Two simple spectrophotometric methods for the determination of cytarabine and its injection formulation

Se han desarrollado dos rápidos y sencillos métodos de espectrofotometría ultravioleta para la estimación de citarabina en agua destilada (M1) y metanol (M2). Estos métodos se han comparado con el método de cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC) descrito en la farmacopea de Estados Unidos. Se han establecido parámetros analíticos como la estabilidad, la exactitud y la precisión de ambos métodos y se han evaluado estadísticamente dichos parámetros para determinar las aplicaciones de los dos métodos. Ambos métodos presentaron ventajas en cuanto a su simplicidad, estabilidad, reproducibilidad y exactitud frente a los métodos no espectrofotométricos existentes utilizados para los análisis comunes del fármaco de formulaciones farmacéuticas.Two rapid and simple ultraviolet spectrophotometric methods for the estimation of cytarabine in distilled water (ME1) and methanol (ME2) has been developed and has been compared with the high performance liquid chromatographic method (HPLC) reported in the United States Pharmacopoeia. Analytical parameters such as stability, accuracy and precision have been established for both the methods and evaluated statistically to assess the applications of the two methods. Both the methods were found to have the advantages for simplicity, stability, reproducibility and accuracy for using as an alternate to the existing non-spectrophotometric methods for the routine analysis of the drug in pharmaceutical formulations.Este proyecto ha sido financiado por el Consejo de Investigación Científica e Industrial (Council of Scientific and Industrial Research, CSIR) de Nueva Delhi

Polyethylene glycol as a de-aggregating agent in the preparation of celecoxib loaded gelatin microspheres

Se prepararon microesferas de gelatina con elevada eficiencia de captura mediante el método de reticulación química por emulsificación, utilizando polietilenglicol como agente antiagregante. Para la reticulación de la gelatina se utilizaron dos agentes de reticulación diferentes: formaldehído y glutaraldehído. Las microesferas preparadas se caracterizaron mediante microscopía electrónica de barrido según la eficiencia de captura, el tamaño de las partículas, la liberación de fármaco in vitro y la morfología. Los estudios de espectrometría FTIR indicaron la ausencia de interacción química entre la gelatina y el PEG. El PEG actúa únicamente como barrera para impedir la agregación de las microgotas de gelatina presentes en la fase interna de la emulsión durante la preparación. Los estudios de liberación de fármaco in vitro indicaron que las microesferas reticuladas mediante glutaraldehído presentaban un índice de liberación inferior a las reticuladas con formaldehído La liberación repentina se observó en ambos casos. En general, aproximadamente un 40% del fármaco se libera en la primera hora, seguido de una liberación lenta durante unas 96 horas en el caso de las microesferas reticuladas con glutaraldehído.Gelatin microspheres with high entrapment efficiency were prepared using emulsification chemical crosslinking method using polyethylene glycol as a de-aggregating agent. Two different cross-linking agents viz. formaldehyde and glutaraldehyde were used for cross-linking gelatin. The prepared microspheres were characterized for entrapment efficiency, particles size, in-vitro drug release and the morphology was studied by scanning electron microscopy. The FTIR studies indicated that there is no chemical interaction between gelatin and PEG. PEG acts only as a barrier to the aggregation of the gelatin microdrops present in the internal phase of the emulsion, while preparation. In-vitro drug release studies indicated that the microspheres cross-linked using glutaraldehyde showed slower release rate than those cross-linked with formaldehyde. Burst release was observed in both the cases. In general, about 40% of the drug is released in the first hour followed by a slow release for about 96 hours for glutaraldehyde cross-linked microspheres

Study of influence of polymerization factors on formation of poly(butyl cyanoacrylate) nanoparticles and in vitro drug release kinetics

