Novel Genotypes of H9N2 Influenza A Viruses Isolated from Poultry in Pakistan Containing NS Genes Similar to Highly Pathogenic H7N3 and H5N1 Viruses

The impact of avian influenza caused by H9N2 viruses in Pakistan is now significantly more severe than in previous years. Since all gene segments contribute towards the virulence of avian influenza virus, it was imperative to investigate the molecular features and genetic relationships of H9N2 viruses prevalent in this region. Analysis of the gene sequences of all eight RNA segments from 12 viruses isolated between 2005 and 2008 was undertaken. The hemagglutinin (HA) sequences of all isolates were closely related to H9N2 viruses isolated from Iran between 2004 and 2007 and contained leucine instead of glutamine at position 226 in the receptor binding pocket, a recognised marker for the recognition of sialic acids linked α2–6 to galactose. The neuraminidase (NA) of two isolates contained a unique five residue deletion in the stalk (from residues 80 to 84), a possible indication of greater adaptation of these viruses to the chicken host. The HA, NA, nucleoprotein (NP), and matrix (M) genes showed close identity with H9N2 viruses isolated during 1999 in Pakistan and clustered in the A/Quail/Hong Kong/G1/97 virus lineage. In contrast, the polymerase genes clustered with H9N2 viruses from India, Iran and Dubai. The NS gene segment showed greater genetic diversity and shared a high level of similarity with NS genes from either H5 or H7 subtypes rather than with established H9N2 Eurasian lineages. These results indicate that during recent years the H9N2 viruses have undergone extensive genetic reassortment which has led to the generation of H9N2 viruses of novel genotypes in the Indian sub-continent. The novel genotypes of H9N2 viruses may play a role in the increased problems observed by H9N2 to poultry and reinforce the continued need to monitor H9N2 infections for their zoonotic potential

Молекулярная и биологическая характеристика низкопатогенных вирусов гриппа H9N2, выделенных в Израиле

All Israeli H9N2-strain viruses used in the present study were subdivided among three groups: groups A and B viruses contained – in all eight segments – 90658/00-like and 1304/03-like sequences, respectively; Group C comprised viruses isolated in 2006-2010, which contained four 1304/03-like segments and four 1525/06-like segments. Molecular analysis revealed that most of the isolates had an RSSR motif at the cleavage site of haemagglutinin. Most of the viruses had an haemagglutinin with L216 typical of humans, and internal proteins associated with the avian host specificity. The studied viruses infected the majority of the directly inoculated birds. Exposure to the virus with full8length PB1-F2 protein for 24 h caused destruction of mitochondria and cell death in cultures of human macrophages, and this effect was not associated with activation of protein p53. A virus with truncated PB1-F2 protein exhibited no destructive effect on mitochondria, but induced enhanced production of pro-apoptotic P53 proteinВсі ізраїльські віруси штаму H9N2, що використовуються в цьому дослідженні, були розділені на групи: віруси груп А і В містили відповідно - у всіх восьми сегментах - 90658/00-подібні і 1304/03-подібні послідовності; група C складалася з вірусів, виділених у 2006-2010 роках, які містили чотири 1304/03-подібних сегмента і чотири 1525/06-подібних сегмента. Молекулярний аналіз показав, що більшість штамів мали RSSR-мотив в сайті розщеплення гемаглютиніну. Більшість вірусів містили гемаглютинін з типовим для людей L216, і, крім того, внутрішні білки, характерні для птахів. Вивчені віруси заразили більшість щеплених птахів безпосередньо. Вплив вірусу з повнорозмірною PB1-F2 білка протягом 24 год викликав руйнування мітохондрій і загибель клітин в культурах людських макрофагів, і цей ефект не був пов’язаний з активацією білка р53. Вірус з усіченою ланцюгом білка PB1-F2 не чинив руйнівного впливу на мітохондрії, але індукував підвищений сінтез проапоптотического білка Р53.Всі ізраїльські віруси штаму H9N2, що використовуються в цьому дослідженні, були розділені на групи: віруси груп А і В містили відповідно - у всіх восьми сегментах - 90658/00-подібні і 1304/03-подібні послідовності; група C складалася з вірусів, виділених у 2006-2010 роках, які містили чотири 1304/03-подібних сегмента і чотири 1525/06-подібних сегмента. Молекулярний аналіз показав, що більшість штамів мали RSSR-мотив в сайті розщеплення гемаглютиніну. Більшість вірусів містили гемаглютинін з типовим для людей L216, і, крім того, внутрішні білки, характерні для птахів. Вивчені віруси заразили більшість щеплених птахів безпосередньо. Вплив вірусу з повнорозмірною PB1-F2 білка протягом 24 год викликав руйнування мітохондрій і загибель клітин в культурах людських макрофагів, і цей ефект не був пов’язаний з активацією білка р53. Вірус з усіченою ланцюгом білка PB1-F2 не чинив руйнівного впливу на мітохондрії, але індукував підвищений сінтез проапоптотического білка Р53.We thank Mrs. Rivi Ascarelli-Goell, MSc and Mrs. Magda David, and Mrs. Faina Golender for excellent technical assistance. This study was supported by the Kameya Grant of the Israel Ministry of Absorption; by Research Grant No. IS-3679–05 from BARD, The United StatesIsrael Binational Agricultural Research and Development Fund; by Grant No. 847–0319 from the Poultry Association of the Israel Ministry of Agriculture and Rural Development; and by Grants IS-4100-08C and US-4379-11 from the USA-Israel Agricultural Research and Development Fund (BARD)

