AVALIAÇÃO DOS NÍVEIS DA CITOCINA PRÓ-INFLAMATÓRIA FATOR DE NECROSE TUMORAL-α EM PACIENTES COM DIABETES TIPO 2 E SUA RELAÇÃO COM VARIAÇÕES GENÉTICAS DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES E OBESIDADE

Introdução: Diabetes tipo 2 (DM2) é um distúrbio multifatorial caracterizado pelo aumento dos níveis de radicais livres. Tanto o estresse oxidativo quanto a obesidade contribuem para um estado inflamatório da doença, principalmente pelo aumento da citocina TNF-α. Sabendo-se que a genética individual pode contribuir para o estresse oxidativo, o estudo avaliou o impacto das variações genéticas de enzimas antioxidantes C262T no gene CAT e polimorfismos nulos dos genes GSTM1 e GSTT1 nos níveis de TNF-α, assim como, avaliou se as variantes genéticas atuariam sinergicamente com a obesidade aumentando os níveis da citocina em diabéticos da Grande Vitória/ES, Brasil. Métodos: O polimorfismo no gene CAT foi avaliado pela técnica PCR/RFLP e nos genes GSTM1 e GSTT1 por PCR multiplex, em 56 pacientes, sendo 28 obesos e 28 não obesos. Níveis de TNF-α foram medidos pela técnica de ELISA sanduíche. Resultados: Frequências das variantes nulas de GSTM1 e GSTT1 foram 44,6% e 17,9%, respectivamente. As frequências genotípicas C262T-CAT foram 73,2%, 25% e 1,8% para homozigoto normal, heterozigoto e homozigoto polimórfico, respectivamente. Não houve associação entre genótipos polimórficos e aumento dos níveis de TNF-α, assim como, não foi demonstrado aumento significante da citocina quando avaliado o sinergismo entre obesidade e genética individual do paciente. Conclusão: Níveis de TNF-α não se elevam em diabéticos tipo 2 na presença dos polimorfismos nos genes CAT, GSTM1 e GSTT1, e a obesidade não atua no aumento dessa citocina na população estudada, separadamente ou em conjunto com a genética individual de variantes nos genes CAT, GSTM1 e GSTT1

Prevalências das mutações 35delG/GJB2 e del (GJB6-D13S1830) em portadores de surdez não-sindrômica na população do Espírito Santo - Brasil Prevalence of 35delG/GJB2 and del (GJB6-D13S1830) mutations in patients with non-syndromic deafness from a population of Espírito Santo - Brazil

Mutações no gene GJB2 constituem a principal causa de surdez genética de herança autossômica recessiva, sendo a mutação 35delG a mais comum em muitos grupos étnicos. Além da mutação 35delG em homozigose, a mutação também é encontrada em heterozigose composta, associada com outras mutações nos genes GJB2 ou GJB6. OBJETIVOS: Determinar a prevalência das mutações 35delG/GJB2 e del (GJB6-D13S1830) em portadores de deficiência auditiva neurossensorial, residentes no estado do Espírito Santo (Brasil). MATERIAL E MÉTODOS: Foram avaliados 77 indivíduos não relacionados, com perda auditiva neurossensorial de moderada a profunda. A mutação 35delG foi estudada através da técnica de PCR/RFLP e a mutação del (GJB6-D13S1830) foi rastreada por meio da técnica de PCR multiplex. RESULTADOS: 88,3% apresentaram genótipo normal para as mutações estudadas, 1,3% foram heterozigotos compostos, 3,9% homozigotos para a mutação 35delG, 6,5% heterozigotos para 35delG/GJB2. A frequência do alelo 35delG/GJB2 e do alelo del (D13S1830/GJB6) na amostra foi de 7,8% e 0,65%, respectivamente. CONCLUSÃO: Os dados obtidos confirmaram a existência das mutações estudadas em casos de perda auditiva neurossensorial na população do Espírito Santo/Brasil. Esses achados reforçam a importância do diagnóstico genético, que pode propiciar um tratamento precoce para crianças e aconselhamento genético para as famílias dos afetados.Mutations in GJB2 gene are the leading cause of deafness in autosomal recessive inheritance, and the 35delG mutation is the most common in many ethnic groups. Besides the 35delG mutation in homozygosis, the mutation is also found in compound heterozygosis, coupled with other mutations in genes GJB2 and GJB6. AIM: To determine the prevalence of 35delG/GJB2 and del (GJB6-D13S1830) mutations in patients with sensorineural hearing impairment in residents from the Espirito Santo state, Brazil. MATERIALS AND METHODS: 77 unrelated individuals with moderate to profound sensorineural hearing loss were evaluated. The 35delG mutation was studied by PCR / RFLP; and the del (GJB6-D13S1830) mutation was screened by the technique of multiplex PCR. RESULTS: 88.3% had normal genotype for the studied mutations, 1.3% were compound heterozygotes, 3.9% homozygotic for the 35delG mutation, 6.5% heterozygotic for 35delG/GJB2. The frequency of 35delG/GJB2 and del (D13S1830/GJB6) alleles in the sample was 7.8% and 0.65%, respectively. CONCLUSION: The data confirmed the existence of the mutations studied in cases of sensorineural hearing loss in a population from Espírito Santo / Brazil. These findings reinforce the importance of genetic diagnosis, which can provide early treatment for children and genetic counseling for the affected families

