Caractérisation des voies d’expression génique dans le follicule ovarien humain en réponse aux gonadotrophines et à l’environnement métabolique maternel

Le développement folliculaire est un processus finement régulé au cours duquel d’innombrables interactions se produisent. Cette régulation fine permet la production d’un ovocyte de qualité, précurseur d’un embryon apte à poursuivre les différentes étapes du développement embryonnaire. La production de cet ovocyte est dépendante des interactions avec son environnement, avec les cellules du cumulus, les cellules de la granulosa et de la thèque qui constituent le follicule ovarien. Ces cellules somatiques agissent comme régulateurs du développement ovocytaire et comme médiateurs de l’environnement maternel. Parmi les facteurs qui influencent la folliculogenèse, l’hormone folliculo-stimulante (FSH)et l’hormone lutéinisante (LH), deux principales hormones clés agissent de manière synergique et complémentaire pour assurer la croissance et l’ovulation. En plus de ces signaux hormonaux, le follicule est également sensible au métabolisme maternel qui, via différents métabolites et leurs précurseurs, influence le développement folliculaire. Dans un premier temps cette thèse s’intéresse à la caractérisation des principaux réseaux de signalisation qui sont impliqués dans la stimulation des cellules de la granulosa humaine en culture par les deux principales hormones ; la FSH et la LH. L’objectif étant d’utiliser des outils de génomique tels le séquençage à haut débit pour produire une image globale des différentes voies géniques qui répondent à l’activation des réseaux de signalisation de la protéine kinase A, de la protéine kinase C et de la protéine kinase B, trois voies de signalisation importantes dans la médiation des effets de la FSH et de la LH dans la granulosa. Dans un deuxième temps, cette thèse s’intéresse également à un autre aspect de l’environnement maternel qui, tout comme les signaux hormonaux, influence le développement folliculaire ; le métabolisme. Le deuxième volet de la thèse a donc comme objectif de décrire à l’aide des mêmes outils de génomique, l’impact des acides gras libres et de l’insuline sur les réseaux de signalisation des cellules de la granulosa humaine. L’utilisation d’un modèle cellulaire in vitro unique nous permettant l’étude des réseaux de signalisation dans un système stable et à un stade folliculaire autrement inaccessible chez la femme, a permis de mettre en évidence un rôle clair de la protéine kinase C dans la médiation des effets de la LH sur les cellules de la granulosa lors de la différenciation et maturation finale du follicule. L’étude plus en profondeur de ces réseaux de signalisation, incluant celui de la protéine kinase B au troisième chapitre, suggère que la protéine kinase A dirigerait majoritairement la différenciation folliculaire précoce alors que la protéine kinase C entrainerait une différenciation terminale impliquant des changements reliés aux processus inflammatoires et à l’ovulation. La protéine kinase B serait quant à elle une voie à caractère permissif agissant sur la survie cellulaire et qui supporterait les deux premières dans leurs actions. La thèse révèle également une certaine sensibilité des cellules de la granulosa au métabolisme maternel. Ainsi dans un contexte de maladie métabolique maternelle et d’exposition à de plus grandes quantités d’acides gras libres et d’insuline, plusieurs voies géniques reliées entre autres à la stéroïdogenèse, au métabolisme, à l’inflammation et au stress seraient perturbées dans la granulosa affectant ainsi le cours du développement folliculaire. En somme, les résultats présentés dans cette thèse suggèrent un aperçu global de l’action de certains des principaux réseaux signalétiques en action au cours de la folliculogenèse au niveau de la granulosa. Les données présentées dans cette thèse révèlent également un premier aperçu de la réponse génomique de ce tissu à certains défis métaboliques dont la prévalence est en augmentation dans la population. En plus de suggérer de nouveaux marqueurs potentiels et de générer de nouvelles hypothèses, les différentes études présentées dans cette thèse permettent l’amélioration de notre connaissance de la signature transcriptomique des cellules de la granulosa humaine en réponse aux gonadotrophines et à l'environnement métabolique maternel contribuant ainsi indirectement à l’amélioration des techniques de procréation assistée.Folliculogenes is is a finely coordinated process that involves countless interactions which will influence the oocyte’s quality and its ability to produce an embryo that will be capableof resuming the different steps of further embryonic development. Production of a goodquality oocyte depends intrinsically on the interactions between the different cell types of the follicle and the exchanges with its direct environment. Granulosa cells act as the maincoordinator for the follicular development and act as one of the principal mediators betweenthe maternal environment and the oocyte. Among the many factors and hormones that influence folliculogenesis processes, the follicle-stimulating hormone (FSH) and the luteinizing hormone (LH) are both key hormones that regulate growth and ovulation in a complementary fashion. Besides these two hormones, the follicle is also sensitive to several components of the maternal metabolism such as hormones and metabolites that impact follicular development. First, the objective of this thesis was to characterize important signaling pathways involvedin human granulosa cells stimulation by both FSH and LH. Using genomic technologies suchas high-throughput sequencing, we were able to provide a global picture and a first insightof the three main signaling pathways activated in response to both hormones, namely the protein kinase A, the protein kinase B and the protein kinase C signaling pathways. Then, thethesis work also aims to describe, using the same technologies and the same in vitro model,the impact of maternal metabolism, more precisely of fatty acids and insulin on genomic answer in human granulosa cells. Using an in vitro cellular model allowing the study of the different signaling pathways in avery stable context and the study of a follicular stage otherwise not accessible in women, the work completed in this thesis allowed us to highlight and to specify the role of the proteinkinase C as a major mediator of the LH signaling action on granulosa cells differentiation and final follicular maturation. In depth study of the main signaling pathways involved inFSH and LH signaling, including the protein kinase B, suggested that PKA signaling may drive the early differentiation of granulosa cells while PKC is thought to potentially control the “advanced” granulosa cell differentiation, mediating pathways related to inflammation and ovulatory processes. The PKB pathway should be looked at as a permissive signaling pathway that supports cell survival as well as PKA and PKC signaling but that is certainly of no less importance. The results of chapter 4 also revealed the direct sensitivity of granulosacells to the metabolic context of the female during late folliculogenesis. Globally, when exposed to metabolic challenges such as high concentrations of fat and insulin, human granulosa cells seemed to respond through the modulation of numerous genes and pathways related to mitochondrial biofunctions, energy metabolism, and steroidogenesis and to activateas well a gene expression program linked to the immune response and to inflammatory processes. Ultimately, this thesis presents a first insight of the action of the main kinases involved in the response to gonadotrophin stimulation in human granulosa cells and an overview of the genomic reorganization in these cells triggered by metabolic challenges that are increasingin prevalence in the current population. Providing a great amount of data to potentially target new developmental or quality makers, this work also generates lots of new hypotheses on mechanisms involved in human folliculogenesis contributing to the improvement of our knowledge of human granulosa cells transcriptomic signatures and indirectly to the improvement of medically assisted reproduction techniques

