Avaliação retrospectiva dos testes de toxicidade inespecífica realizados no Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde em produtos biológicos

Introduction:The in vivo toxicity test known as Unspecific Toxicity Test (ITT) is recommended to assess the safety    of biological products and biotechnology derivatives. The principle of    this test is the administration of the product in guinea pigs and mice, followed by an   observation period. INCQS is the Brazilian National Control Laboratory (NCL) that works  controlling biological products, especially vaccines and hyperimmune sera for the  Immunization National Program (INP) before going to market. Chemical, microbiological and toxicological tests are performed, including ITT. Objective:To analyze the ITT performed at INCQS and to verify the monographs of the Brazilian Pharmacopeia where the test is still recommended. Method:A survey was   carried out with the Harpya data system, which is used to record all  samples and analyses. Results:From 1999 to 2012, 3,453 ITT were performed on biological products, resulting in 100% negative results. Based on these results and following a worldwide trend, since 2002 INCQS has been gradually reducing the amount of vaccines and hyperimmune sera submitted to the unspecific toxicity test. Currently, the risk of contamination of pharmaceutical products with non-specific substances is significantly low, as industries are regulated to comply with Good Manufacturing Practices (GMP). Although ITT still remains in the General Tests of the Brazilian Pharmacopoeia, it is not required in specific monographs of hyperimmune sera and vaccines for human use. Conclusions:These results show that ITT appears to be not enough efficient for detecting nonspecific toxicity due to biological products manufacture and Brazil may follow the worldwide trend to stop performing it.Introdução:O teste de toxicidade in vivo, conhecido como Teste de Toxicidade Inespecífica (TTI), é sugerido para avaliar a segurança de produtos biológicos e derivados de biotecnologia. O princípio do teste é a administração do produto em animais, seguido por um período de observação. O Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS) é o laboratório de controle nacional brasileiro (LCN) que controla os produtos biológicos, especialmente vacinas e soros hiperimunes, para o Programa Nacional de Imunização (PNI) antes da liberação para o mercado. São preconizados ensaios químicos, microbiológicos e toxicológicos, inclusive o TTI. Objetivo:Analisar retrospectivamente o TTI realizado no INCQS e verificar as monografias da Farmacopeia Brasileiraonde ainda é preconizado o teste. Método:Foi realizado um levantamento no sistema de dados Harpya do INCQS, para verificar os resultados satisfatórios e insatisfatórios do TTI. Resultados:No período de 1999 a 2012, foram realizados 3.453 TTI nos produtos biológicos, resultando em 100% de resultados satisfatórios. Com base nestes resultados e seguindo a tendência mundial, o INCQS vem desde 2002 reduzindo gradualmente a quantidade de produtos biológicos submetidos ao TTI. Atualmente, o risco de contaminação de produtos farmacêuticos com substâncias não específicas é significativamente baixo, pois as indústrias são reguladas para o cumprimento das boas práticas de fabricação (BPF). Embora o TTI ainda permaneça nos Testes Gerais da Farmacopeia Brasileira, ele não é requerido nas monografias específicas de soros hiperimunes e vacinas para uso humano. Conclusões: O TTI não parece ser eficiente para detectar toxicidade inespecífica em biológicos e o Brasil deve seguir a tendência mundial de interromper a sua execução

Alternative potency tests for quality control of immunobiologicals: a critical review of the validation approach