Las nanopartículas de polibutil-cianoacrilato se sintetizaron mediante polimerización por dispersión y se caracterizaron mediante espectroscopía 1H-NMR, calorimetría diferencial de barrido y microscopía electrónica de transmisión. Se estudiaron propiedades de las partículas tales como el tamaño y el potencial zeta, y la influencia de la concentración y el tipo de estabilizador en el tamaño de las partículas. También se estudió la influencia de factores de polimerización tales como la concentración de monómero, la temperatura y el tiempo de polimerización en el tamaño y la distribución de las partículas, y su efecto en la eficacia de captura de las nanopartículas, utilizando clorhidrato de doxorubicina (DH) como fármaco modelo. Las concentraciones elevadas de monómero dieron lugar a la formación de partículas de mayor tamaño con distribución de tamaño bimodal y amplia y aumentaron la captura del fármaco. La polimerización a baja temperatura dio lugar a la formación de partículas más pequeñas, mientras que a temperatura elevada (60 °C) se produjo aglomeración y se redujo la captura del fármaco. Los tiempos de polimerización elevados no mostraron tener mucha influencia en el tamaño de las partículas, pero aumentaron la captura del fármaco. Se realizó la carga del fármaco en las nanopartículas mediante técnicas de incorporación y adsorción y se determinó la captura del fármaco. Las nanopartículas cargadas mediante técnicas de incorporación y adsorción mostraron una liberación rápida de fármaco en 0,001 N HCl. La liberación de fármaco en ambos tipos de nanopartículas siguió la ecuación de Higuchi. También se intentó establecer una correlación crítica entre las propiedades de las partículas y el comportamiento de la liberación de fármaco, así como subrayar su importancia en diversas facetas de la administración de fármaco.Poly(butyl cyanoacrylate) nanoparticles were synthesized by dispersion polymerization and characterized by 1H-NMR spectroscopy, differential scanning calorimetry and transmission electron microscopy. Particle properties such as zeta potential and size, and the influence of concentration and type of stabilizer on particle size were studied. The influence of polymerization factors such as monomer concentration, polymerization time and temperature on the particle size and distribution, and their effect on entrapment efficiency of the nanoparticles was studied, using doxorubicin hydrochloride (DH) as a model drug. High monomer concentrations lead to the formation of larger particles with broad and bimodal size distribution, and increased the drug entrapment. Polymerization at low temperatures resulted in smaller particles, and agglomeration was found at high temperature (60°C), with reduced drug entrapment. High polymerization times did not show much influence on particle size, but increased the drug entrapment. Drug loading into nanoparticles was carried out by incorporation and adsorption techniques, and drug entrapment was determined. The nanoparticles loaded by incorporation and adsorption techniques showed rapid drug release in 0.001N HCl. Drug release from both types of nanoparticles followed Higuchi equation. An attempt was also made to critically correlate the particle properties and drug release behavior and emphasize its importance in various facets of drug delivery.Este trabajo ha sido financiado por la University Grants Commission (UGC) de la India

Fluorimetric estimation of doxorubicin hydrochloride in plasma, whole blood and tissues of rat

Se ha desarrollado un método fluorimétrico rápido y sensible para la estimación del clorhidrato de doxorubicina (DH) en sangre entera y tejidos de ratas. También se ha desarrollado un método relativamente más simple y sensible para la estimación en plasma. Los parámetros analíticos se establecieron y compararon en ambos métodos. Los datos de intensidad de fluorescencia relativa (IFR) de los métodos de estimación de DH en plasma y en sangre entera indican la elevada sensibilidad del método anterior. La comparación de los valores de IFR de la sangre entera y de los tejidos indican una baja extracción de DH de la sangre entera. Los valores bajos de IFR se observaron en tejidos que contienen elementos formadores de sangre, tales como el bazo y el hígado, mientras que en pulmones, riñones y corazón los valores de IFR detectados fueron elevados. La incubación de DH con diversas concentraciones de ADN in vitro mostró una reducción de la IFR del DH en comparación con la IFR inicial, lo que indica una fuerte interacción dependiente de la concentración. Se observaron coeficientes de correlación elevados en pulmones (0,9996), sangre entera (0,9985) y corazón (0,9991). La prueba de interceptación realizada para el método de estimación de DH en plasma y el método de estimación en sangre entera y tejidos indica que no se producen interferencias de blancos en las estimaciones. La prueba ‘t’ realizada para las concentraciones estimadas en los estudios de recuperación no indican ninguna diferencia significativa entre las concentraciones añadidas y estimadas que demuestran la exactitud, y el bajo coeficiente de variación (%) y los límites de confianza indican la precisión de los métodos.A rapid and sensitive fluorimetric method of estimation of doxorubicin hydrochloride (DH) in whole blood and tissues of rat was developed. A relatively simpler and sensitive method of estimation in plasma was also developed. The analytical parameters were established for both the methods and were compared. The data of relative fluorescence intensities (RFI) of the methods of estimation of DH in plasma and whole blood indicate high sensitivity of the former method. Comparison of RFI values of whole blood and tissues indicate low extraction of DH from whole blood. Low RFI values were observed in case of tissues such as spleen and liver containing blood forming elements, where as, high RFI values were found in case of lung, kidney and heart. Incubation of DH with various concentrations of DNA in vitro, showed a decrease in RFI of DH with time compared to the initial RFI, indicating a strong interaction which is concentration dependant. High correlation coefficients were observed with lung (0.9996), whole blood (0.9985) and heart (0.9991). The test of intercept performed for the method of estimation of DH in plasma, and the method of estimation in whole blood and tissues indicate no interference of blank in the estimations. The ‘t’ test performed for the estimated concentrations in recovery studies indicate no significant difference between the added and estimated concentrations proving the accuracy, and low coefficient of variation (%) and confidence limits indicate the precision of the methods.Finalcial support from the University Grants Commission (F. 10-32/2000 (SA-II)) New Delhi, India

