Exposure of predatory and scavenging birds to anticoagulant rodenticides in France: Exploration of data from French surveillance programs

Wild raptors are widely used to assess exposure to different environmental contaminants, including anticoagulant rodenticides (ARs). ARs are used on a global scale for rodent control, and act by disruption of the vitamin K cycle that results in haemorrhage usually accompanied by death within days. Some ARs are highly persistent and bioaccumulative, which can cause significant exposure of non-target species.We characterized AR exposure in a heterogeneous sample of dead raptors collected over 12 years (2008–2019) in south-eastern France. Residue analysis of 156 liver samples through LC-MS/MS revealed that 50% (78/156) were positive for ARs, with 13.5% (21/156) having summed second-generation AR (SGAR) concentrations\u3e100 ng/gww.While SGARs were commonly detected (97.4% of positive samples), first-generation ARs were rarely found (7.7% of positive samples). ARs were more frequently detected and at greater concentration in predators (prevalence: 82.5%) than in scavengers (38.8%). Exposure to multiple ARs was common (64.1% of positive samples).While chlorophacinone exposure decreased over time, an increasing exposure trend was observed for the SGAR brodifacoum, suggesting that public policies may not be efficient at mitigating risk of exposure for non-target species. Haemorrhage was observed in 88 birds, but AR toxicosis was suspected in only 2 of these individuals, and no difference in frequency of haemorrhage was apparent in birds displaying summed SGAR levels above or below 100 ng/g ww. As for other contaminants, 17.2% of liver samples (11/64) exhibited Pb levels compatible with sub-clinical poisoning (\u3e6 μg/g dw), with 6.3% (4/64) above the threshold for severe/lethal poisoning (\u3e30 μg/g dw). Nine individuals with Pb levels \u3e6 μg/g dw also had AR residues, demonstrating exposure to multiple contaminants. Broad toxicological screening for other contaminants was positive for 18 of 126 individuals, with carbofuran and mevinphos exposure being the suspected cause of death of 17 birds. Our findings demonstrate lower but still substantial AR exposure of scavenging birds compared to predatory birds, and also illustrate the complexity of diagnosing AR toxicosis through forensic investigations

Intérêt et exploration des marqueurs cliniques et biologiques de la toxicité primaire et secondaire des rodonticides anticoagulants

