Baixa diversidade genética em Culex quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) infectado por Wolbachia do Brasil e Argentina

Culex quinquefasciatus é vetor de patógenos humanos, incluindo nematódeos filarídeos e vários vírus. Embora a sua relevância epidemiológica varie entre as diferentes regiões geográficas, o conhecimento da estrutura genética da população é ainda incipiente. Em vista disso, foram avaliados os níveis de diversidade genética de Cx. quinquefasciatus e de híbridos Cx. quinquefasciatus x Cx. pipiens de nove cidades do Brasil e em La Plata, na Argentina. Para os testes foram utilizados fragmentos dos genes mitocondriais cox1 e nd4, juntamente com coxA e wsp do endossimbionte Wolbachia, herdado maternalmente. O fragmento nd4 não apresentou variação entre as amostras, e o cox1 exibiu quatro haplótipos que separaram dois tipos de Cx. quinquefasciatus, com um deles agrupado no sul do Brasil. Os dados de sequência mostraram baixa diversidade, sendo esta discutida. Ambas as amostras de mosquitos brasileiros e argentinos estão infectados com uma única cepa de Wolbachia. A diversidade apresentada por nd4 e cox1 não é congruente com a estrutura da população revelada por marcadores nucleares e morfologia alar de estudos anteriores com estas mesmas populações. Pesquisas com Cx. quinquefasciatus devem, se possível, avaliar a diversidade por DNA mitocondrial na luz de outros marcadores.Culex quinquefasciatus is a vector of human pathogens, including filarial nematodes and several viruses. Although its epidemiological relevance is known to vary across geographical regions, an understanding of its population genetic structure is still incipient. In light of this, we evaluated the genetic diversity of Cx. quinquefasciatus and Cx. pipiens x Cx. quinquefasciatus hybrids collected from nine localities in Brazil and one site in Argentina. We used mitochondrial genes cox1 and nd4, along with the coxA and wsp genes of the maternally-inherited Wolbachia endosymbiont. The nd4 fragment was invariant between samples, whilst cox1 exhibited four haplotypes that separated two types of Cx. quinquefasciatus, one clustered in southern Brazil. Low sequence diversity was generally observed, being discussed. Both Brazilian and Argentinian mosquitoes were infected with a single Wolbachia strain. As reported in previous studies with these populations, cox1 and nd4 diversity is not congruent with the population structure revealed by nuclear markers or alar morphology. Future Cx. quinquefasciatus research should, if possible, evaluate mtDNA diversity in light of other markers

Accuracy Of Sonography And Hysteroscopy In The Diagnosis Of Premalignant And Malignant Polyps In Postmenopausal Women.

To evaluate the accuracy of sonographic endometrial thickness and hysteroscopic characteristics in predicting malignancy in postmenopausal women undergoing surgical resection of endometrial polyps. Five hundred twenty-one (521) postmenopausal women undergoing hysteroscopic resection of endometrial polyps between January 1998 and December 2008 were studied. For each value of sonographic endometrial thickness and polyp size on hysteroscopy, the sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) were calculated in relation to the histologic diagnosis of malignancy. The best values of sensitivity and specificity for the diagnosis of malignancy were determined by the Receiver Operating Characteristic (ROC) curve. Histologic diagnosis identified the presence of premalignancy or malignancy in 4.1% of cases. Sonographic measurement revealed a greater endometrial thickness in cases of malignant polyps when compared to benign and premalignant polyps. On surgical hysteroscopy, malignant endometrial polyps were also larger. An endometrial thickness of 13 mm showed a sensitivity of 69.6%, specificity of 68.5%, PPV of 9.3%, and NPV of 98% in predicting malignancy in endometrial polyps. Polyp measurement by hysteroscopy showed that for polyps 30 mm in size, the sensitivity was 47.8%, specificity was 66.1%, PPV was 6.1%, and NPV was 96.5% for predicting cancer. Sonographic endometrial thickness showed a higher level of accuracy than hysteroscopic measurement in predicting malignancy in endometrial polyps. Despite this, both techniques showed low accuracy for predicting malignancy in endometrial polyps in postmenopausal women. In suspected cases, histologic evaluation is necessary to exclude malignancy.35243-