Polymerization of n-butyl cyanoacrylate in presence of surfactant: study of influence of polymerization factors on particle properties, drug loading and evaluation of its drug release kinetics

Se sintetizaron nanopartículas de polibutil-cianoacrilato mediante polimerización por emulsión en presencia de un surfactante no iónico (poloxámero 188), en concentraciones superiores a CMC, y se caracterizaron mediante mediciones de potencial zeta, microscopía electrónica de transmisión y análisis de tamaño. Se estudiaron los efectos de factores de polimerización tales como concentración de monómeros, temperatura de polimerización y concentración de surfactante sobre el tamaño de la partícula y su distribución. Al variar la concentración no se apreciaron diferencias significativas en el tamaño medio de las partículas ni en su distribución. A temperaturas de polimerización elevadas se observó un aumento significativo en el tamaño de las partículas y una distribución más extendida, en comparación con los resultados obtenidos a temperaturas bajas y moderadas, lo que se puede atribuir a la deshidratación del óxido de propileno y de los bloques de óxido de etileno dentro del surfactante. Las concentraciones de surfactante en el rango del estudio no mostraron una influencia apreciable en el tamaño y el patrón de distribución de las nanopartículas. La carga de fármacos en las nanopartículas mediante la técnica de incorporación dio como resultado un mayor grado de captura que la técnica de la adsorción. Sin embargo, las nanopartículas cargadas con fármaco mediante la técnica de adsorción presentaron un mayor grado de liberación de clorhidrato de doxorubicina tanto en 0,001N HCl como en solución salina al 0,9 %. Los resultados del análisis cinético revelaron que las nanopartículas seguían la ecuación de Higuchi, lo que indica la posibilidad de penetración del fármaco en la matriz porosa de las nanopartículas tras la adsorción del mismo.Polybutyl cyanoacrylate nanoparticles were synthesized by emulsion polymerization in presence of nonionic surfactant (Poloxamer 188) in concentration above CMC, and were characterized by particle size analysis, transmission electron microscopy and zeta potential measurements. Effect of polymerization factors such as monomer concentration, polymerization temperature and surfactant concentration on the particle size and distribution were studied. Varied monomer concentrations did not show much difference in average particle size and particle distribution. High polymerization temperature showed significant increase in particle size and broader distribution compared to that of low and moderate temperatures which can be attributed to the dehydration of propylene oxide and ethylene oxide blocks within the surfactant. Surfactant concentrations in the range studied, did not show appreciable influence on size and distribution pattern of nanoparticles. Drug loading into nanoparticles by incorporation technique resulted in higher entrapment than the adsorption technique. However, the drug loaded nanoparticles prepared by adsorption technique showed high release of doxorubicin hydrochloride in both 0.001N HCl and 0.9 % saline. The results of kinetic analysis revealed that the nanoparticles followed Higuchi equation indicating the possibility of drug penetration into the porous matrix of nanoparticles following drug adsorption.Los autores del presente artículo manifiestan su agradecimiento a la University Grants Commission (UGC) de la India por la financiación de este trabajo

Preparation and Physicochemical characterisation of caprylocapryl macrogol -8- glycerides microemulsion for oral drug delivery