Introduction: In addition to low reproducibility, in vivo potency tests used in the quality control of immunobiological products require too many animals, causing them significant pain and suffering. In the last decades, many studies have been conducted to validate alternative methods for quality control and batch release of products such as vaccines and other immunobiologicals, especially for potency tests. Objective: To discuss validation studies on alternative methods proposed for replacing the in vivo potency tests and the used statistical approach, as well as to propose harmonization of terminology and to design validation studies for alternative potency methods. Method: A review of scientific databases was carried out to compile the products, data on the validation procedures and to verify their inclusion in the pharmacopeias. Results: Four trials were incorporated into the pharmacopeias. Statistical approaches included mainly regression assessment, ANOVA and Chi-square test. Conclusions: It is a challenge to conduct appropriate validation studies that are widely accepted by regulatory authorities, especially where validation centers have not yet been established. A clear indicator of this difficulty was the low number of methods for biological products incorporated into the guidelines.TÍTULO PT: Testes de potência alternativos para controle de qualidade de imunobiológicos: revisão crítica da abordagem de validação Introdução: Os ensaios de potência in vivo utilizados no controle da qualidade de imunobiológicos requerem o uso de muitos animais, e além da baixa reprodutibilidade, causam dor e sofrimento significativos. Nas últimas décadas, muitos estudos foram desenvolvidos para validar métodos alternativos para o controle da qualidade e liberação de lotes de produtos como vacinas e outros imunobiológicos, especialmente para os testes de potência. Objetivo: Discutir os estudos de validação sobre métodos alternativos para substituir ensaios de potência in vivo, a abordagem estatística utilizada e propor a harmonização da terminologia e o desenho para os estudos de validação de métodos alternativos de potência. Método: Uma pesquisa de revisão foi realizada em bases de dados científicos para compilar os produtos e dados dos procedimentos de validação, verificando sua inclusão nas farmacopeias. Resultados: Quatro ensaios foram incorporados em farmacopeias. As abordagens estatísticas incluíram principalmente a avaliação da regressão, ANOVA e teste de Qui-quadrado. Conclusões: É um desafio realizar estudos de validação adequados que sejam amplamente aceitos pelas autoridades reguladoras, especialmente onde os centros de validação ainda não foram estabelecidos. Um indicador claro dessa dificuldade foi o baixo número de métodos para produtos biológicos incorporados nas diretrizes

Application of the three Rs concept in the assays for the Quality Control of Rabies immunebiologicals

Made available in DSpace on 2014-08-26T17:15:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) 91.pdf: 7442873 bytes, checksum: 27b69519fc283b4bdd1b15559627fb79 (MD5) Previous issue date: 2009Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.O presente estudo é uma aplicação prática do conceito dos Três Rs (3Rs) de Russell e Burch (1959) nos ensaios de controle da qualidade de imunobiológicos para Raiva preconizados pela Farmacopéia Brasileira através de: uma análise retrospectiva de dados para a Redução do nº de animais no Ensaio de Potencia NIH para vacina contra raiva de uso humano (vaccinum rabiei ad usum humanum); mudanças no método de avaliação da inativação viral destas vacinas utilizando animais e células e validação de um ensaio in vitro para substituir o ensaio in vivo no teste de potência de imunoglobulinas anti-rábicas (Immunosera rabicum ex animali ad usum humanum e immunoglobulinum humanum rabicum). Todos os três protocolos de ensaio testados no estudo demonstraram viabilidade de utilização.The present study is a practical application of the Russell and Burch 3Rs concept (1959) in the in vivo tests described in the Farmacopéia Brasileira for quality control of rabies biologicals by testing: A reduction in the number of mice in the NIH potency test for rabies vaccine for human use (vaccinum rabiei ad usum humanum); changes in the evaluation of virus inactivation method using suckling mice and cells as an alternative to the current Brazilian Pharmacopoeia official test (Reduction, Refinement and Replacement) and the validation of an in vitro assay to replace the in vivo assay for the potency test of Rabies Immunoglobulins (Immunosera rabicum ex animali ad usum humanum e immunoglobulinum humanum rabicum) (Replacement). All the three assay protocols have shown viability of use

Comparison of in house and commercial conjugates by rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) in rabies antibodies evaluation