AVALIAÇÃO DOS NÍVEIS DA CITOCINA PRÓ-INFLAMATÓRIA FATOR DE NECROSE TUMORAL-α EM PACIENTES COM DIABETES TIPO 2 E SUA RELAÇÃO COM VARIAÇÕES GENÉTICAS DE ENZIMAS ANTIOXIDANTES E OBESIDADE

Introdução: Diabetes tipo 2 (DM2) é um distúrbio multifatorial caracterizado pelo aumento dos níveis de radicais livres. Tanto o estresse oxidativo quanto a obesidade contribuem para um estado inflamatório da doença, principalmente pelo aumento da citocina TNF-α. Sabendo-se que a genética individual pode contribuir para o estresse oxidativo, o estudo avaliou o impacto das variações genéticas de enzimas antioxidantes C262T no gene CAT e polimorfismos nulos dos genes GSTM1 e GSTT1 nos níveis de TNF-α, assim como, avaliou se as variantes genéticas atuariam sinergicamente com a obesidade aumentando os níveis da citocina em diabéticos da Grande Vitória/ES, Brasil. Métodos: O polimorfismo no gene CAT foi avaliado pela técnica PCR/RFLP e nos genes GSTM1 e GSTT1 por PCR multiplex, em 56 pacientes, sendo 28 obesos e 28 não obesos. Níveis de TNF-α foram medidos pela técnica de ELISA sanduíche. Resultados: Frequências das variantes nulas de GSTM1 e GSTT1 foram 44,6% e 17,9%, respectivamente. As frequências genotípicas C262T-CAT foram 73,2%, 25% e 1,8% para homozigoto normal, heterozigoto e homozigoto polimórfico, respectivamente. Não houve associação entre genótipos polimórficos e aumento dos níveis de TNF-α, assim como, não foi demonstrado aumento significante da citocina quando avaliado o sinergismo entre obesidade e genética individual do paciente. Conclusão: Níveis de TNF-α não se elevam em diabéticos tipo 2 na presença dos polimorfismos nos genes CAT, GSTM1 e GSTT1, e a obesidade não atua no aumento dessa citocina na população estudada, separadamente ou em conjunto com a genética individual de variantes nos genes CAT, GSTM1 e GSTT1

Polymorphisms in methylenetetrahydrofolate reductase and cystathionine beta-synthase in oral cancer - a case-control study in southeastern Brazilians

