A Molecular Signature of Proteinuria in Glomerulonephritis

Proteinuria is the most important predictor of outcome in glomerulonephritis and experimental data suggest that the tubular cell response to proteinuria is an important determinant of progressive fibrosis in the kidney. However, it is unclear whether proteinuria is a marker of disease severity or has a direct effect on tubular cells in the kidneys of patients with glomerulonephritis. Accordingly we studied an in vitro model of proteinuria, and identified 231 “albumin-regulated genes” differentially expressed by primary human kidney tubular epithelial cells exposed to albumin. We translated these findings to human disease by studying mRNA levels of these genes in the tubulo-interstitial compartment of kidney biopsies from patients with IgA nephropathy using microarrays. Biopsies from patients with IgAN (n = 25) could be distinguished from those of control subjects (n = 6) based solely upon the expression of these 231 “albumin-regulated genes.” The expression of an 11-transcript subset related to the degree of proteinuria, and this 11-mRNA subset was also sufficient to distinguish biopsies of subjects with IgAN from control biopsies. We tested if these findings could be extrapolated to other proteinuric diseases beyond IgAN and found that all forms of primary glomerulonephritis (n = 33) can be distinguished from controls (n = 21) based solely on the expression levels of these 11 genes derived from our in vitro proteinuria model. Pathway analysis suggests common regulatory elements shared by these 11 transcripts. In conclusion, we have identified an albumin-regulated 11-gene signature shared between all forms of primary glomerulonephritis. Our findings support the hypothesis that albuminuria may directly promote injury in the tubulo-interstitial compartment of the kidney in patients with glomerulonephritis

Exitoso cultivo in vitro de gametocitos de Plasmodium falciparum

Introducción. Los estadios sexuales de Plasmodium falciparum han sido menos estudiados que los estadios asexuales. Al parecer, esto se debe a la carencia de cultivos estandarizados in vitro y a la dificultad de reconocer sus estadios de desarrollo. Estos hechos no permiten el estudio de aspectos biológicos, aspectos metabólicos, expresión de genes y síntesis de proteínas durante los estadios sexuales, temas de interés en la investigación de nuevos medicamentos antipalúdicos, principalmente los aislados de plantas, y la identificación de un potencial blanco contra Plasmodium. Objetivos. Establecer un cultivo in vitro de gametocitos, con la identificación de sus cinco estadios de desarrollo, y asegurar su continua producción. Materiales y métodos. El cultivo in vitro de gametocitos se realizó a partir de la cepa NF54 de P. falciparum en medio RPMI, con determinación de la parasitemia asexual y sexual, adición de glóbulos rojos A-Rh+ sólo el primer día de cultivo y cambio diario del medio con adición de mezcla de gases (90% N2, 5% O2; 5% CO2), asegurándose que el cultivo se mantuviera a 37 °C. Cuando la parasitemia asexual estuvo entre 3% y 5%, se comenzó a agregar el doble de volumen de medio. Resultados. Se obtuvieron gametocitos en estadios I, II y III a partir del día 11 de cultivo y estadios IV y V a partir del día 14 de cultivo. Conclusiones. Se estandarizó un cultivo in vitro para estadios sexuales de P. falciparum que puede usarse para futuros estudios de evaluación de compuestos, naturales o sintéticos, que actúen sobre los gametocitos, lo cual podría permitir el desarrollo de nuevas estrategias de control contra el paludismo