Sucrose Nonfermenting-Related Kinase Enzyme-Mediated Rho-Associated Kinase Signaling is Responsible for Cardiac Function.

BACKGROUND: Cardiac metabolism is critical for the functioning of the heart, and disturbance in this homeostasis is likely to influence cardiac disorders or cardiomyopathy. Our laboratory has previously shown that SNRK (sucrose nonfermenting related kinase) enzyme, which belongs to the AMPK (adenosine monophosphate-activated kinase) family, was essential for cardiac metabolism in mammals. Snrk global homozygous knockout (KO) mice die at postnatal day 0, and conditional deletion of Snrk in cardiomyocytes (Snrk cmcKO) leads to cardiac failure and death by 8 to 10 months. METHODS AND RESULTS: We performed additional cardiac functional studies using echocardiography and identified further cardiac functional deficits in Snrk cmcKO mice. Nuclear magnetic resonance-based metabolomics analysis identified key metabolic pathway deficits in SNRK knockdown cardiomyocytes in vitro. Specifically, metabolites involved in lipid metabolism and oxidative phosphorylation are altered, and perturbations in these pathways can result in cardiac function deficits and heart failure. A phosphopeptide-based proteomic screen identified ROCK (Rho-associated kinase) as a putative substrate for SNRK, and mass spec-based fragment analysis confirmed key amino acid residues on ROCK that are phosphorylated by SNRK. Western blot analysis on heart lysates from Snrk cmcKO adult mice and SNRK knockdown cardiomyocytes showed increased ROCK activity. In addition, in vivo inhibition of ROCK partially rescued the in vivo Snrk cmcKO cardiac function deficits. CONCLUSIONS: Collectively, our data suggest that SNRK in cardiomyocytes is responsible for maintaining cardiac metabolic homeostasis, which is mediated in part by ROCK, and alteration of this homeostasis influences cardiac function in the adult heart

Effects of methyl donor deficiency on mitochondrial energy metabolism of myocardial and hepatic tissues during pregnancy and lactation in the rat pup