LOW GENETIC DIVERSITY IN Wolbachia-INFECTED Culex quinquefasciatus (DIPTERA: CULICIDAE) FROM BRAZIL AND ARGENTINA

Culex quinquefasciatus is a vector of human pathogens, including filarial nematodes and several viruses. Although its epidemiological relevance is known to vary across geographical regions, an understanding of its population genetic structure is still incipient. In light of this, we evaluated the genetic diversity of Cx. quinquefasciatus and Cx. pipiens x Cx. quinquefasciatus hybrids collected from nine localities in Brazil and one site in Argentina. We used mitochondrial genes cox1 and nd4, along with the coxA and wsp genes of the maternally-inherited Wolbachia endosymbiont. The nd4 fragment was invariant between samples, whilst cox1 exhibited four haplotypes that separated two types of Cx. quinquefasciatus, one clustered in southern Brazil. Low sequence diversity was generally observed, being discussed. Both Brazilian and Argentinian mosquitoes were infected with a single Wolbachia strain. As reported in previous studies with these populations, cox1 and nd4 diversity is not congruent with the population structure revealed by nuclear markers or alar morphology. Future Cx. quinquefasciatus research should, if possible, evaluate mtDNA diversity in light of other markers.FAPESP [05/50225-2, 06/02622-5]FAPES

Acurácia da ultrassonografia e da histeroscopia no diagnóstico de pólipos endometriais pré-malignos e malignos na pós-menopausa

PURPOSE: To evaluate the accuracy of sonographic endometrial thickness and hysteroscopic characteristics in predicting malignancy in postmenopausal women undergoing surgical resection of endometrial polyps. METHODS: Five hundred twenty-one (521) postmenopausal women undergoing hysteroscopic resection of endometrial polyps between January 1998 and December 2008 were studied. For each value of sonographic endometrial thickness and polyp size on hysteroscopy, the sensitivity, specificity, positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) were calculated in relation to the histologic diagnosis of malignancy. The best values of sensitivity and specificity for the diagnosis of malignancy were determined by the Receiver Operating Characteristic (ROC) curve. RESULTS: Histologic diagnosis identified the presence of premalignancy or malignancy in 4.1% of cases. Sonographic measurement revealed a greater endometrial thickness in cases of malignant polyps when compared to benign and premalignant polyps. On surgical hysteroscopy, malignant endometrial polyps were also larger. An endometrial thickness of 13 mm showed a sensitivity of 69.6%, specificity of 68.5%, PPV of 9.3%, and NPV of 98% in predicting malignancy in endometrial polyps. Polyp measurement by hysteroscopy showed that for polyps 30 mm in size, the sensitivity was 47.8%, specificity was 66.1%, PPV was 6.1%, and NPV was 96.5% for predicting cancer. CONCLUSIONS: Sonographic endometrial thickness showed a higher level of accuracy than hysteroscopic measurement in predicting malignancy in endometrial polyps. Despite this, both techniques showed low accuracy for predicting malignancy in endometrial polyps in postmenopausal women. In suspected cases, histologic evaluation is necessary to exclude malignancy.OBJETIVO: Avaliar a acurácia da espessura endometrial ecográfica e características histeroscópicas em predizer malignidade em mulheres na pós-menopausa submetidas à ressecção cirúrgica de pólipos endometriais. MÉTODOS: Quinhentos e vinte e uma (521) mulheres na pós-menopausa submetidas à ressecção histeroscópica de pólipo endometrial entre janeiro de 1998 e dezembro de 2008 foram incluídas no estudo. Para cada valor de espessura endometrial ecográfica e tamanho dos pólipos na histeroscopia, a sensibilidade, a especificidade, valor preditivo positivo (VPP) e valor preditivo negativo (VPN) foram calculados em relação ao diagnóstico histológico de malignidade. Os melhores valores de sensibilidade e especificidade para o diagnóstico de malignidade foram determinados pela curva Receiver Operating Characteristic (ROC). RESULTADOS: O diagnóstico histológico identificou a presença de pré-malignidade ou malignidade em 4,1% dos casos. A espessura endometrial medida por ultrassonografia em casos de pólipos malignos foi maior quando comparado com pólipos benignos e pré-malignos. Na histeroscopia os pólipos malignos também foram maiores. A espessura endometrial de 13 mm mostrou uma sensibilidade de 69,6%, especificidade de 68,5%, VPP de 9,3% e VPN de 98% para predizer malignidade em pólipo endometrial. A medida do pólipo por histeroscopia mostrou que para pólipos de 30 mm de tamanho, a sensibilidade foi de 47,8%, a especificidade foi de 66,1%, VPP foi de 6,1% e VPN foi de 96,5% para predizer o câncer. CONCLUSÕES: A espessura endometrial ultrassonográfica mostrou uma maior acurácia que a avaliação histeroscópica do tamanho do pólipo para predizer malignidade nessas lesões endometriais. Apesar disso, ambas as técnicas não mostraram boa acurácia para excluir a necessidade de fazer a avaliação histológica dos casos suspeitos.24324

