1,332 research outputs found

    Crime, violência e insegurança na população jovem e sénior – um estudo exploratório no Concelho de Cabeceiras de Basto

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    A insegurança surge associada a um clima generalizado de ansiedade relacionada com o processo de mudanças sociais que carateriza a sociedade moderna e de que o aumento da criminalidade é uma das consequências mais visíveis (Lourenço, 2004). Este estudo tem como principal objetivo explorar os sentimentos de insegurança e medo gerados pelo fenómeno do crime e da violência nos indivíduos em meio rural em função da idade.CIEC - Centro de Investigação em Estudos da Criança, IE, UMinho (UI 317 da FCT

    Seleção de péptidos específicos para células do cancro do colon através do uso de bibliotecas de péptidos expressas na superfície de fagos

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    Dissertação de mestrado integrado em Engenharia Biológica (área de especialização em Tecnologia Química e Alimentar)Colorectal cancer (CRC), localized to the large intestine and rectum, is the third most commonly diagnosed cancer and the second leading cause of cancer death. At the molecular level, CRC is a heterogeneous disease. This heterogeneity, currently not covered by available screening tests, translates into differences in the disease progression and also in the response to chemotherapeutic agents which proves that there is an undeniable need for improved diagnostic and screening tools capable of distinguish cancer at a molecular level. The main goal of this thesis was the development of a multifunctional phage-based nanoparticle to detect and report the presence of cancer cells on a given sample through the use of a biosensor. Particularly, M13KE phage particle was genetically modified to accomplish a recombinant product capable of recognizing poorly differentiated colon cancer cells (RKO cell line) and report their presence using bioluminescence. The element of this particle that allowed targeting RKO cells was obtained using phage-displayed random peptide libraries to screen the surface of these cells towards the identification of biomarkers (i.e. membrane proteins) and specific peptide ligands. For that purpose, two types of random peptide libraries (presenting seven linear peptides - Ph.D. 7 and twelve linear peptides - Ph.D. 12) were cloned into the genome of the M13KE filamentous phage. Constructed libraries and a commercial one (Ph.D. C7CTM from New England Biolabs®) were used to perform two methodologies of phage display and biopanning in order to find specific peptide ligands with affinity to RKO cells. The affinity of the phage pools obtained through biopanning was assessed using ELISA methodology. As a result of these experiments, a new specific peptide, CIGNSNTLC, with high affinity towards RKO cells was discovered. In order to confer to the phage the ability to produce a bioluminescent signal, the insertion of NanoLucTM gene into the M13KE genome was also attempted, at the 5’ end of gene VIII in order to obtain 2700 copies of NanoLucTM luciferase coupled to pVIII M13KE major coat protein. The presence of this enzyme on the phage would function as a reporter of the presence of a specific biomarker on a given sample and the amount of signal could be related to the amount of that biomarker. In summary, the results herein gathered highlight that phage display is a powerful tool to find new peptide ligands capable of targeting cancer cells. In addition, the construction of a phage particle capable of recognizing and report the presence of biomarkers on a given sample will be a major advance on the use of biosensors for cancer diagnosis.O cancro colorectal, localizado no intestino grosso e no recto, é o terceiro cancro mais diagnosticado e a segunda causa de morte relacionada com doenças oncológicas. O cancro colorectal é uma doença muito heterogénea a nível molecular. Esta heterogeneidade que se traduz em diferenças na progressão da doença e na resposta dos pacientes aos agentes quimioterápicos, não é, atualmente, abrangida pelos testes diagnósticos usados o que prova, inegavelmente, que há uma necessidade de encontrar métodos de diagnóstico mais eficazes e capazes de distinguir esta doença ao nível molecular. O objetivo principal desta tese foi o desenvolvimento de uma nanopartícula fágica multifuncional para detetar e reportar a presença de células cancerígenas numa dada amostra, através do uso de um biossensor. Em particular, foi planeada a modificação do fago M13KE para obter um produto recombinante capaz de reconhecer células pouco diferenciadas do cancro do colon (de uma linhagem celular denominada RKO), e reportar a sua presença através de bioluminescência. O elemento desta partícula fágica que possibilita o reconhecimento das células RKO foi obtido usando bibliotecas de fagos acopladas à cápside da partícula fágica para rastrear a superfície celular destas células e identificar biomarcadores (proteínas membranares) e ligandos específicos. Com esse objetivo, dois tipos de bibliotecas fágicas (com uma sequência peptídica linear de 7 peptidos – Ph.D. 7, e de 12 péptidos – Ph.D. 12) foram geneticamente construídas usando o fago filamentoso M13KE. As bibliotecas construídas, em conjunto com uma terceira biblioteca comercial (Ph.D. C7CTM da New England Biolabs®) foram usadas para proceder a duas metodologias de phage display e biopanning para encontrar ligandos peptídicos específicos com afinidade para as células RKO. A afinidade dos complexos fágicos obtidos através dos ensaios de biopanning foi avaliada através de ensaios de ELISA. Como resultado das atividades experimentais apresentadas descobriu-se uma nova sequência peptídica, CIGNSNTLC, com grande afinidade para as células RKO. Com o objetivo de conferir a capacidade de produzir um sinal luminescente ao fago, tentou-se inserir o gene NanoLucTM no vetor M13KE por forma a conseguir o acoplamento da NanoLuc® luciferase às 2700 cópias da proteína VIII da cápside do fago. Em suma, os resultados desta tese evidenciaram que o phage display é uma ferramenta poderosa para encontrar novos ligandos capazes de reconhecer células cancerígenas. Adicionalmente, a construção de uma partícula fágica capaz de reconhecer e reportar a presença de biomarcadores numa dada amostra será um grande avanço no uso de biosensores para o diagnóstico de cancro