Massive use of pesticides is a societal issue. Among pesticides, anticoagulant rodenticides are widely used for pest control. They inhibit vitamin K recycling leading to impairment of the coagulation cascade and lethal bleeding. Emergence of resistance in some rodents led to the development of several generations of molecules. Last generation VKA are bioaccumulative in organisms, leading to toxicity and ecotoxicity issues, with major risk of exposure for non-target fauna. It is therefore necessary to differentiate environmental exposure and true poisoning. How is it possible to better characterize VKA toxicity ? Purpose of this work was to try to solve this question. A critical review of literature about biomarkers potency led to the proposal of a list of criteria to evaluate the relevance of those markers. Those criteria were then used to discuss the relevance of markers tested on the field. Two field studies were performed. First was about primary exposure of milking ewes to a first-generation rodenticide, chlorophacinone. It allowed us to show a non-linear correlation between plasmatic concentrations of chlorophacinone and increase of prothrombin time PT. However, conclusions were limited as no dose-response relationship could be demonstrated between VKA concentrations and PT increase. Furthermore chlorophacinone as a first generation VKA is more readily detectable in plasma than second-generation VKA. Second study was dealing with toxicological surveillance of birds of prey over a 12-year period in France, to assess secondary exposure of those birds to VKA, and test correlation between VKA concentrations found in liver samples and diagnosis of toxicosis, based on the presence of haemorrhages. As previously seen, determination of a toxicity threshold is a complex issue. No significant correlation could be shown, and one of the major conclusions was that a toxicity threshold might not be the best marker of toxicity for VKA rodenticides. Last phase of this work was about exploring through a pilot study the potency of vitamin K as a biomarker of VKA toxicity, using vitamin K1 and menaquinone-4 concentrations in different tissues after lethal exposure to bromadiolone. Conclusions of this small-scaled study were limited but are opening new leads for research, such as the use of ratios of [oxydative vitK]/[quinone vitK], which seem to increase within 24 hours after VKA poisoning. Finally, the initial question of this work was not really solved, but this thesis brings new elements in the determination of relevant markers to characterize VKA toxicity, and on a more general point of view some elements of reflexion on the definition of rodenticide toxicity. One unique marker may not be sufficient to diagnose an intoxication, rather a toolbox of markers. Markers should also be classified according to the type of toxicity to be diagnosed, i.e. acute toxicity and chronic toxicity of VKA.Les rodonticides anticoagulants sont des produits prépondérants dans la lutte contre les rongeurs nuisibles. Leur action sur le recyclage de la vitamine K entraîne des anomalies de la coagulation et une mort différée des suites d’hémorragies. L'émergence de phénomènes de résistance chez certains rongeurs a nécessité le développement de plusieurs générations de molécules, les dernières générations étant particulièrement persistantes et bioaccumulables dans les organismes. Cela entraîne des problématiques de toxicité et d’écotoxicité de ces molécules, avec un risque majeur d’exposition des populations non-cibles. Il convient donc de distinguer exposition environnementale aux rodonticides, et intoxication réelle : ainsi, comment caractériser au mieux la toxicité des AVK ? L’objectif principal de ce travail a été de tenter d’apporter des pistes de réponses à cette question. Une revue critique de la littérature existante sur les différents marqueurs potentiels disponibles a été l’occasion de proposer une liste critères permettant d’évaluer la pertinence de ces marqueurs. Ces critères ont été repris par la suite pour discuter des marqueurs testés dans les études sur le terrain. Deux études sur le terrain ont été menées. La première, sur une exposition primaire de brebis laitières à un AVK de première génération, la chlorophacinone, a permis d’établir une corrélation non linéaire entre les concentrations plasmatiques de cet AVK et son effet sur la cascade de coagulation, mesuré par le temps de Quick (TQ). Cependant, ces conclusions sont limitées par l’absence d’une vraie relation dose-réponse entre les concentrations retrouvées et l’augmentation du TQ, ainsi que par la nature de l’AVK testé, de première génération : les résultats sont difficilement généralisables aux AVK de seconde génération, puisque leur fraction circulante dans le plasma est moindre. La deuxième étude s’est basée sur une veille toxicologique réalisée sur douze ans sur des rapaces collectés dans le quart sud-est de la France, afin d'évaluer l’exposition secondaire de ces oiseaux aux AVK, et de tester la corrélation entre niveaux d’AVK retrouvés dans leur foie et probabilité d’intoxication, évaluée par la présence d’hémorragies. Comme déjà observé dans de précédentes études sur le sujet, l’établissement d’un seuil de toxicité s'est avéré complexe. Aucune corrélation significative n’a pu être démontrée, et une des conclusions majeures de cette étude est que l’établissement d’un seuil de concentration pour évaluer la toxicité des AVK n’est peut-être pas le marqueur d’effet le plus pertinent. Le dernier volet de notre travail a consisté en une exploration préliminaire d’un marqueur potentiel peu investigué i.e. l’évolution des concentrations en deux vitamères de la vitamine K (vitamine K1 et ménaquinone-4 (MK4)), dans des tissus facilement accessibles en post-mortem (foie, poumon et rein), suite à une exposition à une dose létale à un AVK, la bromadiolone. Les conclusions de cette étude pilote, réalisée à petite échelle dans des conditions contrôlées chez le rat, sont limitées mais elles ouvrent des pistes de recherches intéressantes notamment concernant l’utilisation des ratios [forme oxydée]/[forme réduite] pour la vitamine K1 et la MK4, qui semblent augmenter dans un délai de 24h suite à une intoxication à un AVK. Finalement, la question de départ de cette thèse n’a pas été pas réellement élucidée. Pourtant, ce travail apporte des éléments supplémentaires à la réflexion sur le sujet, et de manière plus globale sur la définition à apporter à la toxicité des AVK, relativement complexe. Il semblerait qu’un seul marqueur ne soit pas suffisant pour la caractériser, mais plutôt un ensemble de marqueurs. On pourrait également introduire un nouveau niveau de classification des marqueurs potentiels, en lien avec la nature de la toxicité des AVK investiguée, de deux grands types : la toxicité aiguë des AVK, et leur toxicité chronique, aujourd'hui peu caractérisée

Clinical and biological markers potency to characterize primary and secondary toxicity of anticoagulant rodenticides