Brazilian mosquito (Diptera: Culicidae) fauna: I. Anopheles species from Porto Velho, Rondônia state, western Amazon, Brazil

Este estudo contribui para o conhecimento de espécies de Anopheles, incluindo vetores de Plasmodium do oeste da Amazônia brasileira, em Porto Velho, no estado de Rondônia. Esta região vem passando por mudanças ambientais, como consequência de agricultura extensiva e projetos hidroelétricos que causam desmatamento, favorecendo o desenvolvimento de algumas espécies de mosquitos. Assim, a proposta deste estudo é registrar a presença de espécies de anofelinos na área, sendo conduzidas coletas de mosquitos em três locais, ao longo de uma linha de transmissão de energia elétrica. Cada uma das localidades foi amostrada três vezes, no período de 2010 a 2011. Os principais mosquitos adultos capturados em armadilhas de Shannon foram Anopheles darlingi, An. triannulatus, An. nuneztovari l.s., An.gilesi e An. costai. Assim como as formas larvárias Anopheles braziliensis, An. triannulatus, An. darlingi, An. deaneorum, An. marajoara, An. peryassui, An. nuneztovari l.s. e An. oswaldoi-konderi, coletadas em criadouros. Anopheles darlingi foi a espécie mais coletada na região. Em adição, discutiu-se sistemática de Culicidae, distribuição de fauna e aspectos da malária em ambientes modificados do oeste da Amazônia brasileira.This study contributes to knowledge of Anopheles species, including vectors of Plasmodium from the western Brazilian Amazon in Porto Velho, Rondônia State. The sampling area has undergone substantial environmental changes as a consequence of agricultural and hydroelectric projects, which have caused intensive deforestation and favored habitats for some mosquito species. The purpose of this study was to diagnose the occurrence of anopheline species from collections in three locations along an electric-power transmission line. Each locality was sampled three times from 2010 to 2011. The principal adult mosquitoes captured in Shannon trap were Anopheles darlingi, An. triannulatus, An. nuneztovari l.s., An.gilesi and An. costai. In addition, larvae were collected in ground breeding sites for Anopheles braziliensis, An. triannulatus, An. darlingi, An. deaneorum, An. marajoara, An. peryassui, An. nuneztovari l.s. and An. oswaldoi-konderi. Anopheles darlingi was the most common mosquito in the region. We discuss Culicidae systematics, fauna distribution, and aspects of malaria in altered habitats of the western Amazon