Au cours du développement, les modifications du métabolisme des monocarbones liées à une malnutrition peuvent être délétères autant pour la mère que pour le nouveau-né. De plus, les conséquences à long terme d'une carence en période gestationnelle et périnatale sont mal connues, notamment en ce qui concerne les pathologies cardiaques et hépatiques. Nous avons mis en oeuvre un modèle nutritionnel de rates adultes carencées en donneurs de groupements méthyles (vitamines B12, folates et choline) avant la gestation. Ces micronutriments participent à la régulation de différentes enzymes impliquées dans le métabolisme de l'homocystéine. Afin de se placer dans un contexte de physiopathologie, proche de la situation clinique évaluée, nous avons choisi d'alimenter les rates avec un régime carencé un mois avant la mise en accouplement et de poursuivre ce régime pendant la période d'allaitement. Nous avons évalué les répercussions métaboliques et fonctionnelles du régime sur les tissus myocardique et hépatique, chez le nouveau né à 21 jours. Nous avons étudié l'effet de cette carence en groupements méthyles sur le métabolisme énergétique lipidique et sur la carnitine. Conséquences de la carence au niveau myocardique : Le régime carencé en donneurs de méthyles induit une hypertrophie cardiaque avec une augmentation de l'épaisseur du myocarde et un agrandissement des cardiomyocytes. L'étude protéomique du myocarde et l'analyse des données par bioinformatique identifient PGC-1[alpha], PPAR[alpha] et ERR[alpha] comme principaux déterminants des variations d'expression des protéines du métabolisme oxydatif mitochondrial. Nous avons observé une diminution d'expression de PPAR[alpha] et ERR[alpha] et une inactivation de PGC1[alpha] par hypométhylation et hyperacétylation, en lien avec une diminution d'expression de PRMT1 et de SIRT1 et une augmentation de SAH. Conséquences de la carence au niveau du foie : La carence s'accompagne de l'apparition d'une stéatose hépatique microvésiculaire, avec une élévation des taux tissulaires de lipides et de triglycérides. De plus, nous avons observé une augmentation des marqueurs pro inflammatoires sans augmentation des marqueurs de fibrose. A cet égard, nos résultats ont montré qu'un déficit de synthèse de carnitine, impliquée dans la bêta-oxydation et le stockage des acides gras, jouerait un rôle déterminant dans la pathogenèse de la stéatose chez le nouveau-né. Il existe également une dérégulation du métabolisme oxydatif des acides gras, avec diminution d'activité des complexes I et II de la chaîne respiratoire, qui résulte d'une hypométhylation de PGC1 et d'une diminution d'expression de PPAR[alpha], ER[alpha] et ERR[alpha]. En conclusion, nos résultats montrent que la carence maternelle en donneurs de méthyles, induit des modifications sur la fonction de PGC-1[alpha]. Ces modifications sont associées à des altérations de l'oxydation des acides gras et sur la fonction mitochondriale pendant la période néonatale, ce qui entraîne l'accumulation de lipides dans les tissus myocardique et hépatique. Le lien entre la carence en donneurs de méthyles et l'altération de la méthylation de PGC-1[alpha] modifie les activités des enzymes impliquées dans la méthylation et l'acétylation de PGC-1. Ces enzymes sont aussi liées à des modifications épigénomiques qui modulent la fonction et l'expression des protéines. Nos résultats sont en accord avec les études de population de Barker et al, qui suggèrent que la nutrition maternelle pendant les étapes précoces de la vie est corrélée avec le risque de maladies cardio-vasculaires dans la vie adulte indépendamment des autres facteurs de risqueDuring development, changes in carbon metabolism related to malnutrition may be deleterious for both the mother and the newborn. In addition, long-term consequences of a methyl deficiency gestational and prenatal are poorly understood. We are particularly interested in studying these effects on the heart and liver. We have used a nutritional model of adult rats deficient in methyl donors (vitamin B12, folate and choline) before pregnancy. To be placed in a context of pathophysiology, close to the clinical situation, we chose to feed the rats with a methyl deficient diet one month before mating and continue this diet during the suckling period. We evaluated the metabolic and functional effects of this diet on myocardial and hepatic tissues, in the newborn pups in 21 days old. We studied the effects of methyl deficient diet on lipid and energy metabolism and carnitine. Consequences of the deficiency at the myocardial: The diet deficient in methyl donors induces cardiac hypertrophy with an increase in myocardial thickness and enlargement of cardiomyocytes. The proteomics analysis of the bioinformatics data identifies PGC-1[alpha], ERR[alpha] and PPAR[alpha] as major determinants of changes in protein expression of mitochondrial oxidative metabolism. We observed a decreased expression of PPAR[alpha] and ERR[alpha] and an inactivation of PGC1[alpha] by hypomethylation and hyperacetylation, in conjunction with a decrease in the expression of PRMT1 and SIRT1 and increased the level of SAH. Consequences of the deficiency at liver: Deficiency is accompanied by the appearance of microvesicular hepatic steatosis, with elevated tissue levels of lipids and triglycerides. Increase of inflammation was observed in this model with no changes in fibrosis score. In this respect, our results showed a deficiency of carnitine synthesis, involved in the beta-oxidation and storage of fatty acids, play a role in the pathogenesis of hepatic steatosis in the newborn. There is also a deregulation of the oxidative metabolism of fatty acids, with decreased activity of complex I and II of the respiratory chain, resulting in hypomethylation of PGC1 and decreased expression of PPAR[alpha], ER[alpha] and ERR[alpha]. In conclusion, our results show that maternal deprivation in methyl donors impaired the function of PGC-1[alpha]. These changes are associated with alterations in fatty acid oxidation and mitochondrial function during the neonatal period, with lipid accumulation in myocardial tissue and liver. The link between the methyl donor deficiency and impaired methylation of PGC-1[alpha] alters the activities of enzymes involved in methylation and acetylation of PGC-1[alpha]. These enzymes are also associated with epigenetic changes and the function and gene expression. Our results are consistent with population studies by Barker and colleagues, who suggest that maternal nutrition during early stages of life is correlated with the risk of cardiovascular disease in adult, independent of other risk factor

