A heterogeneidade da ataxia espino-cerebelar tipo 2 caracterização clínica e genes modificadores

A ataxia espino-cerebelar tipo 2 (SCA2) é causada por uma sequência repetitiva CAG expandida no gene ATXN2. Caracteriza-se por ataxia cerebelar de início na vida adulta e de gradual instalação. Sacadas oculares lentas e neuropatia periférica são achados associados quase universais, enquanto distúrbios cognitivos, amiotrofia, distonia e parkinsonismo podem eventualmente acontecer, entre outras manifestações. O fator causal mais estudado para a variação de apresentação clínica tem sido o tamanho da sequência repetitiva CAG expandida (CAGexp). O CAGexp explica 25 a 57% da variabilidade da idade de início dos sintomas. Já sua associação com a velocidade de progressão dos déficits atáxicos é matéria controversa na literatura. Entre os fatores que podem influenciar na variabilidade do fenótipo, listamos a própria idade de início, a duração da doença e possíveis genes modificadores. Existem instrumentos validados para a avaliação das manifestações atáxicas na SCA2, mas não há um instrumento que forneça uma boa avaliação dos déficits neurológicos gerais da SCA2. Há poucos estudos prospectivos longitudinais e os mesmos têm medido a história natural da SCA2 predominantemente através da progressão da ataxia. Estes estudos priorizaram uma única modelagem estatística, na qual as variações observadas durante a duração do próprio estudo são medidas, e o efeito da duração da doença, em si, sobre a deterioração neurológica, tem um papel menos detectável. Objetivos: Geral: Descrever a variação das manifestações neurológicas da SCA2 tanto entre diferentes sujeitos afetados como no tempo e investigar se genes candidatos interferem na determinação dessa variabilidade. Específicos 1) Validar uma escala neurológica mais abrangente- a Neurological Examination Score for the assessment of Spinocerebellar Ataxias (NESSCA) - para seu uso na SCA2. 2). Descrever a ocorrência dos sub-fenótipos: parkinsonismo, deterioração cognitiva, amiotrofia e distonia na SCA2. 3) Avaliar e identificar um perfil de alterações cognitivas nos pacientes portadores de SCA2 através das escalas Mini Mental State Examination (MMSE) e Montreal Cognitive Assessment (MOCA). 4) Descrever as velocidades de progressão dos aspectos neurológicos gerais e cognitivos entre duas observações longitudinais, através das escalas Scale for Assessment and Rating of Ataxia (SARA), NESSCA, SCA Functional-Index (SCAFI) e Composite-Cerebellar- Functional-Score (CCFS) e das escalas cognitivas MMSE e MOCA. 5) Correlacionar as variações fenotípicas descritas nos objetivos 2, 3 e 4 com fatores de risco já aceitos, como o CAGexp, a idade de início e a duração da doença, e também com os genes candidatos a modificadores CACNA1A, ATXN1, ATXN3, ATXN7 e RAI1, avaliados através do tamanho de suas sequências repetitivas CAG normais, e o gene mitocondrial ND3, avaliado através do polimorfismo A10398G. Material e Métodos: Este projeto consistiu em dois estudos aninhados: Um estudo transversal, no qual casos SCA2 sintomáticos foram estudados. Os resultados clínicos obtidos no baseline foram correlacionados com as variáveis independentes em estudo. Um estudo longitudinal, no qual a observação da mesma coorte SCA2 em 12 meses de estudo permitiu sua descrição prospectiva. Foram convidados todos os indivíduos sintomáticos com diagnóstico molecular de SCA2 dos ambulatórios de neurogenética do HCPA, em Porto Alegre, dos ambulatórios da UNIFESP, em São Paulo, e do Hospital Gaffrée- Guinle, no Rio de Janeiro. Após darem seu consentimento, foram coletados dados como idade, idade de início do primeiro sintoma e idade de início da marcha atáxica. Depois foram avaliados através das escalas motoras SARA, NESSCA, SCAFI e CCFS; escalas cognitivas MMSE e MOCA; e escalas de humor Beck Depression Inventory (BDI). Extração de DNA e ulterior análise dos genes de interesse foi realizada em todos os sujeitos da pesquisa. Os sujeitos foram reavaliados em 12 meses para repetição das escalas. Além destas, a impressão clínica global do paciente (PGI) quanto ao seu estado neurológico foi também obtida. As propriedades psicométricas da NESSCA foram averiguadas no contexto da SCA2, uma vez que suas qualidades intrínsecas (sua confiabilidade) já estavam bem estabelecidas. Sua validade externa para a SCA2 foi medida, comparada com a duração da doença e com escalas de gravidade já validadas (SARA, SCAFI e CCFS). Sua responsividade à mudança foi medida em 12 meses e foi comparada à responsividade à mudança das escalas SARA, SCAFI e CCFS. Na avaliação baseline, os pacientes foram classificados pela presença dos sub-fenótipos: parkinsonismo, deterioração cognitiva, amiotrofia e distonia. Para detectarmos a existência de fatores de risco para estas complicações, os subgrupos com e sem cada um destes