Leishmania amastigotes as targets for drug screening

Direct drug screening against the mammalian stage of Leishmania has been hampered by cost and the time consuming effort required to accomplish it. The ability to derive transgenic Leishmania expressing reporter genes opened up new possibilities for the development of drug screening tests. Further developments to standardize and gather multiple informations could now be envisionned. We will discuss on such available methodologies that could improve sensitivity, reliability, versatility and the rapidity, of the screen based on intracellular model

Development of monoclonal antibodies against prM of Dengue virus 4

Introduction: dengue is a most common mosquito-borne viral disease in the Americas and tropical countries. Objective: in this work, mice were hyperimmunized   with DENV 4 antigen to produce monoclonal antibodies (mAbs).  Methodology: DENV 4 (GenBank KC806069) was inoculated in C6/36 cell monolayers cultivated in Leibovitz’s 15 medium supplemented with 5% fetal bovine serum and incubated at 28 C. The virus stock was submitted to concentration and ultracentrifugation and stored at -80 C until use (VC DENV 4). Balb/c mice were injected intraperitoneally with 50μg of DENV-4 and successive intraperitoneal injections of 25 μg of VC DENV 4 with Freund’s incomplete adjuvant were performed. The spleen cells were fused to SP2/0 myeloma cells with PEG 1540 and distributed in 96-well microplates with Iscove’s modified medium with Hipoxantina–Aminopterina–Timidina. Hybridoma screening by indirect ELISA showed positive results for six mAbs, and their characterization was performed by Western blotting and Indirect Immunofluorescence (IFI) techniques. Results: the six mAbs showed strong recognition of prM (24/29 kDa), and minor reaction to E protein (66 kDa), E/E protein dimer (105 kDa), and NS1 (49 kDa) protein in two mAbs. The use of mAbs anti-prM as a diagnostic tool using IFI has been demonstrated to detect DENV-4 antigen in infected cells or tissues. Conclusion: DENV 4 generate mAbs with strong reactivity to prM with potential use to confirm the presence of DENV 4 antigen in tissues or infected cells

Seroepidemiological survey of canine visceral leishmaniasis in a continental island of northeast Brazil

Introdução: Leishmaniose Visceral (LV) é uma doença endêmica em municípios vizinhos à Ilha de Maré, situada na plataforma continental do município de Salvador, Bahia, Brasil. Entretanto, casos de LV não tem sido notificados nesta Ilha. Objetivo: foi investigar a soroprevalência e sinais clínicos de Leishmaniose Visceral Canina (LVC) e identificar a população de flebótomos presentes no povoado de Botelho, Ilha de Maré. Metodologia: Soro de cães locais foram testados para IgG anti-Leishmania por imunoensaios (teste rápido TR DPP™ e Elisa Indireto) e uma investigação entomológica foi conduzida. Resultados: 106 amostras foram testadas, sendo que sete (6,6%) foram positivas usando o teste rápido. As amostras positivas foram encaminhadas ao Laboratório Central da Bahia para a confirmação, entretanto, essas amostras apresentaram resultado negativo no ELISA indireto. Foi identificada a presença de nove exemplares da espécie Pressatia choti, subfamília Phlebotominae, espécie frequentemente encontrada em áreas de transmissão de leishmaniose cutânea no Brasil. Conclusão: Apesar deste trabalho não ter identificado a presença de LVC na Ilha de Maré, novos inquéritos sorológicos e analises entomológicas em uma maior área da ilha de Maré serão necessários para a manutenção de uma vigilância epidemiológico na região insular em destaque

Considerações sobre pulgas (Siphonaptera) da raposa Cerdocyon thous (Canidae) da área endêmica de leishmaniose visceral de Jacobina, Bahia, Brasil

No período de julho a setembro de 1998 foram coletadas 152 pulgas em 18 exemplares da raposa Cerdocyon thous capturados na área endêmica de leishmaniose visceral de Jacobina, Estado da Bahia. As pulgas foram identificadas como: 136 Rhopalopsyllus lutzi lutzi, 11 Pulex irritans, 2 Ctenocephalides canis, 1 Ctenocephalides felis felis e 2 Xenopsylla cheopis

Considerações sobre pulgas (Siphonaptera) da raposa Cerdocyon thous (Canidae) da área endêmica de leishmaniose visceral de Jacobina, Bahia, Brasil

No período de julho a setembro de 1998 foram coletadas 152 pulgas em 18 exemplares da raposa Cerdocyon thous capturados na área endêmica de leishmaniose visceral de Jacobina, Estado da Bahia. As pulgas foram identificadas como: 136 Rhopalopsyllus lutzi lutzi, 11 Pulex irritans, 2 Ctenocephalides canis, 1 Ctenocephalides felis felis e 2 Xenopsylla cheopis

Proof of interaction between Leishmania SIR2RP1 deacetylase and chaperone HSP83

The cytoplasmic Leishmania silent information regulator 2 (SIR2)RP1 protein is essential for parasite growth and survival and constitutes an attractive therapeutic target. Little information is available on putative substrate(s) and/or partner(s) that could shed light on the pathways in which this enzyme plays a role. We carried out co-immunoprecipitation experiments on the soluble fractions of wild-type and parasites overexpressing LmSIR2RP1 and found that the essential chaperone heat shock protein (HSP) 83, the Leishmania ortholog of the mammalian HSP90, constantly co-immunoprecipitated with LmSIR2RP1. We found that Leishmania HSP83 is among the lysine acetylated protein, but the intracellular level of SIR2RP1 does not influence the acetylation status of HSP83. Finally, the modified Geldanamycin susceptibility (an inhibitor of HSP83) exhibited by SIR2RP1 mutant parasites support an in vivo relationship between the chaperone activity of HSP83 and LmSIR2RP1. An insight on the nature of the interaction in Leishmania is required to understand its role in the cell fate control during cytodifferentiation

Proof of interaction between Leishmania SIR2RP1 deacetylase and chaperone HSP83.

International audienc

Targeted disruption of cytosolic SIR2 deacetylase discloses its essential role in Leishmania survival and proliferation

International audienc

Estudo experimental sobre a ação de larvicidas em populações de Aedes aegypti do município de Itabuna, Bahia, em condições simuladas de campo

Resumo Objetivo: avaliar, em condições simuladas de campo, a eficácia do pyriproxyfen (hormônio juvenil), do novaluron (inibidor de quitina) e do spinosad (biolarvicida) no controle do Aedes aegypti. Métodos: exposição periódica de larvas de Ae. aeypti obtidas em Itabuna a recipientes tratados com os larvicidas, e comparação do efeito residual do tratamento com cepa Rockfeller. Resultados: o efeito inibitório na emergência de adultos, após 60 dias, foi de 89,5% spinosad, 96,5% novaluron e 75,4% pyriproxifen para larvas de Itabuna, não havendo diferença estatística (p=0,412) entre os tratamentos; spinosad e novaluron apresentaram maior percentual de mortalidade na fase larval, 98,8% e 97,9% respectivamente; pyriproxifen apresentou mortalidade maior na fase pupal, 95,1%. Conclusão: os três larvicidas apresentaram controle semelhante; no entanto, o pyriproxifen pode deixar a falsa impressão de positividade dos criadouros, por agir em fase pupal, comprometendo os indicadores de infestação que são parâmetros estratégicos para as ações de controle