Антиоксидантный эффект амброксола при обострении хронической обструктивной болезни легких у пациентов с ожирением

The aim of this study was to investigate antioxidant activity and clinical efficacy of parenteral ambroxol in obese patients with acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). Methods. Malondialdehyde (MDA), oxidative modification of proteins (MBP) and antiradical activity of (ARA) were measured in blood sera of 98 patients with acute exacerbation of COPD and obesity and in 23 healthy subjects. MDA was measured using thiobarbituric acid. MBP was detected using interaction between oxidized amino acid residues (aldehyde and ketone groups) with 2,4-dinitrophenylhydrazine (2,4-DNPH) and formation of 2,4-dinitrophenylhydrazone. Blood serum antiradical activity was detected by spectrophotometry of epinephrine autooxidation. Patients were divided into two groups: 48 COPD patients were treated with conventional therapy (bronchodilators via nebulize, glucocorticoids, antibiotics, oxygen, if necessary, mucoactive drugs orally) and ambroxol 30 mg q.d. IV; 50 patients were treated with similar conventional therapy and saline solution IV as placebo. Results. OMB level was significantly higher in COPD patients compared to that of healthy subjects. Antiradical activity in patients with acute exacerbation of COPD was significantly lower compared to healthy subjects. Intravenous ambroxol had antioxidant activity, improved clinical manifestations of acute exacerbation of COPD and contributed to faster recovery.У пациентов (n = 98) с обострением хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и ожирением и у здоровых лиц (n = 23) изучены содержание в крови малонового диальдегида (МДА), окислительная модификация белков (ОМБ) и антирадикальная активность сыворотки крови (АРА). Уровень МДА определялся с помощью тиобарбитуровой кислоты. Определение ОМБ было основано на взаимодействии окисленных аминокислотных остатков (альдегидные и кетонные группировки) с 2,4-динитрофенилгидразином с образованием 2,4-динитрофенилгидразонов. Уровень АРА крови определялся по аутоокислению адреналина спектрофотометрически. Больные были разделены на 2 группы. Пациенты 1-й группы (n = 48) получали традиционную терапию (небулизованные бронхолитические препараты и глюкокортикостероиды, антибактериальные препараты, кислород при необходимости, мукоактивные препараты per os) и амброксол 30 мг 1 раз в сутки внутривенно; больным 2-й группы (n = 50) вместо парентерального амброксола на фоне аналогичной в остальном фармакотерапии внутривенно вводился физиологический раствор. Установлено, что уровень ОМБ у обследуемых достоверно выше, чем у здоровых лиц. При этом АРА сыворотки крови при обострении ХОБЛ у больных с ожирением значимо ниже, чем у здоровых. При внутривенной терапии амброксолом наблюдался не только антиоксидантный эффект, но и положительное влияние на клинические проявления обострения и достижение ремиссии заболевания

Некоторые аспекты использования системного подхода к исследованию объектов судебной экспертизы

The article is devoted to the application of the systematic approach when studying the objects of forensic examination. Based on the theoretical reflection on the problem, as well as on the materials of practice of forensic computer and integrated psychological and linguistic examinations, the authors demonstrate that it is necessary to consider complex objects of analysis as systems. All the elements of such systems are intertwined, aligned, organized and collectively possess properties that are not inherent in any component of their parts. Application of the systematic approach in the production of forensic examinations will help to avoid mistakes resulting in unreliable conclusions.На основе теоретического осмысления проблемы использования системного подхода к исследованию объектов судебной экспертизы, а также на материале практики производства судебных компьютерно-технических и комплексных психолого-лингвистических экспертиз показано, что сложные объекты судебной экспертизы необходимо рассматривать как систему. Все элементы данной системы взаимосвязаны, упорядочены, организованы и в совокупности обладают свойствами, не присущими ни одной из составляющей его частей. Использование системного подхода в производстве судебных экспертиз позволит избежать ошибок, ведущих к недостоверным выводам

Ноопепт защищает инфузории Paramecium сaudatum от токсического действия соединений тяжёлых металлов

