Antimicrobial peptides: Interaction with model and biological membranes and synergism with chemical antibiotics

Antimicrobial peptides (AMPs) are promising novel antibiotics since they have shown antimicrobial activity against a wide range of bacterial species, including multiresistant bacteria; however, toxicity is the major barrier to convert antimicrobial peptides into active drugs. A profound and proper understanding of the complex interactions between these peptides and biological membranes using biophysical tools and model membranes seems to be a key factor in the race to develop a suitable antimicrobial peptide therapy for clinical use. In the search for such therapy, different combined approaches with conventional antibiotics have been evaluated in recent years and demonstrated to improve the therapeutic potential of AMPs. Some of these approaches have revealed promising additive or synergistic activity between AMPs and chemical antibiotics. This review will give an insight into the possibilities that physicochemical tools can give in the AMPs research and also address the state of the art on the current promising combined therapies between AMPs and conventional antibiotics, which appear to be a plausible future opportunity for AMPs treatment.Fil: Hollmann, Axel. Universidad Nacional de Santiago del Estero; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes; ArgentinaFil: Martínez, Melina María Belén. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Maturana, Patricia del Valle. Universidad Nacional de Santiago del Estero; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes; ArgentinaFil: Maffia, Paulo Cesar. Universidad Nacional de Quilmes; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Zeta potential beyond materials science: Applications to bacterial systems and to the development of novel antimicrobials

This review summarizes the theory of zeta potential (ZP) and the most relevant data about how it has been used for studying bacteria. We have especially focused on the discovery and characterization of novel antimicrobial compounds. The ZP technique may be considered an indirect tool to estimate the surface potential of bacteria, a physical characteristic that is key to maintaining optimal cell function. For this reason, targeting the bacterial surface is of paramount interest in the development of new antimicrobials. Surface-acting agents have been found to display a remarkable bactericidal effect and have simultaneously revealed a low tendency to trigger resistance. Changes in the bacterial surface as a result of various processes can also be followed by ZP measurements. However, due to the complexity of the bacterial surface, some considerations regarding the assessment of ZP must first be taken into account. Evidence on the application of ZP measurements to the characterization of bacteria and biofilm formation is presented next. We finally discuss the feasibility of using the ZP technique to assess antimicrobial-induced changes in the bacterial surface. Among these changes are those related to the interaction of the agent with different components of the cell envelope, membrane permeabilization, and loss of viability.Fil: Ferreyra Maillard, Anike Paula Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Espeche, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Cutró, Andrea Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentin

Synergistic and antibiofilm activity of the antimicrobial peptide P5 against carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa

In the search for new antimicrobial molecules, antimicrobial peptides (AMPs) offer a viable alternative to conventional antibiotics, as they physically disrupt the bacterial membranes, leading to membrane disruption and eventually cell death. In particular, the group of linear α-helical cationic peptides has attracted increasing research and clinical interest. The AMP P5 has been previously designed as a cationic linear α-helical sequence, being its antimicrobial and hemolytic properties also evaluated. In this work, we analyzed the feasibility of using P5 against a carbapenem-resistant clinical isolate of Pseudomonas aeruginosa, one of the most common and risky pathogens in clinical practice. After antimicrobial activity confirmation in in vitro studies, synergistic activity of P5 with meropenem was evaluated, showing that P5 displayed significant synergistic activity in a time kill curve assay. The ability of P5 to permeabilize the outer membrane of P. aeruginosa can explain the obtained results. Finally, the antibiofilm activity was investigated by viability analysis (MTT assay), crystal violet and confocal imaging, with P5 displaying mild biofilm inhibition in the range of concentrations tested. Regarding biofilm disruption activity, P5 showed a higher efficacy, interfering with biofilm structure and promoting bacterial cell death. Atomic force microscope images further demonstrated the peptide potential in P. aeruginosa biofilm eradication, confirming the promising application of P5 in multi-resistant infections therapeutics.Fil: Martínez, Melina María Belén. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gonçalves, Sónia. Universidade Nova de Lisboa; PortugalFil: Felício, Mário R.. Universidade Nova de Lisboa; PortugalFil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Santos, Nuno C.. Universidade Nova de Lisboa; PortugalFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Maffia, Paulo Cesar. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Antibacterial compounds in postantibiotic era

