Brucella abortus-Stimulated Platelets Activate Brain Microvascular Endothelial Cells Increasing Cell Transmigration through the Erk1/2 Pathway

Central nervous system invasion by bacteria of the genus Brucella results in an inflammatory disorder called neurobrucellosis. A common feature associated with this pathology is blood–brain barrier (BBB) activation. However, the underlying mechanisms involved with such BBB activation remain unknown. The aim of this work was to investigate the role of Brucella abortus-stimulated platelets on human brain microvascular endothelial cell (HBMEC) activation. Platelets enhanced HBMEC activation in response to B. abortus infection. Furthermore, supernatants from B. abortus-stimulated platelets also activated brain endothelial cells, inducing increased secretion of IL-6, IL-8, CCL-2 as well as ICAM-1 and CD40 upregulation on HBMEC compared with supernatants from unstimulated platelets. Outer membrane protein 19, a B. abortus lipoprotein, recapitulated B. abortus-mediated activation of HBMECs by platelets. In addition, supernatants from B. abortus-activated platelets promoted transendothelial migration of neutrophils and monocytes. Finally, using a pharmacological inhibitor, we demonstrated that the Erk1/2 pathway is involved in the endothelial activation induced by B. abortus-stimulated platelets and also in transendothelial migration of neutrophils. These results describe a mechanism whereby B. abortus-stimulated platelets induce endothelial cell activation, promoting neutrophils and monocytes to traverse the BBB probably contributing to the inflammatory pathology of neurobrucellosis.Fil: Rodríguez, Ana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Trotta, Aldana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Melnyczajko, Agustina Pilar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Kim, Kwang Sik. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Delpino, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Barrionuevo, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Giambartolomei, Guillermo Hernan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentin

Assessment on different vaccine formulation parameters in the protection against heterologous challenge with FMDV in cattle

Foot-and-mouth disease (FMD) remains one of the major threats to animal health worldwide. Its causative agent, the FMD virus (FMDV), affects cloven-hoofed animals, including farm animals and wildlife species, inflicting severe damage to the international trade and livestock industry. FMDV antigenic variability remains one of the biggest challenges for vaccine-based control strategies. The current study analyzed the host’s adaptive immune responses in cattle immunized with different vaccine protocols and investigated its associations with the clinical outcome after infection with a heterologous strain of FMDV. The results showed that antigenic payload, multivalency, and revaccination may impact on the clinical outcome after heterologous challenge with FMDV. Protection from the experimental infection was related to qualitative traits of the elicited antibodies, such as avidity, IgG isotype composition, and specificity diversity, modulating and reflecting the vaccine-induced maturation of the humoral response. The correlation analyses of the serum avidity obtained per vaccinated individual might suggest that conventional vaccination can induce high-affinity immunoglobulins against conserved epitopes even within different FMDV serotypes. Cross-reaction among strains by these high-affinity antibodies may support further protection against a heterologous infection with FMDV.Instituto de VirologíaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Pega, Juan Franco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

The role of viral particle integrity in the serological assessment of foot-and-mouth disease virus vaccine-induced immunity in swine

The efficacy of foot-and-mouth disease virus (FMDV) inactivated vaccines is mainly dependent on the integrity of the whole (146S) viral particles. If the intact capsids disassemble to 12S subunits, antibodies against internal-not protective epitopes, may be induced. Serological correlates with protection may be hampered if antibodies against internal epitopes are measured. Here we compared the performance of different ELISAs with the virus-neutralization test (VNT) that measures antibodies against exposed epitopes. Sera from pigs immunized with one dose of an expired commercial FMDV vaccine were used. This vaccine contained about 50% of O1/Campos and over 90% of A24/Cruzeiro strains total antigen as whole 146S particles. Specific-total antibodies were measured with the standard liquid-phase blocking ELISA (LPBE). We also developed an indirect ELISA (IE) using sucrose gradient purified 146S particles as capture antigen to titrate total antibodies, IgM, IgG1 and IgG2. A good correlation was found between VNT titers and IgG-ELISAs for A24/Cruzeiro, with the lowest correlation coefficient estimated for IgG2 titers. For O1/Campos, however, the presence of antibodies against epitopes different from those of the whole capsid, elicited by the presence of 12S particles in the vaccine, hampered the correlation between LPBE and VNT, which was improved by using purified O1/Campos 146S-particles for the liquid-phase of the LPBE. Interestingly, 146S particles but not 12S were efficiently bound to the ELISA plates, confirming the efficiency of the IE to detect antibodies against exposed epitopes. Our results indicate that any serological test assessing total antibodies or IgG1 against epitopes exposed in intact 146S-particles correlate with the levels of serum neutralizing antibodies in vaccinated pigs, and might potentially replace the VNT, upon validation. We recommend that antigen used for serological assays aimed to measure protective antibodies against FMDV should be controlled to ensure the preservation of 146S viral particles.Fil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Turco, Cecilia Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Bessone, Fernando Anibal. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Franco, Raúl. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Pérez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Sala, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Gastronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Virología e Innovaciones Tecnológicas; Argentin

