The incorporation of alpha-tocopherol and functional doses of phytosterol esters during cheesemaking does not affect DNA or mRNA dynamics of Streptococcus thermophilus and Lactococcus lactis throughout and after the end of ripening

Tocopherols and phytosterols are lipid-soluble molecules which have been widely used in the food industry. Nevertheless, the influence of these compounds on the performance of starter lactic acid bacteria (SLAB) in fermented foods has received little attention. Here, we assessed the behavior of Streptococcus thermophilus and Lactococcus lactis during the ripening of a functional Port Salut light cheese elaborated with these SLAB and with alpha-tocopherol and phytosterol esters as bioactive molecules. Functional and control cheeses were manufactured at an industrial plant and sampled at 7, 21, 40, 60 and 90 days after elaboration for real-time quantitative PCR (qPCR) or reverse transcription-qPCR (RT-qPCR) experiments. Target DNA and mRNA from both SLAB were detected after 90 days of elaboration in both functional and control cheeses, supporting their potential role in generating flavor metabolites. Furthermore, here we showed for the first time that the addition of alpha-tocopherol and functional doses of phytosterols did not affect DNA or mRNA dynamics of these SLAB during cheesemaking, throughout and after the end of ripening. Therefore, our results support the use of cheese manufactured with both S. thermophilus and L. lactis as an optimal delivery system for these beneficial bioactive compounds.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Pérez, Carolina Daiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Rizzo, Sergio Anibal. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Rossetti, Luciana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Diaz, G.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Ruzal, Sandra Mónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Nanni, M.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Descalzo, Adriana Maria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développerment; Francia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Assessment on different vaccine formulation parameters in the protection against heterologous challenge with FMDV in cattle

Foot-and-mouth disease (FMD) remains one of the major threats to animal health worldwide. Its causative agent, the FMD virus (FMDV), affects cloven-hoofed animals, including farm animals and wildlife species, inflicting severe damage to the international trade and livestock industry. FMDV antigenic variability remains one of the biggest challenges for vaccine-based control strategies. The current study analyzed the host’s adaptive immune responses in cattle immunized with different vaccine protocols and investigated its associations with the clinical outcome after infection with a heterologous strain of FMDV. The results showed that antigenic payload, multivalency, and revaccination may impact on the clinical outcome after heterologous challenge with FMDV. Protection from the experimental infection was related to qualitative traits of the elicited antibodies, such as avidity, IgG isotype composition, and specificity diversity, modulating and reflecting the vaccine-induced maturation of the humoral response. The correlation analyses of the serum avidity obtained per vaccinated individual might suggest that conventional vaccination can induce high-affinity immunoglobulins against conserved epitopes even within different FMDV serotypes. Cross-reaction among strains by these high-affinity antibodies may support further protection against a heterologous infection with FMDV.Instituto de VirologíaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Pega, Juan Franco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

The incorporation of alpha-tocopherol and functional doses of phytosterol esters during cheesemaking does not affect DNA or mRNA dynamics of Streptococcus thermophilus and Lactococcus lactis throughout and after the end of ripening

Tocopherols and phytosterols are lipid-soluble molecules which have been widely used in the food industry. Nevertheless, the influence of these compounds on the performance of starter lactic acid bacteria (SLAB) in fermented foods has received little attention. Here, we assessed the behavior of Streptococcus thermophilus and Lactococcus lactis during the ripening of a functional Port Salut light cheese elaborated with these SLAB and with alpha-tocopherol and phytosterol esters as bioactive molecules. Functional and control cheeses were manufactured at an industrial plant and sampled at 7, 21, 40, 60 and 90 days after elaboration for real-time quantitative PCR (qPCR) or reverse transcription-qPCR (RT-qPCR) experiments. Target DNA and mRNA from both SLAB were detected after 90 days of elaboration in both functional and control cheeses, supporting their potential role in generating flavor metabolites. Furthermore, here we showed for the first time that the addition of alpha-tocopherol and functional doses of phytosterols did not affect DNA or mRNA dynamics of these SLAB during cheesemaking, throughout and after the end of ripening. Therefore, our results support the use of cheese manufactured with both S. thermophilus and L. lactis as an optimal delivery system for these beneficial bioactive compounds.Inst. de Tecnol. de los Alimentos- ITAFil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Descalzo, Adriana Maria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA).LABINTEX. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Déeveloppement. Déepartement PERSYST, UMR Qualisud; FranciaFil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Diaz, Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Ruzal, Sandra Monica Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Téecnica; ArgentinaFil: Perez, Carolina Daiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rossetti, Luciana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Rizzo, Sergio Anibal. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentin

