FGF-2, TGFβ-1, PDGF-A and respective receptors expression in pleomorphic adenoma myoepithelial cells: an in vivo and in vitro study

Myoepithelial cells have an important role in salivary gland tumor development, contributing to a low grade of aggressiveness of these tumors. Normal myoepithelial cells are known by their suppressor function presenting increased expression of extracellular matrix genes and protease inhibitors. The importance of stromal cells and growth factors during tumor initiation and progression has been highlighted by recent literature. Many tumors result from the alteration of paracrine growth factors pathways. Growth factors mediate a wide variety of biological processes such as development, tissue repair and tumorigenesis, and also contribute to cellular proliferation and transformation in neoplastic cells. OBJECTIVES: This study evaluated the expression of fibroblast growth factor-2 (FGF-2), transforming growth factor β-1 (TGFβ-1), platelet-derived growth factor-A (PDGF-A) and their respective receptors (FGFR-1, FGFR-2, TGFβR-II and PDGFR-α) in myoepithelial cells from pleomorphic adenomas (PA) by in vivo and in vitro experiments. MATERIAL AND METHODS: Serial sections were obtained from paraffin-embedded PA samples obtained from the school's files. Myoepithelial cells were obtained from explants of PA tumors provided by surgery from different donors. Immunohistochemistry, cell culture and immunofluorescence assays were used to evaluate growth factor expression. RESULTS: The present findings demonstrated that myoepithelial cells from PA were mainly positive to FGF-2 and FGFR-1 by immunohistochemistry and immunofluorescence. PDGF-A and PDGFR-α had moderate expression by immunohistochemistry and presented punctated deposits throughout cytoplasm of myoepithelial cells. FGFR-2, TGFβ-1 and TGFβR-II were negative in all samples. CONCLUSIONS: These data suggested that FGF-2 compared to the other studied growth factors has an important role in PA benign myoepithelial cells, probably contributing to proliferation of these cells through the FGFR-1

Pulpal response of dogs primary teeth to an adhesive system or to a calcium hydroxide cement

The aim of this study was to evaluate the pulpal response of dogs primary teeth to an adhesive system or to a calcium hidroxide cement after mechanic exposure of the pulp. Three mongrel dogs were used and ten class V cavities were prepared on their teeth. A mechanic pulp exposure was produced with a sterile exploratory probe in the central portion of each cavity and bleeding was controlled with dry sterile cotton pellets. Enamel, dentin and the site of the pulp exposure of five teeth were etched with 35% phosphoric acid followed by the application of an adhesive system (Scotchbond Multi-Purpose - 3M). In the other five teeth, calcium hydroxide cement (Hydro C - Dentsply) was applied on the site of the pulp exposition before application of the adhesive system (Scotchbond Multi-Purpose - 3M). All teeth were restored with a resin composite (Z-100 - 3M). After 7, 30 or 45 days the dogs were anesthetized and perfused with saline followed by a solution of neutral buffered formalin. Maxilla and mandible were sectioned into three parts and placed in a solution for demineralization. Following bone demineralization, all teeth were cut, trimmed, embedded in paraffin and longitudinally cut. Then, the teeth were stained with hematoxilin and eosin and observed under a light microscope. The results obtained with the treatments proposed in this study showed the presence and persistence of an inflammatory response of different intensities at the three experimental periods. There was no variation in the inflammatory response regarding the different treatments performed.O objetivo deste estudo foi de avaliar a resposta pulpar de dentes decíduos de cães à um sistema adesivo ou a um cimento de hidróxido de cálcio após exposição mecânica da polpa. Foram utilizados três cães sem raça definida, e nestes foram realizados dez preparos cavitários classe V. Uma exposição pulpar mecânica foi produzida com uma sonda exploradora esterilizada, na porção central de cada cavidade. A hemorragia foi controlada com "bolinhas" de algodão esterilizadas. O esmalte, dentina e local da exposição pulpar de cinco dentes foram condicionados com ácido fosfórico a 35%, seguido da aplicação de um sistema adesivo (Scotchbond Multi-Uso - 3M). Nos outros cinco dentes, um cimento de hidróxido de cálcio (Hydro C - Dentsply) foi aplicada no local da exposição pulpar antes da aplicação do mesmo sistema adesivo. Todos os dentes foram restaurados com uma resina composta (Z-100 - 3M). Após 7, 30 ou 45 dias os cães foram anestesiados e perfundidos com solução salina seguida de uma solução de formalina neutra tamponada. A maxila e a mandíbula foram seccionadas em três partes e estocadas em uma solução para desmineralização. Após a desmineralização óssea, todos os dentes foram cortados, incluídos em parafina e seccionados longitudinalmente. A seguir todos os dentes foram corados com hematoxilina e eosina e observados em microscópio de luz. Os resultados demonstraram a presença e persistência de uma resposta inflamatória de diferentes intensidades nos três períodos experimentais. Não houve variação na resposta inflamatória pelos diferentes tratamentos propostos