   Background. The dipeptide drug Noopept, created at the Zakusov Institute of Pharmacology, has a wide range of pharmacological actions, including cytoprotective one. In connection with the increasing pollution of the environment, it is urgent to identify the protective properties of drugs with a negative effect of heavy metal compounds on the live system.   The aim of the present study was to investigate the cytoprotective effects of Noopept under toxicity induced by heavy metal compounds using ciliates Paramecium caudatum as a test object.   Methods. The ciliates Paramecium caudatum were exposed to 4 salts of heavy metals: cadmium chloride, lead acetate, copper sulfate, zinc sulfate, as well as nanoparticles of copper oxide and zinc oxide. Noopept was added to the medium with the experimental cells 30 min before the introduction of damaging agents, at concentrations of 0.01–10 μM. Results. It was found that the presence of metal salts in the medium significantly reduced the number Paramecium сaudatum cells, depending on the time of exposure. Noopept at all studied concentrations reduced cell death, while the maximum intensity of the effect was observed at a concentration of 1 μM.   Conclusions. The results obtained make it possible to supplement data on the wide spectrum of Noopept's action.   Актуальность. Дипептидный препарат Ноопепт, созданный в НИИ фармакологии имени В. В. Закусова, обладает широким спектром фармакологического действия, включая цитопротекторное. В связи с увеличивающимся загрязнением окружающей среды актуальным является выявление защитных свойств препаратов при действии на организм соединений тяжёлых металлов.   Целью настоящего исследования было изучение цитопротекторных эффектов Ноопепта в условиях токсичности, индуцированной соединениями тяжёлых металлов, с использованием инфузорий Paramecium caudatum в качестве тест-объекта.   Методы. Инфузории Раramecium caudatum подвергались действию 4 солей тяжёлых металлов: хлорида кадмия, ацетата свинца, сульфата меди, сульфата цинка, а также наночастиц оксида меди и оксида цинка. За 30 мин до внесения повреждающих агентов в среду с опытными клетками добавлялся Ноопепт в концентрациях 0,01–10 мкМ.   Результаты. Установлено, что присутствие солей металлов в среде достоверно снижало численность клеток Paramecium caudatum в зависимости от времени воздействия. Ноопепт во всех изученных концентрациях снижал гибель клеток, при этом максимальная выраженность эффекта наблюдалась в концентрации 1 мкМ.   Заключение. Полученные в настоящей работе данные о способности препарата Ноопепт предотвращать негативные последствия действия соединений тяжёлых металлов позволяют дополнить сведения о широком спектре действия препарата

ESCHERICHIA COLI phenotypic characteristics and antagonistic activity in opisthorchiasis invasion

Opisthorchis felineus invasion in human causes inflammatory and dyskinetic disorders of the gastrointestinal tract accompanied by altered phenotypic characteristics in colon microbiota. The aim of research — study an impact of the Escherichia coli isolate phenotypic characteristics on Klebsiella spp. bacteria, isolated from colonic contents of patients with diagnosed opisthorchiasis as well as E. coli antagonistic activity. Materials and methods. The phenotypic properties of 54 E. coli isolates and 8 genus Klebsiella isolates obtained from colonic contents of patients with diagnosed opisthorchiasis were assessed. Identification of isolates and analysis of proteomic profiles were performed using Maldi BioTyper 3.0 software. 204 co-cultivation datasets were analyzed investigating antagonistic activity of E. coli isolates with varying properties on Klebsiella spp. E. coli and Klebsiella spp. isolates were examined by whole genome sequencing. Results. E. coli bacteria with typical phenotypic characteristics showed significantly more prominent antagonistic activity against Klebsiella spp. A significantly higher level of antagonistic activity against K. oxytoca bacteria vs K. pneumoniae strains. The proteomic bacterial strain profiles were divided into clusters depending on the level of antagonistic activity. E. coli molecular serotyping for O- and H-antigens revealed the genes of enterotoxigenic, enteroinvasive and extraintestinal pathogens in 60.0% of cases. Strains with the highest antagonistic activity index, which are carriers of the genes typical to enterotoxigenic E. coli sequence serotypes O6:H1 and O6:H5, were identified. The genome of such strains consisted of the largest number of virulence gene complexes: adhesins, invasins, toxins, bacteriocins. Multilocus sequence typing and sequence serotyping of E. coli and K. pneumoniae strains established their heterogeneity; K. oxytoca isolates were identified as ST242 and ST176. All strains were characterized by homology of antibiotic resistance markers (oqxA, oqxB, fosA) and a variety of beta-lactam resistance gene variants. Conclusion. It was found that E. coli isolates with typical phenotypic characteristics and carriers of virulence gene complexes exhibited significantly more pronounced antagonistic activity against Klebsiella spp. isolated from colonic contents of patients with diagnosed opisthorchiasis