Systemic Foot-and-Mouth Disease Vaccination in Cattle Promotes Specific Antibody-Secreting Cells at the Respiratory Tract and Triggers Local Anamnestic Responses upon Aerosol Infection

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious viral disease affecting biungulate species. Commercial vaccines, formulated with inactivated FMD virus (FMDV), are regularly used worldwide to control the disease. Here, we studied the generation of antibody responses in local lymphoid tissues along the respiratory system in vaccinated and further aerosol-infected cattle. Animals immunized with a high-payload monovalent FMD vaccine developed high titers of neutralizing antibodies at 7 days postvaccination (dpv), reaching a plateau at 29 dpv. FMDV-specific antibody-secreting cells (ASC), predominantly IgM, were evident at 7 dpv in the prescapular lymph node (LN) draining the vaccination site and in distal LN draining the respiratory mucosa, although in lower numbers. At 29 dpv, a significant switch to IgG1 was clear in prescapular LN, while FMDV-specific ASC were detected in all lymphoid tissues draining the respiratory tract, mostly as IgM-secreting cells. None of the animals (n = 10) exhibited FMD symptoms after oronasal challenge at 30 dpv. Three days postinfection, a large increase in ASC numbers and rapid isotype switches to IgG1 were observed, particularly in LN-draining virus replication sites already described. These results indicate for the first time that systemic FMD vaccination in cattle effectively promotes the presence of anti-FMDV ASC in lymphoid tissues associated with the respiratory system. Oronasal infection triggered an immune reaction compatible with a local anamnestic response upon contact with the replicating FMDV, suggesting that FMD vaccination induces the circulation of virus-specific B lymphocytes, including memory B cells that differentiate into ASC soon after contact with the infectiveInstituto de VirologíaFil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Malacari, Darío Amilcar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rodríguez, L.L. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Borca, Manuel Victor. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Efecto de yogur fortificado con nanoliposomas de ácidos grasos Omega 3 (EPA+DHA) sobre índices nutricionales