En las últimas décadas, el aumento a nivel mundial de microorganismos resistentes y multi-resistentes, sumado al poco desarrollo de nuevos antibióticos, hace que cada vez dispongamos de menos opciones terapéuticas para el tratamiento de enfermedades infecciosas. Esta situación ha llevado a la búsqueda y desarrollo de nuevos compuestos terapéuticos. En este contexto, han aparecido nuevos actores como las nanopartículas de plata, que debido a su pequeño tamaño (<100 nm) exhiben propiedades particulares. Por otro lado, se han revalorizado otros compuestos, como los péptidos antibacterianos, péptidos cortos de menos de 200 aminoácidos que se pueden obtener de diversas fuentes naturales o ser sintetizados “de novo”, y diferentes compuestos derivados del metabolismo secundario de muchas especies vegetales. Todos estos compuestos han mostrado actividad antimicrobiana de amplio espectro tanto sobre bacterias grampositivas y gramnegativas, incluyendo aquellos microorganismos resistentes a antibióticos tradicionales. En este sentido, el presente capítulo aborda la obtención y caracterización de estos compuestos y su potencial para el desarrollo de nuevas formulaciones terapéuticas con actividad antibacteriana.In the last decades, the worldwide increase in resistant and multi-resistant microorganisms, added to the little development of new antibiotics, means that we have fewer and fewer therapeutic options for the treatment of infectious diseases. This situation has led to the search and development of new therapeutic compounds. In this context, new actors have appeared such as silver nanoparticles, which due to their small size (<100 nm) exhibit particular properties. On the other hand, other compounds have been revalued, such as antibacterial peptides, short peptides of less than 200 amino acids that can be obtained from various natural sources or synthesized “de novo”, and different compounds derived from the secondary metabolism of many plant species. All these compounds have shown broad-spectrum antimicrobial activity on both gram-positive and gram-negative bacteria, including those resistant to traditional antibiotics. In this sense, this chapter addresses the obtaining and characterization of these compounds and their potential for the development of new therapeutic formulations with antibacterial activity.Fil: Ferreyra Maillard, Anike Paula Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Varas, Romina del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Espeche, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Cutró, Andrea Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Ciencias Medicas.; ArgentinaFil: Rodríguez, Sergio Antonio. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Agronomía y Agroindustrias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentin

Lipid selectivity in novel antimicrobial peptides: Implication on antimicrobial and hemolytic activity

Antimicrobial peptides (AMPs) are small cationic molecules that display antimicrobial activity against a wide range of bacteria, fungi and viruses. For an AMP to be considered as a therapeutic option, it must have not only potent antibacterial properties but also low hemolytic and cytotoxic activities [1]. Even though many studies have been conducted in order to correlate the antimicrobial activity with affinity toward model lipid membranes, the use of these membranes to explain cytotoxic effects (especially hemolysis) has been less explored. In this context, we studied lipid selectivity in two related novel AMPs, peptide 6 (P6) and peptide 6.2 (P6.2). Each peptide was designed from a previously reported AMP, and specific amino acid replacements were performed in an attempt to shift their hydrophobic moment or net charge. P6 showed no antimicrobial activity and high hemolytic activity, and P6.2 exhibited good antibacterial and low hemolytic activity. Using both peptides as a model we correlated the affinity toward membranes of different lipid composition and the antimicrobial and hemolytic activities. Our results from surface pressure and zeta potential assays showed that P6.2 exhibited a higher affinity and faster binding kinetic toward PG-containing membranes, while P6 showed this behavior for pure PC membranes. The final position and structure of P6.2 into the membrane showed an alpha-helix conversion, resulting in a parallel alignment with the Trps inserted into the membrane. On the other hand, the inability of P6 to adopt an amphipathic structure, plus its lower affinity toward PG-containing membranes seem to explain its poor antimicrobial activity. Regarding erythrocyte interactions, P6 showed the highest affinity toward erythrocyte membranes, resulting in an increased hemolytic activity. Overall, our data led us to conclude that affinity toward negatively charged lipids instead of zwitterionic ones seems to be a key factor that drives from hemolytic to antimicrobial activity.Fil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Martínez, Melina María Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Noguera, Martín Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas "Prof. Alejandro C. Paladini". Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Físico-Química Biológicas; ArgentinaFil: Santos, Noelia Encarnacion del Carmen. Universidade de Lisboa; PortugalFil: Disalvo, Edgardo Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Maffia, Paulo Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentin

New insights in novel Escherichia coli colistin resistant strains isolated from Argentina

Colistin is a polymyxin antibiotic (polymyxin E) that has in recent years re-emerged as an option for treatment of multidrug-resistant bacteria. Recently, the re-introduction of colistin resulted in the appearance of colistin-resistant bacteria, which is usually caused by LPS modifications. The fact that this modification is mediated by a plasmid carrying the mcr-1 gene, implies a horizontal transfer of colistin resistance. In Argentina, the National Reference Laboratory in Antimicrobial Resistance (NRLAR), has recently screened several bacteria for the MCR-1 plasmid, detecting nine Escherichia coli isolates carrying the plasmid with the mcr-1 gene, among others. In this context, we proposed to assess the effect of surface charge modifications induced by the plasmid MCR-1 and its impact on the resulting colistin resistance in two clinical isolates of colistin-resistant E. coli. Using zeta potential assays, we confirmed the reduction of negative charge exposure on clinical isolates compared to the reference strain of E. coli. In addition, through permeabilization assays, we were able to correlate this reduction in charge exposure with the extent of damage to the bacterial membrane. The fact that this surface charge modification through substitution of lipid A is plasmid encoded, represents an important concern for future antimicrobial peptide drug development.Fil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Martinez, Melina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Faccone, Diego Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Maffia, Paulo Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentin

Phenylalanine interaction with lipid monolayers at different pHs

The influence of Phe on the surface pressure of 1,2-dipalmitoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (DPPC) monolayers at the air?water interface was studied at different initial surface pressures (26 and 40 mN/m) and two pHs (5.0 and 7.3) at constant temperature (20 °C). Changes produced by the aminoacid added to the subphase on the surface pressure and on the dipole potential of lipid monolayers were measured at a fixed area. Compressibility properties of the monolayers at different pHs were studied by (π?A) isotherms. The results suggest that Phe intercalates into a DPPC film at the air?water interface at pH 5 and forms a different arrangement at pH 7.3.The possible relevance of these results of the effect of Phe in physiological conditions is discussed.Fil: Cutró, Andrea Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Cejas, Jimena del Pilar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Disalvo, Edgardo Anibal. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; ArgentinaFil: Frías, María de los Ángeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigaciones y Transferencia de Santiago del Estero; Argentin

Unravelling the mechanism of action of “de novo” designed peptide P1 with model membranes and gram-positive and gram-negative bacteria

In the last years, the decreasing effectiveness of conventional antimicrobial-drugs has caused serious problems due to the rapid emergence of multidrug-resistant pathogens. This situation has brought attention to other antimicrobial agents like antimicrobial peptides (AMPs), for being considered an alternative to conventional drugs. These compounds target bacterial membranes for their activity, which gives them a broad spectrum of action and less probable resistance development. That is why the peptide-membrane interaction is a crucial aspect to consider in the study of AMPs. The aim of this work was the characterization of the “de novo” designed peptide P1, studying its interactions with model membranes (i.e. liposomes of DMPC:DMPG 5:1) in order to evaluate the final position of the peptide upon interacting with the membrane. Also, we tested the effects of the peptide in gram-positive and gram-negative bacteria. Later, by spectroscopic methods, the ability of the peptide to permeabilize the inner and outer membrane of E. coli and plasmatic membrane of S. aureus was assessed. The results obtained confirmed that P1 can disrupt both membranes, showing some difference in its activity as a function of the nature of each bacterial cell wall, confirming higher effects on gram-positive S. aureus. Finally, we also showed the ability of P1 to inhibit biofilms of that gram-positive bacterium. All data obtained in this work allowed us to propose a model, where the first interactions of the peptide with the bacterial envelope, seem to depend on the gram-negative and gram-positive cell wall structure. After that first interaction, the peptide is stabilized by Trp residues depth inserted into the hydrocarbon region, promoting several changes in the organization of the lipid bilayer, following a carpet-like mechanism, which results in permeabilization of the membrane, triggering the antimicrobial activity.Fil: Espeche, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Martínez, Melina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Cutró, Andrea Carmen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Santiago del Estero. Facultad de Ciencias Médicas; ArgentinaFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Maffia, Paulo Cesar. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentin

Interactions of “de novo” designed peptides with bacterial membranes: Implications in the antimicrobial activity

Antimicrobial peptides are small molecules that display antimicrobial activity against a wide range of pathogens. In a previous work, by using model membranes we studied P6, a peptide that shows no antimicrobial activity, and P6.2, which exhibits antibacterial activity. In the present work we aimed to unravel the mode of action of these peptides by studying their interaction in vivo with Escherichia coli and Staphylococcus aureus. In this sense, to study the interactions with bacterial cells and their effect on the bacterial surface, zeta potential, spectroscopic, and microscopic methodologies were applied. P6.2 exhibits a higher affinity toward both bacterial envelopes. The ability of both peptides to disrupt afterwards the bacterial membrane was also studied. Both peptides were able to induce bacterial membrane damage, but higher concentrations of P6 were needed to obtain results comparable to those obtained for P6.2. Additionally, P6.2 exhibited faster damage kinetics. Altogether, these data allow postulating, in a physiologic model, that the lower affinity of P6 for bacterial envelope results in a minor final concentration of the peptide in the bacterial membrane unable to trigger the antimicrobial activity. Finally, the fact that the active P6.2 has the same MIC value for the Gram-positive and Gram-negative bacteria tested, but not the same profile in the permeabilization assays, reinforces the question of whether cell wall components act as electrostatic barriers preventing or minimizing membrane-active AMPs lethal action at the membrane level.Fil: Maturana, Patricia del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Gonçalves, Sónia. Universidade de Lisboa. Faculdade de Medicina. Instituto de Medicina Molecular; PortugalFil: Martínez, Melina María Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Espeche, Juan Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; ArgentinaFil: Santos, Nuno C.. Universidade de Lisboa. Faculdade de Medicina. Instituto de Medicina Molecular; PortugalFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Maffia, Paulo Cesar. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Hollmann, Axel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet Noa Sur. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos. - Universidad Nacional de Santiago del Estero. Centro de Investigación en Biofísica Aplicada y Alimentos; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentin