sequestration on prosthetic materials, or their inactivation by prior antibiotic treatment. These techniques are based on the polymerase chain reaction (PCR), which allows the amplification and detection of extracted bacterial deoxyribonucleic acid (DNA) that is initially present in very small quantities in an ocular sample. In practice, these conventional or real-time PCRs allow either the a priori detection of bacterial DNA (universal PCR) or the identification of a specific DNA fragment of a bacterial genus or species (specific PCR). New techniques of PCR will allow more rapid bacterial identification and also characterization of genotypic properties, such as gene of virulence or antibioresistanc

Traumatologie oculaire à l'Hôpital Edouard Herriot de Lyon (aspects épidémiologiques, caractéristiques cliniques et résultats fonctionnels)

LYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Modifications maculaires avant et après chirurgie de décollement de rétine rhegmatogène (analyse morphologique en OCT-SD et corrélation anatomo-fonctionnelle)

Le but de cette étude est de décrire grâce à I'Optical Coherence Tomography en mode Spectral Domain (OCT-SD) les modifications morphologiques pré-opératoires et postopératoires de décollements de rétine rhegmatogènes et corréler ces modifications aux résultats fonctionnels. 40 patients ont été inclus entre novembre 2009 et novembre 2010 et suivis sur une période de minimum 9 mois et maximum 34 mois. Des coupes OCT -SD en mode cube et en mode haute définition ont été réalisées prospectivement au niveau de la région maculaire en pré-opératoire, post-opératoire immédiat et post-opératoire différé. Les anomalies retrouvées en pré-opératoire ont été regroupées en 4 types (Type 1 : ondulation et épaississement des photorécepteurs (PR) ; Type II : type I + cavitations des couches nucléaires interne et externe ; Type III : II + interruption de la ligne des PR ; Type IV : atrophie rétinienne). A partir de ces 4 types d'anomalies OCT, 2 groupes de patients ont été formés distinguant les patients avec une atteinte de la ligne des PR ou de 1 'architecture rétinienne (groupe 2) des autres (groupe 1 ). Cette distinction semblait prédictive d'une moins bonne récupération fonctionnelle. Les anomalies OCT pré-opératoires prédictives d'une mauvaise récupération fonctionnelle étaient: la présence de zones d'interruptions de la ligne des articles des PR maculaires, d'une atrophie maculaire. L'existence d'une ondulation de la rétine externe, d'un épaississement de la ligne des PR, de cavitations intra rétiniennes n'était pas corrélée à un mauvais pronostic. La présence de ces anomalies était significativement associée au délai entre les premiers symptômes et la prise en charge. La présence, en postopératoire, d'une interruption de la ligne des PR maculaires, d'une altération de la membrane limitante externe (MLE) d'une atrophie rétinienne globale ou d'un oedème maculaire cystoïde (OMC) était également associée à une mauvaise acuité visuelle finale. En revanche, la présence d'une anomalie de l'interface vitréo-maculaire ainsi que la persistance d'une lame de liquide sous maculaire n'est pas corrélée à une moins bonne récupération visuelle. l'OCT-SD permet une meilleure compréhension de l'origine des perturbations fonctionnelles secondaires aux décollements de rétine rhegmatogènes en objectivant les anomalies microscopiques quasi histologiques prédictives d'une mauvaise récupération visuelle. l'OCT SD est utile à l'analyse des conséquences anatomo-fonctionnelles des décollements de rétine rhegmatogènes.LYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Intérêt de la PCR panbactérienne appliquée au diagnostic microbiologique de 100 cas d'endophtalmies aigües post chirurgie de cataracte

LYON1-BU Santé (693882101) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF

Vitrectomie à la pars plana et implant clippé à l'iris dans les luxations postérieures de cristallin et d'implant intraoculaire (à propos de 32 yeux)

