Случай миотонии Беккера с псевдодоминантным типом наследования: современные подходы к дифференциальной диагностике миотоний Томсена и Беккера

Myotonia congenital (MC) is the most common form of the hereditary nondystrophic myotonias caused by mutations in the skeletal muscle chloride channel gene (CLCN1) which change the functional features of muscle fibers membrane. MC is represented by two allelic forms with different types of inheritance: Thomsen’s myotonia congenita (TMC) with an autosomal dominant and Becker’s myotonia congenita (BMC) with an autosomal recessive inheritance. Both forms, TMC and BMC have the same clinical manifestation: skeletal muscle hypertrophy, transient weakness, generalized myotonia, debut in early childhood and a stationary development. Diseases are characterized by equal neurophysiological changes. In the family usually only one patient is detected. In some cases with the horizontal segregation diseases, more than one mutation in CLCN1 gene is found. These factors complicate the diagnosis of TMC and BMC, further medical and genetic counseling of the family members even after the patient’s genotype is detected. The confirmed BMC case with pseudo dominant type of inheritance and limited clinical manifestation is discussed in the light of differential diagnosis of the two discussed diseases. Врожденная миотония (ВМ) – самая частая форма из группы наследственных недистрофических миотоний, развивающаяся в результате мутации гена CLCN1 и нарушения работы ионных каналов хлора мембраны мышечных волокон. ВМ включает 2 аллельные формы: болезнь Томсена с аутосомно-доминантным типом наследования и болезнь Беккера с аутосомно-рецессивным типом наследования. Обе формы имеют одинаковые клинические проявления в виде гипертрофии скелетных мышц, транзиторной слабости, генерализованных миотонических феноменов, дебюта в раннем возрасте и стационарного течения, а также схожих изменений при нейрофизиологическом обследовании мышц. В отягощенных семьях часто диагностируется 1 больной ВМ. В ряде случаев при горизонтальной сегрегации заболевания описывают больше 1 мутации в гене CLCN1. Это затрудняет не только установление нозологического диагноза миотонии, но и последующее медико-генетическое консультирование в отягощенных семьях даже после определения генотипа больного. Представлен подтвержденный случай миотонии Беккера с псевдодоминантным типом наследования и ограниченными клиническими проявлениями с учетом современных подходов дифференциальной диагностики 2 заболеваний.

ИНФИЦИРОВАННОСТЬ ДОНОРСКОГО МАТЕРИАЛА ВИРУСАМИ ГРУППЫ ГЕРПЕСА КАК ВОЗМОЖНАЯ ПРИЧИНА РАЗВИТИЯ БОЛЕЗНИ ТРАНСПЛАНТАТА ПРИ СКВОЗНОЙ КЕРАТОПЛАСТИКЕ

We present the study of outcomes of PCR-diagnostics directed on detection of DNA of herpes-family viruses in donor’s corneal tissues taken during penetrating keratoplasty (PK). In total, there were 46 patients, who under- went PKs. They were followed up from 14 days till 12 months. PCR-research of fragments of a donor cornea re- vealed existence of DNA in 21.7%. The retrospective analysis showed that in the presence of herpes-virus DNA in donor’s cornea is the risk factor of postoperative complications development and increases the rejection rate 2–3 times, reaching 100% – 70%. Thus the high risk of graft failures remains associated not only with the system immunosupressive therapy which is usually considered as the precondition of activization of chronic infections, but also in the absence of that. It gives the ground to conclude that preoperative preparation of a donor material, especially «fresh» corneas, should include expanded PCR-diagnostics on herpes-viruses and its obligatory dis- carding in cases of positive tests. В работе представлены результаты ПЦР-диагностики, направленной на обнаружение ДНК вирусов груп- пы герпеса (ВГЧ 1,2, ВЭБ, ВГЧ 6,7) ткани донорской роговицы, взятой во время операции сквозной кера- топластики (СКП). Под наблюдением находились 46 больных (глаз), перенесшие операцию сквозной ке- ратопластики (СКП). Сроки наблюдения больных после СКП – от 14 дней до 12 месяцев. ПЦР-исследование фрагментов донорской роговицы выявило наличие ДНК вирусов группы герпеса в 21,7%. Ретроспективный анализ показал, что при наличии ДНК вирусов группы герпеса в роговице до- нора риск развития послеоперационных осложнений и помутнения кератотрансплантата повышается в 2–3 раза, достигая 100 и 70% соответственно. При этом высокий риск неблагоприятных исходов сохра- няется не только на фоне системной иммуносупрессивной терапии, которая обычно учитывается как предпосылка активизации хронических инфекций, но и при отсутствии таковой. Это дает основание за- ключить, что предоперационная подготовка донорского материала, особенно «свежих» роговиц, должна включать расширенную ПЦР-диагностику на вирусы группы герпеса и обязательную его выбраковку в случаях положительных тестов.

