Avances en la neosporosis bovina

El Grupo de Sanidad Animal de la EEA Balcarce del INTA presenta tres trabajos que tratan diferentes temas, como taxonomía, morfología, ciclo biológico, epidemiología, situación en el país e impacto económico, inmunidad, control y vacunas, de la neosporosis bovina, enfermedad parasitaria que causa aborto y nacimiento de terneros con deficiencia neuromuscular producida por el protozoo Neospora caninum.Academia Nacional de Agronomía y Veterinari

Avances en la neosporosis bovina

El Grupo de Sanidad Animal de la EEA Balcarce del INTA presenta tres trabajos que tratan diferentes temas, como taxonomía, morfología, ciclo biológico, epidemiología, situación en el país e impacto económico, inmunidad, control y vacunas, de la neosporosis bovina, enfermedad parasitaria que causa aborto y nacimiento de terneros con deficiencia neuromuscular producida por el protozoo Neospora caninum.Academia Nacional de Agronomía y Veterinari

Avances en la neosporosis bovina

El Grupo de Sanidad Animal de la EEA Balcarce del INTA presenta tres trabajos que tratan diferentes temas, como taxonomía, morfología, ciclo biológico, epidemiología, situación en el país e impacto económico, inmunidad, control y vacunas, de la neosporosis bovina, enfermedad parasitaria que causa aborto y nacimiento de terneros con deficiencia neuromuscular producida por el protozoo Neospora caninum.Academia Nacional de Agronomía y Veterinari

Bovine neosporosis in Argentina: 25 years from the first report in the country

La neosporosis es una enfermedad de gran impacto en el ganado vacuno debido a que causa abortos en el segundo y último trimestre de la gestación. En esta revisión se resume y discute la información sobre la misma, recopilada de dos décadas y media de estudios en bovinos de Argentina. Se aportan datos sobre el diagnóstico, la prevalencia y los avances en el estudio de la enfermedad. Está dirigida a los médicos veterinarios dedicados al diagnóstico y a la investigación de la neosporosis y/o a la producción bovina.Neosporosis is a disease with great impact in cattle, responsible for abortions in the second and last trimester of gestation. The present revision summarizes and discusses information from two and a half decades of studies about the disease in cattle from Argentina, contributing data about prevalence, diagnosis and progress in the knowledge of the disease. this report will be of interest for veterinarians specialized in diagnosis and investigation of neosporosis and/or bovine production.Facultad de Ciencias Veterinaria

Evaluación y comparación de pruebas serológicas para la detección de la neosporosis bovina en Argentina