Brucella abortus induces TNF-á-dependent astroglial MMP-9 secretion through mitogen-activated protein kinases

Central nervous system (CNS) invasion by bacteria of the genus Brucella results in an inflammatory disorder called neurobrucellosis. We have recently demonstrated that B. abortus infects microglia and astrocytes, eliciting the production of a variety of pro-inflammatory cytokines which contribute to CNS damage. Matrix metalloproteinases (MMP) have been implicated in inflammatory tissue destruction in a range of pathological situations in the CNS. Increased MMP secretion is induced by pro-inflammatory cytokines in a variety of CNS diseases characterized by tissue-destructive pathology.Fil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Scian, Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Est.de la Inmunidad Humoral Prof.r.a.margni;Fil: Garcia Samartino, Clara. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Barrionuevo, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Baldi, Pablo Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Cassataro, Juliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; ArgentinaFil: Delpino, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Giambartolomei, Guillermo Hernan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Rodríguez, Ana María. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martin; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ibañez, Andres Esteban. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Coria, Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; ArgentinaFil: Velasquez, Lis Noelia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. R. A. Margni; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentin

The role of NLRP3 and AIM2 in inflammasome activation during Brucella abortus infection

The innate immune system is essential for the detection and elimination of Bacterial pathogens. Upon inflammasome activation, caspase-1 cleaves pro-IL-1β and pro-IL-18 to their mature forms IL-1β and IL-18, respectively, and the cell undergoes inflammatory death termed pyroptosis. Here, we reviewed recent findings demonstrating that Brucella abortus ligands activate NLRP3 and AIM2 inflammasomes which lead to control of infection. This protective effect is due to the inflammatory response caused by IL-1β and IL-18 rather than cell death. Brucella DNA is sensed by AIM2 and bacteria-induced mitochondrial reactiveoxygen species is detected by NLRP3. However, deregulation of pro-inflammatory cytokine production can lead to immunopathology. Nervous system invasion by bacteria of the genus Brucella results in an inflammatory disorder termedneurobrucellosis. Herein, we discuss the mechanism of caspase-1 activation and IL-1β secretion in glial cells infected with B. abortus.Our results demonstrate that the ASC inflammasome is indispensable for inducing the activation of caspase-1 and secretion of IL-1β upon infection of astrocytes and microglia with Brucella. Moreover, our results demonstrate that secretion of IL-1β by Brucella-infected glial cells depends on NLRP3 and AIM2 and leads to neurobrucellosis. Further, the inhibition of the host cell inflammasome as an immune evasion strategy has been described for bacterial pathogens. We discuss here that the bacterial type IV secretion system VirB is required for inflammasome activation in host cells during infection. Taken together, our results indicate that Brucella is sensed by ASC inflammasomes mainly NLRP3 andAIM2 that collectively orchestrate a robust caspase-1 activation and pro-inflammatory response.Fil: Marin, Fernanda M.. Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas; BrasilFil: Franco, Miriam M. Costa. Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas; BrasilFil: Gomez, Marco Tulio R.. Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas; BrasilFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Giambartolomei, Guillermo Hernan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Oliveira, Sergio C.. Universidade Federal de Minas Gerais. Instituto de Ciências Biológicas; Brasi

Glial cell-elicited activation of brain microvasculature in response to brucella abortus infection requires asc inflammasome-dependent IL-1b production

Blood-brain barrier activation and/or dysfunction are a common feature of human neurobrucellosis, but the underlying pathogenic mechanisms are largely unknown. In this article, we describe an immune mechanism for inflammatory activation of human brain microvascular endothelial cells (HBMEC) in response to infection with Brucella abortus. Infection of HBMEC with B. abortus induced the secretion of IL-6, IL-8, and MCP-1, and the upregulation of CD54 (ICAM-1), consistent with a state of activation. Culture supernatants (CS) from glial cells (astrocytes and microglia) infected with B. abortus also induced activation of HBMEC, but to a greater extent. Although B. abortus-infected glial cells secreted IL-1b and TNF-α, activation of HBMEC was dependent on IL-1b because CS from B. abortus-infected astrocytes and microglia deficient in caspase-1 and apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD failed to induce HBMEC activation. Consistently, treatment of CS with neutralizing anti-IL-1b inhibited HBMEC activation. Both absent in melanoma 2 and Nod-like receptor containing a pyrin domain 3 are partially required for caspase-1 activation and IL-1b secretion, suggesting that multiple apoptosis-associated speck-like protein containing CARD-dependent inflammasomes contribute to IL-1b-induced activation of the brain microvasculature. Inflammasomemediated IL-1b secretion in glial cells depends on TLR2 and MyD88 adapter-like/TIRAP. Finally, neutrophil and monocyte migration across HBMEC monolayers was increased by CS from Brucella-infected glial cells in an IL-1b-dependent fashion, and the infiltration of neutrophils into the brain parenchyma upon intracranial injection of B. abortus was diminished in the absence of Nod-like receptor containing a pyrin domain 3 and absent in melanoma 2. Our results indicate that innate immunity of the CNS set in motion by B. abortus contributes to the activation of the blood-brain barrier in neurobrucellosis and IL-1b mediates this phenomenon.Fil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Costa Franco, Miriam M.. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Rodríguez, Ana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Bellozi, Paula M. Q.. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Ferrari, Carina Cintia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Hospital Italiano. Instituto de Ciencias Básicas y Medicina Experimental. Departamento de Investigación; ArgentinaFil: Farias, Maria Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Dennis, Vida A.. Alabama State University; Estados UnidosFil: Barrionuevo, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: De Oliveira, Antonio C. P.. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Pitossi, Fernando Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Kim, Kwang Sik. Johns Hopkins University School Of Medicine; Estados UnidosFil: Delpino, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; ArgentinaFil: Oliveira, Sergio Costa. Universidade Federal de Minas Gerais; BrasilFil: Giambartolomei, Guillermo Hernan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Hospital de Clínicas General San Martín; Argentin

Systemic antibodies administered by passive immunization prevent generalization of the infection by foot-and-mouth disease virus in cattle after oronasal challenge

The role of passively transferred sera in the protection against aerogenous foot-and-mouth disease (FMD) virus infection in cattle was evaluated using vaccine-induced immune serum preparations obtained at 7 and 26 days post-vaccination (dpv). We showed that circulating antibodies were sufficient to prevent disease generalization after oronasal infection in animals passively transferred with 26-dpv serum but not with the 7-dpv serum. Conversely, conventional FMD vaccination provided clinical protection at 7 dpv, promoting fast and robust antibody responses upon challenge and even though antibody titers were similar to those found in animals passively immunized with 7-dpv serum. These results demonstrate that presence of antigen-specific antibodies is critical to prevent the dissemination of the virus within the animal. Conventional FMD vaccination additionally promoted the deployment of rapid, high titer and isotype-switched antibody responses at systemic and mucosal levels after infection, thus conferring protection even in the presence of low pre-challenge antibody titers.Fil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ayude, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Schammas, Juan. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Borca, Manuel V.. United States Department of Agriculture; Estados UnidosFil: Pérez Filgueira, Daniel Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentin

Glial Cell-Elicited Activation of Brain Microvasculature in Response to Brucella abortus Infection Requires ASC Inflammasome-Dependent IL-1β Production