Les rodonticides anticoagulants sont des produits prépondérants dans la lutte contre les rongeurs nuisibles. Leur action sur le recyclage de la vitamine K entraîne des anomalies de la coagulation et une mort différée des suites d’hémorragies. L'émergence de phénomènes de résistance chez certains rongeurs a nécessité le développement de plusieurs générations de molécules, les dernières générations étant particulièrement persistantes et bioaccumulables dans les organismes. Cela entraîne des problématiques de toxicité et d’écotoxicité de ces molécules, avec un risque majeur d’exposition des populations non-cibles. Il convient donc de distinguer exposition environnementale aux rodonticides, et intoxication réelle : ainsi, comment caractériser au mieux la toxicité des AVK ? L’objectif principal de ce travail a été de tenter d’apporter des pistes de réponses à cette question. Une revue critique de la littérature existante sur les différents marqueurs potentiels disponibles a été l’occasion de proposer une liste critères permettant d’évaluer la pertinence de ces marqueurs. Ces critères ont été repris par la suite pour discuter des marqueurs testés dans les études sur le terrain. Deux études sur le terrain ont été menées. La première, sur une exposition primaire de brebis laitières à un AVK de première génération, la chlorophacinone, a permis d’établir une corrélation non linéaire entre les concentrations plasmatiques de cet AVK et son effet sur la cascade de coagulation, mesuré par le temps de Quick (TQ). Cependant, ces conclusions sont limitées par l’absence d’une vraie relation dose-réponse entre les concentrations retrouvées et l’augmentation du TQ, ainsi que par la nature de l’AVK testé, de première génération : les résultats sont difficilement généralisables aux AVK de seconde génération, puisque leur fraction circulante dans le plasma est moindre. La deuxième étude s’est basée sur une veille toxicologique réalisée sur douze ans sur des rapaces collectés dans le quart sud-est de la France, afin d'évaluer l’exposition secondaire de ces oiseaux aux AVK, et de tester la corrélation entre niveaux d’AVK retrouvés dans leur foie et probabilité d’intoxication, évaluée par la présence d’hémorragies. Comme déjà observé dans de précédentes études sur le sujet, l’établissement d’un seuil de toxicité s'est avéré complexe. Aucune corrélation significative n’a pu être démontrée, et une des conclusions majeures de cette étude est que l’établissement d’un seuil de concentration pour évaluer la toxicité des AVK n’est peut-être pas le marqueur d’effet le plus pertinent. Le dernier volet de notre travail a consisté en une exploration préliminaire d’un marqueur potentiel peu investigué i.e. l’évolution des concentrations en deux vitamères de la vitamine K (vitamine K1 et ménaquinone-4 (MK4)), dans des tissus facilement accessibles en post-mortem (foie, poumon et rein), suite à une exposition à une dose létale à un AVK, la bromadiolone. Les conclusions de cette étude pilote, réalisée à petite échelle dans des conditions contrôlées chez le rat, sont limitées mais elles ouvrent des pistes de recherches intéressantes notamment concernant l’utilisation des ratios [forme oxydée]/[forme réduite] pour la vitamine K1 et la MK4, qui semblent augmenter dans un délai de 24h suite à une intoxication à un AVK. Finalement, la question de départ de cette thèse n’a pas été pas réellement élucidée. Pourtant, ce travail apporte des éléments supplémentaires à la réflexion sur le sujet, et de manière plus globale sur la définition à apporter à la toxicité des AVK, relativement complexe. Il semblerait qu’un seul marqueur ne soit pas suffisant pour la caractériser, mais plutôt un ensemble de marqueurs. On pourrait également introduire un nouveau niveau de classification des marqueurs potentiels, en lien avec la nature de la toxicité des AVK investiguée, de deux grands types : la toxicité aiguë des AVK, et leur toxicité chronique, aujourd'hui peu caractérisée.Massive use of pesticides is a societal issue. Among pesticides, anticoagulant rodenticides are widely used for pest control. They inhibit vitamin K recycling leading to impairment of the coagulation cascade and lethal bleeding. Emergence of resistance in some rodents led to the development of several generations of molecules. Last generation VKA are bioaccumulative in organisms, leading to toxicity and ecotoxicity issues, with major risk of exposure for non-target fauna. It is therefore necessary to differentiate environmental exposure and true poisoning. How is it possible to better characterize VKA toxicity ? Purpose of this work was to try to solve this question. A critical review of literature about biomarkers potency led to the proposal of a list of criteria to evaluate the relevance of those markers. Those criteria were then used to discuss the relevance of markers tested on the field. Two field studies were performed. First was about primary exposure of milking ewes to a first-generation rodenticide, chlorophacinone. It allowed us to show a non-linear correlation between plasmatic concentrations of chlorophacinone and increase of prothrombin time PT. However, conclusions were limited as no dose-response relationship could be demonstrated between VKA concentrations and PT increase. Furthermore chlorophacinone as a first generation VKA is more readily detectable in plasma than second-generation VKA. Second study was dealing with toxicological surveillance of birds of prey over a 12-year period in France, to assess secondary exposure of those birds to VKA, and test correlation between VKA concentrations found in liver samples and diagnosis of toxicosis, based on the presence of haemorrhages. As previously seen, determination of a toxicity threshold is a complex issue. No significant correlation could be shown, and one of the major conclusions was that a toxicity threshold might not be the best marker of toxicity for VKA rodenticides. Last phase of this work was about exploring through a pilot study the potency of vitamin K as a biomarker of VKA toxicity, using vitamin K1 and menaquinone-4 concentrations in different tissues after lethal exposure to bromadiolone. Conclusions of this small-scaled study were limited but are opening new leads for research, such as the use of ratios of [oxydative vitK]/[quinone vitK], which seem to increase within 24 hours after VKA poisoning. Finally, the initial question of this work was not really solved, but this thesis brings new elements in the determination of relevant markers to characterize VKA toxicity, and on a more general point of view some elements of reflexion on the definition of rodenticide toxicity. One unique marker may not be sufficient to diagnose an intoxication, rather a toolbox of markers. Markers should also be classified according to the type of toxicity to be diagnosed, i.e. acute toxicity and chronic toxicity of VKA

