Efecto de diferentes factores de crecimiento recombinantes sobre un modelo "in vitro" de cicatrización del estroma corneal humano

Esta tesis muestra el desarrollo de un modelo de herida del estroma corneal humano y su respuesta a tres factores de crecimiento implicados en el proceso de cicatrización corneal (TGFβ1, PDGF-BB y bFGF). El modelo mimetiza los procesos que tienen lugar durante la cicatrización. El bFGF es secretado en tiempos tempranos, acelera el cierre por proliferación, inhibe la diferenciación miofibroblástica y promueve la síntesis de una matriz reparadora. El TGFβ1 se secreta tardíamente, induce una proliferación lenta, una diferenciación miofibroblástica significativa, y un descenso de la migración, estimulando la síntesis de una matriz fibrótica. El PDGF-BB induce un cierre rápido por proliferación y migración, un nivel bajo de miofibroblastos y síntesis de una matriz reparadora. Este modelo es viable para estudiar los eventos que tienen lugar durante el proceso de reparación del estroma y es de gran utilidad para testar nuevos tratamientos dirigidos a mejorar el proceso de cicatrización corneal.Departamento de Biología Celular, Histología y Farmacologí

PID_20_21_053_Anexo 1

Anexo 1 del PID_20_21_053Biología Celular, Histología y Farmacologí

Modelo "In vitro" de cicatrización del estroma corneal humano

Introducción. Durante el proceso de cicatrización, se ponen en marcha muchos sistemas de señalización en los que intervienen diferentes factores de crecimiento (GFs). Objetivo. El objetivo de este trabajo fue determinar cómo los diferentes GFs actúan durante el proceso de reparación estromal in vitro. Métodos. Se evaluó el efecto del TGFβ1, del bFGF y del PDGF-BB sobre la proliferación, migración y diferenciación de queratocitos humanos. Resultados. El PDGF-BB estimuló los niveles más altos de proliferación y la herida se cerró a los 10 días. Con TGFβ1 y bFGF se observó un efecto similar sobre la proliferación, sin embargo, el tiempo de cierre fue diferente. Con ambos GFs, la proliferación fue lenta y gradual. Con PDGF-BB y bFGF el cierre tuvo lugar a la vez. Con el TGFβ1 no tuvo lugar. Tanto el PDGF-BB como el bFGF estimularon la diferenciación hacia fibroblastos mientras que el TGFβ1 estimuló la diferenciación hacia miofibroblastos. Conclusiones. Cada GF actuó de diferente manera sobre los procesos de proliferación, migración y diferenciación durante el proceso de cierre de la herida.Departamento de Biología Celular, Histología y FarmacologíaMáster en Investigación en Ciencias de la Salu

Repercusión de la evaluación mediante la realización de cuestionarios frecuentes en el aprendizaje de la asignatura Biología del grado de Óptica y Optometría: análisis comparativo de métodos y resultados

Innovación EducativaEl objetivo principal de este proyecto fue analizar si la implantación de la evaluación continua mediante la resolución de cuestionarios frecuentes facilita y ayuda a la comprensión de la materia por los alumnos a lo largo del curso. En este proyecto se ha analizado la repercusión de los resultados obtenidos por los alumnos de la asignatura Biología del grado de Óptica y Optometría evaluados mediante la resolución de cuestionarios frecuentes y se han comparado con los obtenidos por alumnos evaluados mediante el método clásico de un único examen final. La calificación fue significativamente mayor en los cursos en los que los alumnos fueron evaluados mediante cuestionarios frecuentes, sin existir diferencias entre los cursos evaluados mediante esta nueva metodología. El efecto del curso sólo fue significativo en la convocatoria de junio, en las calificaciones de julio no hubo diferencias entre cursos. También se ha podido concluir que el patrón entre hombres y mujeres fue similar, con mejores calificaciones en junio de los cursos evaluados mediante la realización de cuestionarios frecuentes, y sin diferencias en segunda convocatoria. Del análisis realizado se concluye por tanto que el nuevo método ha tenido efecto positivo mejorando las calificaciones, pero sólo en primera convocatoria (junio).Departamento de Biología Celular, Histología y Farmacologíaproyecto, innovación, docente, evaluación continua, cuestionarios frecuentes, aprendizaj