Effets sur le métabolisme énergétique mitochondrial myocardique et hépatique de la carence en donneurs de méthyles au cours de la gestation et de l'allaitement chez le raton

During development, changes in carbon metabolism related to malnutrition may be deleterious for both the mother and the newborn. In addition, long-term consequences of a methyl deficiency gestational and prenatal are poorly understood. We are particularly interested in studying these effects on the heart and liver. We have used a nutritional model of adult rats deficient in methyl donors (vitamin B12, folate and choline) before pregnancy. To be placed in a context of pathophysiology, close to the clinical situation, we chose to feed the rats with a methyl deficient diet one month before mating and continue this diet during the suckling period. We evaluated the metabolic and functional effects of this diet on myocardial and hepatic tissues, in the newborn pups in 21 days old. We studied the effects of methyl deficient diet on lipid and energy metabolism and carnitine. Consequences of the deficiency at the myocardial: The diet deficient in methyl donors induces cardiac hypertrophy with an increase in myocardial thickness and enlargement of cardiomyocytes. The proteomics analysis of the bioinformatics data identifies PGC-1[alpha], ERR[alpha] and PPAR[alpha] as major determinants of changes in protein expression of mitochondrial oxidative metabolism. We observed a decreased expression of PPAR[alpha] and ERR[alpha] and an inactivation of PGC1[alpha] by hypomethylation and hyperacetylation, in conjunction with a decrease in the expression of PRMT1 and SIRT1 and increased the level of SAH. Consequences of the deficiency at liver: Deficiency is accompanied by the appearance of microvesicular hepatic steatosis, with elevated tissue levels of lipids and triglycerides. Increase of inflammation was observed in this model with no changes in fibrosis score. In this respect, our results showed a deficiency of carnitine synthesis, involved in the beta-oxidation and storage of fatty acids, play a role in the pathogenesis of hepatic steatosis in the newborn. There is also a deregulation of the oxidative metabolism of fatty acids, with decreased activity of complex I and II of the respiratory chain, resulting in hypomethylation of PGC1 and decreased expression of PPAR[alpha], ER[alpha] and ERR[alpha]. In conclusion, our results show that maternal deprivation in methyl donors impaired the function of PGC-1[alpha]. These changes are associated with alterations in fatty acid oxidation and mitochondrial function during the neonatal period, with lipid accumulation in myocardial tissue and liver. The link between the methyl donor deficiency and impaired methylation of PGC-1[alpha] alters the activities of enzymes involved in methylation and acetylation of PGC-1[alpha]. These enzymes are also associated with epigenetic changes and the function and gene expression. Our results are consistent with population studies by Barker and colleagues, who suggest that maternal nutrition during early stages of life is correlated with the risk of cardiovascular disease in adult, independent of other risk factorsAu cours du développement, les modifications du métabolisme des monocarbones liées à une malnutrition peuvent être délétères autant pour la mère que pour le nouveau-né. De plus, les conséquences à long terme d'une carence en période gestationnelle et périnatale sont mal connues, notamment en ce qui concerne les pathologies cardiaques et hépatiques. Nous avons mis en oeuvre un modèle nutritionnel de rates adultes carencées en donneurs de groupements méthyles (vitamines B12, folates et choline) avant la gestation. Ces micronutriments participent à la régulation de différentes enzymes impliquées dans le métabolisme de l'homocystéine. Afin de se placer dans un contexte de physiopathologie, proche de la situation clinique évaluée, nous avons choisi d'alimenter les rates avec un régime carencé un mois avant la mise en accouplement et de poursuivre ce régime pendant la période d'allaitement. Nous avons évalué les répercussions métaboliques et fonctionnelles du régime sur les tissus myocardique et hépatique, chez le nouveau né à 21 jours. Nous avons étudié l'effet de cette carence en groupements méthyles sur le métabolisme énergétique lipidique et sur la carnitine. Conséquences de la carence au niveau myocardique : Le régime carencé en donneurs de méthyles induit une hypertrophie cardiaque avec une augmentation de l'épaisseur du myocarde et un agrandissement des cardiomyocytes. L'étude protéomique du myocarde et l'analyse des données par bioinformatique identifient PGC-1[alpha], PPAR[alpha] et ERR[alpha] comme principaux déterminants des variations d'expression des protéines du métabolisme oxydatif mitochondrial. Nous avons observé une diminution d'expression de PPAR[alpha] et ERR[alpha] et une inactivation de PGC1[alpha] par hypométhylation et hyperacétylation, en lien avec une diminution d'expression de PRMT1 et de SIRT1 et une augmentation de SAH. Conséquences de la carence au niveau du foie : La carence s'accompagne de l'apparition d'une stéatose hépatique microvésiculaire, avec une élévation des taux tissulaires de lipides et de triglycérides. De plus, nous avons observé une augmentation des marqueurs pro inflammatoires sans augmentation des marqueurs de fibrose. A cet égard, nos résultats ont montré qu'un déficit de synthèse de carnitine, impliquée dans la bêta-oxydation et le stockage des acides gras, jouerait un rôle déterminant dans la pathogenèse de la stéatose chez le nouveau-né. Il existe également une dérégulation du métabolisme oxydatif des acides gras, avec diminution d'activité des complexes I et II de la chaîne respiratoire, qui résulte d'une hypométhylation de PGC1 et d'une diminution d'expression de PPAR[alpha], ER[alpha] et ERR[alpha]. En conclusion, nos résultats montrent que la carence maternelle en donneurs de méthyles, induit des modifications sur la fonction de PGC-1[alpha]. Ces modifications sont associées à des altérations de l'oxydation des acides gras et sur la fonction mitochondriale pendant la période néonatale, ce qui entraîne l'accumulation de lipides dans les tissus myocardique et hépatique. Le lien entre la carence en donneurs de méthyles et l'altération de la méthylation de PGC-1[alpha] modifie les activités des enzymes impliquées dans la méthylation et l'acétylation de PGC-1. Ces enzymes sont aussi liées à des modifications épigénomiques qui modulent la fonction et l'expression des protéines. Nos résultats sont en accord avec les études de population de Barker et al, qui suggèrent que la nutrition maternelle pendant les étapes précoces de la vie est corrélée avec le risque de maladies cardio-vasculaires dans la vie adulte indépendamment des autres facteurs de risqu