Se evaluó el rendimiento de los macrogol -8- glicéridos de caprilocaproilo en el desarrollo de una microemulsión autoemulsionante, estable y aceptable desde el punto de vista farmacológico. Se evaluó la idoneidad de la concentración de surfactante en relación con la fase oleosa a través de la medición de la tensión interfacial. Se elaboró un sistema de microemulsiones pseudoternario con macrogol -8- glicéridos de caprilocaproilo/poligliceril 6-dioleato/ triglicéridos de cadena media y agua. La microemulsión modelo se caracterizó en relación con su comportamiento electroconductivo y la medición del tamaño de las gotitas tras su dilución en agua y fluido gástrico simulado, y se realizaron estudios de carga de superficie, estabilidad centrífuga, viscosidad y estabilidad. Se aplicó la teoría de la transición de percolación al sistema, lo que hizo posible la determinación del umbral de percolación y la identificación de las estructuras bicontinuas. Los cambios de tensión interfacial asociados a la formación de las microemulsiones mostraron valores muy bajos, hasta un 30% de aceite en una proporción 4:1 de surfactante/cosurfactante. Además, el tamaño de las partículas investigadas tras la dilución en agua abundante y en fluido gástrico simulado demostraron la eficacia del sistema de microemulsiones como un posible sistema de transporte para la administración oral de fármacos.The performance of caprylocapryl macrogol -8- glycerides in the development of pharmaceutically acceptable, stable, selfemulsifying microemulsion was assessed. The suitability of the concentration of surfactant with respect to the oil phase was assessed by interfacial tension measurement. A pseudoternary microemulsion system was constructed using caprylocapryl macrogol -8- glycerides / polyglyceryl 6-dioleate / medium chain triglycerides and water. The model microemulsion was characterised with regard to its electroconductive behaviour and droplet size measurement after dilution with water as well as with simulated gastric fluid, surface charge, centrifugal stability, viscosity and stability studies. The percolation transition theory, which makes it possible to determine the percolation threshold and to identify the bicontinuous structures, was applied to the system. The interfacial tension changes associated with the microemulsion formation shows ultra low values upto 30% oil at a surfactant / cosurfactant ratio 4:1. Moreover, the investigated particle size after dilution with excess of water as well as with simulated gastric fluid proved the efficiency of the microemulsion system as a potential carrier for oral drug delivery.La financiación de este proyecto se ha realizado a través del Consejo de Investigación Científica e Industrial (Council of Scientific and Industrial Research, CSIR) de Nueva Delhi, India

Dos sencillos métodos espectrofotométricos para la determinación de la citarabina y de su formulación inyectable

Se han desarrollado dos rápidos y sencillos métodos de espectrofotometría ultravioleta para la estimación de citarabina en agua destilada (M 1) y metanol (M 2). Estos métodos se han comparado con el método de cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC) descrito en la farmacopea de Estados Unidos. Se han establecido parámetros analíticos como la estabilidad, la exactitud y la precisión de ambos métodos y se han evaluado estadísticamente dichos parámetros para determinar las aplicaciones de los dos métodos. Ambos métodos presentaron ventajas en cuanto a su simplicidad, estabilidad, reproducibilidad y exactitud frente a los métodos no espectrofotométricos existentes utilizados para los análisis comunes del fármaco de formulaciones farmacéuticas

A new reverse-phase high performance liquid chromatographic method for determination of flutamide in liposomes, rat blood plasma and tablet dosage forms