Interstitial and Langerhans' dendritic cells in chronic periodontitis and gingivitis

The aim of the present study was to compare quantitatively the distribution of dendritic cell subpopulations in chronic periodontitis and gingivitis. Fourteen biopsies from patients with chronic periodontitis and fifteen from patients with gingivitis were studied. An immunoperoxidase technique was used to quantify the number of Langerhans' cells (CD1a) and interstitial dendritic cells (factor XIIIa) in the oral and sulcular and junctional/pocket epithelia and in the lamina propria. A greater number of factor XIIIa+ dendritic cells in the lamina propria and CD1a+ dendritic cells in the oral epithelium were observed in gingivitis compared to the periodontitis group (p = 0.05). In the sulcular and junctional/pocket epithelia and in the lamina propria, the number of CD1a+ dendritic cells was similar in the gingivitis and periodontitis groups. In conclusion, the number of Langerhans' cells in the oral epithelium and interstitial dendritic cells in the lamina propria is increased in gingivitis compared to periodontitis, which may contribute to the different pattern of host response in these diseases

Cisticercose oral: relato de caso e revisão da literatura

A cisticercose é uma doença que ocorre quando o indivíduo é infectado pela larva da Taenia solium, atuando como hospedeiro intermediário ao invés de definitivo. A cisticercose em cavidade oral é rara e seu diagnóstico clínico é difícil. Neste trabalho, é relatado um caso de cisticercose oral em paciente de 23 anos, sexo feminino que apresentou um crescimento indolor na região de dorso de língua. Foi realizada uma biópsia excisional e o exame histopatológico revelou uma cavidade cística apresentando em seu interior a larva.Cysticercosis is a condition that occurs when man is infested by the larvae of Taenia solium, acting as an intermediate host instead of definitive. Oral cysticercosis is a rare event, and it represents a difficulty in clinical diagnosis. A case of oral cysticercosis in a 23-year-old white female who presented a painless swelling in the dorsal portion of the tongue is reported. An excisional biopsy was performed and histopathological examination revealed a cystic cavity containing the tapeworm

DESAFIOS E PERSPECTIVAS NA PRODUÇÃO IN VIVO DE EMBRIÕES DE PEQUENOS RUMINANTES NO NORDESTE DO BRASIL

As a result of the need to use matrices and breeders with high genetic merit, reproductive biotechnologies such as Multiple Ovulation and Embryo Transfer (MOTE) have been increasingly used, thus guaranteeing productivity even in the face of obstacles. In recent years, this activity has shown a marked development and improvement, especially in goats and sheep, which are extremely important species for the Northeast Region of Brazil, as they are one of the most advantageous crops for this region when compared to other crops such as livestock and because it is a sustainable activity from an environmental, socio-cultural and economic point of view. Among the main factors that still affect the performance and success of Embryo Transfer (ET) programs in small ruminants we can highlight the selection of donor and recipient females, variability in response to superovulation protocols, premature corpus luteum (CL) regression, need for surgical steps such as laparotomy and laparscopy and low availability of specialized labor. In this sense, this article addresses the main stages of in vivo embryo production in small ruminants as well as the challenges and perspectives of each stage to be faced in the Northeast Region of Brazil.Em decorrência da necessidade de aproveitamento de matrizes e reprodutores de alto mérito genético biotecnologias reprodutivas como a Multipla Ovulação e Transferência de Embriões (MOTE) vêm sendo cada vez mais utilizada, garantindo assim a produtividade mesmo diante de obstáculos. Nos últimos anos essa atividade vem apresentando um acentuado desenvolvimento e aprimoramento, principalmente em caprinos e ovinos que se constituem espécies de extrema importância para a Região Nordeste do Brasil, por serem uma das culturas mais vantajosas quando comparado com as demais culturas como a pecuária e por se tratar de uma atividade sustentável do ponto de vista ambiental, sociocultural e econômico.  Dentre os principais fatores que ainda afetam o desempenho e sucesso dos programas de Transferência de Embriões (TE) em pequenos ruminantes podemos destacar a seleção de fêmeas doadoras e receptoras, variabilidade de resposta aos protocolos de superovulação, regressão prematura de corpo lúteo (CL), necessidade de etapas cirúrgicas como a laparotomia e laparscopia e baixa disponibilidade de mão de obra especializada. Nesse sentido, este artigo aborda as principais etapas da produção in vivo de embriões em pequenos ruminantes bem como os desafios e as perspectivas de cada etapa a serem enfrentadas na Região Nordeste do Brasil