Effets sur le métabolisme énergétique mitochondrial myocardique et hépatique de la carence en donneurs de méthyles au cours de la gestation et de l'allaitement chez le raton

Au cours du développement, les modifications du métabolisme des monocarbones liées à une malnutrition peuvent être délétères autant pour la mère que pour le nouveau-né. De plus, les conséquences à long terme d'une carence en période gestationnelle et périnatale sont mal connues, notamment en ce qui concerne les pathologies cardiaques et hépatiques. Nous avons mis en oeuvre un modèle nutritionnel de rates adultes carencées en donneurs de groupements méthyles (vitamines B12, folates et choline) avant la gestation. Ces micronutriments participent à la régulation de différentes enzymes impliquées dans le métabolisme de l'homocystéine. Afin de se placer dans un contexte de physiopathologie, proche de la situation clinique évaluée, nous avons choisi d'alimenter les rates avec un régime carencé un mois avant la mise en accouplement et de poursuivre ce régime pendant la période d'allaitement. Nous avons évalué les répercussions métaboliques et fonctionnelles du régime sur les tissus myocardique et hépatique, chez le nouveau né à 21 jours. Nous avons étudié l'effet de cette carence en groupements méthyles sur le métabolisme énergétique lipidique et sur la carnitine. Conséquences de la carence au niveau myocardique : Le régime carencé en donneurs de méthyles induit une hypertrophie cardiaque avec une augmentation de l'épaisseur du myocarde et un agrandissement des cardiomyocytes. L'étude protéomique du myocarde et l'analyse des données par bioinformatique identifient PGC-1[alpha], PPAR[alpha] et ERR[alpha] comme principaux déterminants des variations d'expression des protéines du métabolisme oxydatif mitochondrial. Nous avons observé une diminution d'expression de PPAR[alpha] et ERR[alpha] et une inactivation de PGC1[alpha] par hypométhylation et hyperacétylation, en lien avec une diminution d'expression de PRMT1 et de SIRT1 et une augmentation de SAH. Conséquences de la carence au niveau du foie : La carence s'accompagne de l'apparition d'une stéatose hépatique microvésiculaire, avec une élévation des taux tissulaires de lipides et de triglycérides. De plus, nous avons observé une augmentation des marqueurs pro inflammatoires sans augmentation des marqueurs de fibrose. A cet égard, nos résultats ont montré qu'un déficit de synthèse de carnitine, impliquée dans la bêta-oxydation et le stockage des acides gras, jouerait un rôle déterminant dans la pathogenèse de la stéatose chez le nouveau-né. Il existe également une dérégulation du métabolisme oxydatif des acides gras, avec diminution d'activité des complexes I et II de la chaîne respiratoire, qui résulte d'une hypométhylation de PGC1 et d'une diminution d'expression de PPAR[alpha], ER[alpha] et ERR[alpha]. En conclusion, nos résultats montrent que la carence maternelle en donneurs de méthyles, induit des modifications sur la fonction de PGC-1[alpha]. Ces modifications sont associées à des altérations de l'oxydation des acides gras et sur la fonction mitochondriale pendant la période néonatale, ce qui entraîne l'accumulation de lipides dans les tissus myocardique et hépatique. Le lien entre la carence en donneurs de méthyles et l'altération de la méthylation de PGC-1[alpha] modifie les activités des enzymes impliquées dans la méthylation et l'acétylation de PGC-1. Ces enzymes sont aussi liées à des modifications épigénomiques qui modulent la fonction