53 research outputs found

    Proteolysis-Dependent Remodeling of the Tubulin Homolog FtsZ at the Division Septum in \u3ci\u3eEscherichia coli\u3c/i\u3e

    Get PDF
    During bacterial cell division a dynamic protein structure called the Z-ring assembles at the septum. The major protein in the Z-ring in Escherichia coli is FtsZ, a tubulin homolog that polymerizes with GTP. FtsZ is degraded by the two-component ATP-dependent protease ClpXP. Two regions of FtsZ, located outside of the polymerization domain in the unstructured linker and at the C-terminus, are important for specific recognition and degradation by ClpXP. We engineered a synthetic substrate containing green fluorescent protein (Gfp) fused to an extended FtsZ C-terminal tail (residues 317–383), including the unstructured linker and the C-terminal conserved region, but not the polymerization domain, and showed that it is sufficient to target a non-native substrate for degradation in vitro. To determine if FtsZ degradation regulates Z-ring assembly during division, we expressed a full length Gfp-FtsZ fusion protein in wild type and clp deficient strains and monitored fluorescent Z-rings. In cells deleted for clpX or clpP, or cells expressing protease-defective mutant protein ClpP(S97A), Z-rings appear normal; however, after photobleaching a region of the Z-ring, fluorescence recovers ~70% more slowly in cells without functional ClpXP than in wild type cells. Gfp-FtsZ(R379E), which is defective for degradation by ClpXP, also assembles into Z-rings that recover fluorescence ~2-fold more slowly than Z-rings containing Gfp-FtsZ. In vitro, ClpXP cooperatively degrades and disassembles FtsZ polymers. These results demonstrate that ClpXP is a regulator of Z-ring dynamics and that the regulation is proteolysis-dependent. Our results further show that FtsZ-interacting proteins in E. coli fine-tune Z-ring dynamics

    Isolation, Characterization and Lipid-Binding Properties of the Recalcitrant FtsA Division Protein from Escherichia coli

    Get PDF
    We have obtained milligram amounts of highly pure Escherichia coli division protein FtsA from inclusion bodies with an optimized purification method that, by overcoming the reluctance of FtsA to be purified, surmounts a bottleneck for the analysis of the molecular basis of FtsA function. Purified FtsA is folded, mostly monomeric and interacts with lipids. The apparent affinity of FtsA binding to the inner membrane is ten-fold higher than to phospholipids, suggesting that inner membrane proteins could modulate FtsA-membrane interactions. Binding of FtsA to lipids and membranes is insensitive to ionic strength, indicating that a net contribution of hydrophobic interactions is involved in the association of FtsA to lipid/membrane structures

    Badania i analiza drgań konstrukcji kombajnu zbożowego dla miejsc nadmiernie obciążonych statycznie

    No full text
    The article presents the static analysis of threshing machine frame and the bracket of rear axle beam of a combine harvester. To conduct the study, two programs were used: Inventor 2017 to create the model and Nastran In-CAD 2017 to perform simulation calculations. The purpose of the article is to present the design of the support frame of a combine harvester along with its defects, and to carry out research using the finite element method by means of CAD/CAE software. A solution to design defects has been proposed, which involves the reduction of stress. In addition, vibration was measured in places that were excessively exposed to static load.Artykuł prezentuje analizę statyczną kadłubu młocarni oraz wspornika belki tylnej kombajnu zbożowego. Dla przeprowadzenia badań użyto program Inventor 2017 dla budowy modelu oraz program Nastran in- CAD 2017 dla przeprowadzenia obliczeń symulacyjnych. Celem artykułu jest przedstawienie konstrukcji ramy nośnej kombajnu zbożowego, jej wad oraz przeprowadzenie badań z wykorzystaniem metody elementów skończonych przy użyciu oprogramowania typu CAD/CAE. Zaproponowano rozwiązanie wad konstrukcyjnych zmniejszające naprężenia. Dodatkowo dokonano pomiaru drgań w miejscach nadmiernie obciążonych statycznie

    Content protein and fat in milk using nano water to drink dairy cows

    No full text
    Badanie przedstawione w artykule miało na celu wykazanie czy istnieje zależność pomiędzy pojeniem krów nanowodą, a zawartością białka i tłuszczu w mleku oraz poprawą stanu zdrowia krów. Do badań wyselekcjonowano 9 najczęściej chorujących krów z całego stada. Krowy przez okres badań spożywały nanowodę, która ma lepszą wchłanialność niż zwykła woda oraz właściwości lecznicze. W artykule dokonano wstępnej analizy wyników zawartości tłuszczu i białka w mleku krowim. Wyniki badań wykazały niewielki wzrost zawartości białka w mleku po zastosowaniu nanowody.A study presented in the article was to demonstrate whether there is a correlation between watering cows nano water and protein and fat content in milk and improved cow health. The study selected 9 cows suffering the most from the whole herd. Cows ate the study period nano water, which has a better absorbency than plain water and medicinal properties. The article presents the results of a preliminary analysis of fat and protein in cow’s milk. The results showed a slight increase in protein content in the milk after application nano water

    Wyznaczanie mocy użytecznej i wpływ na parametry reologiczne surowców podczas walcowania

    No full text
    The paper presents mathematical modelling of determining the power output over the rolling materials in the gap rotating rollers taking into account the rheological parameters of the final product. Determination of these parameters will reduce energy consumption, increase efficiency and reduce loss of material during production. This solution, suggested in the article, allows determination of the overall quality of the rolled product layer. Analysis of experimental results revealed that the main features of the machine provide the necessary stable shape products and provide good rheological parameters of these products. Rheological testing indicators allow for a rational approach to a decision to operate a rolling process. At the same time they improve quality control methods and will have an impact on the design parameters of rollers and modes of chambers. The proposed method not only allows obtaining a predetermined pressure, but also allows defining the optimal shape of the gap, wherein the pressure gradient is constant.W artykule przedstawiono modelowanie matematyczne wyznaczania mocy użytecznej podczas walcowania surowców w szczelinie rolek obrotowych z uwzględnieniem parametrów reologicznych produktu końcowego. Wyznaczenie tych parametrów pozwoli na zmniejszenie zużycia energii, zwiększenie wydajności oraz zmniejszenie strat surowców w czasie produkcji. Zastosowanie tego rozwiązania zaproponowanego w artykule pozwala na określenie ogólnej jakości zwiniętej warstwy produktu. Analiza wyników eksperymentalnych pozwoliła stwierdzić, że główne cechy maszyny, zapewniają niezbędny stabilny kształt produktów i zapewniają dobre parametry reologiczne tych produktów. Testowanie wskaźników reologicznych pozwalają na racjonalne podejście do decyzji o prowadzeniu procesu walcowania. Jednocześnie poprawią sposoby kontroli jakości i będą miały wpływ na parametry konstrukcji trybów rolek i komór roboczych. Proponowany sposób nie tylko pozwala na uzyskanie określonego ciśnienia, a również pozwolą na określenie optymalnego kształtu szczeliny, w którym gradient ciśnienia jest stały

    Cryo‐ EM

    No full text
    corecore