Influencia de la insulina bovina y humana sobre los índices de maduración, fecundación y división in vitro de ovocitos de bovino

The present study was carried out to determine the effects of supplementation of the maturation media with human or bovine insulin on in vitro maturation, fertilization and cleavage rates of bovine oocytes. Cumulus-intact bovine oocytes were cultured in a maturation medium (TCM-199 containing 10 percent fetal calf serum) with or without human or bovine insulin supplementation (10 mg/ml). For the bovine insulin supplement, the maturation (80.3 percent), fertilization (61.3 percent) and cleavage (55.3 percent) rates were significantly higher (p<0.05) than those obtained in the control group (70.1; 50.1 and 42.5 percent respectively). Thus, the percentages of cleavaged ova obtained in presence of human or bovine insulin (54.8 and 55.3 percent respectively) were significantly higher (p<0.05) than those observed in control group (42.5 percent). No difference was found among human and bovine insulin treatments. These results demonstrate that the addition of human or bovine insulin to the maturation medium increased the percentages of matured oocyte, increasing the subsequent fertilization and cleavage rates of bovine oocytes in vitro.Se realizó un estudio para determinar los efectos de la suplementación del medio de maduración con insulina humana o bovina sobre los índices de maduración, fecundación y división in vitro de ovocitos de bovino. Ovocitos de bovino se cultivaron en medio de maduración (TCM-199 conteniendo 10 p.100 de suero de ternero fetal) con o sin insulina humana o bovina (10 mg/ml). Para la insulina bovina, los índices de maduración (80,3 p.100), fecundación (61,3 p.100) y división (55,3 p.100) fueron superiores significativamente (p<0,05) que aquellos obtenidos por el grupo control (70,1; 50,1 y 42,5 p.100 respectivamente). Además, los porcentajes de óvulos divididos obtenidos en presencia de insulina humana o bovina (54,8 y 55,3 p.100 respectivamente), fueron superiores significativamente (p<0,05) en comparación con los obtenidos por el grupo control (42,5 p.100). No se apreciaron diferencias significativas entre los tratamientos con insulina humana y bovina. Estos resultados ponen de manifiesto que la adición de insulina humana o bovina al medio de maduración incrementa los porcentajes de ovocitos maduros, mejorando posteriormente los índices de fecundación y división de ovocitos de bovino in vitro

Un método optimizado para el análisis cromosómico de ovocitos y cigotos obtenidos mediante técnicas de maduración y fecundación in vitro

Matured bovine oocytes and zygotes obtained by in vitro maturation and fertilization techniques (IVM and IVF) were cytogenetically prepared by using an improved method for chromosome preparations. The method, which involves use of trypsinizedhypotonic solution plus a vortex-agitated system and very cold two-step fixation process, contributes to weaken the zona pellucida and allows the swelling of oocytes and zygotes which helps the subsequent spreading of the chromosomes. This method permits to obtain preparations of good quality for examining the number and morphology of the chromosomes of oocytes and zygotes for any meiotic and mitotic stage.Se logró optimizar un método rápido para analizar citogenéticamente ovocitos y cigotos de bovino obtenidos mediante técnicas de maduración y fecundación in vitro (MIV y FIV). El método, el cual utiliza una solución hipotónica con tripsina, un sistema de agitación mediante vortex y un sistema doble de fijación en frío, contribuye a eliminar fácilmente la zona pelúcida y a hinchar a los ovocitos y cigotos favoreciendo posteriormente la extensión de los cromosomas. Este método permite obtener preparaciones de muy buena calidad para el análisis tanto del número como de la morfología de los cromosomas de los ovocitos y cigotos en cualquier estadío meiótico y mitótico

Producción in vitro de embriones de bovino: influencia de la suplementación sérica y hormonal

On study the effect of different serum and hormonal supplements, when added to the maturation medium, on the in vitro maturation and subsequent fertilization and cleavage process of bovine oocytes. The oocyte maturation, fertilization and cleavage rates in the presence of ECS, FCS and hormonal supplements were significantly higher (p<0.001) than that obtained in the control group. No significant differences for maturation, fertilization and development were observed between the different supplements. The addition of serum and hormonal supplements to the maturation medium improved the in vitro maturation rates and subsequent in vitro fertilization and cleavage rates of bovine oocytes.El objetivo del presente estudio fue investigar si diferentes suplementos séricos y hormonales, cuando se adicionan al medio de maduración, mantienen los procesos de maduración, fecundación y división de ovocitos de bovino in vitro. Los índices de maduración ovocitaria, fecundación y división, en presencia de los suplementos ECS, FCS y hormonas fueron superiores significativamente (p<0,001) que aquellos observados en el grupo control. No se apreciaron diferencias significativas para los estadíos de maduración, fecundación y división entre los diferentes suplementos estudiados. Concluimos que la adición de suplementos séricos y hormonales al medio de maduración mejora los índices de maduración ovocitaria y subsiguientes índices de fecundación y división in vitro de ovocitos de bovino

