Вміст глутатіону та активність ферментів його метаболізму у печінці щурів за тривалої дії олігоефірів багатоатомних спиртів

Study of mechanisms of pathological process development of xenobiotics action is actual in modern science. Oligoesters of polyatomic alcohol “Laprols” present widespread xenobiotics, which are characterized by significant synthesis volume, wide use (as basis of industrial output of synthetic resin, foam polyurethane, paint materials, household agents), intake in water sources of population and as a result impact on person’s health. Defined ways of organism adaptation to xenobiotics action were formed during evolution, central role in which presents biochemical mechanisms of their decontamination. The aim of the investigation is to evaluate the influence of oligoesters of polyatomic alcohol “Laprols” OEF-LP-502 in doses 1/10 and 1/100 LD50 on glutathione content and enzymes’ activity of its metabolism in rats’ liver. Experiments were done on sexually mature rats of Wistar with body weight (180-220) g. They were exposed to per oral coarse with probe by water solution of compounds daily and once time during 45 days in doses 1/10 and 1/100 LD50. Animals of control group were taken volumes of fresh water. Investigation of indices was done in dynamics on the 15-th, 30-th, 45-th days after experiment’s start. After 45-day administration of OEF by rats in doses 1/10 and 1/100 LD50 abnormalities in the glutathione system develop in the liver, which are manifested by reduced content of restored glutathione, the activity of enzymes that destroy hydroperoxide (glutathione peroxidase and G-S-T) on the background of glutathione reductase increase as an adaptive response to renew restored glutathione. Changes of glutathione content and activity of enzymes of its metabolism in conditions of prolonged influence of OEF is the reason for the intensification of lipid peroxidation and degradation as a result of hepatocytes of rats. Abnormalities of glutathione system in hepatocytes of rats are one of the pathogenetic links of the mechanisms of action of OEF-LP that should be considered in the development of methods for their correction.Изучение механизмов развития патологических процессов в условиях воздействия на организм ксенобиотиков (КБ) является актуальным направлением современной науки. К числу распространенных КБ относятся олигоэфиры многоатомных спиртов технического названия «Лапролы», для которых характерны довольно значительные объемы синтеза, широкое применение в различных сферах народного хазяйства, возможность поступления к источникам питьевого водоснабжения населения и поэтому возможно негативное влияние на здоровье человека. К действию КБ в процессе эволюции сформировались определенные способы адаптации организма, ведущую роль среди которых играют биохимические механизмы их обезвреживания. В последних значительная роль отводится восстановленному глутатиону и ферментам его метаболизма. Состояние системы глутатиона в условиях длительного воздействия новых представителей ОЭФ-ЛП изучено недостаточно, а именно его учет необходим для всестороннего раскрытия механизмов биологического действия и разработки средств их коррекции. В работе использованы ОЭФ-ЛП марки 502 с регламентированными физико-химическими характеристиками. Эксперименты проведены на половозрелых крысах-самцах линии Wistar весом 180-220 г. Животных подвергали пероральной затравке с помощью зонда водными растворами ОЭФ ежедневно однократно в течение 45 суток в дозах 1/10 и 1/100 ЛД50. Животным контрольной группы вводили соответствующие объемы питьевой воды. Исследование показателей проводили в динамике наблюдения: на 15, 30, 45-е сутки после начала эксперимента. После 45-дневного введения крысам ОЭФ в дозах 1/10 и 1/100 ЛД50 в печени развиваются нарушения в системе глутатиона, проявляющиеся снижением содержания ВГ, активности ферментов, которые разрушают гидроперекиси (ГТО и Г-S-Т) на фоне повышения глутатионредуктазы (ГР) – как адаптивной реакции, направленной на регенерацию ВГ. Изменения содержания глутатиона и активности ферментов его метаболизма в условиях длительного воздействия ОЭФ является причиной интенсификации процессов ПОЛ и деструкции вследствие этого гепатоцитов крыс. Нарушение системы глутатиона в гепатоцитах крыс является одним из патогенетических звеньев механизмов действия ОЭФ-ЛП, что необходимо учитывать при разработке средств их коррекции.Вивчення механізмів розвитку патологічних процесів за умов дії на організм ксенобіотиків (КБ) є актуальним напрямком сучасної науки . До числа розповсюджених КБ відносяться олігоефіри багатоатомних спиртів технічної назви «Лапроли», для яких характерні досить значні об’єми синтезу, широке застосування у різних сферах народного господарства можливість надходження до джерел питного водопостачання населення та завдяки цьому можливий негативний вплив на здоров’я людини. До дії КБ у процесі еволюції сформувалися певні способи адаптації організму, провідну роль серед яких відіграють біохімічні механізми їх знешкодження. В останніх значна роль відводиться відновленому глутатіону і ферментам його метаболізму. Стан системи глутатіону за умов тривалого впливу нових представників ОЕФ-ЛП вивчено недостатньо, а саме його урахування є необхідним для всебічного розкриття механізмів біологічної дії і розроблення засобів їх корекції.У роботі використано ОЕФ-ЛП марки 502 з регламентованими фізико-хімічними характеристиками. Експерименти проведено на статевозрілих щурах-самцях лінії Wistar вагою 180-220 г. Тварин піддавали пероральній затравці за допомогою зонда водними розчинами ОЕФ щоденно одноразово протягом 45 діб у дозах 1/10 і 1/100 ЛД50. Тваринам контрольної групи вводили відповідні об’єми питної води. Дослідження показників проводили у динаміці спостереження: на 15, 30, 45-ту добу після початку експерименту. Після 45-денного введення щурам ОЕФ у дозах 1/10 і 1/100 ЛД50 у печінці розвиваються порушення у системі глутатіону, що проявляються  зниженням вмісту ВГ, активності ферментів, які руйнують гідроперекиси (ГПО і Г-S-Т), на тлі підвищення ГР – як адаптивної реакції, спрямованої на регенерацію ВГ. Зміни вмісту глутатіону та активності ферментів його метаболізму за умов тривалого впливу ОЕФ є причиною інтенсифікації процесів ПОЛ та деструкції внаслідок цього гепатоцитів щурів. Порушення системи глутатіону у гепатоцитах щурів є однією з патогенетичних ланок механізмів дії ОЕФ-ЛП, що необхідно враховувати при розробленні засобів їх корекції