et l'expression des protéines. Nos résultats sont en accord avec les études de population de Barker et al, qui suggèrent que la nutrition maternelle pendant les étapes précoces de la vie est corrélée avec le risque de maladies cardio-vasculaires dans la vie adulte indépendamment des autres facteurs de risqueDuring development, changes in carbon metabolism related to malnutrition may be deleterious for both the mother and the newborn. In addition, long-term consequences of a methyl deficiency gestational and prenatal are poorly understood. We are particularly interested in studying these effects on the heart and liver. We have used a nutritional model of adult rats deficient in methyl donors (vitamin B12, folate and choline) before pregnancy. To be placed in a context of pathophysiology, close to the clinical situation, we chose to feed the rats with a methyl deficient diet one month before mating and continue this diet during the suckling period. We evaluated the metabolic and functional effects of this diet on myocardial and hepatic tissues, in the newborn pups in 21 days old. We studied the effects of methyl deficient diet on lipid and energy metabolism and carnitine. Consequences of the deficiency at the myocardial: The diet deficient in methyl donors induces cardiac hypertrophy with an increase in myocardial thickness and enlargement of cardiomyocytes. The proteomics analysis of the bioinformatics data identifies PGC-1[alpha], ERR[alpha] and PPAR[alpha] as major determinants of changes in protein expression of mitochondrial oxidative metabolism. We observed a decreased expression of PPAR[alpha] and ERR[alpha] and an inactivation of PGC1[alpha] by hypomethylation and hyperacetylation, in conjunction with a decrease in the expression of PRMT1 and SIRT1 and increased the level of SAH. Consequences of the deficiency at liver: Deficiency is accompanied by the appearance of microvesicular hepatic steatosis, with elevated tissue levels of lipids and triglycerides. Increase of inflammation was observed in this model with no changes in fibrosis score. In this respect, our results showed a deficiency of carnitine synthesis, involved in the beta-oxidation and storage of fatty acids, play a role in the pathogenesis of hepatic steatosis in the newborn. There is also a deregulation of the oxidative metabolism of fatty acids, with decreased activity of complex I and II of the respiratory chain, resulting in hypomethylation of PGC1 and decreased expression of PPAR[alpha], ER[alpha] and ERR[alpha]. In conclusion, our results show that maternal deprivation in methyl donors impaired the function of PGC-1[alpha]. These changes are associated with alterations in fatty acid oxidation and mitochondrial function during the neonatal period, with lipid accumulation in myocardial tissue and liver. The link between the methyl donor deficiency and impaired methylation of PGC-1[alpha] alters the activities of enzymes involved in methylation and acetylation of PGC-1[alpha]. These enzymes are also associated with epigenetic changes and the function and gene expression. Our results are consistent with population studies by Barker and colleagues, who suggest that maternal nutrition during early stages of life is correlated with the risk of cardiovascular disease in adult, independent of other risk factorsMETZ-SCD (574632105) / SudocNANCY1-Bib. numérique (543959902) / SudocNANCY2-Bibliotheque electronique (543959901) / SudocNANCY-INPL-Bib. électronique (545479901) / SudocSudocFranceF