Міцність захисних касок для роботи на об'єктах будіндустрії

The article is devoted to the solution of safety issues of workers at the facilities Building industry. The article considers modern trends Designing and calculating helmet helmets from the point of view of providing Their strength. An analysis of studies of work carried out in conditions Increased danger.Статья посвящена решению вопросов безопасности работающих на объектах стройиндустрии. В статье рассматриваются современные тенденции конструирования и расчета защитных шлемов-касок с точки зрения обеспечения их прочности. Дан анализ исследований работ, проводимых в условиях повышенной опасности.Стаття присвячена вирішенню питань безпеки працюючих на об'єктах будіндустрії. У статті розглядаються сучасні тенденції конструювання і розрахунку захисних шоломів-касок з точки зору забезпечення їх міцності. Дан аналіз досліджень робіт, що проводяться в умовах підвищеної небезпеки

Development and validation of a universal S-segment-based real-time RT-PCR assay for the detection of Simbu serogroup viruses

Simbu serogroup viruses induce acute clinical diseases and abnormal courses of pregnancies in livestock. In Israel, two members of this serogroup, namely Akabane virus (AKAV) and Shuni virus (SHUV), were recently detected and, in Europe, Schmallenberg virus (SBV) poses a threat to ruminants. To address this emerging problem, a universal S-segment-based real-time RT-PCR assay (Uni-S) for the detection of Simbu serogroup viruses was established, which, additionally, enabled species identification of the detected viruses by subsequent sequencing. The newly developed probe-based PCR system enabled reliable detection of a comprehensive panel of Simbu viruses. Furthermore, several SBV isolates and German field samples were tested by the new Uni-S system in comparison to a SBV-specific real-time RT-PCR and both assays exhibited equally high levels of sensitivities. Finally, co-circulation of AKAV and SHUV in Israel was confirmed by analyzing field samples using the Uni-S assay followed by sequence analysis of the positive samples. To validate the test specificity, blood and tissue samples from animals negative for Simbu viruses, preparations of genetically related viruses and additional ruminant pathogens were examined and all were found to be negative.In conclusion, the new assay enabled sensitive and rapid universal molecular detection of Simbu viruses and is expected to serve as a valuable method for infection diagnosis, especially in regions where several Simbu serogroup members circulate