Effect of Nitrogen Source and Inorganic Phosphate Concentration on Methanol Utilization and PEX

Methylotrophic yeast Pichia pastoris has proved to be especially useful for production of various heterologous proteins. In biotechnology it is very important to maintain the balance between high levels of heterologous gene expression and cell viability. Decisive understanding of gene regulation mechanisms is essential for reaching this goal. In this study, we investigated the effect of different nitrogen sources and phosphate concentration in media on methanol utilization. It was shown that expression levels of main genes, which are involved in methanol utilization (MUT genes) and in functioning of peroxisomes (PEX genes), are maximal when ammonium sulphate is used as a nitrogen source. Expression of these genes is decreased in media with poor nitrogen sources, such as proline. Addition of rapamycin to the media completely removed repression of AOX1 promoter in media with proline, which allows proposing that Tor-kinase is involved in establishing of nitrogen regulation of this gene. It was also shown that MUT genes expression levels get higher, when the phosphate concentration in media is increased

Realities of awareness of permanent residents of industrial region on the problem of osteoporosis.

The questionnaire method was used to study the awareness on osteoporosis in 95 patients of the therapeutic hospital, residents of the industrial center (the city of Dnipro). It was established presence of risk factors for osteoporosis, especially in women. Prevalence: age over 65 years, smoking, fractures in anamnesis, associated pathology, early menopause. Low awareness of patients on the diagnosis, prevention and treatment of osteoporosis, as well as lack of motivation for undergoing examination and possible treatment has been established. A third of them did not know the term. Living in the industrial region was not regarded as a risk factor for osteoporosis

Realities of awareness of permanent residents of industrial region on the problem of osteoporosis.