Repercusión de la evaluación mediante la realización de cuestionarios frecuentes en el aprendizaje de la asignatura Biología del grado de Óptica y Optometría: análisis comparativo de métodos y resultados

Innovación EducativaEl objetivo principal de este proyecto fue analizar si la implantación de la evaluación continua mediante la resolución de cuestionarios frecuentes facilita y ayuda a la comprensión de la materia por los alumnos a lo largo del curso. En este proyecto se ha analizado la repercusión de los resultados obtenidos por los alumnos de la asignatura Biología del grado de Óptica y Optometría evaluados mediante la resolución de cuestionarios frecuentes y se han comparado con los obtenidos por alumnos evaluados mediante el método clásico de un único examen final. La calificación fue significativamente mayor en los cursos en los que los alumnos fueron evaluados mediante cuestionarios frecuentes, sin existir diferencias entre los cursos evaluados mediante esta nueva metodología. El efecto del curso sólo fue significativo en la convocatoria de junio, en las calificaciones de julio no hubo diferencias entre cursos. También se ha podido concluir que el patrón entre hombres y mujeres fue similar, con mejores calificaciones en junio de los cursos evaluados mediante la realización de cuestionarios frecuentes, y sin diferencias en segunda convocatoria. Del análisis realizado se concluye por tanto que el nuevo método ha tenido efecto positivo mejorando las calificaciones, pero sólo en primera convocatoria (junio).Departamento de Biología Celular, Histología y Farmacologíaproyecto, innovación, docente, evaluación continua, cuestionarios frecuentes, aprendizaj

Clinical, Refractive and Histological Reversibility of Corneal Additive Surgery in Deep Stroma in an Animal Model.

Producción CientíficaThe aim was to evaluate the reversibility of the clinical and histological changes induced in the corneas of an animal model after removing an intracorneal ring segment (ICRS).Surgery for this study was performed in 38 eyes of an experimental animal model (Gallus domesticus) for ICRS surgery (Ferrara technique). The animals without complications were randomized to two groups; in all of them, 1 segment was implanted in each eye and later removed at different times (1 and 3 months after implantation). In each group, after explantation, corneas were processed at different times for histological analysis with hematoxylin and eosin (H&E) stain and electronic microscopy. The refractive state of the eyes was also measured.In corneas without complications (88.23%), explantation was performed correctly. During the first few days, around the area where the ICRS was implanted we observed deposits of cells and a moderate degree of corneal opacity (haze). These signs decreased progressively without disappearing completely. Histologically, at 7 days, we observed hyperplasia and abnormal arrangement of collagen fibers. Later, these findings also decreased in both groups, albeit at a faster rate in group 1. Minimal changes were observed in electron microscopy up to the end of the study in both groups. Preoperative refractive state was achieved at 1 month after explantation in both groups.ICRS can safely be explanted from the cornea. Refractive reversibility was achieved at 1 month after explantation. However, the clinical and histological findings after ICRS explantation depend on the time from implantation to explantation

Scleral changes induced by atropine in chicks as an experimental model of myopia

Producción CientíficaPurpose: To determine the effects of intravitreal atropine on scleral growth in the form-deprived chick as an experimental model of myopia. Methods: Five groups of five chicks were studied from day 0–12 post-hatching. One group remained untreated (C), and four were form-deprived by monocular light diffusers to induce myopia. Two groups (RL and A) wore diffusers for 9 days, and the other two groups (D and D + A) wore diffusers throughout the study. Group D received no further treatment (myopia positive control). Groups A and D + A received intravitreal injections of atropine for days 9–12. Measurements of refractive error and axial length were performed on days 0, 9, and 12. Sclera changes were assessed in cartilaginous and fibrous layers by histological analysis. Results: All form-deprived eyes had a myopic refractive error on day 9. All atropine- treated groups were hyperopic on day 12. The effect of atropine was most evident in Group D + A in which diffusers were maintained throughout treatment and changes in refractive error were statistically significant. The observed changes in axial length were in line with the changes in refractive error. The scleral fibrous layer thickness increased, and the sceral cartilaginous layer underwent a slight thinning compared to Group D, the myopia positive control. Conclusions: If the signals that induce growth remain during atropine treatment, morphological changes in sclera are produced: the scleral fibrous layer thickened, and the sceral cartilaginous layer thinned. These changes resulted in refractive error recovery, and the ocular growth was stopped. The data suggested the atropine was acting throughout the scleral fibrous layer.2015-09-2