О месте новой концепции в теории комплексной экспертизы

The paper addresses some issues arising from the need to evaluate new theories andconcepts, presents key innovative aspects of the recently developed theory of integratedforensic investigation and highlights the synthesis of the existing and new conceptualframeworks.В статье затронуты вопросы оценки новых теорий и концепций, представлены основные новации разработанной концепции комплексной судебной экспертизы и подчеркивается синтез существующей и новой концепций

Effects of autologous gingiva-derived cells with myogenic potential on regeneration of skeletal muscle

In our recent studies we found for the first time the ability of human multipotent mesenchymal stromal cells (MSCs) derived from alveolar gingiva (alveolar mucosa) to differentiate into myogenic direction. The aim of the present study was to evaluate the effects of autologous gingiva-derived MSCs with myogenic potential on the regeneration of muscular tissue after mechanical damage. The study was conducted on 11 male rabbits. Biopsy of alveolar gingiva was performed at each animal before experiment for autologous MSCs obtainment. Cultures of MSCs were induced in vitro into myogenic direction. To model the damage, the medial heads of the gastrocnemius muscles were intersected on both pelvic limbs of the rabbit. Injection of autologous MSCs was performed on the seventh day after injury into the damaged muscle of one of the extremities, while equal volume of saline (control) was injected into the muscle of the contralateral limb. The animals were sacrificed on 0, 21, and 35 days after the administration of cells. MSCs transplantation led to significant reduction of the area of muscle damage. Immunohistochemical analysis revealed earlier increase in the proportion of MyoD- and myogenin-positive cells, as well as decrease in the expression of Ki-67 in damaged tissue, in experimental group compared to the control. Autologous cells did not significantly affect the composition of muscle fibers. Significant decrease in the proportion of fibrous tissue was also observed in the experimental group. The results indicate the effectiveness of autologous alveolar gingiva-derived MSCs for treatment of mechanical damage of muscle tissue. Local administration of cells accelerated reparative regeneration and prevented fibrosis

Цитопротекторные свойства дипептидных миметиков фактора роста нервов и мозгового нейротрофического фактора, ГК-2 и ГСБ-106, в модели окислительного стресса у инфузорий

Resume. Actuality. Dimeric dipeptide mimics of the nerve growth factor ( NGF) and brain derived neurotrophic factor (BDNF), respectively GK-2 and GSB-106, were created in the V.V. Zakusov Institute of pharmacology. The similarity of GK-2 and GSB-106 to the corresponding full-sized neurotrophins by the mechanism of action and pharmacological properties, including pronounced neuroprotective activity in vitro and in vivo, has been established. The purpose of this study was to obtain additional data on the cytoprotective properties of GK-2 and GSB-106 using Paramecium caudatum. Methods. Oxidative stress in the Paramecium caudatum was induced by adding heavy metal salts (cadmium chloride, lead acetate, copper sulfate, zinc sulfate) to the medium at a final concentration of 10 |jM. GK-2 or GSB-106 in concentrations from 10-5 to 10-8 M was added into the medium with experimental cells 45 minutes before introducing the oxidative stress initiator. Results. Dipeptides GK-2 and GSB-106 in all studied concentrations protected cells from death. The maximum neuroprotective effect of the dipeptides showed in a concentration of 10-8 M, completely preventing the death of ciliates. Conclusion. GK-2 and GSB-106, at a concentration of 10-8M, completely protect against the death Paramecium caudatum under conditions of oxidative stress caused by heavy metal salts.Актуальность. В НИИ фармакологии имени В.В. Закусова были созданы димерные дипептидные миметики фактора роста нервов (nerve growth factor, NGF) и мозгового нейротрофического фактора (brain derived neurotrophic factor, BDNF), соответственно ГК-2 и ГСБ-106. Установлено подобие ГК-2 и ГСБ-106 соответствующим полноразмерным нейротрофинам по механизму действия и фармакологическим свойствам, включая выраженную нейропротекторную активность in vitro и in vivo. Целью данной работы было получение дополнительных данных о цитопротекторных свойствах ГК-2 и ГСБ-106 с использованием инфузорий. Методы. Окислительный стресс у инфузорий Paramecium caudatum моделировали добавлением в среду солей тяжёлых металлов (хлорид кадмия, ацетат свинца, сульфат меди, сульфат цинка) в конечных концентрации 10 мкМ. За 45 мин до внесения инициатора окислительного стресса в среду с опытными клетками добавляли ГК-2 или ГСБ-106 в концентрациях от 10-5 до 10-8 М. Результаты. Дипептиды ГК-2 и ГСБ-106 во всех изученных концентрациях защищали клетки от гибели. Максимальный нейропротекторный эффект дипептиды проявляли в концентрации 10-8 М, полностью предотвращая гибель инфузорий. Заключение. ГК-2 и ГСБ-106 в концентрации 108 М полностью защищают от гибели инфузории Paramecium caudatum в условиях окислительного стресса, вызванного солями тяжёлых металлов