La flutamida es un antiandrógeno ampliamente utilizado en el tratamiento del cáncer de próstata que afecta al nivel de antígeno específico de la próstata (PSA) en sangre, lo que requiere que sea estable en la sangre durante el suficiente tiempo. Se ha desarrollado una nueva forma de dosificación farmacéutica, los liposomas, para mejorar la eficacia de este fármaco. El objeto de este estudio es desarrollar un método HPLC UV para la determinación de la FLT en los liposomas, en el plasma de sangre de rata y en distintas formas de dosificación en comprimidos comercializadas. Los pasos de preparación de muestras requieren menos tiempo. El estándar interno (IS) para el procedimiento de ensayo fue la 6- mercaptopurina. Las muestras se inyectaron en la columna de la fase inversa (Thermosil® C18). La fase móvil, metanol: agua (80:20, v/v), se llevo a cabo con una velocidad de flujo de 1 ml/min. durante 8 min. La FLT se detectó mediante un detector de UV con una longitud de onda de 295 nm. Los tiempos de retención del IS y la FLT fueron de 3,03 y 4,02 min. respectivamente. El método fue lineal en el rango de concentración de 20-1000 ng/ml y 50-1000 μg/ml en la fase móvil y en el plasma de sangre de rata respectivamente. Se validó la exactitud, precisión, robustez y recuperación del método. El límite de detección fue de 0,099 μg/ml y de 0,106 μg/ml en la fase móvil y en el plasma de sangre de rata respectivamente. El método demostró ser muy reproducible y parece ser adecuado para el control rutinario de fármaco terapéutico. Se podría utilizar sin ninguna interferencia por parte de lípidos, excipientes de comprimidos y sustancias endógenas de las muestras de plasma.Flutamide is an anti-androgen widely used in treatment of prostate cancer by affecting Prostate Specific Antigen (PSA) level in blood, which requires its stability in blood for enough time. A new pharmaceutical dosage form, liposomes, has been developed for improving efficacy of this drug. The aim of this study is to develop HPLC UV method for the determination of FLT in liposomes, rat blood plasma and different marketed tablet dosage forms. The method involved less time-consuming sample preparation steps. The internal standard (IS) for the assay procedure was 6-Mercaptopurine. The samples were injected on to reverse-phase (Thermosil® C18) column. The mobile phase, Methanol: Water (80:20, v/v) was run at a flow rate of 1 ml/min for 8 min. The FLT was detected by UV detector at 295 nm wavelength. The retention times for IS and FLT were 3.03 and 4.02 min, respectively. The method was linear over the concentration range 20-1000 ng/ml and 50-1000 μg/ml in mobile phase and rat blood plasma, respectively. The method was validated for accuracy, precision, robustness and recovery. The limit of detection was 0.099μg/ml and 0.106μg/ml in mobile phase and rat blood plasma, respectively. The method was shown to be highly reproducible and it seems to be adequate for routine therapeutic drug monitoring. It could be used without any interference from lipids, tablet excipients and endogenous substances from the plasma samples

Preparación y caracterización físicoquímica de

Se evaluó el rendimiento de los macrogol -8- glicéridos de caprilocaproilo en el desarrollo de una microemulsión autoemulsionante, estable y aceptable desde el punto de vista farmacológico. Se evaluó la idoneidad de la concen- concentración tración de surfactante en relación con la fase oleosa a través de la medición de la tensión interfacial. Se elaboró un sistema de microemulsiones pseudoternario con macrogol -8- glicéridos de caprilocaproilo/poligliceril 6-dioleato/ triglicéridos de cadena media y agua. La microemulsión modelo se caracterizó en relación con su comportamiento electroconductivo y la medición del tamaño de las gotitas tras su dilución en agua y fluido gástrico simulado, y se realizaron estudios de carga de superficie, estabilidad centrífuga, viscosidad y estabilidad. Se aplicó la teoría de la transición de percolación al sistema, lo que hizo posible la determinación del umbral de percolación y la identificación de las estructuras bicontinuas. Los cambios de tensión interfacial asociados a la formación de las microemulsiones mostraron valores muy bajos, hasta un 30% de aceite en una proporción 4:1 de surfactante/cosurfactante. Además, el tamaño de las partículas investigadas tras la dilución en agua abundante y en fluido gástrico simulado demostraron la eficacia del sistema de microemulsiones como un posible sistema de transporte para la administración oral de fármacos

NOVEL DRUG DELIVERY SYSTEMS: DESIRED FEAT FOR TUBERCULOSIS

Tuberculosis has claimed its victims throughout much of known human history and is currently the most devastating human bacterial disease. The ability to infect human population on a global scale, combined with the widespread emergence of multi-drug resistant strains, has led to the placement of Mycobacterium tuberculosis on the National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) list of Biodefence and Emerging Infectious Disease Threats Agents. The resurgence of interest in tuberculosis (TB) has stemmed because of increased evidences from developed countries. Contrary to expectations, no country has reached the phase of elimination and in no subsection of society TB has been completely eliminated. A deeper understanding of the process will assist in the identification of the host and mycobacterial efforts involved and provide targets for therapeutic strategies against tuberculosis. The article presents a view on pathogenesis of tuberculosis and its diverse manifestations, host defense evasion, mechanisms of microbial persistence, emergence of Multiple Drug Resistance and Extensive Drug Resistance, conventional therapy used and the possible novel systems which are under extensive investigation as drug carriers for improving the cytosolic concentration of the anti-tubercular agents