PRODUÇÃO IN VIVO DE EMBRIÕES CAPRINOS E OVINOS SUBMETIDOS AO MEIO DE MANUTENÇÃO ACP®

The use of ACP® as a means of maintenance in the stages of multiple ovulation and embryo transfer, has not yet been reported in the literature, although ACP® is a plant fluid rich in nutrients. Thus, the objective was to compare the efficiency of ACP® as a substitute for embryo maintenance medium during MOTE biotechnology in goats and sheep. For this, three donor goats, Anglo-Nubian breed and three donor sheep, Dorper breed were used. Fifteen recipient females of each species were used. The donors were submitted to the superovulation protocol and inseminated, and later the embryos were collected. After harvesting, the embryos were submitted to the control maintenance medium, TQC Holding® or ACP® maintenance medium. The recipients were synchronized simultaneously with the donors, and after 30 days the pregnancy diagnosis was made. It was obtained 10% of pregnant in goats and 75% of pregnant in sheep, whose embryos were submitted to the ACP® maintenance medium before the innovation. It is concluded that the means of maintenance of ACP® embryos did not negatively influence the embryonic quality and the development of pregnancy in small ruminants.A utilização do ACP® como meio de manutenção nas fases de ovulação múltipla e transferência embrionária, ainda não foi relatada na literatura, embora o ACP® seja um fluido vegetal rico em nutrientes. Assim, o objetivo foi comparar a eficiência do ACP® como substituto do meio de manutenção de embriões durante a biotecnologia MOTE em caprinos e ovinos. Para isso, foram utilizadas três cabras doadoras, raça Anglo-Nubiana e três ovelhas doadoras, raça Dorper. Quinze fêmeas receptoras de cada espécie foram utilizadas. As doadoras foram submetidas ao protocolo de superovulação e inseminadas, e posteriormente os embriões foram coletados. Após a colheita, os embriões foram submetidos ao meio de manutenção controle, meio de manutenção TQC Holding® ou ACP®. As receptoras foram sincronizadas simultaneamente com as doadoras, e após 30 dias foi feito o diagnóstico de gestação. Obteve-se 10% de prenhes em cabras e 75% de prenhes em ovelhas, cujos embriões foram submetidos ao meio de manutenção ACP® antes da inovação. Conclui-se que o meio de manutenção dos embriões ACP® não influenciou negativamente na qualidade embrionária e no desenvolvimento da prenhez em pequenos ruminantes