Влияние раково-эмбрионального антигена на продукцию цитокинов иммунокомпетентными клетками крови у больных с опухолями молочной железы

Aim. Investigation of the influence of canceroembryonic antigen (CEA) on the immune cells in patients with breast tumors.Materials and methods. Peripheral blood of 67 patients with invasive ductal carcinoma (n = 44), fibroadenoma (n = 12) and breast pre-cancer (n = 11). In the supernatants of the blood cells cytokine production induced by CEA was determined by ELISA.Results. It was found that CEA stimulated production of IL-6, IL-8, IL-10, IL-1β, IL-1Ra, TNFα, G-CSF, GM-CSF and the protein MCP-1 by blood immune cells in patients with fibroadenoma compared with groups of patients with invasive ductal carcinoma and precancerous lesions. Stimulation index of CEA on cytokine production by immunocompetent cells in patients in these groups was lower than in groups of patients with fibroadenoma due to initially high levels of spontaneous cytokine production.Results.  In  patients  with  fibroadenoma  CEA  was  found  to  stimulate  the  production  of  IL-6,  IL-8,  IL-10,  IL-1β,  IL-1Ra,  TNFa,  G-CSF,  GM-CSF  and  MCP-1  compared  with  groups  of  patients  with  invasive ductal carcinoma and precancerous conditions. Indexes of the influence of CEA on cytokine production by immunocompetent cells in these groups was lower than in the fibroadenoma due to initially high spontaneous production of cytokines.Conclusion.  Evident  spontaneous  cytokine-producing  function  of  immunocompetent  blood  cells  was revealed in patients with invasive ductal carcinoma and precancerous conditions compared to patients with fibroadenoma.  The  differences  between  the  indices  of  CEA  influence  on  cytokine  production  in  patients with malignant, benign and precancerous conditions can serve as a basis for the development of methods of differential diagnosis of breast tumors.Цель – изучение влияния раково-эмбрионального антигена (РЭА) на иммунокомпетентные клетки крови при опухолях молочной железы.Материалы и методы. Исследована периферическая кровь 67 пациентов с инвазивным протоковым раком (n = 44), фиброаденомой (n = 12) и предраковыми состояниями молочной железы (n = 11). В супернатантах клеток крови иммуноферментным анализом определяли продукцию цитокинов, индуцированную РЭА.Результаты. Обнаружено, что у больных с фиброаденомой РЭА стимулировал выработку IL-6, IL-8, IL-10, IL-1β, IL-1Ra, TNFα, G-CSF, GM-CSF и белка MCP-1 по сравнению с группами больных с инвазивным протоковым раком и предраковыми состояниями. Индексы влияния РЭА на продукцию цитокинов иммунокомпетентными клетками в этих группах были ниже, чем при фиброаденоме вследствие изначально высокой спонтанной продукции цитокинов.Заключение. Выявлена выраженная спонтанная цитокинпродуцирующая функция иммунокомпетентных клеток крови пациентов с инвазивным протоковым раком и предраковыми состояниями по сравнению с группой пациентов с фиброаденомой. Различия в индексах влияния РЭА на продукцию цитокинов у пациентов со злокачественными, доброкачественными и предраковыми состояниями могут служить основой создания методов дифференциальной диагностики опухолей молочной железы

Хроническое ультрафиолетовое облучение индуцирует развитие устойчивой резистентности клеток меланомы к противоопухолевым препаратам