Intérêt et exploration des marqueurs cliniques et biologiques de la toxicité primaire et secondaire des rodonticides anticoagulants

Massive use of pesticides is a societal issue. Among pesticides, anticoagulant rodenticides are widely used for pest control. They inhibit vitamin K recycling leading to impairment of the coagulation cascade and lethal bleeding. Emergence of resistance in some rodents led to the development of several generations of molecules. Last generation VKA are bioaccumulative in organisms, leading to toxicity and ecotoxicity issues, with major risk of exposure for non-target fauna. It is therefore necessary to differentiate environmental exposure and true poisoning. How is it possible to better characterize VKA toxicity ? Purpose of this work was to try to solve this question. A critical review of literature about biomarkers potency led to the proposal of a list of criteria to evaluate the relevance of those markers. Those criteria were then used to discuss the relevance of markers tested on the field. Two field studies were performed. First was about primary exposure of milking ewes to a first-generation rodenticide, chlorophacinone. It allowed us to show a non-linear correlation between plasmatic concentrations of chlorophacinone and increase of prothrombin time PT. However, conclusions were limited as no dose-response relationship could be demonstrated between VKA concentrations and PT increase. Furthermore chlorophacinone as a first generation VKA is more readily detectable in plasma than second-generation VKA. Second study was dealing with toxicological surveillance of birds of prey over a 12-year period in France, to assess secondary exposure of those birds to VKA, and test correlation between VKA concentrations found in liver samples and diagnosis of toxicosis, based on the presence of haemorrhages. As previously seen, determination of a toxicity threshold is a complex issue. No significant correlation could be shown, and one of the major conclusions was that a toxicity threshold might not be the best marker of toxicity for VKA rodenticides. Last phase of this work was about exploring through a pilot study the potency of vitamin K as a biomarker of VKA toxicity, using vitamin K1 and menaquinone-4 concentrations in different tissues after lethal exposure to bromadiolone. Conclusions of this small-scaled study were limited but are opening new leads for research, such as the use of ratios of [oxydative vitK]/[quinone vitK], which seem to increase within 24 hours after VKA poisoning. Finally, the initial question of this work was not really solved, but this thesis brings new elements in the determination of relevant markers to characterize VKA toxicity, and on a more general point of view some elements of reflexion on the definition of rodenticide toxicity. One unique marker may not be sufficient to diagnose an intoxication, rather a toolbox of markers. Markers should also be classified according to the type of toxicity to be diagnosed, i.e. acute toxicity and chronic toxicity of VKA.Les rodonticides anticoagulants sont des produits prépondérants dans la lutte contre les rongeurs nuisibles. Leur action sur le recyclage de la vitamine K entraîne des anomalies de la coagulation et une mort différée des suites d’hémorragies. L'émergence de phénomènes de résistance chez certains rongeurs a nécessité le développement de plusieurs générations de molécules, les dernières générations étant particulièrement persistantes et bioaccumulables dans les organismes. Cela entraîne des problématiques de toxicité et d’écotoxicité de ces molécules, avec un risque majeur d’exposition des populations non-cibles. Il convient