fenótipos foram comparados em relação à distribuição das variáveis independentes: idade, sexo, idade de início dos sintomas, duração da doença, o número de repetições CAG nos genes ATXN1, ATXN2, ATXN3, ATXN7, CACNA1A e RAI1 e o polimorfismo mitocondrial A10908G. Finalmente, as taxas de progressão da NESSCA, da SARA, da SCAFI, da CCFS, do MMSE e da MOCA foram medidas ao longo do tempo. Para se determinar se a progressão seria linear ou não, duas maneiras de medir a progressão foram realizadas: a variação durante a duração do estudo e a variação em um modelo que incluiu a duração total dos sintomas deste o seu início. Finalmente, o efeito dos fatores de risco em estudo sobre as taxas de progressão foi medido através de estratificações do grupo de sujeitos quanto à idade, sexo, idade de início dos sintomas e duração da doença, o número de repetições CAG nos genes ATXN1, ATXN2, ATXN3, ATXN7, CACNA1A, RAI1 e polimorfismo mitocondrial 10908 A/G. Resultados: 49 pacientes foram avaliados. A NESSCA correlacionou-se com outros parâmetros clínicos e escalas de gravidade como duração da doença (r=0,55, p<0,0001), tamanho de CAG expandido (rho=0,32, p=0,003) e SARA (r=0,63 p<0,0001). A duração da doença e o CAGexp determinaram 44% da variação da NESSCA. A idade de início da ataxia, CAGexp e duração da doença determinaram 53% da SARA. Apesar de válida para uso na SCA2, não demonstrou boa responsividade a mudança em 1 ano - delta NESSCA, de acordo com Patient Global Impression of Change (AUC 0.63 CI95%).Em relação aos sub-fenótipos, 33% dos pacientes apresentaram parkinsonismo, 16% apresentaram distonia e ambos foram associados a maiores CAGexp (p<0,005 e 0,006). Amiotrofia ocorreu em 14% dos indivíduos e não se correlacionou com nenhuma variável clínica estudada. Declínio cognitivo foi detectado em 24% da amostra através do MMSE e esteve associado ao polimorfismo mitocondrial 10398G, sendo que 83% dos pacientes com declínio cognitivo e 34% dos pacientes sem declínio cognitivo apresentavam o alelo G (p=0,003). Quarenta e nove pacientes foram avaliados no baseline e destes, 38 foram reavaliados em 1 ano. Em média (DP) os modelos de duração do estudo e duração da doença corresponderam a 13 meses (2,16) e 14 anos (6,66) de vida, respectivamente. A SARA demonstrou progressão de 1.75 (CI 95%: 0. A NESSCA progrediu 1.45 (CI 95%: 0.74-2.16) versus 0.41 (95% CI 0.24 a 0.59) pontos/ano nos modelos acima. Para entender esta discrepância, as taxas de progressão na duração do estudo foram sobrepostas à duração da doença, podendo ser observada uma aceleração após 10 anos de evolução. Os escores da SARA demonstraram progressão de 0.35 antes e 2.45 pontos/ano após 10 anos de doença (p = 0.013). O perfil cognitivo dos 49 pacientes foi avaliado através do MMSE e MOCA. Embora 76% dos pacientes apresentassem escores dentro da normalidade no MMSE, 85% dos pacientes apresentavam escores alterados no MOCA, com déficits nas funções executivas, memória verbal, linguagem e funções visuo-espaciais. O declínio cognitivo correlacionou-se com a gravidade nas escalas motoras (p<0,02). Os escores no MOCA correlacionaram-se com a duração da doença (p=0,023). Após 1 ano, apesar da progressão nos escores nas escalas motoras, não houve progressão significativa nos escores cognitivos. Conclusões: NESSCA foi validada para utilização na SCA2, no entanto por não apresentar boa responsividade à mudança em um ano, deve ser utilizada como desfecho secundário em futuros estudos clínicos. O estudo de sub-fenótipos parece ser uma estratégia válida para estudo de fatores modificadores de doença. Entre os resultados, algumas associações como distonia e maiores CAGexp corroboram estudos anteriores, enquanto a associação de parkinsonismo e maiores CAGexp discordou de outros dados encontrados na literatura, indicando que devam ser melhor avaliadas em futuros estudos. A associação observada entre declínio cognitivo e o alelo G do complexo mitocondrial 10398 é inédita e deverá ser confirmada em estudos prospectivos posteriores. A progressão da SCA2 medida pela SARA e NESSCA não é constante durante a evolução da doença, sugerindo-se que as fases mais precoces apresentem evolução mais lenta. Estas diferenças devem ser levadas em consideração no planejamento de futuros estudos prospectivos observacionais ou de intervenção, especialmente no cálculo do tamanho amostral, critérios de inclusão e duração do estudo. Nosso estudo sugere que o MOCA é útil na avaliação das funções cognitivas em pacientes com SCA2 com avaliação abrangente e mais complexa de funções executivas, memória verbal, linguagem e funções visuo-espaciais, demonstrando taxas de disfunção cognitiva em 85% dos pacientes SCA2. Embora haja correlação entre os escores cognitivos e motores, o estudo mostra uma clara dissociação entre a progressão dos declínios motores e cognitivos, sugerindo