Blood-brain barrier activation and/or dysfunction are a common feature of human neurobrucellosis, but the underlying pathogenic mechanisms are largely unknown. In this article, we describe an immune mechanism for inflammatory activation of human brain microvascular endothelial cells (HBMEC) in response to infection with Brucella abortus Infection of HBMEC with B. abortus induced the secretion of IL-6, IL-8, and MCP-1, and the upregulation of CD54 (ICAM-1), consistent with a state of activation. Culture supernatants (CS) from glial cells (astrocytes and microglia) infected with B. abortus also induced activation of HBMEC, but to a greater extent. Although B. abortus-infected glial cells secreted IL-1β and TNF-α, activation of HBMEC was dependent on IL-1β because CS from B. abortus-infected astrocytes and microglia deficient in caspase-1 and apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD failed to induce HBMEC activation. Consistently, treatment of CS with neutralizing anti-IL-1β inhibited HBMEC activation. Both absent in melanoma 2 and Nod-like receptor containing a pyrin domain 3 are partially required for caspase-1 activation and IL-1β secretion, suggesting that multiple apoptosis-associated speck-like protein containing CARD-dependent inflammasomes contribute to IL-1β-induced activation of the brain microvasculature. Inflammasome-mediated IL-1β secretion in glial cells depends on TLR2 and MyD88 adapter-like/TIRAP. Finally, neutrophil and monocyte migration across HBMEC monolayers was increased by CS from Brucella-infected glial cells in an IL-1β-dependent fashion, and the infiltration of neutrophils into the brain parenchyma upon intracranial injection of B. abortus was diminished in the absence of Nod-like receptor containing a pyrin domain 3 and absent in melanoma 2. Our results indicate that innate immunity of the CNS set in motion by B. abortus contributes to the activation of the blood-brain barrier in neurobrucellosis and IL-1β mediates this phenomenon.Blood-brain barrier activation and/or dysfunction are a common feature of human neurobrucellosis, but the underlying pathogenic mechanisms are largely unknown. In this article, we describe an immune mechanism for inflammatory activation of human brain microvascular endothelial cells (HBMEC) in response to infection with Brucella abortus Infection of HBMEC with B. abortus induced the secretion of IL-6, IL-8, and MCP-1, and the upregulation of CD54 (ICAM-1), consistent with a state of activation. Culture supernatants (CS) from glial cells (astrocytes and microglia) infected with B. abortus also induced activation of HBMEC, but to a greater extent. Although B. abortus-infected glial cells secreted IL-1β and TNF-α, activation of HBMEC was dependent on IL-1β because CS from B. abortus-infected astrocytes and microglia deficient in caspase-1 and apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD failed to induce HBMEC activation. Consistently, treatment of CS with neutralizing anti-IL-1β inhibited HBMEC activation. Both absent in melanoma 2 and Nod-like receptor containing a pyrin domain 3 are partially required for caspase-1 activation and IL-1β secretion, suggesting that multiple apoptosis-associated speck-like protein containing CARD-dependent inflammasomes contribute to IL-1β-induced activation of the brain microvasculature. Inflammasome-mediated IL-1β secretion in glial cells depends on TLR2 and MyD88 adapter-like/TIRAP. Finally, neutrophil and monocyte migration across HBMEC monolayers was increased by CS from Brucella-infected glial cells in an IL-1β-dependent fashion, and the infiltration of neutrophils into the brain parenchyma upon intracranial injection of B. abortus was diminished in the absence of Nod-like receptor containing a pyrin domain 3 and absent in melanoma 2. Our results indicate that innate immunity of the CNS set in motion by B. abortus contributes to the activation of the blood-brain barrier in neurobrucellosis and IL-1β mediates this phenomenon.Fil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Franco, Miriam M. Costa. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Franco, Miriam M. Costa. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Rodríguez, Ana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Rodríguez, Ana María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Bellozi, Paula M. Q.. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Bellozi, Paula M. Q.. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Ferrari, Carina Cintia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Ferrari, Carina Cintia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Farias, Maria Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Farias, Maria Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Dennis, Vida A.. Alabama State University; Estados UnidosFil: Dennis, Vida A.. Alabama State University; Estados UnidosFil: Barrionuevo, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Barrionuevo, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Oliveira, Antonio C. P. de. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Oliveira, Antonio C. P. de. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Pitossi, Fernando Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Pitossi, Fernando Juan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Kim, Kwang Sik. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Kim, Kwang Sik. University Johns Hopkins; Estados UnidosFil: Delpino, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Delpino, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Oliveira, Sergio C.. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Oliveira, Sergio C.. Universidade Federal do Minas Gerais; BrasilFil: Giambartolomei, Guillermo Hernan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; ArgentinaFil: Giambartolomei, Guillermo Hernan. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Inmunología, Genética y Metabolismo; Argentin