Evolución de la incidencia de la translocación robertsoniana 1/29 en la raza vacuna retinta en los ultimos seis años

Desde 1989 se viene analizando, en el Laboratorio de Citogenética animal aplicada del Departamento de Genética de la Facultad de Veterinaria de la Universidad de Córdoba, la frecuencia de la translocación robertsoniana 1/29 en la raza vacuna Retinta en colaboración con el Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación (M.A.P.A.) y la Asociación de Criadores de Ganado Vacuno Selecto de raza Retinta. La evolución de la translocación, después de las indicaciones dadas por la Asociación en el sentido de la necesidad de evitar como reproductores a animales portadores, ha sido la esperada, al igual que ha ocurrido en otros paises. En el presente trabajo se exponen los resultados obtenidos a lo largo del estudio, observándose un descenso progresivo en la incidencia de la translocación que pasó de presentarse en estado heterocigótico en un porcentaje aproximado del 30 p. 1 00, a un porcentaje en la actualidad de alrededor del 16 p.1 00. Por otra parte se ha observado también ligeras fluctuaciones en los porcentajes, encontrando que en los años en que la tasa se incrementaba coincidía con un escaso número de animales analizados y lo que es más importante con la incorporación de nuevas ganaderías al estudio. También presentamos el estudio de la incidencia de la translocación en las dos Comunidades donde la raza vacuna Retinta se distribuye principalmente, es decir, Andalucía y Extremadura

Evolución de la incidencia de la translocación robertsoniana 1/29 en la raza vacuna retinta en los ultimos seis años

Desde 1989 se viene analizando, en el Laboratorio de Citogenética animal aplicada del Departamento de Genética de la Facultad de Veterinaria de la Universidad de Córdoba, la frecuencia de la translocación robertsoniana 1/29 en la raza vacuna Retinta en colaboración con el Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación (M.A.P.A.) y la Asociación de Criadores de Ganado Vacuno Selecto de raza Retinta. La evolución de la translocación, después de las indicaciones dadas por la Asociación en el sentido de la necesidad de evitar como reproductores a animales portadores, ha sido la esperada, al igual que ha ocurrido en otros paises. En el presente trabajo se exponen los resultados obtenidos a lo largo del estudio, observándose un descenso progresivo en la incidencia de la translocación que pasó de presentarse en estado heterocigótico en un porcentaje aproximado del 30 p. 1 00, a un porcentaje en la actualidad de alrededor del 16 p.1 00. Por otra parte se ha observado también ligeras fluctuaciones en los porcentajes, encontrando que en los años en que la tasa se incrementaba coincidía con un escaso número de animales analizados y lo que es más importante con la incorporación de nuevas ganaderías al estudio. También presentamos el estudio de la incidencia de la translocación en las dos Comunidades donde la raza vacuna Retinta se distribuye principalmente, es decir, Andalucía y Extremadura

Etude de l’incidence de la translocation 1/29 chez la race bovine retinta pendant les derniers six ans

Dés 1989 on étude chez le Laboratoire de Cytogénétique Animale Appliquée du Departement de Génétique de la Faculté de Veterinaire de l"Université de Cordoba (Espagne), la presence de la translocation robertsonienne 1/29 chez la race bovine Retinta en collaboration avec le Ministére de l"Agriculture, dela Péche et de l"Alimentation et l"Association d"Eleveurs de Bovins de la race Retinta. L"evolution de la translocation, aprés les recommendations de l"Association d"eviter comme reproducteurs les animaux porteurs, a été cello q"on esperais. Au long de l"étude on a observée que l"incidence de latranslocation, á l"état heterozigotique, a derivé progressivement des presque le 30 p.100 jusqu"a le 16 p.100 actuellement. D"autre part on a observé aussi des légéres fluctuations dans les pourcentages de presentation de la translocation, étant les pourcentages les plus elevés dans les années avec une haute incorporation á l"étude d"autres troupeaux. Au méme temps nous presentons les resultats de l"étude de l"incidence de la translocation 1/29 dans les deux regions principales dans les quelles la race Retinta est distribuée, c"est á dire, l"Andalusia et l"Extremadura.Desde 1989 se viene analizando, en el Laboratorio de Citogenética animal aplicada del Departamento de Genética de la Facultad de Veterinaria de la Universidad de Córdoba, la frecuencia de la translocación robertsoniana 1/29 en la raza vacuna Retinta en colaboración con el Ministerio de Agricultura, Pesca y Alimentación (M.A.P.A.) y la Asociación de Criadores de Ganado Vacuno Selecto de raza Retinta. La evolución de la translocación, después de las indicaciones dadas por la Asociación en el sentido de la necesidad de evitar como reproductores a animales portadores, ha sido la esperada, al igual que ha ocurrido en otros paises. En el presente trabajo se exponen los resultados obtenidos a lo largo del estudio, observándose un descenso progresivo en la incidencia de la translocación que pasó de presentarse en estado heterocigótico en un porcentaje aproximado del 30 p. 1 00, a un porcentaje en la actualidad de alrededor del 16 p.1 00. Por otra parte se ha observado también ligeras fluctuaciones en los porcentajes, encontrando que en los años en que la tasa se incrementaba coincidía con un escaso número de animales analizados y lo que es más importante con la incorporación de nuevas ganaderías al estudio. También presentamos el estudio de la incidencia de la translocación en las dos Comunidades donde la raza vacuna Retinta se distribuye principalmente, es decir, Andalucía y Extremadura