Déterminants du recours au travail atypique : Une étude des travailleurs à statut précaire dans les organisations québécoises

Cette étude, réalisée auprès de 250 entreprises privées québécoises, a pour objectif d'identifier les facteurs qui permettent d'expliquer l'intensité du recours à des contrats atypiques, et d'une façon plus particulière, à des travailleurs à statut précaire. Trois catégories de déterminants ont été testées : les facteurs environnementaux, les facteurs internes reliés aux coûts de0501n-d'oeuvre et les facteurs internes reliés à la flexibilité organisationnelle. Les variables du modèle ont permis d'expliquer 19 % de la variance de l'intensité du recours au statut précaire. Les résultats de notre étude suggèrent que le recours à des travailleurs à statut précaire peut être expliqué davantage par des raisons liées aux coûts de0501n-d'oeuvre que par des motifs liés à la flexibilité organisationnelle ou à l'environnement concurrentiel.The purpose of this study was to examine the factors that influence the use of contingent wokers. More than 250 Canadian organizations participed to the survey. Three class of determinants have been tested: environmental factors, work-force costs factors, and organizational flexibility factors. The model explained 19% of variance in intensity of use of contingent workers. The results suggest that the strategy of externalization of work is motivated much more by cost control considerations, and less by the research of organizational flexibility or by the nature of competitive environment and the structure of ownership

Une étude exploratoire de cultures de négociation enracinées dans des pratiques syndicales et patronales de négociation en relations du travail : le cas des installations de la multinationale Alcan au Saguenay−Lac-Saint-Jean de 1937 à 2007

