Experimental Evaluation of Application of Cross-Flow Ultrafiltarion Method for O Antigen Concentrating in Cholera Chemical Bivalent Vaccine Production

Demonstrated is possibility to apply cross-flow ultrafiltration method for O antigen of Vibrio cholerae M-41 Ogawa concentrating from germ-free centrifugate. Technological process of concentrating was optimized. Worked out were the regimes of conservation and cleaning of the ultrafiltration device. The prospects of cross-flow ultrafiltration method introduction in technology of cholera chemical bivalent vaccine production were determined

Protestant women in the late Soviet era: gender, authority, and dissent

At the peak of the anti-religious campaigns under Nikita Khrushchev, communist propaganda depicted women believers as either naïve dupes, tricked by the clergy, or as depraved fanatics; the Protestant “sektantka” (female sectarian) was a particularly prominent folk-devil. In fact, as this article shows, women’s position within Protestant communities was far more complex than either of these mythical figures would have one believe. The authors explore four important, but contested, female roles: women as leaders of worship, particularly in remote congregations where female believers vastly outnumbered their male counterparts; women as unofficial prophetesses, primarily within Pentecostal groups; women as mothers, replenishing congregations through high birth rates and commitment to their children’s religious upbringing; and women as political actors in the defence of religious rights. Using a wide range of sources, which include reports written by state officials, articles in the church journal, letters from church members to their ecclesiastical leaders in Moscow, samizdat texts, and oral history accounts, the authors probe women’s relationship with authority, in terms of both the authority of the (male) ministry within the church, and the authority of the Soviet state

Разработка оптимальных условий нанофильтрации в технологии производства иммуноглобулина G человека нормального для внутривенного введения