Neospora caninum is a protozoan parasite that causes abortion and important economic losses in cattle worldwide. The accurate diagnosis of neosporosis is essential for management and control measures. The aims of this study were: i) to evaluate the performance of an in-house enzyme-linked immunosorbent assay based on the 38 kDa native antigen (p38-ELISA) to diagnose bovine neosporosis in Argentina using a well- characterized local sera panel from experimentally infected and naturally exposed cattle and ii) to compare the diagnostic performance and agreement of three N. caninum serological tests: p38-ELISA, indirect fluorescence antibody test (IFAT) and immunoblotting (IB) using the same sera panel. Serum samples testing either positive or negative by IFAT and IB were considered “Relative Standards of Comparison” (RSC) and used for p38-ELISA evaluation. Receiver operating characteristics analysis revealed that p38-ELISA was highly accurate (area under the curve= 0.982) according to RSC with a cut-off index of 0.0905. Relative sensitivity and specificity of p38-ELISA were 97.8 % and 99.5 %, respectively and agreement between RSC and p38-ELISA was almost perfect (k= 0.97). The evaluation and performance comparison of serological tests were performed according to the definition of gold standard based on the decision of the “majority of tests”. All tests displayed high sensitivity and specificity values (greater than 95 %); and excellent agreement. This study describes the accurate performance of p38-ELISA evaluated locally and the highly accurate diagnostic performance of the studied tests for the detection of anti-N.caninum antibodies in cattle from Argentina.Neospora caninum es un parásito protozoo responsable de abortos y pérdidas económicas en bovinos. La realización de un diagnóstico serológico preciso y con resultados comparables obtenidos por diferentes pruebas contribuye al manejo de este problema y a encarar medidas de control. Los objetivos del presente trabajo fueron los siguientes: 1) evaluar en Argentina una prueba de enzimoinmunoensayo in-house con el antígeno nativo de 38 kDa de N. caninum (ELISA-p38) para el diagnóstico de la neosporosis bovina, utilizando un panel de sueros locales bien caracterizados, procedentes de bovinos infectados de modo experimental o naturalmente expuestos; 2) comparar el desempeno˜ y establecer el nivel de concordancia de tres pruebas serológicas para la detección de N. caninum, ELISA-p38, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (IB), con el mismo panel de sueros. Los sueros que resultaron positivos o negativos a IFI e IB fueron considerados como estándares relativos de comparación (ERC) para evaluar la prueba de ELISA-p38. El análisis de característica operativa del receptor determinó que la prueba de ELISA-p38 fue altamente precisa (área bajo la curva= 0,982) usando el punto de corte 0,0905. La sensibilidad y especificidad relativa del ELISA-p38 fue 97,8 % y 99,5 %, respectivamente, con una concordancia casi perfecta (k= 0,97) respecto del ERC. La comparación del desempeno˜ de las pruebas se realizó usando como gold standard el criterio de la decisión de la ‘‘mayoría de las pruebas’’. Las pruebas exhibieron altos valores de sensibilidad y especificidad (mayores del 95 %) y excelente concordancia. Este trabajo describe un buen desempeno˜ de la prueba de ELISA-p38 evaluada localmente y adecuada performance diagnóstica de las pruebas serológicas analizadas para la detección de anticuerpos anti N. caninum en bovinos de Argentina.Facultad de Ciencias Veterinaria

Humoral and cellular immune response and transplacental transmission in cows experimentally infected with Neospora caninum NC-6 Argentina strain

La infección por Neospora caninum es una importante causa de aborto en los bovinos. El objetivo de este estudio fue evaluar la respuesta inmune humoral y celular en bovinos y la posibilidad de transmisión transplacentaria durante una infección experimental con la cepa de N. caninum NC-6 Argentina. Se inocularon vacas preñadas de 65 días de gestación seropositivas (SP) y seronegativas (SN) a N. caninum por vía intravenosa con 108 taquizoítos de la cepa NC-6 o con PBS como control negativo.Facultad de Ciencias VeterinariasInstituto Nacional de Tecnología Agropecuari

Evaluación y comparación de pruebas serológicas para la detección de la neosporosis bovina en Argentina