Submitted by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-12-01T15:45:44Z No. of bitstreams: 1 Rev_Pat_Trop_39_163-172.pdf: 640371 bytes, checksum: efeda7e3240033f5e4fb180defcca730 (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2015-12-01T16:07:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Rev_Pat_Trop_39_163-172.pdf: 640371 bytes, checksum: efeda7e3240033f5e4fb180defcca730 (MD5)Made available in DSpace on 2015-12-01T16:07:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rev_Pat_Trop_39_163-172.pdf: 640371 bytes, checksum: efeda7e3240033f5e4fb180defcca730 (MD5) Previous issue date: 2010Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Criação de Animais de Laboratório. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Imunologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.A raiva é uma zoonose letal transmitida ao homem pela inoculação do vírus rábico, principalmente pela mordedura de animais infectados. Em 2005, o Ministério da Saúde brasileiro gastou cerca de R$66 milhões com ações de vigilância epidemiológica, empregados em campanhas de vacinação e na aquisição de imunobiológicos. O controle sorológico é exigência básica para a correta avaliação da pessoa vacinada. Neste trabalho, 91 soros de 34 indivíduos foram submetidos à titulação de anticorpos pela técnica de rápida inibição de focos fluorescentes, adaptada a microplacas de 96 poços, para comparar um conjugado produzido in house com outro comercial. Do total, 74 soros (82,2$ 66 millions in epidemiological surveillance actions, in order to carry out vaccination campaigns and acquisition of immunobiologicals. The serological evaluation is the basic requirement for surveillance of individuals vaccinated. Ninety one sera, from 34 vaccinees, were selected to evaluate the antibody titration by rapid fluorescent focus inhibition test adapted to 96-well microplates, to compare an in house produced conjugate and a commercial one. Seventy four sera (82.2%) had titers of ≥0.5 IU/mL and 12 sera (13.3%) had titers of <0.5 IU/mL. Theses results showed that the rapid fluorescent focus inhibition test using the in house conjugate was as sensitive as the commercial one. The difference between the results using both conjugates was not significant; the antibody titers were highly correlated (r=0.94)

A eritropoietina humana recombinante: uma breve revisão com ênfase no processo de controle da qualidade - doi: 10.5102/ucs.v11i1.1980

A eritropoietina (EPO) é um hormônio glicoproteico que regula a eritropoiese, atuando sobre as células progenitoras eritroides na medula óssea. É produzido nos adultos principalmente no córtex renal. O Ministério da Saúde, em 2005, passou a fornecer produtos biológicos, dentre eles a rhEPO. A produção desses medicamentos proporcionou uma economia de 40 milhões por ano ao país. A rhEPO é produzida em células de ovário de hamster chinês – CHO. É uma glicoproteína composta de 165 aminoácidos. A massa molecular da estrutura glicosilada, que contém cerca de 40% de carboidratos, é de 30–34 kDa. A rhEPO é um medicamento que faz parte do Componente Especializado de Assistência Farmacêutica do Ministério da Saúde, como parte da Política Nacional de Assistência Farmacêutica. O INCQS recebeu, de 2007 a 2012, um total de 779 lotes de rhEPO para análise, 88% desse total corresponde à apresentação de 4000 UI/mL

The recombinant human erythropoietin: a brief review with emphasis in the process of quality control

Submitted by Manoel Barata ([email protected]) on 2017-11-14T12:33:10Z No. of bitstreams: 1 1980-1150ICC.pdf: 182253 bytes, checksum: 42e5b3728ebec706f7afddef733be413 (MD5)Approved for entry into archive by Manoel Barata ([email protected]) on 2017-11-14T13:51:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 1980-1150ICC.pdf: 182253 bytes, checksum: 42e5b3728ebec706f7afddef733be413 (MD5)Made available in DSpace on 2017-11-14T13:51:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1980-1150ICC.pdf: 182253 bytes, checksum: 42e5b3728ebec706f7afddef733be413 (MD5) Previous issue date: 2013Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Carlos Chagas. Curitiba, PR, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.A eritropoietina (EPO) é um hormônio glicoproteico que regula a eritropoiese, atuando sobre as células progenitoras eritroides na medula óssea. É produzido nos adultos principalmente no córtex renal. O Ministério da Saúde, em 2005, passou a fornecer produtos biológicos, dentre eles a rhEPO. A produção desses medicamentos proporcionou uma economia de 40 milhões por ano ao país. A rhEPO é produzida em células de ovário de hamster chinês – CHO. É uma glicoproteína composta de 165 aminoácidos. A massa molecular da estrutura glicosilada, que contém cerca de 40% de carboidratos, é de 30–34 kDa. A rhEPO é um medicamento que faz parte do Componente Especializado de Assistência Farmacêutica do Ministério da Saúde, como parte da Política Nacional de Assistência Farmacêutica. O INCQS recebeu, de 2007 a 2012, um total de 779 lotes de rhEPO para análise, 88% desse total corresponde à apresentação de 4000 UI/mL.The erythropoietin (EPO) is a glycoprotein hormone wich controls the erythropoiesis, acting on erythroid progenitors cells on bone narrow. It is produced, primarily in the kidney cortex. The Ministry of Health, since 2005 provides biopharmaceuticals, including rhEPO. The production of these medicines provided an economy of 40 million per year to the country. The rhEPO is produced in Chinese Hamster Ovary cells – CHO. Is a glycoprotein composed of 165 amino acid, the molecular mass of glycosylated structure, that contains about 40% of carbohydrate, is 30-34 kDa. The rhEPO is a medicine that makes part of the Specialized Pharmaceutical Services Component, of Ministry of Health as part of the National Policy of Pharmaceutical Assistance. The INCQS received, from 2007 to 2012, a total of 779 batches of rhEPO for analysis, 88% of which corresponds to the presentation of 4000 IU/ml