    Epifluorescence microscope methods for bacterial enumeration in a 4-chlorophenol degrading consortium

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    Epifluorescence microscope methods, namely BacLight, direct epifluorescence filter technique and Rhodamine 123, consistently underestimated plate bacterial counts in a 4-chlorophenol degrading consortium. Cells capable of passing through 0.2 mgrm filters, referred as `ultramicrocells', were found. Although cell counts were higher when traditional methods were used, BacLight and direct epifluorescence filter technique were convenient techniques for the systematic monitoring of bacteria involved in biodegradation processes, as results were consistent and available within a short time

    Comentários gráficos sobre os desenhos de Paulo Mendes da Rocha

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    Partindo-se do pressuposto de que o desenho é instrumento de diálogo entre o arquiteto e ele mesmo ou com terceiros e que este tipo de representação vem perdendo espaço para tecnologias digitais, este trabalho tem como objetivo estudar e analisar desenhos de projetos selecionados do arquiteto Paulo Mendes da Rocha, como contribuição para a discussão sobre o papel do desenho analógico no processo projetivo atual. O estudo acerca de quatro projetos (Ginásio do Clube Paulistano, Residência Butantã, Residência Millan e MuBE) se deu através de marcações realizadas pela pesquisadora sobre desenhos originais do arquiteto, com o objetivo de detectar intenções projetuais, conceitos e características dos projetos. Para tanto, foram feitas marcações gráficas sobre os desenhos originais, de maneira a evidenciar uma leitura particular da pesquisadora, permitindo assim uma melhor compreensão dos projetos escolhidos para o estudo. O desenho sobre o desenho marca os pontos que o julgamento considera importantes, tratando-se de uma leitura particular e permitindo melhor compreensão dos projetos para quem o pratica, uma vez que o ato de desenhar está estreitamente relacionado ao de pensar. Optou-se por apresentar as imagens relacionadas a citações diretas de autoresThe drawing is an instrument of dialogue between the architect and himself or others, but this type of representation has been losing ground to digital technologies. This research aims to study and analyze drawings of Paulo Mendes da Rocha’s architecture projects, as a contribution to the discussion on the role of analogical drawing on current projective process. The study on four projects (Clube Paulistano Gym, Butantã residence, Millan residence and MuBE) was made through markings performed by the researcher on architect's original drawings, with the objective to detect projectual intentions, concepts and project characteristics. For this purpose, graphic markings were made on the original drawings, in order to show a researcher’s particular reading, allowing a better understanding of the projects chosen as a case of study. The drawing over the drawing indicates the points that judgment considers important, being a particular reading and allowing better understanding of projects for those who practice it, because the act of drawing is closely related to thinking. It was chosen display the images related to direct quotes from authors on the subject, in order to maintain textual fidelity of comments.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paul