Morphometric relationships and population genetics of Culex quinquefasciatus

Objetivo. Culex (Culex) quinquefasciatus Say 1823 tem distribuição expansiva em aglomerados humanos e é vetor em ciclos de transmissão de agentes patogênicos, como filarídeos e arbovírus. Taxonomicamente, essa espécie está dentro do subgrupo pipiens, cuja principal característica é a similaridade morfológica dos seus integrantes. Este estudo objetivou caracterizar genética e morfologicamente espécies Cx. quinquefasciatus de dez localidades brasileiras e da região da bacia do Prata, na Argentina. Métodos. Para análises morfológicas foram utilizados valores morfométricos das veias alares de fêmeas e a razão DV/D do edeago, na genitália de machos adultos. Para testes genéticos foram sequenciados os genes mitocondriais cox1 e nd4, clonados fragmentos do segundo espaçador ribossomal ITS2 e analisado o padrão de bandas eletroforéticas do segundo intron do lócus da Acetilcolinesterase (ace2). Resultados. A forma das veias alares de fêmeas agrega dois principais grupos, um com mosquitos do Brasil e outro de La Plata, tendo este último maior variança interna. Esses dados estão relacionados à distribuição encontrada no fragmento ace2, que indica La Plata como área de hibridação entre Cx. quinquefasciatus e Cx. pipiens. Os valores de tamanho da asa apresentam três principais agrupamentos. Um deles em áreas ao norte do Brasil, outro no sudeste e sul, e outro na Argentina. O mesmo ocorre com a razão DV/D da genitália masculina. Os dados de sequências de bases do gene cox1 apresentam polimorfismos, com baixa diversidade e agrupamento populacional na região Sul do Brasil. Os SNPs encontrados são silenciosos, pois não apresentam modificação na estrutura da proteína produzida. O gene nd4 é idêntico em todas as amostras. Esses fragmentos sugerem características de homoplasmia em Cx. quinquefasciatus. O espaçador ITS2 mostrou variedade de polimorfismos, por eventos intra-genômicos de inserção, deleção, translocação e transição de bases. Porém, esses eventos são sincrônicos em populações de diferentes áreas geográficas; assim como, mostra pouca variação nas estruturas dos transcritos RNAr. Por outro lado, os dados ITS2 apontam a segregação de um trinucleotídeo GTC, em mosquitos de La Plata, caracterizando essa área como de isolamento geográfico de mosquitos do complexo pipiens. Conclusão. A espécie Cx. quinquefasciatus possui baixa diversidade genética e morfológica, duas linhagens mitocondriais no Brasil e mosquitos de origem híbrida com Cx. pipiens na Bacia do Prata, na ArgentinaObjective. The Culex (Culex) quinquefasciatus Say 1823 is widely distributed in human settlements, and is a vector in the transmission cycles of pathogens such as arboviruses and filarids. This species belongs to Cx pipiens complex, whose main characteristic is the morphologic similarity of their species. This study aimed to characterize genetic and morphological Cx quinquefasciatus species from different regions of Brazil and La Plata, Argentina. Methods. Were used morphometric values of wing veins of females and the DV/D ratio of aedeagus in adult male genitalia. For genetic testing were sequenced mitochondrial cox1 and nd4 genes, cloned fragments of ribosomal ITS2 spacer and examined the pattern of electrophoretic bands of the second intron of Acetylcholinesterase (ace2) locus. Results. The shape of the wing veins of female aggregates two main groups, one with mosquitoes of the Brazil and one from La Plata, the latter having greater internal variance. These data are related to the distribution found in ace2 fragment, which indicates La Plata as hybridization area between Cx. pipiens and Cx. quinquefasciatus. The values of wing size form a geographical cline, with three main groupings. One of these areas in the north of Brazil other in the southeast and south, and another in Argentina. The same happens with reason DV/D of the male genitalia. Sequence data bases have cox1 gene polymorphisms with low diversity and clustering of population in southern Brazil. The cox1 SNPs found are trace, because it does not show modification in the structure of the protein produced. The nd4 gene is identical in all samples. These fragments suggest homoplasmic features in Cx. quinquefasciatus. ITS2 showed polymorphisms and intragenomic events by insertion, deletion, translocation and transition bases. However, these events are synchronous in populations from different geographic areas and shows little variation in the structures of rRNA transcripts. Moreover, the data indicate ITS2 segregation of a trinucleotide GTC in mosquitoes from La Plata, featuring this area as the geographic isolation of the subgroup pipiens mosquitoes. Conclusion. Cx quinquefasciatus species has low genetic and morphological diversity, two mitochondrial lineages in Brazil and mosquitoes of hybrid origin with Cx pipiens in La Plata, Argentin