USO DA BROMELINA NA QUALIDADE DO SÊMEN CAPRINO CONGELADO/DESCONGELADO

The objective of this study was to evaluate the effect of bromelain on sperm quality, after defrosting, in goats. For this purpose, five Anglo Nubian goats were used. Semen collection was performed with the aid of an artificial vagina. The semen was evaluated for its macroscopic and microscopic parameters. After the analysis, the total volume of the pool was divided into three groups. One belonging to the control group (ACP-101/102®) and two treatment groups with ACP-101/102® enriched with bromelain in concentrations of 5% and 10%. The samples were cryopreserved with the aid of the Tk3000 device. Then, the straws were immersed in liquid nitrogen and stored in cryogenic cylinders. After one week the samples were thawed and evaluated by the system CASA (Computer Assisted Sperm Analysis). After thawing, the total sperm motility assessed by the system CASA was preserved in the control group and in the treatment group at a concentration of 5%. The curvilinear speed (LCV) and mean trajectory speed (VAP) of sperm were higher in the control group compared to the others. Thus, it is concluded that bromelain does not present genotoxicity to goat sperm, as well as its use is satisfactory in terms of the quality of seminal parameters after thawing.O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da bromelaína na qualidade espermática, após descongelamento, em caprinos. Para tanto, foram utilizadas cinco cabras anglo-núbias. A coleta de sêmen foi realizada com auxílio de vagina artificial. O sêmen foi avaliado quanto aos seus parâmetros macroscópicos e microscópicos. Após a análise, o volume total da piscina foi dividido em três grupos. Um pertencente ao grupo controle (ACP-101/102®) e dois grupos de tratamento com ACP-101/102® enriquecido com bromelaína nas concentrações de 5% e 10%. As amostras foram criopreservadas com auxílio do aparelho Tk3000. Em seguida, as palhetas foram imersas em nitrogênio líquido e armazenadas em cilindros criogênicos. Após uma semana as amostras foram descongeladas e avaliadas pelo sistema CASA (Computer Assisted Sperm Analysis). Após o descongelamento, a motilidade espermática total avaliada pelo sistema CASA foi preservada no grupo controle e no grupo tratamento na concentração de 5%. A velocidade curvilínea (LCV) e a velocidade média de trajetória (VAP) dos espermatozoides foram maiores no grupo controle em relação aos demais. Assim, conclui-se que a bromelaína não apresenta genotoxicidade ao esperma caprino, bem como seu uso é satisfatório quanto à qualidade dos parâmetros seminais após descongelamento

TAXAS DE MATURAÇÃO DE OÓCITOS CONGELADOS LENTAMENTE DE CAPRINOS

The objective was to evaluate the maturation rates of goat oocytes submitted to slow freezing in conventional medium for IVM. For this purpose, cumulus-oocyte complexes aspirated from pubic goat ovaries were classified morphologically and slowly frozen with 1.5 M ethylene glycol. After thawing the cryopreserved oocytes, those classified as viable were matured in conventional in vitro maturation medium. Evaluating the maturation rate, the percentage of matured oocytes in the group that underwent the cryopreservation process is significantly lower (17.6%) when compared to the control group (69.2%), also showing a high percentage of immature oocytes. Several oocyte injuries were found, caused by the studied cryopreservation method, interfering with their oocyte competence. Even with nuclear maturation rates, observed through the extrusion of the first polar corpuscle, the morphologies were altered in most oocytes, and further studies using new techniques and / or other cryoprotectants are necessary.O objetivo foi avaliar as taxas de maturação de oócitos caprinos submetidos ao congelamento lento em meio convencional para IVM. Para tanto, complexos cumulus-oócitos aspirados de ovários púbicos de cabras foram classificados morfologicamente e congelados lentamente com etileno glicol 1,5 M. Após o descongelamento dos oócitos criopreservados, aqueles classificados como viáveis foram maturados em meio convencional de maturação in vitro. Avaliando a taxa de maturação, o percentual de oócitos maturados no grupo que passou pelo processo de criopreservação é significativamente menor (17,6%) quando comparado ao grupo controle (69,2%), apresentando também um alto percentual de oócitos imaturos. Foram encontradas diversas lesões oocitárias, causadas pelo método de criopreservação estudado, interferindo na sua competência oocitária. Mesmo com as taxas de maturação nuclear, observadas através da extrusão do primeiro corpúsculo polar, as morfologias foram alteradas na maioria dos ovócitos, sendo necessários mais estudos utilizando novas técnicas e/ou outros crioprotetores