Efecto del medio de cultivo y la suplementación proteica en la maduración "in vitro" de ovocitos bovinos

En el presente trabajo se describen los efectos del medio de maduración ovocitaria y de la suplementación proteica sobre el proceso de maduración ovocitaria in vitro de oocitos inmaduros de vacuno. Para ello se usaron tres medios de cultivo diferentes, tales como: medioTCM-199, medio DME y medio H-Y, así como cuatro suplementos proteicos distintos (fluido folicular bovino: BFF; suero fetal bovino: FCS; fracción V albuminosa del suero bovino: BSA; y liquido amniótico bovino: BAF). Los índices de maduración ovocitaria obtenidos, usando el medio TCM-199, fueron significativamente superiores (81,8 p.100; p0,05), fue superior al conseguido por los ovocitos del grupo control (45,5 p.100), aunque tales diferencias no fueron significativas. Por el contrario, los ovocitos madurados en presencia de FCS (81 p.100), BSA (86,2 p.100) o BAF (77,9 p.100) mostraron unos indices de maduración meiótica significativamente superiores (p<0,001) a los conseguidos por el grupo control. En conclusión, los resultados obtenidos en el presente trabajo indican que el medio TCM-199 fue superior, en cuanto al número de ovocitosque alcanzaron el estadio de maduración, en comparación con losmed¡os D M E y H-Y. Así mismo, la suplementación proteica contribuyó a incrementar el porcentaje de ovoc¡los que alcanzaron el estadio de metafase-II. Además, los mayores porcentajes de maduración se consiguieron cuando el medio de maduración se suplementó con FCS, BSA y BAF

Influencia de diferentes fracciones foliculares sobre la maduración in vitro de ovocitos inmaduros de bovino

Three experiments were carried out to investigate whether cumulus cells, Bovine Follicular Fluid (BFF) and granulosa cells, when added as supplements to the maturation medium, support the in virto maturation of immature bovine oocytes. In the first experiment, the maturation medium was supplemented with three different concentrations of the BF F (10, 20 and 50 p.100, respectively). In the second experiment, the effect of three different concentrations of the granulosa (1,10 y 100x 106 cells/ml, respectively), on in vitro oocyte maturation porcentages were evaluated. In the third experiment, the effect of the presence or absence of cumulus cells on the in vitro oocyte maturation rates was compared. Maturation rates at the metaphase II stage, following supplementation with 20 p.100 BFF (60 p.100) were significantly higher (p"O.05) than those obtained in control group (45 p.100). Significant differences between the 10 p.100 BFF, 20 p.100 BFF and 50 p.100 BFF treatments, were not observed. ml and the control treatments (90 p.100 and 85 p.100, respectively) were significantly higher (pa0.001) than when 10 and 10000" cells/ml (66 p.100 and 47 p.100, respectively) were added. Significant differences in the presence (78 p.100) or absence (62 p.100) of cumulus cells (p<0_05) on in vitrooocyte maturation rates were found. The present results indicatethat the presence of cumul us cells surrounding i m matu re oocytes, the addition of low granulosa cells concentrations and BFF added to the maturation medium may be required to induce both nuclear and cytoplasmic maturation of immature bovine oocytes in vitro.Se llevaron a cabo tres experimentos con el objetivo de investigar si las células del cúmulo, fluido folicular bovino (FFB) y las células de la granulosa, cuando son añadidos como suplemento al medio de maduración, soportan la maduración in vitro de ovocitos inmaduros de bovino. En el primer experimento, el medio de maduración fue suplementado con tres diferentes concentraciones de F F B (10, 20 y 50 p.100, respectivamente). En el segundo experimento, se evaluó el efecto de tres concentraciones diferentes de células de lagranulosa (1, 10 y 100x106 células/ml, respectivamente), sobre los porcentajes de maduración ovocitaria in vitro. En el tercer experimento, se comparó el efecto de la presencia o ausencia de células del cúmulo sobre los índices de maduración oocitaria in vitro. Los índices de maduración en el estadio de metafase 11, siguientes a la suplementación con un 20 p.100 FFB (60 p.100) fueron significativamente superiore