donc de distinguer exposition environnementale aux rodonticides, et intoxication réelle : ainsi, comment caractériser au mieux la toxicité des AVK ? L’objectif principal de ce travail a été de tenter d’apporter des pistes de réponses à cette question. Une revue critique de la littérature existante sur les différents marqueurs potentiels disponibles a été l’occasion de proposer une liste critères permettant d’évaluer la pertinence de ces marqueurs. Ces critères ont été repris par la suite pour discuter des marqueurs testés dans les études sur le terrain. Deux études sur le terrain ont été menées. La première, sur une exposition primaire de brebis laitières à un AVK de première génération, la chlorophacinone, a permis d’établir une corrélation non linéaire entre les concentrations plasmatiques de cet AVK et son effet sur la cascade de coagulation, mesuré par le temps de Quick (TQ). Cependant, ces conclusions sont limitées par l’absence d’une vraie relation dose-réponse entre les concentrations retrouvées et l’augmentation du TQ, ainsi que par la nature de l’AVK testé, de première génération : les résultats sont difficilement généralisables aux AVK de seconde génération, puisque leur fraction circulante dans le plasma est moindre. La deuxième étude s’est basée sur une veille toxicologique réalisée sur douze ans sur des rapaces collectés dans le quart sud-est de la France, afin d'évaluer l’exposition secondaire de ces oiseaux aux AVK, et de tester la corrélation entre niveaux d’AVK retrouvés dans leur foie et probabilité d’intoxication, évaluée par la présence d’hémorragies. Comme déjà observé dans de précédentes études sur le sujet, l’établissement d’un seuil de toxicité s'est avéré complexe. Aucune corrélation significative n’a pu être démontrée, et une des conclusions majeures de cette étude est que l’établissement d’un seuil de concentration pour évaluer la toxicité des AVK n’est peut-être pas le marqueur d’effet le plus pertinent. Le dernier volet de notre travail a consisté en une exploration préliminaire d’un marqueur potentiel peu investigué i.e. l’évolution des concentrations en deux vitamères de la vitamine K (vitamine K1 et ménaquinone-4 (MK4)), dans des tissus facilement accessibles en post-mortem (foie, poumon et rein), suite à une exposition à une dose létale à un AVK, la bromadiolone. Les conclusions de cette étude pilote, réalisée à petite échelle dans des conditions contrôlées chez le rat, sont limitées mais elles ouvrent des pistes de recherches intéressantes notamment concernant l’utilisation des ratios [forme oxydée]/[forme réduite] pour la vitamine K1 et la MK4, qui semblent augmenter dans un délai de 24h suite à une intoxication à un AVK. Finalement, la question de départ de cette thèse n’a pas été pas réellement élucidée. Pourtant, ce travail apporte des éléments supplémentaires à la réflexion sur le sujet, et de manière plus globale sur la définition à apporter à la toxicité des AVK, relativement complexe. Il semblerait qu’un seul marqueur ne soit pas suffisant pour la caractériser, mais plutôt un ensemble de marqueurs. On pourrait également introduire un nouveau niveau de classification des marqueurs potentiels, en lien avec la nature de la toxicité des AVK investiguée, de deux grands types : la toxicité aiguë des AVK, et leur toxicité chronique, aujourd'hui peu caractérisée

Mortalité et nécrose auriculaire suite à un traitement au lévamisole chez des porcelets : quel est votre avis ?

National audienc

Mortalité et nécrose auriculaire suite à un traitement au lévamisole chez des porcelets : quel est votre avis ?

National audienc

Spinosad et troubles comportementaux puis nerveux: quel est votre avis?

