Seasonal influence on seminal pattern and freezability of pantaneiro bull semen

O objetivo deste experimento foi avaliar o efeito da época do ano sobre a biometria testicular e qualidade do sêmen fresco e congelado de touros Pantaneiros. Seis touros foram submetidos, mensalmente, durante um ano, à mensuração testicular e à coleta e congelamento do sêmen, utilizando-se meio à base de tris-gema-glicerol. O comprimento e o volume testiculares foram maiores (P 0,05). Conclui-se que touros Pantaneiros, na região do Distrito Federal, podem ser utilizados em programas de acasalamento natural em todas as épocas do ano. Visando ao enriquecimento do Banco Brasileiro de Germoplasma Animal com maior número de doses, sugere-se o congelamento do sêmen entre os meses de junho e agosto, embora este não apresente perda de qualidade nas diferentes épocas do ano.The purpose of this paper was to investigate the effect of the season of the year on testicular morphology, fresh and frozen/thawed semen quality from Pantaneiro bulls bred in Brasilia, DF. Six bulls were submitted, once a month for one year, to evaluation of testicular measurements, semen collection using an artificial vagina and cryopreserved with medium containing Tris-based, egg yolk and glycerol. The testicular length and volume were greater (P 0.05). In conclusion, Pantaneiro bulls, bred in the Midwest region of Brazil, can be used in natural mating programs in all seasons. Aiming to improve the Brazilian Animal Germplasm Bank with a higher number of samples collected, we suggest that the freezing of the semen is done between June and August, although there will be no losses of semen quality at any time

Embryo production in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Superovulatory response and embryo yield in 19 Morada Nova and 20 Somalis Brasileira ewes was analyzed. All animals were synchronized with the insertion of an intravaginal device (CIDR(r)) on Day 0, replaced by a new device on Day 7, which remained in place until Day 14 and superovulated with 133mg of porcine FSH (pFSH) in decreasing doses at 12h intervals from Day 12 until Day 15 of the treatment, and a single dose of equine chorionic gonadotropin (eCG, 200UI) on Day 14 (i.e., administered in CIDR removal). Fifty hours after CIDR(r) removal, females were inseminated by laparoscopy. All embryos were recovered by laparotomy 5 days after insemination. Sheep which responded to the superovulation protocol (P>0.05) included 74% of the Morada Nova ewes and 50% of the Somalis Brasileira ewes. Morada Nova showed better results (P<0.05) than Somalis Brasileira in number of ovulations (15.38 ± 5.24 vs. 10.56 ± 2.83), total structures (11.00 ± 7.55 vs. 3.33 ± 1.94) and embryo yields (6.79 ± 5.35 vs. 2.90 ± 2.18). Despite the high fertilization rate, degenerate embryo rate was high for both breeds, with an overall rate of 39% (57/145). In conclusion, superovulatory response and embryo yields in Morada Nova ewes were considered sufficient to justify the use of this procedure in genetic resources conservation programs. However, improvements to embryo quality and control of precocious regression of corpus luteum are necessary to produce better results in the MOET program, with minimal variations and maximum embryo yield in Morada Nova and Somalis Brasileira ewes

Composição de fosfolipídios e resistência à vitrificação de blastocistos produzidos in vivo de uma raça de suíno naturalizada brasileira

Blastocistos de suínos foram submetidos ao MALDI-TOF para se identificarem os principais fosfolipídios (PL). Depois, parte destes embriões (D6) foram vitrificados (n=52), ou permaneceram frescos (grupo controle, n=42). Após o aquecimento, os blastocistos foram cultivados in vitro para se avaliar a reexpansão e a eclosão (BE) às 24 e 48 horas. Finalmente, às 48 horas, os BE foram submetidos ao RT-qPCR em busca dos genes BCL2A1, BAK, BAX e CASP3. No MALDI-TOF, a intensidade do íon foi expressa em unidades arbitrárias. O desenvolvimento embrionário foi comparado por qui-quadrado (P0,05) entre blastocistos frescos ou vitrificados às 24 (33,3%, 32,7%) e 48 horas (2,4%, 13,5%). As taxas de eclosão foram maiores (P 0.05) between fresh or vitrified blastocysts at 24 (33.3%; 32.7%) or 48 hours (2.4%; 13.5%). Hatching rates were higher (P< 0.05) for fresh compared to vitrified at 24 (66.7%; 15.4%) and 48 hours (97.6%; 36.0%). BAX was overexpressed (P< 0.05) after vitrification. In conclusion, Piau blastocysts can be cryopreserved by Cryotop. This study also demonstrated that the apoptotic pathway may be responsible for the low efficiency of porcine embryo cryopreservation