Scientific relevance. Medicinal products based on immunoglobulin class G (IgG) from human plasma are widely used in clinical practice to treat bacterial and viral infections, primary and secondary immunodeficiencies, and autoimmune diseases. Nanofiltration is a way to mitigate the risk of in-process contamination of raw materials with various pathogens, including viruses. Therefore, it is relevant to investigate the development and implementation of additional viral inactivation and/or elimination steps.Aim. This study aimed to develop and validate optimum nanofiltration conditions and to scale up the nanofiltration step for the manufacturing of human IgG for intravenous administration.Materials and methods. The study used a solution of  IgG  from  plasma  fractions  II  and  III. The authors paired nanofilters manufactured by Planova 20N and BioEx (Asahi Kasei, Japan), Viresolve Pro (Merck Millipore, USA), Virosart HC and HF (Sartorius, Germany), and Pegasus  SV4 and Prime (Pall, USA) with Sartopore polyethersulphone prefilters by Sartorius (Germany), Virosart MAX polyamide prefilters by Sartorius (Germany), and EKX-P regenerated cellulose prefilters by Pall (Germany). Virus reduction validation studies were performed with model viruses (human immunodeficiency virus type 1, porcine transmissible gastroenteritis virus, porcine parvovirus, murine encephalomyocarditis virus, and bovine viral diarrhoea virus) in the laboratories of the N.F. Gamaleya centre. The sample data analysis involved calculating mean values with 95% confidence intervals.Results. For all the selected combinations of prefilters and filters, the maximum nanofiltration throughput depended on the IgG concentration in the test solution. With the combination of an EKX-P filter with a Pegasus SV4 nanofilter, the maximum throughput and the IgG yield reached 6300 g/m2 and 95%, respectively. When combined with a Planova 20N nanofilter, EKX-P and Sartopore (polyethersulphone) filters provided a maximum throughput of up to 2980 g/m2 and an IgG yield of almost 100%, provided that the test solution had an IgG concentration of 10 g/L. With different filter combinations, virus reduction levels ranged from 4.00±0.05 to 4.75±0.04 log10  for human immunodeficiency virus type 1, from 4.30±0.04 to 4.55±0.06 log10 for porcine transmissible gastroenteritis virus, from 5.38±0.08 log10  to 5.57±0.04 log10  for murine encephalomyocarditis virus, 5.12±0.10 log10 to 5.25±0.08 log10 for porcine parvovirus, and exceeded 5.00 log10 for bovine viral diarrhoea virus. The virus reduction levels achieved were not statistically associated with prefilter brands.Conclusions. The study demonstrated that nanofiltration was effective at removing  viruses with various virion sizes and physicochemical characteristics, including viruses as small as parvovirus B19. The levels of virus reduction exceeded 4 log10 and met the acceptance criteria.The laboratory-scale nanofiltration parameters and the corresponding filtration times, as well as IgG yields, did not change when the process was scaled up. Therefore, nanofiltration is an effective and productive technique that helps eliminate various types of viruses and considerably improve viral safety without affecting the quality of biological medicinal products.Актуальность. Лекарственные препараты на основе иммуноглобулина G (IgG) из плазмы крови человека широко применяются в терапии бактериальных и вирусных инфекций, первичных и вторичных иммунодефицитов, аутоиммунных заболеваний. Снизить риск производственной контаминации сырья различными патогенами, в том числе вирусами, позволяет процесс нанофильтрации. Для повышения вирусной безопасности необходимы исследования по разработке и внедрению дополнительных этапов инактивации и (или) элиминации вирусов.Цель. Разработка оптимальных условий процесса нанофильтрации, валидация и масштабирование данной стадии для  производства  лекарственного  препарата  иммуноглобулина G человека для внутривенного введения.Материалы и методы. Раствор IgG из фракции II+III плазмы крови, нанофильтры Planova — 20N и BioEx (Asahi Kasei, Япония), Viresolve Pro (Merck Millipore, США), Virosart — HC и HF (Sartorius, Германия), Pegasus — SV4 и Prime (Pall, США), предфильтры Sartopore из полиэфирсульфона, Virosart MAX (Sartorius,  Германия)  из  полиамида,  EKX-P  (Pall,  Германия) из регенерированной целлюлозы. Лабораторные исследования по валидации вирусной редукции выполняли с модельными тест-вирусами (ВИЧ-1, трансмиссивного гастроэнтерита (коронавируса) свиней, парвовирус свиней,  вирус  энцефаломиокардита  мышей,  вирус бычьей диареи) на базе ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России. Анализ данных по выборке проводили с помощью среднего значения при 95% доверительном интервале.Результаты. Установлено, что производительность нанофильтрации для всех выбранных комбинаций «предфильтр — нанофильтр» зависит от концентрации IgG в испытуемом растворе. Максимальная пропускная способность и выход продукта составили:  предфильтр (фильтр) ЕКХ-P с нанофильтром Pegasus SV4 —  6300  г/м2  (выход  IgG  более  95%); EKX-P или Sartopore (полиэфирсульфон) с Planova 20N — до 2980 г/м2 (выход IgG — практически 100% при условии проведения  процесса  только  при  концентрации  IgG  10  г/л).  Для разных комбинаций фильтров уровень редукции соответствовал критериям приемлемости: ВИЧ-1 —  от  4,00±0,05  до  4,75±0,04  log10;  коронавирус  свиней  —  от  4,30±0,04 до 4,55±0,06 log10; вирус энцефаломиокардита мышей — от 5,38±0,08 до 5,57±0,04 log10; вирус бычьей диареи — более 5,00 log10; парвовирус свиней — от 5,12±0,10 до 5,25±0,08 log10. Статистически достоверного различия в зависимости уровня редукции от марки предфильтров не выявили.Выводы. Подтверждена эффективность противовирусной нанофильтрации для вирусов  с различными размерами вириона и физико-химическими характеристиками, включая мелкий парвовирус В19: уровень редукции вирусов для всех комбинаций составил более 4 log10, что соответствует критериям приемлемости. Разработанные в лабораторных условиях параметры и соответствующая им длительность нанофильтрации, а также выход целевого продукта для всех комбинаций исследованных фильтров не изменились при масштабировании. Нанофильтрация может служить эффективным и высокопродуктивным инструментом удаления различных типов вирусов, который не влияет на качество продукта и значительно повышает вирусную безопасность биологических препаратов