Dans le cadre d’une recherche doctorale en développement régional, cette thèse étudie le phénomène social du changement des pratiques patronales et syndicales de négociation des relations du travail. La discipline du développement régional est multidisciplinaire : économie, sciences sociales, sciences politiques, urbanisme, etc. Nous optons pour les fondements théoriques de la discipline du courant humaniste en développement organisationnel (DO) pour explorer une micro-initiative complexe de changements des cultures de négociation enracinées dans les pratiques syndicales et patronales de négociation d’enjeux en relations du travail vécues dans les installations de la multinationale Alcan au Saguenay−Lac-Saint-Jean de 1937 à 2007. L’objectif de notre recherche est de développer un modèle théorique provisoire de ces cultures. Le contexte conceptuel structurant notre recherche s’articule autour de trois concepts théoriques : stratégies de changement du courant humaniste en DO, évolution de la culture organisationnelle dans une entreprise et modèle de négociation en relations du travail. Pour cerner l’expérience de négociation vécue par des dirigeants syndicaux et patronaux sur une période de 70 ans, une démarche qualitative, inductive et partenariale guide l’itinéraire des différentes phases de recherche. Cette démarche s’inscrit dans le cadre épistémologique de la science-action, postulant que la véritable théorie est « la théorie d’usage » qui émerge des pratiques (Argyris, 2003; Tessier, 1996) de négociation chez Alcan. Une méthodologie praxéologique (Argyris, 2003, 1970; Argyris et Schön, 1999; Schön, 1994; St-Arnaud, 2003, 1999, 1992) est retenue puisqu’elle permet d’avoir un accès aux réflexions de négociateurs « sur » leurs pratiques de négociation. La méthode d’entretiens de dirigeants patronaux et syndicaux, captés en mode vidéo, est employée pour récolter ces réflexions « sur » leur pratique de négociation (données qualitatives de notre étude) d’enjeux, de problèmes et de conflits de relations du travail. La transcription écrite de ces entretiens a été transformée en récit autobiographique (Bertaux, 2005, 1980; Desmarais, 2016; Ferrarotti, 1980; Peneff, 1990) de pratiques de négociation des relations du travail. La méthodologie de la théorisation enracinée (MTE) dans la réalité d’une pratique (Glaser et Strauss, 2010, 1967; Luckerhoff et Guillemette, 2012; Prévost et Roy, 2015) nous sert de guide pour analyser et interpréter les réflexions (données empiriques) récoltées auprès de 12 dirigeants syndicaux et patronaux « sur » leurs pratiques de négociation. L’analyse de ces réflexions contenues dans des récits autobiographiques conduit aux premiers résultats de la recherche qui déclinent les valeurs, attitudes et comportements de négociation qui composent les cultures de négociation basées sur l’affrontement et sur la concertation. Elle permet d’identifier chez les négociateurs patronaux et syndicaux d’Alcan la présence d’une culture d’affrontement caractérisée par des valeurs de confrontation, de méfiance et de mépris. Elle mène également à l’identification d’une culture de concertation qui se manifeste par des processus d’apprentissage de principes et méthodes de la négociation raisonnée ou concertée valorisant la confiance réciproque, le respect mutuel, l’écoute attentive, la transparence, la collaboration et le leadership démocratique. Ces premiers résultats laissent entrevoir que la culture de concertation occupe une place prépondérante lors de périodes de négociation d’enjeux communs de relations du travail. La poursuite de l’analyse de nos réflexions de chercheuse et de celles des dirigeants patronaux et syndicaux, considérés comme des cochercheurs, apporte les deuxièmes résultats qui se traduisent par la présence d’une culture de concertation qui s’étend sur sept décennies de négociation de relations du travail dans les installations de la multinationale Alcan au Saguenay−Lac-Saint-Jean. Une première période (1937-1967), marquée par la naissance du Syndicat national des employés-es de l’aluminium d’Arvida (SNEAA), témoigne de racines d’une coopération syndicale-patronale. Une seconde période (1967-1980), empreinte de deux conflits majeurs de travail (1976 et 1979), évolue sous le signe d’une culture de confrontation qui laisse toutefois place à un fond de collaboration syndicale-patronale. L’intégration progressive des principes et d’une méthode de négociation raisonnée ou concertée, favorisant le dialogue et le processus de résolution de problèmes, imprègne la troisième période (1980-1998). La quatrième période (1998-2007) pérennise la culture de concertation qui conduit, en 1998, à la signature d’une entente de stabilité opérationnelle d’une durée de 18 ans (1998-2016). Ces quatre périodes témoignent de la naissance, de la croissance et de la maturité d’une culture de concertation chez Alcan. Le troisième résultat du processus de l’analyse des pratiques de négociation nous conduit à formuler quatre conclusions qui soutiennent un modèle théorique provisoire qui propose la prédominance d’une culture de négociation concertée enracinée dans des pratiques syndicales et patronales de négociation d’enjeux de relations du travail dans les installations Alcan au Saguenay−Lac-Saint-Jean

Improving The Effectiveness Of Human Resources Practices Through Transforming Care At The Bedside

