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Terapia fotodinâmica (PDT) no tratamento de queratose actínica disseminada em antebraço: estudo piloto
A terapia fotodinâmica (TFD) é um tipo de tratamento local baseado na produção de espécies reativas de oxigênio, principalmente o oxigênio singleto, a partir da fotoativação de um agente sensibilizador seletivamente presente no tecido alterado. Como consequência\ud
da presença do oxigênio singleto, ocorre a oxidação de biomoléculas e a morte celular. Nesse estudo, avaliamos a resposta da ALA-TFD no tratamento de queratose disseminada em antebraço em 10 pacientes. Um dispositivo a base de LEDs foi especialmente desenvolvido. Os resultados com avaliação até 90 dias demonstraram a efetividade do tratamento com qualidade estética e boa tolerância dos pacientes. A TFD pode se constituir uma opção terapêutica para a queratose actínica disseminada.Photodynamic therapy (PDT) is a local treatment based on the production of oxygen reactive species, mainly singlet oxygen, afer the photoactivation of a sensitizer agent selectively present in the abnormal tissue. As a consequence of thepresence of singlet oxygen, oxidation of several biomolecules occurs and then the cell death. In this study we evaluate the ALA-PDT response in the treatment of disseminated keratosis ar the foream of 10 patients. A LED-based illwnination device was especially designed for this application The clinical results presented until 90 days afer treatment, showed the PDT eficacy with satisfactory aesthetic result and patient tolerante to the treatment. PDT may constitute a therapeutic option for the disseminated actinic keratosis
Immunocytochemical expression of p16 INK4A and Ki-67 in cytologically negative and equivocal pap smears positive for oncogenic human papillomavirus
This study was designed to analyze the cross-sectional comparison of the
p16
INK4A
and Ki-67 immunocytochemical expression in negative and equivocal (atyp-ical
squamous cells of undetermined significance (ASC-US)) liquid-based cytology
(LBC) samples testing positive for high-risk human papillomavirus (HPV) types with
HC2 assay or polymerase-chain reaction (PCR). A series of 199 consecutive LBC speci-mens
derived from the same number of women participating in the ongoing Latin American
Screening Study at Leonor Mendes de Barros Hospital, São Paulo, were analyzed
using immunocytochemistry for expression of p16
INK4A
and Ki-67 in negative and
equivocal LBC samples testing positive for high-risk HPV types with hybrid capture
II test (HC2) or PCR. All patients with at least one test positive (cytology, PCR, and/or
HC2) were followed each 6 months for 3 years. The follow-up procedure consisted of
visual examination, colposcopic inspection, cytology, and HC2 assay. Among the neg-ative
cytologic samples, 101 were HPV-positive and 55 HPV-negative. Of the HPV-pos-itive
group, 59 of 101 cases (58.4%) were positive for both p16 and Ki67
immunostaining, and 17 of 101 (16.8%) were negative for both. The proportion of
Ki-67-positivity increased almost in parallel with the increasing grade of p16-positivity
(p = 0.0001 for linear trend). In the HPV-negative group, both markers were negative in
41 of 55 cases (74.5%), and no statistical relationship was observed between the two
markers (Pearson, p = 0.595). HPV-positive ASC-US samples demonstrated a simulta-neous
positive immunoreaction for p16 and Ki67 in 11 of 16 cases (68.7%), whereas 3
(18.7%) were concurrently negative. The relationship between the two markers was of
borderline significance (Pearson, p = 0.053), but no linear relationship was found be-tween
the graded p16 and Ki-67 expression (p = 0.065 for linear trend). In the HPV-negative
ASC-US group, there was no statistical association between the graded p16
and Ki-67 positivity (Pearson, p = 0.281). After 36 months of follow-up of the ASC-US
patients, 6 women still displayed ASC-US smear, of which 4 of 6 were HPV-positive
and expressed both p16 and Ki-67 markers. Two of 43 ASC-US smears had high-grade squamous intraepithelial lesions diagnosed (4.6%), and 1 had low-grade squamous