Introduction. Melanoma belongs to the group of the most malignant tumors characterized by aggressive growth and active metastasis. At the same time, the effectiveness of therapy, primarily targeted therapy, is largely limited by the rapid development of drug resistance.Aim. To study the effect of chronic ultraviolet (UV) irradiation on the formation of a population of radiation-resistant melanoma cells; to study the features of cell signaling and the sensitivity of UV-resistant melanoma cells to the antitumor drugs.Materials and methods. The experiments were carried out on in vitro cultured A375 melanoma cells. Cells were cultured in a standard DMEM + 10 % FBS medium; cell growth rate was analyzed using the MTT assay; cell survival after irradiation was analyzed using a colony-forming test. Determination of the transcriptional activity of the estrogen receptor (ER) was performed by reporter analysis upon transfection into cells of a plasmid containing the luciferase reporter gene controlled by estrogen responsive element. The immunoblotting method was used to analyze the expression of cellular proteins; comparative analysis of ERα and ERβ expression was performed by immunofluorescent method.Results. Long-term UV irradiation leads to the formation of a UV-resistant subpopulation of A375 melanoma cells, which is characterized by decreased sensitivity to targeted (vemurafenib) and hormonal (tamoxifen) drugs, increased expression of Snail, an activator of the epithelial-mesenchymal transition, and in the absence of noticeable changes in the expression of PI3K / mTOR signaling. Metformin reduces Snail expression in both parental and UV-resistant A375 cells and enhances the cytostatic effect in combination with vemurafenib or tamoxifen.Conclusion. The data obtained demonstrate a decrease in the sensitivity of melanoma cells to targeted drugs under the long-term exposure to UV. The ability of metformin to potentiate the action of targeted drugs and inhibit Snail allows us to consider metformin not only as an antitumor agent, but also as a potential inhibitor of the epithelial-mesenchymal transition.Введение. Меланома относится к группе наиболее злокачественных новообразований, отличающихся агрессивным ростом и активным метастазированием. при этом эффективность терапии, в первую очередь таргетной терапии, во многом ограничена быстрым развитием резистентности к препаратам.Цель исследования – изучить влияние хронического ультрафиолетового (УФ) облучения на формирование субпопуляции устойчивых к УФ клеток меланомы, а также особенности клеточного сигналинга и чувствительность УФрезистентных клеток меланомы к действию противоопухолевых препаратов.Материалы и методы. эксперименты проводились на культивируемых in vitro клетках меланомы А375. клетки культивировали в стандартной среде DMEM + 10 % FBS, анализ скорости роста клеток проводили с помощью МТТ-теста; выживаемость клеток после облучения анализировали с использованием колониеобразующего теста. Транскрипционную активность рецептора эстрогенов (ER) определяли методом репортерного анализа при трансфекции в клетки плазмиды, содержавшей ген-репортер люциферазы под контролем промотора с эстроген-респонсивным элементом. Для анализа экспрессии клеточных белков использовали метод иммуноблоттинга; сравнительный анализ экспрессии ERα и ERβ проводили с помощью иммунофлуоресцентного метода.Результаты. Длительное УФ-облучение приводит к формированию УФ-резистентной субпопуляции клеток меланомы А375, отличающейся пониженной чувствительностью к таргетным (вемурафенибу) и гормональным (тамоксифену) препаратам на фоне повышенной экспрессии Snail – активатора эпителиально-мезенхимального перехода и при отсутствии заметных изменений в экспрессии белков PI3K (фосфоинозитид-3-киназы) / mTOR (мишень рапамицина млекопитающих) сигналинга. Метформин снижает экспрессию Snail как в родительских, так и в УФ-резистентных клетках А375 и усиливает цитостатический эффект в комбинации с вемурафенибом или тамоксифеном.Заключение. полученные данные свидетельствуют о снижении чувствительности к таргетным препаратам клеток меланомы на фоне длительной экспозиции с УФ. Способность метформина потенцировать действие таргетных препаратов и ингибировать Snail позволяет рассматривать это лекарственное стредство не только как противоопухолевый агент, но и как потенциальный ингибитор эпителиально-мезенхимального перехода

Introducing a New Concept in the Theory of Integrated Forensic Investigation

The paper addresses some issues arising from the need to evaluate new theories andconcepts, presents key innovative aspects of the recently developed theory of integratedforensic investigation and highlights the synthesis of the existing and new conceptualframeworks