Poster y resumenThe main Omega3 polyunsaturated fatty acids (3 PUFA) are alpha-linolenic acid (ALA, 18:3 n-3), eicosapentaenoic acid (EPA, 202:5 n-3) and docosahexaenoic acid (DHA, 22:6 n-3). ALA is essential; It means that the body does not synthesize it, and it must be obtained from the foods that are consumed. The conversion efficiency of ALA into EPA and DHA in the body is low; Therefore, the only way to increase their concentration in the body is through food. Due to the high susceptibility of 3 PUFAs to oxidation, fortification of food products with them is challenging. Yogurt constitutes a convenient matrix to transport bioactives due to its semisolid structure, oxidative stability and nutritional value. In this framework, although nanotechnology has been used to prevent the oxidation of bioactive compounds, experimental data on its application in foods in relation to technological aspects are scarce. Therefore, the evaluation of a yogurt and its capacity as a vehicle to provide recommended amounts of EPA and DHA was carried out, and to establish whether the nanoliposomes confer greater stability to the aforementioned fatty acids, thus influencing their nutritional indices. For this, yogurt formulations were made using ultra-pasteurized partially skimmed milk (2% total fat), commercial starter culture (S. thermophilus and L. delbrueckii subsp. bulgaricus) and marine oil rich in EPA DHA. The formulations were developed to contain free oil or innanoliposomes with concentrations between 100-125; 200-250 -and 450-500 mg/ 200 ml of yogurt (Formulas under protection). The nanoliposomes based on soy lecithin were made under the framework of an agreement between the Food Technology Institute of INTA and a private company (protected development). Samples were taken at 0, 14, and 28 days, which were stored at 4 ºC. The fatty acid profile was quantified by gas chromatography (GC) and calculations were performed to determine indices. nutritional; Atherogenic Index (AI), Thrombogenic Index (TI), Health Promoting Index (HPI) and Hypocholesterolemic / Hypercholesterolemic Ratio (HH). The data obtained by CG showed that the yogurt formulations with free oil presented an approximate loss of 81% of these 3 PUFA after 28 days of storage at 4 ºC, while no such drop was recorded in any of the yogurts developed that contained nanoliposomes, evaluated up to 28 days of storage. In the case of the AI, TI, HPI and HH indices for the nanoliposomal formulations, values ​​of 3.05, 1.46, 0.36 and 1.02 were obtained, while for the free formulations the values ​​were 3.50, 1.70, 0.23 and 0.86, respectively, observing thus better performance for nanoliposomal formulations. These results indicated that yogurt constitutes a matrix suitable to be used as a vehicle to incorporate 3 PUFA beneficial for health, and if they are found in nanoliposomes, their stability remains stable, thus ensuring the quantity and property of the bioactive until the end of the shelf life of the food.Los principales ácidos grasos poliinsaturados Omega3 (3 PUFA) son el ácido alfa-linolénico (ALA, 18:3 n-3), el ácido eicosapentaenoico (EPA, 202:5 n-3) y el ácido docosahexaenoico (DHA, 22:6 n-3). El ALA es esencial; significa que el cuerpo no lo sintetiza, y debe obtenerse de los alimentos que se consumen. La eficiencia de conversión de ALA en EPA y DHA en el organismo es baja; por lo tanto, la única manera de aumentar la concentración de estos en el organismo es a través de los alimentos. Debido a la alta susceptibilidad de los 3 PUFA a la oxidación, la fortificación de productos alimenticios con ellos es desafiante. El yogur constituye una matriz conveniente para vehiculizar bioactivos por su estructura semisólida, estabilidad oxidativa y valor nutricional. En este marco, si bien la nanotecnología ha sido utilizada para prevenir la oxidación de compuestos bioactivos, los datos experimentales sobre su aplicación en alimentos con relación a aspectos tecnológicos son escasos. Por lo tanto, se realizó la evaluación de un yogur y su capacidad como vehículo para aportar cantidades recomendadas de EPA y DHA, y establecer si los nanoliposomas, confieren una estabilidad mayor a los mencionados ácidos grasos, influyendo así en sus índices nutricionales. Para ello, se realizaron formulaciones de yogur utilizando leche parcialmente descremada ultra pasteurizada (2 % de grasa total), cultivo comercial iniciador (S. thermophilus y L. delbrueckii subsp. bulgaricus) y aceite marino rico en EPA DHA. Las formulaciones se desarrollaron para contener aceite libre o en nanoliposomas con concentraciones entre 100- 125; 200-250 -y 450-500 mg/ 200 ml de yogur (Fórmulas bajo protección). Los nanoliposomas en base a lecitina de soja, se realizaron bajo el marco de un acuerdo entre el Instituto Tecnología de Alimentos del INTA y una empresa privada (desarrollo protegido). Se tomaron muestras a los 0, 14, y 28 días, las cuales fueron almacenadas a 4 ºC. Se cuantificó el perfil de ácidos grasos mediante cromatografía gaseosa (CG) y se realizaron los cálculos para determinar índices nutricionales; Índice Aterogénico (AI), Índice Trombogénico (TI), Índice promotor de salud (HPI) y Relación Hipocolesterolémica / Hipercolesterolémica (HH). Los datos obtenidos por CG mostraron que las formulaciones de yogur con aceite libre presentaron una pérdida aproximada del 81% de estos 3 PUFA a los 28 días de almacenamiento a 4 ºC, mientras que no se registró tal caída en ninguno de los yogures desarrollados que contenían nanoliposomas, evaluados hasta los 28 días de almacenamiento. En el caso de los índices AI, TI, HPI y HH para las formulaciones nanoliposomales, se obtuvieron valores de 3.05, 1.46, 0.36 y 1.02, mientras que para las formulaciones libres los valores fueron 3.50, 1.70, 0.23 y 0.86, respectivamente, observándose así una mejor performance para las formulaciones nanoliposomales. Estos resultados indicaron que el yogur constituye una matriz apta para ser utilizada como vehículo para incorporar 3 PUFA benéficos para la salud, y si ellos se encuentran en nanoliposomas, su estabilidad se mantiene estable, asegurando así la cantidad y propiedad del bioactivo hasta el final de la vida útil del alimento.Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos (ITA)Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Universidad de Buenos Aires (UBA). Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Pega, Juan Franco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). CIA. Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos (ITA); Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas de Argentina (CONICET); Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina.Fil: Ambrosi, Vanina. Universidad de Morón. Escuela Superior de Ingeniería, Informática y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Investigación Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Instituto de Ciencia y Tecnología de los Sistemas Alimentarios Sustentables (ICyTeSAS) UEDD INTA-CONICET; Argentina.Fil: Guidi, Silvina Mabel. Universidad de Morón. Escuela Superior de Agronomía y Ciencias Agroalimentarias (ESIIyCA); Argentina.Fil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación de Agroindustria; Argentina

Early Adaptive Immune Responses in the Respiratory Tract of Foot-and-Mouth Disease Virus-Infected Cattle