Aspects of the infestation of Culex (Culex) quinquefasciatus (Diptera: Culicidae) in the Pinheiros river, São Paulo (São Paulo, Brazil) and considerations on the applications of the population control

Objetivo. O estudo apresenta aspectos da biologia e ecologia de Culex quinquefasciatus no rio Pinheiros, e focaliza alguns possíveis fatores que levam o mosquito proliferar neste ambiente. As análises das informações permitiram conhecer aspectos da infestação da espécie e a eficácia das ações de controle efetuadas no local. Métodos. O trabalho de campo foi efetuado no período de 01 (um) ano, mediante coleta de dados, envolvendo pesquisa bibliográfica referente aos caracteres e a biologia de Cx. quinquefasciatus, pesquisa documental referente às medidas de controle entomológico efetuadas no rio Pinheiros, informações sobre temperatura e precipitação pluviométrica e descrição do quadro ecológico e geográfico do rio Pinheiros. Para as atividades de monitoramento foram realizadas coletas de adultos de mosquitos e, posteriormente, identificados e contados em laboratório. Foram utilizados indicadores de freqüência de adultos, separando-os por sexo, e as fêmeas em vazias, com sangue e com ovos para estudos de dinâmica populacional. Resultados. Devido à estagnação do rio, motivada pela regulação artificial de seu fluxo em várias extensões, formam-se condições propícias à proliferação do mosquito Culex quinquefasciatus, espécie altamente adaptada à exploração de corpos dágua com elevado teor de poluentes. Esse mosquito apresentou alta freqüência e exclusividade entre os culicídeos. A aplicação de larvicida biológico, de um modo geral, não teve influência nos níveis de frequência de mosquitos adultos, tendo que a população mostrou uma flutuação sazonal natural durante o período de estudo. Conclusão. Os dados de qualidade da água do rio Pinheiros apresentaram altos níveis de poluição, picos com alta temperatura e grande quantidade de sais no meio líquido. Essas condições podem estar interferindo na toxicidade do larvicida biológico. O estudo sugere, antes da implantação de ações de controle, a elaboração de um protocolo, com provisão de testes de campo para verificação da atividade do larvicida, como precipitação, aderência às partículas do sedimento e nível de toxicidade do preparado no meio líquido. Além disso, foi sugerida a realização de testes do conteúdo do estômago da larva, para observação quanto à presença de esporos do Bs e também aplicações especiais de inseticidas nas regiões de maior atividade reprodutiva da população de mosquitos.Objective. The present study presents aspects of the biology and ecology of Culex quinquefasciatus in the Pinheiros river, focusing some possible factors that take the mosquito to proliferate in that environment. The analyses of the information allowed to know the level of infestation of the species and the effectiveness of the control actions made in the place. Methods. The field work was made in the period of 01 (one) year, by collecting data, involving bibliographical research regarding to characters and the biology of Cx. quinquefasciatus, research reports regarding to the measures of entomological control made in the Pinheiros River, information about temperature, rain precipitation and description of the ecological and geographical picture of the river. For the monitored activities mosquito adult collections were accomplished and, later on, they were identified and counted in laboratory. Indicators of adults' frequency were used, separating them according to sex, in blood fed and unfed females, and with or no eggs for studies of dynamic of population. Results. Due to the stagnation of the river, motivated by the artificial regulation of its flow in several extensions, favorable conditions were formed to the proliferation of the mosquito Cx. quinquefasciatus, species highly adapted to the exploration of bodies of water with high level of pollutes. This mosquito presented high infestation levels and exclusiveness among the Culicidae species in the fauna local. The application of biological larval insecticide didn't present any impact in the frequency of adult mosquitoes, and this showed a natural seasonal flotation during the study period. Conclusion. The data of quality of the water of the Pinheiros River presented high pollution levels, high temperature and great amount of salts in the liquid medium. Those conditions can interfere in the toxicity of the biological larval insecticide. The study also suggests, before the implantation of a control program, the elaboration of a protocol, with provision of field tests for verification of the activity of the larval insecticide, as precipitation tests, adherence to the particles of the sediment, content of the stomach of the larva and toxicity of the mixture in the liquid medium