intraepithelial lesion (2.3%). All of those were positive for HPV, p16 and Ki-67. Patients
with ASC-US diagnosis and positive high-risk HPV status and positive for p16
INK4A
Ki67 should be carefully observed to exclude occurrence of a squamous intraepithelial
lesion. The combination of these two markers can be a useful implement for manage-ment
of women with equivocal cytology.European Commission (EC) - INCO-DEV Programme - Project #ICA4-CT-2001-10013
Evaluation of the viability of the chemiluminescence as a PDT light source for microbial control
A terapia fotodinâmica é a combinação do agente fotossensibilizador, da fonte de luz e do oxigênio que pode resultar na oxidação de biomoléculas e gerar danos celulares. Esta técnica é aplicada em diversas situações, desde o controle microbiológico até o tratamento de câncer. A maioria dos estudos utiliza as fontes de luz tradicionais, ou seja, lasers, sistemas à LED e lâmpadas. No entanto, poucos são os estudos que se concentram em propostas de fonte de luz alternativas. Iluminação portátil, flexível e independente de energia elétrica são características de grande interesse, principalmente, aos países em desenvolvimento no qual há uma grande parcela da população não assistida por hospitais de referência, além de cidades que não possuem o fornecimento de energia elétrica. Neste estudo, foi avaliada a viabilidade do uso, in vitro, da quimiluminescência como uma fonte de luz para a terapia fotodinâmica, induzindo a redução microbiana de Staphylococcus aureus. A quimiluminescência é uma reação química onde por meio da mistura de reagentes líquidos ocorre a emissão de luz sem a necessidade de qualquer ativação externa. Previamente aos estudos da aplicação terapia fotodinâmica in vitro, foram avaliadas diversas reações de quimiluminescência no intuito de estabelecer as características mais viáveis ao efeito fotodinâmico. Através de um modelo similar a teoria de Förster, foi estabelecida a relação espectral entre a banda de emissão da quimiluminescência e o espectro de absorção do fotossensibilizador Photogem®. Na análise in vitro, o agente fotossensível foi utilizado em quatro concentrações entre 6 e 75 g/ml e iluminação entre 60 minutos até 240 minutos. Longos tempos de irradiação são necessários devido a baixa intensidade de luz oriunda da quimiluminescência (intervalo de algumas dezenas de W/cm²). Os resultados demonstraram que o longo tempo de experimento não gerou redução microbiana nos grupos em que foi avaliado o efeito isolado da fonte de luz e do fotossensibilizador. Porém, quando foi avaliado o efeito fotodinâmico na combinação da reação química e o fotossensibilizador, atingiu-se redução da bactéria próxima de 98% (redução de duas ordens logarítmicas, aproximadamente) nas maiores concentrações de Photogem® e de dose de luz aplicada. Este estudo demonstra a possibilidade do uso da quimiluminescência como uma fonte de luz alternativa no controle microbiano através do efeito fotodinâmico, além de apresentar as vantagens de irradiação portátil, flexível entre outras quando comparada com as fontes de luz convencionais.Photodynamic therapy is a combined action of the photosensitizer, a light source and the oxygen that may result in an oxidation of biomolecules and cellular damage. This technique is used for several applications, from microbial control to cancer treatment. The majority of the studies use conventional light sources as lasers, LED systems and lamps, just a few focuse on the proposal of alternative light sources. Portable, flexible and non-wired illumination are duired characteristics especially for developing countries where still great part of the population is not assisted by hospitals and several regions do not have electricity. In this study, the viability of chemiluminescence use a PDT light source was evaluated in the in vitro microbial reduction of Staphylococcus aureus. Chemiluminescence is a chemical reaction where after the reagents mixture a light emission occurs. Previously to the microorganism experiment, several chemiluminescence protocols were tested for the determination