Применение экзомного секвенирования для диагностики наследственных моторно-сенсорных нейропатий

Introduction. Hereditary motor and sensory neuropathies, a highly genetic heterogeneous group of disorders, have a phenotype caused by peripheral nerve damage.Purpose of the study – to assess the extent of genetic heterogeneity of hereditary motor and sensory neuropathies in Russian patients and to evaluate the diagnostic effectiveness of using full-exome research methods to find the genetic cause of hereditary motor and sensory neuropathies.Materials and methods. The material for the study was DNA samples from 51 patients and their family members referred for whole exome sequencing to the DNA-diagnostics laboratory of Research Centre for Medical Genetics in 2017–2019. Methods: whole exome sequencing, Sanger sequencing, restriction fragment length polymorphism.Results. Whole exome sequencing in combination with segregation analysis of the pathogenic variants in families allowed to determine the cause of the disease in 41 % of cases. In another 16 % of cases, candidate genetic variants as a possible cause of the disease were revealed, but additional studies are needed to confirm it. The most frequently mutated gene was MFN2 caused neuropathy in 6 unrelated families. MPZ gene mutations were detected in two families, AARS gene mutations were revealed in another two families, and mutations in GJB1, HINT1, INF2, LRSAM1, LITAF, MME, NEFL, WWOX were detected once. Among the causal variants, mutations in B4GALNT1 caused spastic paraplegia, in COL6A1 led to Bethlem’s congenital muscular dystrophy, and in SYT2 caused congenital myasthenic syndrome indicating difficulties in differential diagnosis of inherited neuromuscular disorders. A PMP22 duplication was detected in 2 families prior to whole exome sequencing.Conclusion. Whole exome sequencing is very important for finding the molecular cause of hereditary motor and sensory neuropathies. In most cases, additional methods should be used to clarify the pathogenicity of variants detected by whole exome sequencing. However, it is necessary to remember that the most common cause of the disease is a large duplication of the region 17p11.2.Введение. Наследственные моторно-сенсорные нейропатии – обширная генетически-гетерогенная группа наследственных болезней, при которых клинический фенотип обусловлен тем или иным поражением периферических нервов.Цель исследования – оценить размах генетической гетерогенности наследственных моторно-сенсорных нейропатий у российских больных и диагностическую эффективность использования полноэкзомных методов исследования для поиска генетической причины наследственных моторно-сенсорных нейропатий.Материалы и методы. Материалом для исследования послужили образцы ДНК 51 больного и членов их семей, обратившихся за экзомным секвенированием в лабораторию ДНК-диагностики ФГБНУ «Медико-генетический научный центр им. академика Н. П. Бочкова» в 2017–2019 гг. Методы: полноэкзомное секвенирование, секвенирование по Сенгеру, метод анализа полиморфизма длин амплификационных фрагментов.Результаты. Используя экзомное секвенирование в сочетании с анализом сегрегации патогенных вариантов, удалось установить причину болезни в семьях у 41 % пациентов. Еще у 16 % выявлены кандидатные генетические варианты, являющиеся возможной причиной заболевания, однако для подтверждения этого необходимы дополнительные исследования, которые по решению семей не были проведены. Наиболее часто (в 6 неродственных семьях) выявлены мутации гена MFN2, в 2 семьях – гена MPZ, в 2 – AARS, по 1 случаю – GJB1, HINT1, INF2, LRSAM1, LITAF, MME, NEFL, WWOX. Среди причинных вариантов были выявлены мутации генов, отвечающих за спастическую параплегию (B4GALNT1), врожденную мышечную дистрофию Бетлема (COL6A1), миастению (SYT2), что свидетельствует о трудностях дифференциальной диагностики наследственных нервно-мышечных заболеваний. В 2 семьях до проведения полноэкзомного секвенирования (WES) была детектирована дупликация на хромосоме 17.Выводы. Экзомные методы исследования очень важны для поиска молекулярной причины наследственной моторно-сенсорной нейропатии. Для уточнения патогенности вариантов, выявленных при экзомном секвенировании, в большинстве случаев необходимо использовать дополнительные методы. Однако, несмотря на их высокую информативность, следует помнить, что наиболее частой причиной болезни является крупная дупликация региона 17p11.2

Липосомы, содержащие дексаметазон: получение, характеристика и использование в офтальмологии