Estrous synchronization in Santa Ines sheep using FSH : LH

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Ciências Animais, 2013.Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito de diferentes fontes de promotores do crescimento folicular (FSH:LH e eCG) na sincronização do estro, ovulação e fertilidade de ovelhas Santa Inês. Para tanto, matrizes Santa Inês foram submetidas a protocolos de sincronização seguida de inseminação artificial em tempo fixo (IATF) com sêmen congelado. No Experimento 1, as matrizes (n=44) iniciaram protocolo com dispositivos intravaginais impregnados com progestágenos (60 mg de acetato de medroxiprogesterona - Progespon®) e mantidos por 12 dias. Na remoção do pessário, os animais foram divididos em quatro grupos: G300eCG receberam 300 UI de ECG por via intramuscular; G20FSH:LH receberam 20 UI de FSH:LH; G40FSH:LH receberam 40 UI de FSH:LH; e G20/20FSH:LH receberam 40 UI de FSH:LH dividido em duas doses administradas 12 horas antes e no momento da remoção do pessário. Os animais foram mantidos com rufião para detecção do estro. Os folículos foram avaliados (ultrassonografia) em intervalos de 4 horas até a ovulação e os corpos lúteos sete dias após a ovulação. O sangue foi coletado para avaliação da concentração sérica de P4 por radioimunoensaio. No Experimento 2 foi realizado por inseminação artificial em tempo fixo por laparoscopia as 64 e 74 horas após a remoção do MAP, nos grupos G300eCG e G20FSH:LH respectivamente, com o objetivo de avaliar a eficiência dos protocolos. Na análise estatística utilizou-se ANOVA e as médias comparadas pelo teste de Duncan, as variáveis sem distribuição normal foram analisadas pelo teste de Kruskal-Wallis, e os dados binomiais pelo teste de Qui-quadrado. A hora do estro e da ovulação, diâmetro do maior folículo, volume luteal e concentração sérica de progesterona foram semelhantes entre os protocolos (P>0,05).O tempo entre a remoção do pessário intravaginal até o estro e ovulação variaram de 46,3±11,8 a 53,0±7,2 e 80,4±17,3 a 95,3±6,1, respectivamente. A alta variação na distribuição do estro e da ovulação, em todos os tratamentos, mostrou que nenhum dos protocolos foi eficiente na sincronização do estro e ovulação, evidenciando a necessidade de desenvolvimento de protocolos mais eficientes. O número de ovelhas em estro não diferiu entre os grupos G300eCG e G20FSH:LH, tendo valores de 72% e 71%, respectivamente (P>0,05). A taxa de fertilidade foi semelhante ao utilizar 300 UI de eCG (38%) ou 20 UI de FSH:LH (26,9%) após a remoção do pessário vaginal (P>0,05). Durante a estação seca, tanto o protocolo utilizando eCG quanto FSH:LH nas diferentes doses, não foram eficientes na sincronização do estro e da ovulação, resultando em baixa taxa de fertilidade com IATF usando sêmen congelado, no entanto a semelhança entre os tratamentos sugere que o eCG pode ser substituído pelo FSH:LH em programas de sincronização do estro. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACTThe purpose of this study to evaluate the effect of different sources of follicular growth promoters (FSH:LH and eCG) on estrus synchronization, ovulation and fertility of Santa Inês ewes. Therefore, arrays Santa Inês underwent synchronization protocols followed by fixed-time artificial insemination (TAI) with frozen semen. In Experiment 1, the arrays (n=44) initiated protocol with intravaginal devices impregnated with progesterone (60 mg of medroxyprogesterone acetate - Progespon®) and kept for 12 days. On P4 removal, the animals were divided into four groups: G300eCG received 300 IU intramuscularly ECG; G20FSH: LH received 20 IU FSH:LH; G40FSH:LH received 40 IU FSH:LH, and G20/20FSH:LH received 40 IU FSH:LH administered in two divided doses, 12 hours before and at the time of P4 removal. The animals were maintained with teaser for estrus detection. The follicles were ultrasound evaluated with 4 hours interval and again seven days after ovulation for corpora lutea assessment. Radioimmunoassay was performed to access P4 from serum of collected blood samples. In Experiment 2 TAI was performed using laparoscopy at 64 and 74 hours after removal of MAP, in groups G300eCG G20FSH: LH respectively, in order to evaluate protocols efficiency. For statistical analysis was used ANOVA and means were compared by Duncan test, variables without normal distribution were analyzed using Kruskal-Wallis test, and binomial data by Chi-square. The time of oestrus and ovulation, largest follicle diameter, luteal volume and progesterone concentration were similar among protocols (P> 0.05). The time between removal of intravaginal device to estrus and ovulation ranged from 46.3 ± 11.8 to 53.0 ± 7.2 and 80.4 ± 17.3 to 95.3 ± 6.1, respectively. The high variation in the estrus and ovulation distribution in all treatments showed that none of protocols was effective in estrus and ovulation synchronization, suggesting the need for development of more efficient protocols. The number of ewes in estrus did not differ between groups G300eCG (72%) and G20FSH:LH (71%) (P> 0.05). Fertility rate was similar when using 300 IU eCG (38%) or 20 IU FSH: LH (26.9%) after removal of vaginal pessary (P> 0.05). During the dry season, both eCG as FSH:LH using at different doses protocol was not effective in estrus and ovulation synchronization, resulting in low fertility rate with TAI using frozen semen, however the similarity among treatments suggests that the eCG can be replaced by FSH:LH in oestrus synchronization programs

Different alternatives assessment to improve efficiency estrus and ovulation synchrony in hair sheep