Supplemental Material - A Cytotoxicity Assay as an Alternative to the Murine Model for the Potency Testing of <i>Bothrops jararaca</i> Venom and Antivenom: An Intralaboratory Pre-validation Study

Supplemental Material for A Cytotoxicity Assay as an Alternative to the Murine Model for the Potency Testing of Bothrops jararaca Venom and Antivenom: An Intralaboratory Pre-validation Study by Renata N.C. Nundes, Antonio E.C.C. Almeida, Wlamir C. Moura, Marcelo S. Gonzalez and Humberto P. Araújo in Alternatives to Laboratory Animals</p

Potency Evaluation of Recombinant Human Erythropoietin in Brazil: Assessment of Reproducibility Using a Practical Approach

In this study, we compared the results of potency determination of recombinant human erythropoietin (rhEPO) obtained between 2010 and 2012 by the National Institute of Quality Control in Health (INCQS/Fiocruz), i.e., the National Control Laboratory (NCL), and by a manufacturer of rhEPO. In total, 47 different batches of commercially prepared rhEPO (alpha isoform) were analyzed. All results, including those of the control and warning limits, remained within the limits recommended by European Pharmacopoeia (Ph. Eur.). All relative error (RE) values were less than ± 30%, wh ereas most were approximately ± 20%. Applying the Bland-Altman plot, only two of 47 values remained outside the limits of agreement (LA). In addition, agreement of potency determination between INCQS and the manufacturer coefficient of variation of reproducibility (% CVR) was considered satisfactory. Taken together, our results demonstrate (i.) the potency assay of rhEPO performed at INCQS, is standardized and controlled, (ii.) the comparison of our results with those of the manufacturer, revealed an adequate inter-laboratory variation, and (iii.) the critical appraisal proposed here appears to be a feasible tool to assess the reproducibility of biological activity, providing additional information regarding monitoring and production consistency to manufacturers and NCLs

Immune response in cattle vaccinated against rabies

Submitted by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2016-04-28T17:51:08Z No. of bitstreams: 1 Mem_Inst_Oswaldo_Cruz_95_83-88.pdf: 49576 bytes, checksum: 538528b8e73ecef429fd280382af6b84 (MD5)Approved for entry into archive by Alexandre Sousa ([email protected]) on 2016-04-28T18:01:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Mem_Inst_Oswaldo_Cruz_95_83-88.pdf: 49576 bytes, checksum: 538528b8e73ecef429fd280382af6b84 (MD5)Made available in DSpace on 2016-04-28T18:01:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mem_Inst_Oswaldo_Cruz_95_83-88.pdf: 49576 bytes, checksum: 538528b8e73ecef429fd280382af6b84 (MD5) Previous issue date: 2000Centro de Controle de Zoonoses Paulo Dacorso Filho. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Criação de Animais de Laboratório, Departamento de Primatologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman. Laboratório de Raiva e Sorologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Departamento de Imunologia. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Departamento de Microbiologia e Imunologia. Instituto de Veterinária. Seropédica, RJ, Brasil.In order to determine the best type of rabies vaccine to use as a booster, 78 serological samples from singly vaccinated cattle were analyzed by counterimmunoelectrophoresis technique. The animals were divided into several groups, received the first vaccine dose with modified live virus vaccine (ERA strain) and were revaccinated with inactivated virus or modified live virus vaccines. Boosters were given at 2, 4, 8, 12 and 16 weeks following first vaccination. Results showed high titres in the cases of booster with inactivated vaccine. In all cases, however, detectable antibody titres declined quickly