que estes “progridam” em padrões diferentes de comprometimento.Spinocerebellar ataxia type 2 (SCA2) is an autosomal dominant cerebellar ataxia caused by the abnormal expansion of a CAG repeat, characterized by a progressive cerebellar syndrome starting in adulthood, associated with saccadic slowness. SCA2 presents a large clinical variability besides ataxia like dystonia, parkinsonism, amyotrophy, cognitive decline. Factors that could modify the SCA2 phenotype are size of CAG expansion, age of onset, duration of disease and possible modifier genes. While validated ataxia scales are available, comprehensive instruments to measure all SCA2 neurological manifestations are required. Although progression of SCA2 has been studied, only the natural history of ataxia is well known, as measured during the study duration. Objective: Describe the clinical findings of a Brazilian cohort of SCA2 patients, stratify them according the presence of sub-phenotypes: cognitive deterioration, amiotrophy, parkinsonism and dystonia; and test possible association between the CAG-containing genes ATXN1, ATXN2, ATXN3, CACNA1A, ATXN7, RAI1 and the A10398G mitochondrial polymorphism with these sub-phenotypes. Validate the Neurological Examination Score for the assessment of Spinocerebellar Ataxias (NESSCA) to be used in SCA2 and to compare its responsiveness to those obtained with other instruments such as SARA, SCAFI, and CCFS scales. Evaluate cognitive dysfunction in Spinocerebellar Ataxia type 2 (SCA2) using Mini Mental Examination (MMSE) and Montreal Cognition Assesment (MOCA), describing the main domains affected and study them prospectively, looking for correlation between cognitive dysfunction and clinical variables and potentially modifying genes. Describe the progression rate of ataxia, by the Scale for the Assessment and Rating of Ataxia (SARA), as well as the progression rate of the overall neurological picture, by the Neurological Examination Score for Spinocerebellar Ataxias (NESSCA), and not only during the study modifiers duration but also in a disease duration model. Comparisons between these models might allow us to explore whether progression is linear during the disease duration in SCA2. Material e Methods: Subjects with molecular diagnosis of SCA2 selected from Neurogenetic Network were evaluated by motor scales: SARA, NESSCA, SCA- Functional Index(SCAF)I, and Composite-Cerebellar-Functional-Score (CCFS); cognitive scales MMSE and MOCA; humor scale: Beck Depression Inventory (BDI), at baseline and 12 months of follow up. Subjects were classified by presence/absence of phenotypes: parkinsonism, dystonia, amyotrophy and cognitive decline. CAG repeats at ATXN1, ATXN2, ATXN3, CACNA1A, ATXN7 and RAI1, and polymorphism A10398G at mtDNA were established. Correlations were done with age at onset, disease duration, CAGexp size and between scales and possible modifying genes. Responsiveness of NESSCA was estimated by comparing deltas of stable to worse patients after 12 months, according to Patient Global Impression of change, and the area under the curve (AUC) of the Receiver Operating Characteristics curve of scores range. The progression rate of ataxia was measured by the SARA as well as the progression rate of the overall neurological picture, by the NESSCA, during the study duration and also in a disease duration model. Comparisons between these models might allow us to explore whether progression is linear during the disease. Results: 49 patients were evaluated. NESSCA correlated with other clinical parameters and severity scales such as disease duration (r = 0.55, p <0.0001) expanded CAG size (rho = 0.32, p = 0.003) and SARA (r = 0 63, p <0.0001). Disease duration and CAGexp size determined 44% of NESSCA. Age at onset of ataxia, CAGexp, and disease duration determined 53% of SARA. Although valid for use in SCA2, NESSCA did not show good responsiveness to change in 1 year - delta NESSCA, comparing with Patient Global Impression of Change PGI) (AUC 0.63 CI95%).Regarding sub-phenotypes, 33% of patients presented parkinsonism, 16% presented dystonia and both were associated with CAGexp (p <0.005 and 0.006). Amyotrophy was present in 14% of the individuals and did not correlate with any clinical variable studied. Cognitive decline was detected in 24% of subjects according MMSE and was associated with 10398G mitochondrial polymorphism, with 83% of patients with cognitive impairment carrying the G allele, while 34% of patients without cognitive decline had the allele G (p = 0.003).Forty-nine patients were evaluated at baseline and of these, 38 were re-evaluated at 1 year. On average (SD), the study duration and disease duration models corresponded to 13 months (2.16) and 14 years (6.66) of life, respectively. SARA showed a progression of 1.75 (95% CI: 0.92-2.57) versus 0.79 (95% CI 