Neospora caninum is a protozoan parasite that causes abortion and important economic losses in cattle worldwide. The accurate diagnosis of neosporosis is essential for management and control measures. The aims of this study were: i) to evaluate the performance of an in-house enzyme-linked immunosorbent assay based on the 38 kDa native antigen (p38-ELISA) to diagnose bovine neosporosis in Argentina using a well- characterized local sera panel from experimentally infected and naturally exposed cattle and ii) to compare the diagnostic performance and agreement of three N. caninum serological tests: p38-ELISA, indirect fluorescence antibody test (IFAT) and immunoblotting (IB) using the same sera panel. Serum samples testing either positive or negative by IFAT and IB were considered “Relative Standards of Comparison” (RSC) and used for p38-ELISA evaluation. Receiver operating characteristics analysis revealed that p38-ELISA was highly accurate (area under the curve= 0.982) according to RSC with a cut-off index of 0.0905. Relative sensitivity and specificity of p38-ELISA were 97.8 % and 99.5 %, respectively and agreement between RSC and p38-ELISA was almost perfect (k= 0.97). The evaluation and performance comparison of serological tests were performed according to the definition of gold standard based on the decision of the “majority of tests”. All tests displayed high sensitivity and specificity values (greater than 95 %); and excellent agreement. This study describes the accurate performance of p38-ELISA evaluated locally and the highly accurate diagnostic performance of the studied tests for the detection of anti-N.caninum antibodies in cattle from Argentina.Neospora caninum es un parásito protozoo responsable de abortos y pérdidas económicas en bovinos. La realización de un diagnóstico serológico preciso y con resultados comparables obtenidos por diferentes pruebas contribuye al manejo de este problema y a encarar medidas de control. Los objetivos del presente trabajo fueron los siguientes: 1) evaluar en Argentina una prueba de enzimoinmunoensayo in-house con el antígeno nativo de 38 kDa de N. caninum (ELISA-p38) para el diagnóstico de la neosporosis bovina, utilizando un panel de sueros locales bien caracterizados, procedentes de bovinos infectados de modo experimental o naturalmente expuestos; 2) comparar el desempeno˜ y establecer el nivel de concordancia de tres pruebas serológicas para la detección de N. caninum, ELISA-p38, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (IB), con el mismo panel de sueros. Los sueros que resultaron positivos o negativos a IFI e IB fueron considerados como estándares relativos de comparación (ERC) para evaluar la prueba de ELISA-p38. El análisis de característica operativa del receptor determinó que la prueba de ELISA-p38 fue altamente precisa (área bajo la curva= 0,982) usando el punto de corte 0,0905. La sensibilidad y especificidad relativa del ELISA-p38 fue 97,8 % y 99,5 %, respectivamente, con una concordancia casi perfecta (k= 0,97) respecto del ERC. La comparación del desempeno˜ de las pruebas se realizó usando como gold standard el criterio de la decisión de la ‘‘mayoría de las pruebas’’. Las pruebas exhibieron altos valores de sensibilidad y especificidad (mayores del 95 %) y excelente concordancia. Este trabajo describe un buen desempeno˜ de la prueba de ELISA-p38 evaluada localmente y adecuada performance diagnóstica de las pruebas serológicas analizadas para la detección de anticuerpos anti N. caninum en bovinos de Argentina.Facultad de Ciencias Veterinaria

Evaluation of frequency of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Sarcocystis spp. and transmission routes in sheep from Humid Pampa, Argentina

The aim of this study was to describe the frequency of ovine specific antibodies to Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Sarcocystis spp. and to estimate different transmission routes of these infections. One hundred and thirty Texel sheep and their 117 Texel lambs were included in the study. Serum samples were tested for antibodies to T. gondii, N. caninum and Sarcocystis spp. using IFAT. Toxoplasma gondii seroprevalence was 10.00% in sheep (IC95%: 4.80-15.20%), being higher in adult sheep (≥12 year) than in younger sheep (OR 1.30; 95% CI, 1.10-1.50). N. caninum and Sarcocystis spp. seroprevalences were 1.54% (IC95%: 0.00-5.70) and 72.09% (IC95%: 67.70-82.70), respectively, with no association between age and seropositivity in sheep (P>0.05). T. gondii seroprevalence in lambs was 4.27% (IC95%: 0.61-7.94). No association between T. gondii serological status in sheep and their lambs was detected (P = 0.07). Two T. gondii and Sarcocystis spp. seropositive lambs were euthanized and T. gondii and Sarcocystis spp. DNA was detected by PCR in their tissues. In conclusion, the increase of T. gondii seropositivity in relationship with sheep age and the lack of association between sheep-lamb serological status, suggest that horizontal infection is the main transmission route in this flock as reported before. Due to the low number of N. caninum-seropositive ewes no assumptions can be done about the impact of this parasite in this flock. According with previous reports, the main transmission route for Sarcocystis spp. in this species in the present study was horizontal.Facultad de Ciencias Veterinaria