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-graduação em Ciências Animais, 2016.A inseminação artificial é uma poderosa ferramenta para os programas de melhoramento genético e conservação de raças, porém, é menos difundida em ovinos. Isso ocorre devido aos resultados irregulares e baixos de fertilidade após a sincronização do estro e inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Um dos fatores que pode contribuir para a piora nesse resultado é a assincronia do estro e da ovulação após o tratamento hormonal. Neste estudo objetivou-se avaliar diferentes alternativas para aumentar a eficiência dos protocolos de sincronização do estro utilizados em programas de IATF em ovinos. Entre as abordagens utilizadas estão (1) o uso de diferentes promotores do desenvolvimento folicular (eCG e FSH:LH) em diferentes épocas do ano (períodos chuvoso e seco); (2) o uso do protocolo longo com MAP em diferentes épocas do ano (períodos chuvoso, seco e transições); (3) o uso do estradiol associado a progesterona (4) o uso de diferentes doses de eCG e momentos de aplicação; e (5) o uso de dois protocolos curtos com diferentes fontes de progesterona (MAP e P4). Em todos os experimentos, diferentes avaliações quanto a manifestação estral, condição folicular, lutea e hormonal foram realizadas para determinar a eficiência das alternativas propostas. Apesar do protocolo longo com MAP apresentar um melhor desempenho na sincronia do estro e/ou ovulação na época seca do que na época chuvosa, os resultados mostraram que esse protocolo não sincroniza eficientemente a ovulação, o que poderia afetar negativamente as taxas de fertilidade após IATF. A sincronia do estro e ovulação também é prejudicada quando se utiliza 400 UI de eCG, 24 horas antes da remoção do pessário de progesterona. O uso de diferentes fontes de estradiol, em conjunto com a progesterona, auxilia no recrutamento de uma nova onda e padroniza a condição folicular ovariana, portanto essa abordagem pode ser usada em estudos futuros, para atingir essa finalidade. A utilização da progesterona tanto em um protocolo longo, quanto no curto, resulta em uma boa sincronia da ovulação, contudo, o protocolo curto parece apresentar uma maior eficiência em sincronizar o tempo das ovulações. Essa abordagem em um programa de IATF com a utilização de sêmen congelado, não melhora as taxas de fertilidade utilizando a inseminação artificial por via cervical superficial, contudo, quando a inseminação é realizada por via laparoscópica resulta em valores próximos a 70% de taxa de fertilidade.Artificial insemination is a powerful tool for breeding programs and conservation of breeds, however, it is less widespread in sheep. This is due to irregular and low fertility results after estrus synchronization and fixed-time artificial insemination (FTAI). One of the factors that may contribute to the decline of this result is the is the asynchrony of estrus and ovulation after hormonal treatment. This study aimed to evaluate different alternatives to increase the efficiency of estrus synchronization protocols used in FTAI programs in sheep. Among the approaches used are (1) the use of different promoters of follicular development (eCG and FSH:LH) in different seasons (rainy and dry); (2) using the long-term protocol with MAP in different seasons (rainy, dry and transitions); (3) the use of estradiol associated with progesterone (4) the use of different doses of eCG and application times; and (5) the use of two short-term protocols with different sources of progesterone (MAP and P4). In all experiment, different assessments of the estrous manifestation, follicular, luteal and hormonal condition were performed to determine the effectiveness of the proposed alternatives. Despite long-term protocol with MAP perform better in synchrony of estrus and/or ovulation in the dry season than in the rainy season, the results showed that this protocol does not effectively synchronize ovulation, which could negatively affect fertility rates after TAI. Synchrony of estrus and ovulation is also impaired when using 400 UI of eCG 24 hours before removal of progesterone pessaries. The use of different sources of estradiol in combination with progesterone, helps to recruit a new wave and standardizes the ovarian follicular condition, so this approach can be used in future studies to achieve this purpose. The use of progesterone in both a long protocol as in short, results in a good synchronization of ovulation, however, the short protocol seems to have a higher efficiency in synchronizing the time of ovulation. This approach in a FTAI program with frozen semen does not improve fertility rates using superficial cervical artificial insemination, however, when insemination is performed laparoscopically it results in values close to 70% fertility rate

SEASONAL INFLUENCE ON SEMINAL PATTERN AND FREEZABILITY OF PANTANEIRO BULL SEMEN

The purpose of this paper was to investigate the effect of the season of the year on testicular morphology, fresh and frozen/thawed semen quality from Pantaneiro bulls bred in Brasilia, DF. Six bulls were submitted, once a month for one year, to evaluation of testicular measurements, semen collection using an artificial vagina and cryopreserved with medium containing Tris-based, egg  yolk and glycerol. The testicular length and volume were greater (P 0.05). In conclusion, Pantaneiro bulls, bred in the Midwest region of Brazil, can be used in natural mating programs in all seasons. Aiming to improve the Brazilian Animal Germplasm Bank with a higher number of samples collected, we suggest that the freezing of the semen is done between June and August, although there will be no losses of semen quality at any time. Keywords: bovine; conservation; cryopreservation; reproduction; seasonality