La luxation lenticulaire est une affection ophtalmologique rare. Sa prise en charge pose la question du choix de la correction de l'aphaquie. L'implantation intraoculaire constitue actuellement la technique de choix. Elle est réalisée dans la plupart des cas, en l'absence de support capsulaire, à l'aide d'un implant de chambre antérieure à appui angulaire ou à fixation irienne, ou d'un implant de chambre postérieure fixé à l'iris ou à la sclère (à distance de l'extraction du matériel luxé ou dans le même temps). Nous avons réalisé une étude rétrospective des caractéristiques pré et postopératoires de 32 yeux atteints de luxations postérieures de cristallin et d'implant, traités par vitrectomie postérieure combinée à une implantation par lentille clippée à l'iris, afin d'évaluer l'efficacité et l'innocuité à moyen terme de cette prise en charge. L'ablation de la lentille luxée a consisté en une vitrectomie isolée dans 6 cas, une phacofragmentation associée dans 14 cas, une extraction de l'implant par voie cornéenne dans 12 cas. L'implant a été clippé à la face antérieure de l'iris dans 19 cas, et à sa face postérieure dans 13 cas. L'acuité visuelle a été améliorée par l'intervention dans 88% des cas (p=0.002). L'acuité visuelle en fin de suivi était de 5/10 ou plus chez 69% des patients. L'équivalent sphérique postopératoire était de -0.51 +- 1.14 D contre +8.2 +- 6.03 Den préopératoire. La perte cellulaire endothéliale semblait survenir précocement, probablement en lien avec le traumatisme chirurgical. Nous n'avons eu à déplorer aucun cas d'endophtalmie, de luxation de l'implant ou de décompensation cornéenne oedémateuse. Les complications observées étaient la survenue d'un œdème maculaire cystoïde (8 yeux, résolutif dans 3 cas), d'un décollement de rétine (4 yeux, réappliqué dans tous les cas), d'une hémorragie intra-vitréenne transitoire (4 yeux), d'un glaucome secondaire (2 yeux), et d'un soulèvement choroïdien (1 cas). Les taux de complications observés étaient comparables aux données de la littérature. La mise en place d'un implant clippé à l'iris en chambre antérieure ou en chambre postérieure, à l'issue de la vitrectomie postérieure, est donc un traitement efficace et sûr à moyen terme de l'aphaquie dans les luxations de cristallin et d'implant intraoculaire. Cette prise en charge combinée de la luxation et de l'aphaquie dans le même temps opératoire est à l'origine d'une réhabilitation anatomique et fonctionnelle rapide.LYON1-BU Santé (693882101) / SudocSudocFranceF

Baseline factors predictive of visual prognosis in acute postoperative bacterial endophthalmitis in patients undergoing cataract surger

IMPORTANCE Although rare, postoperative endophthalmitis in patients undergoing cataract surgery can lead to anatomical or functional loss of the eye. Therapeutic strategies such as antibiotic prophylaxis and microbiological diagnosis are more effective with a target patient population. New prospective data are needed to identify prognostic factors. OBJECTIVE To identify baseline factors of visual prognosis in patients with acute bacterial endophthalmitis after cataract surgery. DESIGN Prospective study of consecutive patients undergoing cataract surgery, enrolled from March 1, 2004, through December 31, 2005. We analyzed outcomes to determine the effect on the final visual outcome, defined as poor (visual acuity [VA] worse than 20/100) or good (VA 20/40 or better) using univariate and multivariate analysis. SETTING Four academic hospitals. PARTICIPANTS Ninety-nine consecutive patients with cataract. INTERVENTION Corneal phacoemulsification. MAIN OUTCOMES AND MEASURES Factors related to the cataract surgery (complications), initial clinical presentation, and microbiological diagnosis and the final VA. RESULTS The significant baseline factors (at presentation) for good visual outcome (45% of the series) were the winter season, absence of complications during cataract surgery, initial VA, microbiological investigations revealing no microorganism or a coagulase-negative Staphylococcus species (CNSP), and fundus visibility. Quantitative factors associated with a good clinical prognosis were shorter duration of cataract surgery, younger age, and a hypopyon no greater than 1.5 mm. Significant factors associated with poor visual outcome were infection of the right eye, initial VA, corneal edema, a hypopyon larger than 1.5 mm, detection of bacterial species other than a CNSP, and the absence of fundus visibility. Multiple logistic regression analysis showed that high bacterial virulence was the only independent factor (odds ratio, 14.0 [95% CI, 2.7-71.0]; P = .001) for poor visual outcome. On the other hand, low bacterial virulence (odds ratio, 0.2 [95% CI, 0.03-0.6]; P = .01) and the absence of complications during cataract surgery (0.1 [0.01-0.4]; P = .003) were independent factors for good VA. CONCLUSIONS AND RELEVANCE Most clinical outcome factors in acute postoperative endophthalmitis can be identified at presentation. The bacterial virulence level is the main factor predictive of the final visual prognosis