0.45 to 1.14) points / year in study duration model and disease duration model. NESSCA progressed 1.45 (95% CI: 0.74-2.16) versus 0.41 (95% CI 0.24 to 0.59) points / year in the above models. To understand this discrepancy the rates of progression over the duration of the study were superimposed over the duration of the disease, and an acceleration could be observed after 10 years of evolution. SARA scores showed progression of 0.35 before and 2.45 points / year after 10 years of disese (p = 0.013). The cognitive profile of the 49 patients was assessed by MMSE and MOCA. Although 76% of patients had normal MMSE scores, 85% of patients had altered MOCA scores, with impairments in executive, verbal memory, language, and visuospatial functions. Cognitive decline correlated with severity on motor scales (p <0.02). MOCA scores correlated with disease duration (p = 0.023). After 1 year, despite the progression in motor scale scores, there was no significant progression in cognitive scores. Conclusions: NESSCA has been validated for use in SCA2, however because it does not have good response to change in 1 year, we suggest it should be used as a secondary outcome in future studies.The study of sub-phenotypes seemed to be a valid strategy for study disease modifying factors. Among the results, some associations such as dystonia and larger CAGexp corroborated previous studies, while the association of parkinsonism and higher CAGexp has conflicting data in the literature, indicating that it should be better studied in future studies.The observed association between cognitive decline and the G allele of mitochondrial complex 10398 is original. Since this has been seen only once, in our original observation, it should be confirmed in other independent cohort. The progression of SCA2 as measured by SARA and NESSCA is not constant during the course of the disease, suggesting that the earliest stages evolve more slowly. These differences should be taken into account when planning future prospective observational or interventional studies, especially in calculating sample size, inclusion criteria, and study duration. Our study suggests that MOCA is useful in assessing cognitive functions in patients with SCA2 with comprehensive and more complex assessment of executive functions, verbal memory, language, and visuospatial functions, demonstrating cognitive dysfunction rates in 85% of SCA2 patients. Although there is a correlation between cognitive and motor scores our study shows a clear dissociation between the progression of motor and cognitive decline, suggesting that they progress in different patterns of impairment

The progression rate of spinocerebellar ataxia type 2 changes with stage of disease

BACKGROUND: Spinocerebellar ataxia type 2 (SCA2) affects several neurological structures, giving rise to multiple symptoms. However, only the natural history of ataxia is well known, as measured during the study duration. We aimed to describe the progression rate of ataxia, by the Scale for the Assessment and Rating of Ataxia (SARA), as well as the progression rate of the overall neurological picture, by the Neurological Examination Score for Spinocerebellar Ataxias (NESSCA), and not only during the study duration but also in a disease duration model. Comparisons between these models might allow us to explore whether progression is linear during the disease duration in SCA2; and to look for potential modifiers. RESULTS: Eighty-eight evaluations were prospectively done on 49 symptomatic subjects; on average (SD), study duration and disease duration models covered 13 (2.16) months and 14 (6.66) years of individuals' life, respectively. SARA progressed 1.75 (CI 95%: 0.92-2.57) versus 0.79 (95% CI 0.45 to 1.14) points/year in the study duration and disease duration models. NESSCA progressed 1.45 (CI 95%: 0.74-2.16) versus 0.41 (95% CI 0.24 to 0.59) points/year in the same models. In order to explain these discrepancies, the progression rates of the study duration model were plotted against disease duration. Then an acceleration was detected after 10 years of disease duration: SARA scores progressed 0.35 before and 2.45 points/year after this deadline (p = 0.013). Age at onset, mutation severity, and presence of amyotrophy, parkinsonism, dystonic manifestations and cognitive decline at baseline did not influence the rate of disease progression. CONCLUSIONS: NESSCA and SARA progression rates were not constant during disease duration in SCA2: early phases of disease were associated with slower progressions. Modelling of future clinical trials on SCA2 should take this phenomenon into account, since disease duration might impact on inclusion criteria, sample size, and study duration. Our database is available online and accessible to future studies aimed to compare the present data with other cohorts