Glucocorticoid dexamethasone (DM) liposomes of various lipid compositions were obtained. DM was used in insoluble form and in water-soluble form as disodium salt of dexamethasone phosphate (DMP). Correspondence between the drug inclusion percent and the structure of liposomes, and its solubility in water was studied. Lipids were shown to allow DM solubilization at concentration exceeding its solubility in water 9.3 times. Using repeated gel-chromatography, release of medicinal substances from liposomes was determined for all the samples of liposomes containing both DМP and DM. It was thus shown that up to 87% of the included substance remained in the liposomes. Biocompatibility of «empty» liposomes and liposomes containing a glucocorticoid with rabbit eyeball tissues was studied after their endovitreal incorporation. Dipalmitoylphosphatidylcholine liposomes were demonstrated not to cause inflammatory reaction after introduction in this way. Distribution of the liposomes in tissues of the rabbit eye posterior chamber was determined. It was shown that the liposomes after endovitreal introduction were distributed in various layers of retina.Получены липосомы различного липидного состава, содержащие глюкокортикоид дексаметазон (ДМ) и динатриевую соль дексаметазона фосфата (ДМФ). Изучена зависимость эффективности включения препарата от его растворимости в воде и от состава липосом. Показано, что липиды позволяют солюбилизировать ДМ в концентрации, в 9.3 раза превышающей его растворимость в воде. Для всех образцов липосом, содержащих как ДМФ, так и ДМ, определена степень высвобождения лекарственных субстанций из липосом путем проведения повторной гель-хроматографии. При этом показано, что в липосомах сохраняется до 87% включенной субстанции. Изучена биосовместимость «пустых» липосом и липосом, содержащих глюкокортикоид, с тканями глазного яблока кролика при их эндовитреальном введении. Установлено, что липосомы из дипальмитоилфосфатидилхолина не вызывают воспалительной реакции при таком способе введения. Изучено распределение липосом в тканях заднего отдела глаза кролика. При этом показано, что липосомы при эндовитреальном введении распределяются в различные слои сетчатки

Phenylketonuria in Portugal: Genotype-Phenotype Correlations Using Molecular, Biochemical, and Haplotypic Analyses

The impairment of the hepatic enzyme phenylalanine hydroxylase (PAH) causes elevation of phenylalanine levels in blood and other body fluids resulting in the most common inborn error of amino acid metabolism (phenylketonuria). Persistently high levels of phenylalanine lead to irreversible damage to the nervous system. Therefore, early diagnosis of the affected individuals is important, as it can prevent clinical manifestations of the disease.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

A case of Becker myotonia with pseudodominant inheritance: сurrent approaches to the differential diagnosis of Thomsen’s and Becker's myotonia congenita

Myotonia congenital (MC) is the most common form of the hereditary nondystrophic myotonias caused by mutations in the skeletal muscle chloride channel gene (CLCN1) which change the functional features of muscle fibers membrane. MC is represented by two allelic forms with different types of inheritance: Thomsen’s myotonia congenita (TMC) with an autosomal dominant and Becker’s myotonia congenita (BMC) with an autosomal recessive inheritance. Both forms, TMC and BMC have the same clinical manifestation: skeletal muscle hypertrophy, transient weakness, generalized myotonia, debut in early childhood and a stationary development. Diseases are characterized by equal neurophysiological changes. In the family usually only one patient is detected. In some cases with the horizontal segregation diseases, more than one mutation in CLCN1 gene is found. These factors complicate the diagnosis of TMC and BMC, further medical and genetic counseling of the family members even after the patient’s genotype is detected. The confirmed BMC case with pseudo dominant type of inheritance and limited clinical manifestation is discussed in the light of differential diagnosis of the two discussed diseases

Methods to reduce intraocular pressure on secondary glaucoma after severe eye burns

Purpose: Show the results of treatment of secondary glaucoma after severe eye burns.Methods: We observed 70 patients (108 eyes) with severe burns the eyes and their consequences, secondary glaucoma was observed in 40 patients (58 eyes). All patients with secondary glaucoma received traditional antihypertensive therapy, with its failure to resort to antiglaucomatous surgery. Cataract extraction performed in 24 cases, 16 of them in combination with other surgery: the reconstruction of the anterior chamber, penetrating keratoplasty, sinustrabeculectomy, diode laser cyclocoagulation. Diode laser cy- clocoagulation performed 42 times in 8 of them in combination with other antiglaucomatous surgery: cataract surgery, reconstruction of the anterior chamber. Sinustrabeculectomy in patients with secondary glaucoma was performed in 7 cases, 4 of them with collagen implant drainage. Ahmed glaucoma drainage implant performed in 5 cases.Results: In 23 out of 58 (39.6%) of long-term compensation glaucoma IOP was achieved antihypertensive therapy without sur- gery. After cataract extraction resistant compensated IOP was achieved in 10 cases, a temporary (1 to 42 months) — in 11 cases, IOP is not reduced in 2 cases. After completing diode laser cyclocoagulation stable normalization of IOP occurred in 16 cases, the temporary (from 1 month to 2 years) — in 20 cases, 4 cases of IOP reduction was not achieved. As a result sinustrabeculectomy in 4 cases IOP decreased, in one case the hypotensive effect is not there. After implantation Ahmed glaucoma valve in 2 cases was achieved stable normalization of IOP, in the 2 cases — the temporary; in 1 case developed endophthalmitis, and the device was removed.Conclusion: the immediate effect of antiglaucomatous treatment was 96.6%, but the high incidence of IOP decompensation (73.7%) suggesting the need for continuous follow-up patients after severe eye burn injury, and a readiness to use other methods to reduce IOP