Hook effect in radioligand assay for Anti Glutamic Acid Decarboxylase (Anti-GAD65). Influence of temperature and physicochemical interpretation

Background: Radioligand assay is one of the principal methods used for analytical determination of the Anti-GAD65 concentration. We studied the influence of temperature on the calibration curves obtained by such a method Matherial and Methods: We used a commercially available RIA kit for Anti-GAD65 and a gamma counter. Data was analyzed using Statistica software. Results and Discusion: Activities bound to the antibody increase with temperature. There was a decrease in activity for high concentrations attributable to the "hook effect". We propose a simple physicochemical model that justifies satisfactorily the results.Objetivo: El análisis por radioligando es uno de los métodos principales utilizados en la determinación analítica del Anti-GAD65. Se ha estudiado la influencia de la temperatura sobre las gráficas de calibración obtenidas por dicha técnica. Material y Métodos: Usamos un kit comercial para Anti-GAD65 y un contador gamma. Los resultados son analizados mediante el programa Statistica. Resultados y Discusión: Las actividades ligadas al anticuerpo aumentan con la temperatura. Se observa una disminución de la actividad para altas concentraciones atribuible al llamado “efecto anzuelo”. Se propone un sencillo modelo fisicoquímico que justifica satisfactoriamente los resultado

Influencia de la temperatura sobre las curvas de calibración en IRMA de IGF I. Interpretación mediante dos modelos no excluyentes

The influence of temperature on the calibration graphs used in the analytical determination of IGF I by IRMA has been studied. The results were analyzed using the equation of the four parameters and a modification of the isotherm BET. Such equations correspond, respectively, to the models of interaction ligand (antigen) - receiver (antibody) and adsorption antigen on the wall of the tube coated antibody. The adjustments to both equations are satisfactory with some advantages for the adsorption model that make it preferable in the interpretation of results. It also determine thermodynamic parameters for the immunocomplex dissociation.Key Words: Four parameters equation, B.E.T. isotherm. Antigen-antibody reaction.Se estudia la influencia de la temperatura sobre las gráficas de calibración utilizadas en la determinación analítica de IGF I mediante IRMA. Los resultados se analizan mediante la ecuación de los cuatro parámetros y una modificación de la isoterma B.E.T. Tales ecuaciones corresponden, respectivamente, a los modelos de interacción ligando (antígeno) – receptor (anticuerpo) y adsorción del antígeno sobre la pared del tubo recubierta de anticuerpo. Los ajustes a ambas ecuaciones son satisfactorios con algunas ventajas para el modelo de adsorción que lo hacen preferible en cuanto a la interpretación de los resultados. Se determinan también los parámetros termodinámicos para la disociación del inmunocomplejo.Palabras clave: Ecuación cuatro parámetros, Isoterma B.E.T. Reacción antígeno-anticuerpo

Cinética de la estabilidad del radiofármaco 99mTc-DTPA. Influencia de la temperatura

The radiochemical purity of the radiopharmaceutical 99mTc-DTPA depending on the time is studied by radiocromatography in the first hours passed after its preparation. Results adjust to exponential equations that indicate order one for the degradation of radiopharmaceutical. The constants obtained for different temperatures follow the equation of Arrhenius, whose parameters are calculated. Analytical and graphical methods are provided for the calculation of the validity time (t95) depending on temperature.La pureza radioquímica del radiofármaco 99mTc-DTPA en función del tiempo se estudia por radiocromatografía en las primeras horas transcurridas tras su preparación. Los resultados se ajustan a ecuaciones exponenciales indicativas de que la degradación del radiofármaco sigue una cinética de orden uno. Las constantes obtenidas a diferentes temperaturas siguen la ecuación de Arrhenius, cuyos parámetros se calculan. Se proponen sendos métodos, analítico y gráfico, para el cálculo del tiempo de validez (t95) en función de la temperatura

Efecto de gancho en el ensayo de radioligando para Anti-descarboxilasa del ácido glutámico (anti-GAD65). Influencia de la temperatura y la interpretación fisicoquímica

Background: Radioligand assay is one of the principal methods used for analyticaldetermination of the Anti-GAD65 concentration. We studied the influence of temperature onthe calibration curves obtained by such a methodMatherial and Methods: We used a commercially available RIA kit for Anti-GAD65 and agamma counter. Data was analyzed using Statistica software.Results and Discusion: Activities bound to the antibody increase with temperature. Therewas a decrease in activity for high concentrations attributable to the "hook effect". Wepropose a simple physicochemical model that justifies satisfactorily the resultsObjetivo: El análisis por radioligando es uno de los métodos principales utilizados en ladeterminación analítica del Anti-GAD65. Se ha estudiado la influencia de la temperaturasobre las gráficas de calibración obtenidas por dicha técnica.Material y Métodos: Usamos un kit comercial para Anti-GAD65 y un contador gamma. Losresultados son analizados mediante el programa Statistica.Resultados y Discusión: Las actividades ligadas al anticuerpo aumentan con la temperatura.Se observa una disminución de la actividad para altas concentraciones atribuible al llamado“efecto anzuelo”. Se propone un sencillo modelo fisicoquímico que justificasatisfactoriamente los resultado