The questionnaire method was used to study the awareness on osteoporosis in 95 patients of the therapeutic hospital, residents of the industrial center (the city of Dnipro). It was established presence of risk factors for osteoporosis, especially in women. Prevalence: age over 65 years, smoking, fractures in anamnesis, associated pathology, early menopause. Low awareness of patients on the diagnosis, prevention and treatment of osteoporosis, as well as lack of motivation for undergoing examination and possible treatment has been established. A third of them did not know the term. Living in the industrial region was not regarded as a risk factor for osteoporosis

Development of Real-Time Multiplex PCR Assay for the Detection and Differentiation of Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei

Objective of the study was to develop a real-time multiplex PCR assay for the detection and differentiation of B. mallei and B. pseudomallei, characterized by high sensitivity and specificity. Materials and Methods. The primers and probes were designed to detect the species-specific sequence of the fliР gene of B. mallei and gp68 gene of B. pseudomallei, respectively. Species specificity was tested with a panel of 56 B. pseudomallei strains, 14 B. mallei strains and 34 strains of closely or distantly related species. To define the analytical sensitivity of the assay, the serially diluted bacterial suspension at concentrations of 109 –102 cells /ml was used. Conclusions. The multiplex PCR assay with two primer pairs and fluorescently-labeled probes, allowing for simultaneous detection and differentiation between B. mallei and B. pseudomallei was designed. Species-specific for glanders agent, B. mallei, fragment of fliP gene, which encodes protein of flagellin biosynthesis, and species-specific gene region of B. pseudomallei, encoding gp68 protein, were identified as DNA targets. Testing of Burkholderia and non-Burkholderia bacterial species revealed 100 % specificity of the amplification assay. The minimum detection limit of the designed multiplex PCR test-system was 1·103 cells/ml for B. mallei, and 1·104 cells/ml for B. pseudomallei

Содержание биологически активных веществ в проростках капусты рода Brassica L.

Relevance. Photosynthetic seedlings, as a model object, are interesting both in the study of nutritional value and the species response of a plant organism to the cultivation.Material and methods. The study was carried out on the basis of the laboratory analytical department of the FSBSI FSVC. The material of the research was sprouts of Brassica chinensis L., cv. Vesnyanka; Brassica oleraceae L. var. italica Plenck, cv. Tonus; Brassica oleracea L. convar. acephala DC., cv. Malinovka; Brassica oleracea var. gongylodes L., hybrid F1 Sonata and cv. Venskaya Belaya 1350; Brassica oleracea L. convar. capitata (L.) Alef. var. capitata L. f. rubra (L.) Thell., cv. Gako 741. The seeds of the 2018 harvest were germinated in filter paper cassettes using distilled water. The cassettes with seeds were placed in a thermostat under constant illumination and a temperature of 25°C. They have been germinated for 8 days, after which a biochemical analysis of the samples was carried out.Results. It was found out that the total content of water-soluble antioxidants in the studied of cabbage crops was in the range of concentrations from 3.58-4.57 mg-eq HA/g (wet weight). According to this indicator of 8-day-old seedlings, red cabbage variety Gako 741 was distinguished by the maximum values. The total content of antioxidants in the alcoholic extract ranged from 21.24 to 28.23 mg-eq HA/g (dry weight). The content of polyphenols – in the concentration range of 16.39-24.94 mg-eq of HA/g (dry weight). As a result of the research, direct correlations of the studied characteristics were revealed. A high correlation was shown between the content of water-soluble antioxidants and dry matter (r=0.72...0.98) and between the content of carotenoids and chlorophylls (r=0.98...0. 99).Актуальность. В настоящее время исследователи активно изучают проростки овощных культур, особенности их роста и развития, пищевую ценность. Фотосинтезирующие проростки, как модельный объект, интересен как при изучении пищевой ценности, так и видовой реакции растительного организма при культивировании. В связи с этим, комплексное изучение биологически активных соединений в проростках капустных культур, является актуальным.Материал и методика. Исследование проводили на базе лабораторно-аналитического отдела ФГБНУ «Федерального научного центра овощеводства» (ФГБНУ ФНЦО). Материалом исследований являлись проростки капусты китайской (Brassica chinensis L.) – сорт Веснянка, капусты брокколи (Brassica oleraceae L. var. italica Plenck) – сорт Тонус, капусты декоративной (Brassica oleracea L. convar. acephala DC.) – сорт Малиновка, капусты кольраби (Brassica oleracea var. gongylodes L.) – гибрид F1 Соната и сорт Венская белая 1350, капусты краснокочанной (Brassica oleracea L. convar. Capitata (L.) Alef. var. capitata L. f. rubra (L.) Thell.) – сорт Гако 741. Семена урожая 2018 года проращивали в кассетах на фильтровальной бумаге, используя дистиллированную воду. Кассеты с семенами помещали в термостат, при постоянном освещении и температуре 25°С. Проращивали в течение 8 суток, после чего проводили биохимический анализ исследуемых образцов.Результаты. Суммарное содержание водорастворимых антиоксидантов в исследованных проростках капустных культур находилось в пределах концентраций от 3,58-4,57 мг-экв ГК/г (сырой массы). По этому показателю у 8-суточных проростков максимальными значениями выделялась капуста краснокочанная. Суммарное содержание антиоксидантов в спиртовом экстракте составило от 21,24 до 28,23 мг-экв ГК/г (cухой массы), содержание полифенолов – в пределах 16,39-24,94 мг-экв ГК/г (сухой массы). В результате исследований выявлены прямые корреляционные взаимосвязи изученных признаков: высокая – между содержанием водорастворимых антиоксидантов и сухого вещества (r=0,72…0,98) и между содержанием каротиноидов и хлорофиллов (r=0,98…0,99)