Principles and applications of molecular biology techniques for the microbiological diagnosis of acute post-operative endophthalmitis.

International audience: The systematic microbiological evaluation of endophthalmitis allows the confirmation of the infectious nature of the disease and the possible adaptation of treatment at the individual level and, at the collective level, the epidemiological characterization of the bacterial spectrum of endophthalmitis. Long reserved for research, the use of molecular biology techniques to complement conventional culture techniques has become important for the diagnosis of endophthalmitis in recent years. These new diagnostic techniques are particularly useful for the microbiological study of bacteria that are difficult or impossible to grow because of their intrinsic properties, their presence in only a small inoculum, their sequestration on prosthetic materials, or their inactivation by prior antibiotic treatment. These techniques are based on the polymerase chain reaction (PCR), which allows the amplification and detection of extracted bacterial deoxyribonucleic acid (DNA) that is initially present in minute quantities in an ocular sample. In practice, these conventional or real-time PCRs allow either the a priori detection of bacterial DNA (universal PCR) or the identification of a specific DNA fragment of a bacterial genus or species (specific PCR). New techniques of PCR will allow more rapid bacterial identification and also characterization of genotypic properties, such as genes of virulence or antibiotic resistance

Longitudinal study of retinal status using optical coherence tomography after acute post-cataract endophthalmitis

absen

Longitudinal study of retinal status using optical coherence tomography after acute onset endophthalmitis following cataract surgery

International audiencePurpose To analyse the macula imaged with optical coherence tomography (OCT) in patients treated for acute postcataract endophthalmitis.Methods Patients presenting with acute postcataract endophthalmitis were included in this observational and multicentre study from January 2008 to December 2011. We recorded the following OCT data at the 3, 6 and 12-month visits: the central macular thickness, the perifoveal macular thickness, the central foveal point thickness and abnormalities of the outer retina, the macula and vitreoretinal interface.Results 46 patients were included in the OCT analysis. From month 3 to 12, epiretinal membrane (ERM) prevalence increased from 26% to 39%, vitreomacular traction prevalence decreased from 12% to 6%, non-tractional macular oedema (ME) prevalence varied between 7% and 13%. Only macular thinning remained stable at 10%. At month 12, a significant correlation was found between non-tractional ME and capsular rupture (at the time of cataract extraction, p=0.03). Eyes with an ERM exhibited increased central macular thickness (p=0.001) and lower visual acuity (VA) (p=0.02) at M12 in comparison to the group with normal macula. OCT analysis showed a significant association between ERM and the alteration of the ellipsoid band (p=0.02), as well as the external limiting membrane (ELM, p=0.07) at M12.Conclusions ERM and ME were the main macular abnormalities diagnosed after 1 year of follow-up, associated with VA less than or equal to 20/40 in 50% of the cases. Ultrastructural abnormalities of the ELM and the ellipsoid band were frequently observed in those patients

Three cases of post-cataract surgery endophthalmitis due to Rhizobium (Agrobacterium) radiobacter.

WOS: 000302148700067International audienceWe present three unrelated post-cataract surgery endophthalmitis cases caused by Rhizobium radiobacter, hospitalized in three different hospitals. Early diagnosis was obtained in two cases by bacterial DNA detection in vitreous samples. All patients recovered from infection, but pars plana vitrectomy was needed in two patients due to rapid clinical deterioration