Differential expression and localization of transient receptor potential vanilloid 1 in rabbit and human eyes

Producción CientíficaSummary. Introduction: The superfamily of transient receptor potential (TRP) cation channels is involved in nociception. Members of this family, such as the vanilloid receptor type 1 (TRPV1) channel, are activated by a wide range of stimuli including heat (>43°C), low pH (<6.5), hypoxia, and hypertonicity. Here we report TRPV1 expression in rabbit and human eyes. Material and methods: We analyzed the expression of TRPV1 mRNA by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (qRT-PCR) and protein by immunohistochemistry in eyes of New Zealand White rabbits and humans. Results: In rabbit and human eyes, TRPV1 protein was present in all layers of the corneal epithelium, but only in the basal layer of the conjunctiva. It was also in the ciliary and lens epithelia of both species as well as in the secretory cells of the rabbit lacrimal gland. The retinal pigment epithelium was positive for this protein in both species. TRPV1 was also present in rabbit Müller cells, where it had a similar pattern of expression to vimentin intermediate filaments. Analysis by qRT-PCR showed that TRPV1 mRNA was found in all of the structures where the protein was present. The highest level was in the lens and the lowest in the retina. Conclusion: TRPV1 is expressed in cells that are particularly active in Ca2+ exchange as well as in cells with significant water transport activity. Because TRPV1 is a Ca2+ channel, it probably functions in the regulation of both water and Ca2+ movements in ocular tissues

Dynamic changes of the extracellular matrix during corneal wound healing

Producción CientíficaThe extracellular matrix (ECM) confers transparency to the cornea because of the precise organization of collagen fibrils and a wide variety of proteoglycans. We monitored the corneal wound healing process after alkali burns in rabbits. We analyzed the location and expression of collagens and proteoglycans, the clinical impact, and the recovery of optical transparency. After the animals received both general and ocular topical anesthesia, the central cornea of the left eye was burned by placing an 8-mm diameter filter paper soaked in 0.5 N NaOH for 60 s. The eyes were evaluated under a surgical microscope at 1, 3, and 6 months after burning. At each time point, the clinical conditions of the burned and control corneas were observed. The arrangement of collagen fibers in the corneal stroma was visualized by Picrosirius-red staining, Gomori's silver impregnation and transmission electronic microscopy. Corneal light transmittance was also measured. Myofibroblasts presence was analyzed by immunohistochemistry. mRNA expression levels of collagen types I and III, lumican, decorin, keratocan and alpha-smooth muscle actin were determined by quantitative real-time polymerase chain reaction. One month after alkali burn, the ECM was disorganized and filled with lacunae containing different types of cells and collagen type III fibers in the wound area. Corneal opacities were present with attendant loss of light transmittance. Collagen and proteoglycan mRNA expression levels were up-regulated. After three months, wound healing progress was indicated by reduced corneal opacity, increased light transmittance, reorganization of collagen fibers and only collagen type I expression levels were at control levels. After six months, the wound area ECM morphology was similar to controls, but transmittance values remained low, denoting incomplete restoration of the stromal architecture. This multidisciplinary study of the stromal wound healing process revealed changes in corneal transmittance, collagen organization, myofibroblasts presence and ECM composition at 1, 3, and 6 months after alkali burning. Documenting wound resolution during the six-month period provided reliable information that can be used to test new therapies.Instituto de Salud Carlos III (Health Research Fund PI15/01906 )Ministerio de Economía, Industria y Competitividad ( project BFU2016-75360-R)Junta de Castilla y León (Project VA114P17

Factores familiares que intervienen en las relaciones interpersonales de la primera infancia pertenecientes al Centro de Desarrollo Infantil los lagos del mundo municipio de Rionegro.

A continuación se identifican los aspectos que inciden en los comportamientos de los niños del Centro de Desarrollo Infantil Los Lagos, con el fin de intervenir y orientar a las familias hacia el mejoramiento de la calidad de vida