ABSTRACT INTRODUCTION: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is a serious public health problem, due to its high mortality rate and worldwide rising incidence. OSCC susceptibility is mediated by interactions between genetic and environmental factors. Studies suggest that genetic variants encoding enzymes involved in folate metabolism may modulate OSCC risk by altering DNA synthesis/repair and methylation process. OBJECTIVE: The goals of this study were to evaluate the association of three genotypic polymorphism (MTHFR C677T, MTHFR A1298C and CBS 844ins68) and oral cancer risk in southeastern Brazilians and evaluate the interactions between polymorphisms and clinical histopathological parameters. METHODS: This case-control study included 101 cases and 102 controls in the state of Espírito Santo, Brazil. MTHFR genotyping was done by PCR-RFLP (polymerase chain reaction - restriction fragment length polymorphism) and CBS genotyping by PCR (polymerase chain reaction) analysis. RESULTS: MTHFR C677T polymorphism was associated with lymph node involvement. Genotype CT + TT acted as a protective factor. MTHFR A1298C AC + CC genotype was associated with tumor differentiation, and possibly with a better prognosis. In risk analysis, no correlation was observed between genotypes and OSCC. CONCLUSION: We concluded that MTHFR C677T, MTHFR A1298C and CBS 844ins68 polymorphisms were not associated with OSCC risk in southeastern Brazilians; however, we suggest a prognosis effect associated with MTHFR C677T and A1298C polymorphisms in OSCC

Influência de polimorfismos nos genes antioxidantes GSTM1, GSTT1 e GSTP1 no desenvolvimento de complicações oftalmológicas em diabéticos tipo 2

Introdução: A Diabetes tipo 2 (DM2) é uma desordem metabólica ocasionada pela disfunção das células beta pancreáticas que interferem na produção de insulina e/ou pela resistência dos órgãos alvos a esse hormônio. Níveis elevados de radicais livres em conjunto com declínio das defesas antioxidantes, presente na DM2, podem ocasionar danos a organelas celulares promovendo complicações da doença. As glutationas S- transferases (GSTs) são as principais enzimas antioxidantes que participam da defesa celular contra o estresse oxidativo e polimorfismos nos genes que codificam essas enzimas podem acarretar no surgimento de complicações oftalmológicas em diabéticos. Este trabalho avaliou a influência dos polimorfismos nos genes GSTs no desenvolvimento de doenças como a catarata e o glaucoma em pacientes com DM2 na Grande Vitória/ES. Metodologia: Os polimorfismos dos genes GSTM1 e GSTT1 foram investigados através da técnica de PCR multiplex. Para o gene GSTP1 utilizou-se a técnica PCR-RFLP. A análise estatística foi realizada através do teste exato de Fisher ou o teste do qui-quadrado com P-valor <0.05.  Resultados: Não fora encontrada relação entre os polimorfismos nos genes GSTM1, GSTT1 e GSTP1 e o surgimento de doenças como glaucoma e catarata em pacientes com DM2. Conclusão: Nossos dados sugerem que os polimorfismos nulos nos genes GSTM1 e GSTT1 e o polimorfismo Ile105Val no gene GSTP1 não estão associados com a suscetibilidade individual para o desenvolvimento de complicações oftalmológicas em pacientes com DM2

Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers. extracts: Screening by examining aedicidal action under laboratory and field conditions along with its antioxidant, antileishmanial, and antimicrobial activities.

An increase in the incidence of arboviral, microbial and parasitic infections, and to disorders related to oxidative stress has encouraged the development of adjuvant therapies based on natural formulations, such as those involving plant extracts. Thus, to expand the repertoire of the available therapeutic options, this study aimed to describe the versatility of Tephrosia toxicaria (Sw.) (Pers., 1807) extracts for the control of arbovirus vectors, as well as their antioxidant, antileishmanial, and antimicrobial potential. Among the aqueous and hydroethanolic extracts obtained, the hydroethanolic extract from roots (RHA) was identified as the most active larvicide extract demonstrating, respectively, the lowest lethal concentration (mg/mL) for 50%, 90% and 99% of Aedes aegypti (L., 1762) and Aedes albopictus (S., 1894) larvae, observed at 24 h (0.33, 0.84 and 1.80; 0.32, 0.70 and 1.32) and 48 h (0.17, 0.51 and 1.22; 0.26, 0.47 and 0.78) post-exposure. Field assays revealed that RHA (0.84 mg/mL) is a potential oviposition deterrent, reducing egg-laying by approximately 90%. RHA (0.1 mg/mL) also exhibited antioxidant activity for the following tests: total antioxidant capacity (286.86 mg AAE/g), iron (87.16%) and copper (25.64%) chelation, and superoxide scavenging (10%). In the cell culture assays, RHA (0.1 mg/mL) promoted regeneration of metabolic activity (92% cell viability) in cells exposed to oxidative stress. Furthermore, RHA displayed weak antileishmanial activity (IC50 = 3.53 mg/mL) against Leishmania amazonensis and not exhibit antimicrobial activity. The extraction favored the concentration of carbohydrates in RHA, in addition to lectins and protease inhibitors, with molecular masses estimated between 10 and 24 kDa. Cytotoxicity and phytotoxicity analyses of RHA suggested its biosecurity. Thus, RHA is a multivalent extract with insecticide and antioxidant properties at low and safe concentrations. However, others studies on its indirect toxic effects are ongoing to ensure the complete safety of RHA