Caracterización biológica y genética de la cepa de <i>Neospora caninum</i> NC-6 Argentina y aplicación práctica de la tipificación de microsatélites en infecciones experimentales en bovinos

La infección por Neospora caninum es una de las principales causas de abortos bovinos. Los objetivos de este trabajo fueron caracterizar genéticamente el aislamiento de N.caninum NC-6 Argentina utilizando el análisis de microsatélites y estudiar su comportamiento biológico mediante inoculaciones experimentales en bovinos preñados, evaluando la respuesta inmune producida y la ocurrencia de transmisión transplacentaria. Se inocularon vacas preñadas de 65 días de gestación, seropositivas y seronegativas a N. caninum, con 5 x 107 taquizoítos de la cepa NC-6 y se sacrificaron a los 108 +/- 2 días de gestación. Se tomaron muestras de sueros periódicamente y se les realizó inmunofluorescencia indirecta para anticuerpos. Se obtuvieron muestras de sangre los días 30 y 37, se estimularon in vitro con N. caninum y se analizó la producción de interferón gamma (IFNγ). Se tomaron muestras de órganos de las madres, las placentas y los fetos que fueron procesadas por histopatología, inmunohistoquímica y PCR para ADN de N. caninum Las muestras positivas se analizaron para la tipificación de los microsatélites. Los animales inoculados incrementaron significativamente los títulos de anticuerpos anti-N.caninum y la producción de IFNγ respecto a los controles. Una vaca seropositiva inoculada abortó, un feto del grupo seronegativo no fue viable y el resto de los fetos fueron viables pero presentaron lesiones. La PCR fue positiva en los fetos de las vacas seronegativas y en 2/3 fetos de las seropositivas. El análisis de microsatélites demostró que el ADN presente tenía un patrón idéntico a NC-6 Argentina. Éste es el primer reporte de una infección experimental de bovinos con la cepa de N. caninum aislada en Argentina. Esta cepa demostró su patogenicidad en animales seropositivos y seronegativos, fue capaz de atravesar la placenta y fue patógena para los fetos, el análisis de microsatélites demostró que la cepa hallada en las placentas era NC-6 Argentina.El presente trabajo ha sido galardonado con el Premio Mayor AAPAVET (Asociación Argentina de Parasitología Veterinaria) - Premio Anual Rioplatense 2010/2011 “Congreso Mundial de Parasitología Veterinaria” en la categoría Mejor trabajo original de investigación.Facultad de Ciencias Veterinaria

An Ibero-American inter-laboratory trial to evaluate serological tests for the detection of anti-<i>Neospora caninum</i> antibodies in cattle

We carried out an inter-laboratory trial to compare the serological tests commonly used for the detection of specific Neospora caninum antibodies in cattle in Ibero- American countries. A total of eight laboratories participated from the following countries: Argentina (n = 4), Brazil (n = 1), Peru (n = 1), Mexico (n = 1), and Spain (n = 1). A blind panel of well-characterized cattle sera (n = 143) and sera representative of the target population (n = 351) was tested by seven in-house indirect fluorescent antibody tests (IFATs 1–7) and three enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs 1–3; two in-house and one commercial). Diagnostic performance of the serological tests was calculated and compared according to the following criteria: (1) the BPre-test information,^ which uses previous epidemiological and serological data; (2) the BMajority of tests,^ which classifies a serumas positive or negative according to the results obtained by most tests evaluated. Unexpectedly, six tests showed either sensitivity (Se) or specificity (Sp) values lower than 90%. In contrast, the best tests in terms of Se, Sp, and area under the ROC curve (AUC) values were IFAT 1 and optimized ELISA 1 and ELISA 2. We evaluated a high number of IFATs, which are the most widely used tests in Ibero-America. The significant discordances observed among the tests regardless of the criteria employed hinder control programs and urge the use of a common test or with similar performances to either the optimized IFAT 1 and ELISAs 1 and 2.Facultad de Ciencias Veterinaria