AVALIAÇÃO ULTRAESTRUTURAL DE ESPERMATOZOIDE CAPRINO CRIOPRESERVADO, ATRAVÉS DA MICROSCOPIA ELETRÔNICA DE TRANSMISSÃO

The ultrastructure evaluation allows the analysis of the sperm cell in a subcellular proportion that is not observed in optical microscopy. Transmission electron microscopy (MET) is a tool used to determine the size and shape of inorganic and biological structures based on the interaction of electrons incident on matter. In this sense, with the use of MET, the objective was to evaluate the ultrastructural changes after the semen manipulation, mainly in the freeze-thaw process, which were not observed in tests using optical microscopy, that is, the morphological integrity of the membranes and goat sperm organelles. The evaluation took place at the Institute of Biosciences of the University of Brasília (UnB). The semen straws were thawed and washed in PBS. Then, they were centrifuged and fixed, contrasted in bloc and subjected to dehydration. The samples were placed for polymerization and ultrathin cuts were made and stored until the time of MET evaluation. In the ultrastructural analyzes by MET in the present work, no harmful actions occurred in either the control or experimental groups. The head regions (plasma membrane and acrosome) remained preserved, with no change in DNA. In conclusion, MET is especially useful tool for cell evaluation.A avaliação da ultraestrutura permite a análise da célula espermática em uma proporção subcelular que não é observada na microscopia óptica. A microscopia eletrônica de transmissão (MET) é uma ferramenta utilizada para determinar o tamanho e a forma de estruturas inorgânicas e biológicas com base na interação de elétrons incidentes na matéria. Nesse sentido, com o uso do MET, objetivou-se avaliar as alterações ultraestruturais após a manipulação do sêmen, principalmente no processo de congelamento-descongelamento, que não foram observadas em testes com microscopia óptica, ou seja, a integridade morfológica das membranas e organelas de esperma de cabra. A avaliação aconteceu no Instituto de Biociências da Universidade de Brasília (UnB). As palhetas de sêmen foram descongeladas e lavadas em PBS. Em seguida, foram centrifugados e fixados, contrastados em bloco e submetidos à desidratação. As amostras foram colocadas para polimerização e cortes ultrafinos foram feitos e armazenados até o momento da avaliação do MET. Nas análises ultraestruturais por MET no presente trabalho, nenhuma ação prejudicial ocorreu nos grupos controle ou experimental. As regiões da cabeça (membrana plasmática e acrossoma) permaneceram preservadas, sem alterações no DNA. Em conclusão, MET é uma ferramenta especialmente útil para avaliação celular

TÉCNICA DO COMETA PARA AVALIAÇÃO DA INTEGRIDADE DO DNA DE ESPERMATOZOIDES CAPRINOS CRIOPRESERVADOS EM ACP-101/102®

Animal reproduction represents one of the most important factors, and the use of reproductive biotechnologies that help increase production is essential. The comet technique is the simple and quick way to detect pre-mutagenic lesions and assist in studies on environmental biomonitoring, toxicological genetics, biological radiation, DNA repair process and genetic ecotoxicology. The objective of this study was to evaluate the viability of DNA from sperm cells from goat semen submitted to the cryopreservation process in powdered coconut water (ACP-101c/102c). The experiment was carried out at the Federal University of Piauí with two goats of reproductive age. The evaluation of the spermatic DNA integrity was performed using an immunofluorescence microscope. Classes from 0 to 3 were used, 0 being no damage and 3, the tail of the comet greater than twice the size of the nucleoid. The results obtained in the G2 test group (ACP 101c-102c) showed a slight tail formation, indicating a slight fragmentation of DNA. It was concluded that in the control group GC1 (TRIS + egg yolk of Gallu gallus domesticus) and experimental group (ACP 101c - 102c) there was no significant difference.A reprodução animal representa um dos fatores mais importantes, sendo imprescindível o uso de biotecnologias reprodutivas que auxiliem no aumento da produção. A técnica do cometa é a maneira simples e rápida de detectar lesões pré-mutagênicas e auxiliar em estudos de biomonitoramento ambiental, genética toxicológica, radiação biológica, processo de reparo de DNA e ecotoxicologia genética. O objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade do DNA de espermatozoides de sêmen caprino submetido ao processo de criopreservação em água de coco em pó (ACP-101c/102c). O experimento foi realizado na Universidade Federal do Piauí com duas cabras em idade reprodutiva. A avaliação da integridade do DNA espermático foi realizada em microscópio de imunofluorescência. Foram utilizadas classes de 0 a 3, sendo 0 nenhum dano e 3, a cauda do cometa maior que o dobro do tamanho do nucleoide. Os resultados obtidos no grupo teste G2 (ACP 101c-102c) mostraram uma leve formação de cauda, indicando uma leve fragmentação do DNA. Concluiu-se que no grupo controle GC1 (TRIS + gema de ovo de Gallu gallus domesticus) e no grupo experimental (ACP 101c - 102c) não houve diferença significativa