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious viral disease which affects both domestic and wild biungulate species. This acute disease, caused by the FMD virus (FMDV), usually includes an active replication phase in the respiratory tract for up to 72 h postinfection, followed by hematogenous dissemination and vesicular lesions at oral and foot epithelia. The role of the early local adaptive immunity of the host in the outcome of the infection is not well understood. Here we report the kinetics of appearance of FMDV-specific antibody-secreting cells (ASC) in lymphoid organs along the respiratory tract and the spleen in cattle infected by aerosol exposure. While no responses were observed for up to 3 days postinfection (dpi), all animals developed FMDV-ASC in all the lymphoid organs studied at 4 dpi. Tracheobronchial lymph nodes were the most reactive organs at this time, and IgM was the predominant isotype, followed by IgG1. Numbers of FMDV-ASC were further augmented at 5 and 6 dpi, with an increasing prevalence in upper respiratory organs. Systemic antibody responses were slightly delayed compared with the local reaction. Also, IgM was the dominant isotype in serum at 5 dpi, coinciding with a sharp decrease of viral RNA detection in peripheral blood. These results indicate that following aerogenous administration, cattle develop a rapid and vigorous genuine local antibody response throughout the respiratory tract. Time course and isotype profiles indicate the presence of an efficient T cell-independent antibody response which drives the IgM-mediated virus clearance in cattle infected by FMDV aerosol exposure.Instituto de VirologíaFil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Malacari, Darío Amilcar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Arzt, J. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Pérez Beascoeachea, C. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria. Dirección de Laboratorios; ArgentinaFil: Maradei, E. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria. Dirección de Laboratorios; ArgentinaFil: Rodríguez, L. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Borca, Manuel Victor. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Impacto de la incorporación de lípidos vegetales y antioxidantes sobre el comportamiento del starter durante la producción industrial de un queso funcional evaluado por técnicas independientes de cultivo

Los fitoesteroles son un conjunto de lípidos vegetales que han sido utilizados para el diseño de productos lácteos funcionales debido a su capacidad para reducir el colesterol sérico. No obstante, su efecto sobre el comportamiento del cultivo starter en la elaboración de quesos no ha sido estudiado. En este trabajo se monitoreó la cinética del DNA y RNA de la bacteria Streptococcus thermophilus, un starter lácteo ampliamente utilizado y con potencial probiótico, durante la producción industrial de un queso funcional conteniendo esteres de ftoesteroles y alfa-tocoferol como compuestos bioactivos. Para este propósito, se optimizaron técnicas de PCR cuantitativa (qPCR) y qPCR con transcriptasa reversa (RT-qPCR). Asimismo, se utilizó un diseño experimental ad hoc para evaluar el umbral de detección de ácidos nucleicos libres. En nuestro conocimiento, este abordaje provee la primera evidencia experimental indicando que el DNA no es un indicador confiable de integridad celular cuando se detecta por qPCR, mientras que el RNA permitiría estimar de modo más preciso integridad bacteriana. El starter S. thermophilus se detectó por qPCR y RT-qPCR durante la producción del queso hasta los 81 días de madurado. Asimismo, se observó por primera vez que la adición de alfa-tocoferol y concentraciones funcionales de fitoesteroles correlacionó con un aumento significativo en los niveles de DNA y cDNA específicos.Phytosterols are plant lipophilic triterpenes that have been used for the design of functional dairy products because of their ability to lower serum cholesterol levels. However, their effect on the starter culture behavior during cheesemaking has not yet been studied. Here, we followed DNA and RNA kinetics of the bacterium Streptococcus thermophilus, an extensively used dairy starter with probiotic potential, during industrial production of a functional cheese containing phytosterol esters and alpha-tocopherol as bioactive compounds. For this purpose, real-time quantitative PCR (qPCR) and reverse transcription-qPCR (RT-qPCR) assays were optimized. An experimental set-up was used to evaluate the detection threshold of free nucleic acids. To our knowledge, this approach provides the first experimental evidence indicating that DNA is not a reliable marker of cell integrity, whereas RNA may constitute a more accurate molecular signature to estimate bacterial integrity. The starter S. thermophilus was detected by qPCR and RT-qPCR during cheese production until 81 days of ripening. We also showed for the first time that the addition of alpha-tocopherol and phytosterols at functional concentrations correlated with a significant increase in target DNA and cDNA levels.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Rizzo, Sergio Anibal. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Rossetti, Luciana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Perez, Carolina Daiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Ruzal, S.M. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Descalzo, Adriana Maria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina

Efecto de altas presiones hidrostáticas sobre parámetros de calidad y microbiológicos en una bebida fermentada utilizando suero lácteo