    The subjectivity of the Werewolf (São Bernardo)

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    O ensaio concentra-se na análise da trajetória social de Paulo Honório, narrador-protagonista de São Bernardo, e busca interpretar o sentido da conjunção entre lirismo, dinheiro e melancolia no livro.This essay focuses on the analysis of the social course of the narrator-protagonist of São Bernardo, seeking to grasp the sense of the conjunction between lyricism, money and melancholy in the book

    Bars and boxes

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    A seção Criação tem por objetivo publicar textos e materiais inéditos de escritores e/ou artistas, fotógrafos, desenhistas, além de documentos inéditos encontrados no Arquivo do IEB/USP. “Grades e caixas”, de Ana Paula Pacheco, reúne dois contos sobre o feminino. Pacheco é escritora e professora de Teoria Literária e Literatura Comparada na Universidade de São Paulo. “Pedaços de sonho, seguidos de considerações tecidas pelo Urso siberiano” se beneficia de estudos de Freud (1972), e de narrativas de Schnitzler (1987; 2008) e de Nastassja Martin (2021). “Pandora, a barata” incorpora livremente estudos de Erwin e Dora Panofsky (2009).The Creation section has the objective of publish unpublished texts and materials by writers and/or artists, photographers, designers, as well as unpublished documents found in the USP IEB Archive. “Bars and boxes”, by Ana Paula Pacheco, gathers two tales about the feminine. Pacheco is writer and professor of Literary Theory and Comparative Literature in the Sao Paulo University. “Pedaços de sonho, seguidos de considerações tecidas pelo Urso siberiano” benefits from the studies by Freud (1972), Schnitzler (1987; 2008) and Nastassja Martin (2021). In addition, “Pandora, a barata” freely incorporates the studies by Erwin and Dora Panofsky (2009). &nbsp

    Astúcia de classe: "Famigerado", de Guimarães Rosa, e o lugar do escritor

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    No quadro social imaginado por Grande sertão: veredas, jagunços heróicos e bandidos do sertão dividem o Bem e o Mal, sobre o panode-fundo da Primeira República. Em Primeiras estórias, de outro modo, a nova matéria histórica, remetendo ao quadro da modernização brasileira nos anos J.K., parece colocarem xeque a estetização literária. O ex-jagunço é agora um “homem livre pobre”. No duelo -- apenas verbal -- entre sertão e cidade, o lugar de classe do escritor vem à tona

    The peasant and the prosecutor of the poor: Barren Lives

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    The experimental character in Graciliano Ramos’ novel, Barren Lives, allows the apprehension of the social fracture considering the contradictions between the narrator-intellectual and the stream of consciousness of a peasant family, driven away by the drought. Labor itself comes to the fore, in a context in which the local oligarchies see their own downfall (the coffee crises of 1929), a patriarchal national-populism arises (the Getulio Vargas’ era), and a critical imagination takes place.O ensaio busca iluminar o caráter experimental do romance Vidas Secas, de Graciliano Ramos, o qual permite a apreensão da fratura social brasileira a partir das contradições entre o narrador-intelectual e a representação da consciência de uma família de retirantes empurrada pela seca. Num contexto de queda das oligarquias (a crise do café de 1929), de populismo nacional-patriarcalista (a era Vargas) e de imaginação crítica, as relações de trabalho vêm ao procênio, funcionando como princípio formal do livro

    Cidade-cárcere: violência e representação das classes baixas na literatura brasileira contemporânea

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    O ensaio tem por objeto de reflexão parte da literatura contemporânea brasileira, dentro do campo específico rotulado como “marginal”, indagando suas bases em nossa tradição histórico-literária e os sentidos daquilo que a crítica avessa a essa produção nomeia como “neodocumentalismo”. A hipótese a testar é de que, em seus melhores momentos, haja continuidade da herança modernista, com significativa diferença de tom e horizonte político. Centralmente, busca-se comparar os modos de figuração das vozes das camadas baixas na literatura brasileira de hoje com aqueles presentes em obras do primeiro Modernismo. Por fim, questiona-se o sentido da emersão literária dessas vozes das classes baixas no cenário do capitalismo avançado
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