In 2010, in an effort to increase patient involvement in decision-making about health care redesign, a Quebec university health care organization implemented the Transforming Care at the Bedside (TCAB). This article presents the results from a qualitative study exploring health professionals’ perceptions of TCAB and the effect on turnover and overtime. This descriptive, qualitative study utilized focus groups, individual interviews, and a review of administrative documents for data collection. Participants included hospital workers from five units implementing TCAB. The data generated by the interviews and focus groups were analyzed using NVivo with the method proposed by Miles and Huberman (1994). During the first year of implementation of TCAB, the team noted the importance of taking time to see the effects of the changes and thereby facilitate the involvement of other team members. A number of TCAB team members also cited communication as a facilitating element for informing team members of changes. According to the participants, the TCAB strategies that were implemented have had a positive impact on practice and on the work environment, and turnover showed an improvement. There was no change in absenteeism. TCAB has the potential to impact not only nurses’ work, but interprofessional team work as well, through changes that involve everyone. Future research should focus on how to support team members to reduce resistance to change and increase social support in order to implement and sustain changes.

Identification of functional microRNAs released through asymmetrical processing of HIV-1 TAR element†

The interaction between human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) and RNA silencing pathways is complex and multifaceted. Essential for efficient viral transcription and supporting Tat-mediated transactivation of viral gene expression, the trans-activation responsive (TAR) element is a structured RNA located at the 5′ end of all transcripts derived from HIV-1. Here, we report that this element is a source of microRNAs (miRNAs) in cultured HIV-1-infected cell lines and in HIV-1-infected human CD4+ T lymphocytes. Using primer extension and ribonuclease (RNase) protection assays, we delineated both strands of the TAR miRNA duplex deriving from a model HIV-1 transcript, namely miR-TAR-5p and miR-TAR-3p. In vitro RNase assays indicate that the lack of a free 3′ extremity at the base of TAR may contribute to its low processing reactivity in vivo. Both miR-TAR-5p and miR-TAR-3p down-regulated TAR miRNA sensor activity in a process that required an integral miRNA-guided RNA silencing machinery. miR-TAR-3p exerted superior gene downregulatory effects, probably due to its preferential release from HIV-1 TAR RNA by the RNase III Dicer. Our study suggests that the TAR element of HIV-1 transcripts releases functionally competent miRNAs upon asymmetrical processing by Dicer, thereby providing novel insights into viral miRNA biogenesis

High-fat diets and seizure control in myoclonic-astatic epilepsy: A single center's experience

AbstractPurposeTo determine the efficacy of the Modified Atkins Diet (MAD) and Ketogenic Diet (KD) in seizure control within a population of myoclonic-astatic epilepsy (MAE) patients.MethodsThis was a retrospective, single center study evaluating the seizure control by high fat diets. Seizure diaries kept by the parents performed seizure counts. All patients met the clinical criteria for MAE.ResultsNine patients met the clinical criteria. We found that both the MAD and KD were efficacious in complete seizure control and allowed other medications to be stopped in seven patients. Two patients had greater than 90% seizure control without medications, one on the KD and the other on the MAD. Seizure freedom has ranged from 13 to 36 months, and during this time four patients have been fully weaned off of diet management. One patient was found to have a mutation in SLC2A1.ConclusionOur results suggest that strictly defined MAE patients respond to the MAD with prolonged seizure control. Some patients may require the KD for seizure freedom, suggesting a common pathway of increased requirement for fats. Once controlled, those fully responsive to the Diet(s) could be weaned off traditional seizure medications and in many, subsequently off the MAD or KD

Increased Transnational Sea Ice Transport Between Neighboring Arctic States in the 21st Century

The Arctic is undergoing a rapid transition toward a seasonal ice regime, with widespread implications for the polar ecosystem, human activities, as well as the global climate. Here we focus on how the changing ice cover impacts transborder exchange of sea ice between the exclusive economic zones of the Arctic states. We use the Sea Ice Tracking Utility, which follows ice floes from formation to melt, in conjunction with output diagnostics from two ensembles of the Community Earth System Model that follow different future emissions scenarios. The Community Earth System Model projects that by midcentury, transnational ice exchange will more than triple, with the largest increase in the amount of transnational ice originating from Russia and the Central Arctic. However, long‐distance ice transport pathways are predicted to diminish in favor of ice exchanged between neighboring countries. By the end of the 21st century, we see a large difference between the two future emissions scenarios considered: Consistent nearly ice‐free summers under the high emissions scenario act to reduce the total fraction of transnational ice exchange compared to midcentury, whereas the low emissions scenario continues to see an increase in the proportion of transnational ice. Under both scenarios, transit times are predicted to decrease to less than 2 yr by 2100, compared to a maximum of 6 yr under present‐day conditions and 2.5 yr by midcentury. These significant changes in ice exchange and transit time raise important concerns regarding risks associated with ice‐rafted contaminants.</p