СИНТЕЗ ФОСФОРИЛИРОВАННЫХ АМИНОКИСЛОТ

Phosphorylated derivatives of amino acids: glycine, β-alanine, γ-aminobutyric, L-aspartic and L-glutamic acid have been synthesized. Phosphorylation reaction is carried out using dimethylphosphite on allyl ethers of N-acetyl derivatives of amino acids. Obtained phosphorylated amino acids are of interest for potential use as pharmaceutical substances for a new class of effective drugs.  Разработан процесс получения фосфорилированных аминокислот, представляющих интерес для использования в качестве фармацевтических субстанций нового класса эффективных лекарственных средств различного терапевтического действия. Процесс включает 3 стадии: N-ацетилирование аминокислот, получение аллиловых эфиров N-ацетилпроизводных аминокислот и фосфорилирование синтезированных эфиров путем присоединения диметилфосфита по двойной связи аллиловых групп. В результате образуются целевые соединения – 3-диал-коксифосфорил-1-пропиловые эфиры N-ацетилированных аминокислот. При осуществлении указанного процесса синтезированы и выделены фосфорилированные производные следующих аминокислот: глицина, β-аланина, γ-аминомасляной, L-аспарагиновой и L-глутаминовой кислот. Установлено, что полнота конверсии аллилового эфира при действии диметилфосфита зависит от природы применяемой N-ацетиламинокислоты. Реакция фосфо-рилирования легко протекает при использовании аллиловых эфиров N-ацетилпроизводных монокарбоновых аминокислот – глицина, β-аланина и γ-аминомасляной кислоты. Диаллиловые эфиры вступают в реакцию значительно труднее, что, вероятно, связано с пространственными затруднениями при фосфорилировании двойных связей. Полученные фосфорилированные производные представляют интерес для использования в качестве потенциальных фармацевтических субстанций для нового класса эффективных лекарственных средств антигипоксического и кардиоваскулярного действия, а также корректоров патологий центральной нервной системы. 

Синтез и кардиопротекторная эффективность аргинина сукцината

The synthesis was developed and physic-chemical properties of the pharmaceutical substance the di-L-arginine succinate were determined. Its cardioprotective effectiveness in cases of ischemic-reperfusion injury of the myocardium was demonstrated in experiments on rats. The substance was used to obtain the drug Inokardin of cardioprotective action.Разработаны условия синтеза и определены физико-химические показатели фармацевтической субстанции ди-L-аргинина сукцинат. В опытах на животных показана его кардиопротекторная эффективность при ишемическо-реперфузионном повреждении миокарда. Субстанция использована для получения лекарственного средства Инокардин кардиопротекторного действия