Tephrosia toxicaria (Sw.) Pers. extracts: Screening by examining aedicidal action under laboratory and field conditions along with its antioxidant, antileishmanial, and antimicrobial activities

An increase in the incidence of arboviral, microbial and parasitic infections, and to disorders related to oxidative stress has encouraged the development of adjuvant therapies based on natural formulations, such as those involving plant extracts. Thus, to expand the repertoire of the available therapeutic options, this study aimed to describe the versatility of Tephrosia toxicaria (Sw.) (Pers., 1807) extracts for the control of arbovirus vectors, as well as their antioxidant, antileishmanial, and antimicrobial potential. Among the aqueous and hydroethanolic extracts obtained, the hydroethanolic extract from roots (RHA) was identified as the most active larvicide extract demonstrating, respectively, the lowest lethal concentration (mg/mL) for 50%, 90% and 99% of Aedes aegypti (L., 1762) and Aedes albopictus (S., 1894) larvae, observed at 24 h (0.33, 0.84 and 1.80; 0.32, 0.70 and 1.32) and 48 h (0.17, 0.51 and 1.22; 0.26, 0.47 and 0.78) post-exposure. Field assays revealed that RHA (0.84 mg/mL) is a potential oviposition deterrent, reducing egg-laying by approximately 90%. RHA (0.1 mg/mL) also exhibited antioxidant activity for the following tests: total antioxidant capacity (286.86 mg AAE/g), iron (87.16%) and copper (25.64%) chelation, and superoxide scavenging (10%). In the cell culture assays, RHA (0.1 mg/mL) promoted regeneration of metabolic activity (92% cell viability) in cells exposed to oxidative stress. Furthermore, RHA displayed weak antileishmanial activity (IC50 = 3.53 mg/mL) against Leishmania amazonensis and not exhibit antimicrobial activity. The extraction favored the concentration of carbohydrates in RHA, in addition to lectins and protease inhibitors, with molecular masses estimated between 10 and 24 kDa. Cytotoxicity and phytotoxicity analyses of RHA suggested its biosecurity. Thus, RHA is a multivalent extract with insecticide and antioxidant properties at low and safe concentrations. However, others studies on its indirect toxic effects are ongoing to ensure the complete safety of RHA

Frequency of HPV in oral cavity squamous cell carcinoma

Abstract Background The prevalence of high-risk human papillomavirus (HPV) DNA in cases of oral cavity squamous cell carcinoma (SCC) varies widely. The aim of this study is to investigate the frequency of high-risk HPV DNA in a large Brazilian cohort of patients with oral cavity SCC. Methods Biopsy and resected frozen and formalin-fixed paraffin-embedded specimens of oral cavity SCC were available from 101 patients who were recruited at two Brazilian centres. Stringent measures with respect to case selection and prevention of sample contamination were adopted to ensure reliability of the data. Nested PCR using MY09/MY11 and GP5+/GP6+ as well as PGMY09/11 L1 consensus primers were performed to investigate the presence of HPV DNA in the tumours. HPV-positive cases were subjected to direct sequencing. Shapiro–Wilk and Student t test were used to evaluate data normality and to compare the means, respectively. Qualitative variables were analysed by logistic regression. Results Our results demonstrate that the frequency of high-risk HPV types in oral cavity SCC is very low and is less than 4%. All HPV-positive cases were HPV16. In addition, our results do not show a significant association between the tumour clinical features and the risk factors (tobacco, alcohol and HPV) for oral cavity SCC. Conclusion In the current study, we observed an overlapping pattern of risk factors that are related to tumour development. This, along with a low frequency of high-risk HPV DNA, supports the findings that HPV is not involved in the genesis of oral cavity SCC in Brazilian population