National audienceDes cas similaires ont été rapportés à l'ANMV avec le spinosad et d'autres antiparasitaires externes. L'hypothèse est une réaction des puces au produit qui, s'agitant sur l'animal avant de mourir, provoqueraient son agitation

Partitioning of Persistent Organic Pollutants between Adipose Tissue and Serum in Human Studies

Supplementary Materials: The following supporting information can be downloaded at: https:// www.mdpi.com/article/10.3390/toxics11010041/s1, Table S1. Search strings.Blood is the most widely used matrix for biomonitoring of persistent organic pollutants (POPs). It is assumed that POPs are homogenously distributed within body lipids at steady state; however, the variability underlying the partitioning of POPs between fat compartments is poorly understood. Hence, the objective of this study was to review the state of the science about the relationships of POPs between adipose tissue and serum in humans. We conducted a narrative literature review of human observational studies reporting concentrations of POPs in paired samples of adipose tissue with other lipid-based compartments (e.g., serum lipids). The searches were conducted in SCOPUS and PUBMED. A meta-regression was performed to identify factors responsible for variability. All included studies reported high variability in the partition coefficients of POPs, mainly between adipose tissue and serum. The number of halogen atoms was the physicochemical variable most strongly and positively associated with the partition ratios, whereas body mass index was the main biological factor positively and significantly associated. To conclude, although this study provides a better understanding of partitioning of POPs to refine physiologically based pharmacokinetic and epidemiological models, further research is still needed to determine other key factors involved in the partitioning of POPFrench National Research Agency (ANR-18-CE34- 0001-01, Creative Project)Ramón y Cajal Program (RYC-2016-20155, Ministerio de Economía, Industria y Competitividad, Spain)Université de ParisINSER

Biomarkers Potency to Monitor Non-target Fauna Poisoning by Anticoagulant Rodenticides

International audienceThe widespread use of pesticides to control agricultural pests is a hot topic on the public scene of environmental health. Selective pest control for minimum environmental impact is a major goal of the environmental toxicology field, notably to avoid unintended poisoning in different organisms. Anticoagulant rodenticides cause abnormal blood coagulation process; they have been widely used to control rodents, allowing inadvertent primary and secondary exposure in domestic animals and non-target predatory wildlife species through direct ingestion of rodenticide-containing bait or by consumption of poisoned prey. To report toxic effect, the most common approach is the measurement of liver or plasma residues of anticoagulant rodenticides in dead or intoxicated animals showing clinical symptoms. However, one major challenge is that literature currently lacks a hepatic or plasma concentration threshold value for the differentiation of exposure from toxicity. Regarding the variation in pharmacology properties of anticoagulant rodenticides inter- and intra-species, the dose-response relationship must be defined for each species to prejudge the relative risk of poisoning. Beyond that, biomarkers are a key solution widely used for ecological risk assessment of contaminants. Since anticoagulant rodenticides (AR) have toxic effects at the biochemical level, biomarkers can serve as indicators of toxic exposure. In this sense, toxicological knowledge of anticoagulant rodenticides within organisms is an important tool for defining sensitive, specific, and suitable biomarkers. In this review, we provide an overview of the toxicodynamic and toxicokinetic parameters of anticoagulant rodenticides in different animal species. We examine different types of biomarkers used to characterize and differentiate the exposure and toxic effects of anticoagulant rodenticide, showing the strengths and weaknesses of the assays. Finally, we describe possible new biomarkers and highlight their capabilities

Accidental chlorophacinone exposure of lactating ewes: Clinical follow-up and human health dietary implications

International audienceAnticoagulant rodenticides are widely used for rodent control in agricultural and urban settings. Their intense use can sometimes result in accidental exposure and even poisoning of livestock. Can milk, eggs or meat derived from such accidently exposed animals be consumed by humans? Data on the pharmacokinetics of chlorophacinone in milk of accidently exposed ewes were used to estimate the risk associated with its consumption. Three days after accidental ingestion, chlorophacinone was detected in plasma of 18 ewes, with concentrations exceeding 100 ng/mL in 11 animals. Chlorophacinone was detected in milk on day 2 post-exposure and remained quantifiable for at least 7 days in milk of these 11 ewes. Concentrations in milk were much lower than in plasma and decreased quickly (mean half-life of 2 days). This study demonstrated dose-dependent mammary transfer of ingested chlorophacinone. Variation in prothrombin time (PT) on Day 3 suggested that some of the ewes that ingested chlorophacinone may have been adversely affected, but PT did not facilitate estimation of the quantity of chlorophacinone consumed. Using safety factors described in the literature, consumption of dairy products derived from these ewes after a one-week withdrawal period would pose low risk to consumers