Evaluar el efecto de APH sobre parámetros de calidad y microbiológicos en una bebida fermentada, elaborada a partir de lactosuero, a fin de: - Proponer una alternativa de aprovechamiento de este subproducto mediante su transformación en un alimento de interés nutricional. presencia de microorganismos ácido lácticos y péptidos bioactivos. - Generar información de interés tecnológico respecto al efecto de APH sobre el comportamiento de los microorganismos starter ácido lácticos de la bebida fermentada - métodos tradicionales de cultivo. - métodos moleculares : PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) y qPCR con transcriptasa reversa (RT qPCR)Fil: Ambrosi, Vanina A. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Denoya, Gabriela Inés. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Castells, María Laura. Instituto Nacional de Tecnología Industrial (INTI). Área de Lácteos; Argentina.Fil: Sarquis, Sandra. Instituto Nacional de Tecnología Industrial (INTI). Área de Lácteos; Argentina.Fil: Aranibar, Germán F. Instituto Nacional de Tecnología Industrial (INTI). Área de Lácteos; Argentina.Fil: Vaudagna, Sergio Ramon. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Morón; Argentina.Fil: Nanni, Mariana.Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Universidad de Morón; Argentina.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto Tecnología de Alimentos; Argentina

Impact of extracellular nucleic acids from lactic acid bacteria on qPCR and RT-qPCR results in dairy matrices: Implications for defining molecular markers of cell integrity

In this study, we evaluated whether quantitative PCR (qPCR) and reverse transcription-qPCR (RT-qPCR) results could be affected by extracellular (free) DNA or RNA, respectively, obtained either from isolated bacteria or from fermented dairy foods manufactured with these microorganisms. These experimental set-ups involved two starter lactic acid bacteria (SLAB), Streptococcus thermophilus and Lactococcus lactis, as models across their most common technological environments: yoghurt, milk and cheese. The presence of free DNA modified qPCR results in levels sufficient to bias SLAB determinations, indicating that DNA may be a poor measure of cellular integrity. Furthermore, we showed for the first time that an order of magnitude more of free RNA than of DNA had to be used to modify RT-qPCR results. Importantly, the interference produced by free DNA and RNA was maintained across all the dairy matrices evaluated, independently of the SLAB and of the source of nucleic acids used, in both negative and positive samples. This study suggests that, contrary to DNA molecules, mRNA from dead microorganisms or from other extracellular sources may not be a determinant factor in skewing molecular quantifications. Therefore, our results support the potential use of mRNA as a molecular signature of cell integrity in dairy matrices.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rizzo, Sergio Anibal. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Rossetti, Luciana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Pérez, Carolina Daiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Díaz, G.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; ArgentinaFil: Descalzo, Adriana Maria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Centre de Coopération Internationale en Recherche Agronomique pour le Développerment; FranciaFil: Nanni, Mariana Sandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria. Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Effect of Light Exposure on Functional Compounds of Monovarietal Extra Virgin Olive Oils and Oil Mixes During Early Storage as Evaluated by Fluorescence Spectra

The oxidation of antioxidants in bottled extra virgin olive oil (EVOO), especially vitamin E and chlorophyll, can affect the quality of the product. However, the effect of light exposure on these functional compounds and their relation with oil quality, during the early storage of EVOO, is not clear. In this study, we evaluated the photochemical stability of vitamin E and chlorophyll in two monovarietal EVOO, Picual (PEVOO) and Farga (FEVOO), and in mixed olive oils (MOO) containing 70:30 v/v of EVOO and sunflower oil (SO), respectively. PEVOO, FEVOO, MOO and SO were subjected to light exposure for 7 days, and the amounts of vitamin E and chlorophyll were assessed by fluorescence spectra. Peroxide value (PV) and acidity index (AI) were also determined. Results showed that MOO contained significantly lower contents of vitamin E and chlorophyll than PEVOO or FEVOO before light exposure (p < 0.001). However, these compounds showed a significant decrease in PEVOO and FEVOO throughout light exposure (p < 0.001). Interestingly, although the effect of oil variety and light exposure on PV and AI determinations was significant (p < 0.001), all the oils showed values which were in accordance with the International Olive Council (IOC) standards. Principal component analysis (PCA) highlighted antioxidant changes in EVOO, MOO and SO upon this short period of light exposure. As a whole, our results indicate that, unlike PV and AI determinations, fluorescence spectra analysis may be an interesting tool for quality control in EVOO mixed with other oils or subjected to inadequate storage conditions.Fil: Diaz, Gabriela Esther. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Primrose, D. Universidad de Morón. Facultad de Agronomía y Ciencias Agroalimentarias; Argentina.Fil: Sancho, Ana Maria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina.Fil: Nanni, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de Alimentos; Argentina