THE EFFECTS OF OMEGA-3 FATTY ACIDS ON BLOOD HOMOCYS-TEINE LEVEL IN TYPE 2 DIABETIC PATIENTS

Abstract &nbsp;&nbsp; INTRODUCTION: Diabetes is regarded as serious condition for both the individual&nbsp;and the society.&nbsp;Its rapidly increasing global prevalence is&nbsp;a&nbsp;significant cause for concern. One of the most important reasons of mortality in diabetic patients is atherosclerosis. Many epidemiologic studies have shown that the total homocysteine concentration is a risk indicator for cardiovascular disease. Studies have shown that its concentration is increased considerably in diabetes mellitus. Epidemiological data indicate that the consumption of omega-3 unsaturated fatty acids (n-3FA) leads to a reduction in cardiovascular disorders and may protect against metabolic diseases. In recent years, many have studied omega-3 fatty acids but still, it cannot be used as an additive. This study aimed to evaluate the effects of &omega;3 on homocysteine in type 2 diabetic patients. &nbsp;&nbsp; METHODS: A randomized double blind placebo controlled clinical trial was conducted on 80 type 2 diabetic patients aged 45-85 years with diabetes for at least 2 years. Anthropometric indices including body mass index (BMI) and medical history were obtained. Diabetic patients were randomly assigned to either the case or the control group. Each subject received 3 capsules per day (omega-3 or placebo) for a period of 2 months. A sample of 10&nbsp;ml blood was collected from each subject at the beginning and at the end of the study. Serum homocysteine was measured by Hitachi autoanalyzer with the Enzymatic Cycling method. Nutrient intake was estimated using 24-hour dietary recall questionnaire at the beginning and at the end of the trial for 2 days and analyzed by FPII. T-test was also used to compare the groups. &nbsp;&nbsp; RESULTS: Comparison of mean&nbsp;&plusmn;&nbsp;SD (standard deviation) of BMI and food intake did not show any difference between the case and control groups. homocysteine levels were 3.10&nbsp;&micro;mol/lit and 0.126&nbsp;&micro;mol/lit in the case and control groups, respectively, and the difference was significant. &nbsp;&nbsp; CONCLUSION: Omega-3 fatty acids supplementation (3 g/per day) in the form of capsules can decrease homocysteine content in diabetic patients. &nbsp; &nbsp;&nbsp; Keywords: Type 2 diabetes mellitus, omega-3 fatty acid, homocysteine. &nbsp;</p

Endothelial Cell Surface Expressed Chemotaxis and Apoptosis Regulator (ECSCR) Regulates Lipolysis in White Adipocytes via the PTEN/AKT Signaling Pathway.

Elevated plasma triglycerides are associated with increased susceptibility to heart disease and stroke, but the mechanisms behind this relationship are unclear. A clearer understanding of gene products which influence plasma triglycerides might help identify new therapeutic targets for these diseases. The Endothelial Cell Surface expressed Chemotaxis and apoptosis Regulator (ECSCR) was initially studied as an endothelial cell marker, but has recently been identified in white adipocytes, the primary storage cell type for triglycerides. Here we confirm ECSCR expression in white adipocytes and show that Ecscr knockout mice show elevated fasting plasma triglycerides. At a cellular level, cultured 3T3-L1 adipocytes silenced for Ecscr show a blunted Akt phosphorylation response. Additionally we show that the phosphatase and tensin homology containing (PTEN) lipid phosphatase association with ECSCR is increased by insulin stimulation. These data suggest a scenario by which ECSCR contributes to control of white adipocyte lipolysis. In this scenario, white adipocytes lacking Ecscr display elevated PTEN activity, thereby reducing AKT activation and impairing insulin-mediated suppression of lipolysis. Collectively, these results suggest that ECSCR plays a critical function in regulating lipolysis in white adipose tissue

The association between CD3+ and CD8+tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and prognosis in patients with pancreatic adenocarcinoma

Background: : Pancreatic adenocarcinoma (PDAC), with more than 250,000 deaths each year, is the eighth leading cause of death worldwide, with a five-year survival of less than 5% and a median recurrence time between 5 and 23 months. The association between PDAC and CD3+/CD8+ tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and the extent of tumor spread and clinical outcomes has been recently shown. This study aimed to determine and compare the density of TILs and their association with disease prognosis in patients with PDAC. Materials and Methods: : In this study, we collected PDAC tissues and corresponding adjacent normal tissues from 64 patients with TIL-positive PDAC. The immunohistochemistry method was used for the detection of the expression levels of CD3+ and CD8+ TILs in PDAC tissues. Also, the completed follow-up history was evaluated for at least five years. Results: : The frequency of intratumoral and peritumoral TILs was 20 (31.2%) and 44 (68.8%), respectively. The mean density of CD3+ TILs and CD8+ TILs was 67.73%±20.17% and 69.45%±17.82%, respectively. The density of CD3+ TILs and CD8+ TILs was not associated with overall survival nor metastasis-free survival of the patients and tumor grade. However, the density of TILs was significantly lower in those patients who experienced tumor recurrence than those without this recurrence. Conclusion: : TILs density was high in patients with PDAC. The density of both CD3+ and CD8+ TILs was significantly lower in patients who experienced tumor recurrence. Thus, this study suggests that tracking and determining the density of CD3+ and CD8+ TILs might be effective in predicting PDAC recurrence

Insulin stimulation increases association between ECSCR C-terminus and PTEN in 293T cell overexpression system.

<p><b>A.</b> 293T cells were co-transfected with FLAG-tagged PTEN and either full-length or cytoplasmic truncated ECSCR and subjected to anti-FLAG immune precipitation. Full-length, but not truncated, ECSCR co-immune precipitates with PTEN. <b>B.</b> Insulin stimulation increases ECSCR-PTEN association. <b>C.</b> PI3K inhibitor LY294002 but not by PKA inhibitor cAMPS-Rp blocks ECSCR-PTEN association. Blots are representative of three independent experiments. <b>D</b>. Model for ECSCR influence on insulin inhibition of HSL in white adipocytes. ECSCR interaction with PTEN is predicted to inhibit its activity, allowing increased insulin activation of the PI3K-AKT axis. <i>Dashed lines</i> represent indirect interactions.</p

Tissue expression of ECSCR protein in mouse and human white adipocytes.

<p><b>A.</b> Anti-ECSCR western blot of adult male mouse tissues. Results are representative of lysates from three independent animals. WAT, epididymal white adipose tissue. Tub, tubulin loading control. <b>B.</b> ECSCR protein in cultured 3T3-L1 cells during differentiation to adipocytes. ECSCR protein is compared to reference lipid droplet marker perilipin, with GAPDH as loading control. <b>C.</b> Fractionation of freshly resected human white adipose tissue into mature adipocytes (buoyant fraction) and stromal vascular fraction (SVF). ECSCR is prominent on lipid-bearing, buoyant white adipocytes. SVF antigen CD34 is detected only in the pelleted fraction. <b>D.</b> Confocal micrographs of human muscle and WAT tissue sections stained with UEA-1 lectin (Red) to show vasculature and, anti-ECSCR antiserum (Green). Top: Skeletal muscle. ECSCR is present on the capillaries and on an unidentified resident cell type. Striated muscle fibers are negative for ECSCR. Bottom: White adipose tissue. Adipocyte profiles, immune reactive for ECSCR but negative for UEA lectin, are indicated with (*).</p