of the best reaction for this study photodynamic effect. Using a mathematical model similar to the Förster theory, the spectral relation of chemiluminescence emission and Photogem® absorption band was calculated. The photosensitizer was tested at four concentrations between 6 an 75 g/ml and illumination at exposure times between 60 and 240 minutes. Long exposure times were needed due to the low irradiances of about dozens of W/cm².The results showed that the experiment long procedure did not result in microbial reduction, which was verified at the individual effect of light and of photosensitizer. On the other hand, the photodynamic effect produced by the combination of the photosensitizer and chemiluminescence resulted in 98% microorganism reduction for the higher Photogem® concentrations and light dose. This study shows the viability of the chemiluminescence as a light source for the microbial control by PDT, associated with the characteristics of a portable and flexible illumination device
Squamous cervical intraepitelial bneoplasia grades II and III cytopathological and histopathological correlation: evaluation of the glandular involvement and of the cytophatic effects of human papillomavirus infection
O surgimento do Sistema de Bethesda para diagnosticos citologicos cervicovaginais trouxe varios questionamentos relativos a sua aplicabilidade em nosso meio, entre os quais: - agrupamento das alteracoes citologicas classificadas como NIC II e NIC III sob a denominacao unica de Lesao lntraepitelial Escamosa de Alto Grau; - utilizacao do diagnostico citologico de atipias em celulas glandulares de significado indeterminado (AGUS) na emissao de laudos citologicos. Outra questao amplamente discutida se refere a concordancia cito-histopatologica em relacao aos efeitos citopaticos da presenca de HPV nas Lesoes de Alto Grau. Como consequencia da utilizacao de criterios nao especificos para este diagnostico, o confronto de laudos incompativeis e bastante frequente em nosso meio. Na tentativa de elucidar estas questoes foram revistos 98 casos cuja citologia diagnosticou Lesao lntraepitellal Escamosa de Alto Grau e que foram submetidos a resseccao parcial do colo uterino atraves de cirurgia de alta frequencia, apos comprovacao diagnostica de NIC II ou NIC III por biopsia dirigida pela colposcopia. Os resultados mostraram que ha concordancia cito-histopatologica em 81,6 por cento dos casos, sendo maior nos casos de NIC III (87,1 por cento) do que nos de NIC II (67,9 por cento). Atraves da Analise de Regressao Logistica pudemos observar que a chance de se encontrar extensao glandular nas pacientes que apresentaram AGUS a citologia e 5,32 vezes maior em relacao aquelas que nao apresentaram e e 5,74 vezes maior nas lesoes NIC III do que nas NIC II. Os resultados tambem mostraram que a concordancia cito-histopatologica referente a presenca ou nao de efeitos citopaticos do HPV e de 60,7 por cento nos casos de NIC II, com valor preditivo positivo de 86,7 por cento e valor preditivo negativo de 30,8 por cento, e de 52,8 por cento nos casos de NIC III, com valor preditivo positivo de 72,2 por cento e valor preditivo negativo de 46,2 por cento, sempre utilizando coilocitos como criterio especifico para a presenca do efeito citopatico viral. O presente estudo pennite-nos concluir que e mais apropriado utilizar a nomenclatura sugerida pelo Sistema de Bethesda associada a nomenclatura ja estabelecida de NIC II e NIC III; o valor preditivo da citologia no comprometimento glandular das lesoes NIC II e NIC III e estatisticamente significante, quando utilizados criterios e objetivos para o diagnostico de AGUS; existe...(au)BV UNIFESP: Teses e dissertaçõe
Cervical biopsy-based comparison of a new liquid based TLP with conventional smears
Objetivo: Comparar a acuracia diagnostica de amostras citologicas em meio liquido UCM (Digene Corporation, MD, EUA) e de amostras citologicas convencionais utilizando-se o resultado histologico como padrao ouro. Material e Metodos: Estudo transversal em 788 mulheres submetidas a exame ginecologico durante o qual foram coletadas amostras cervicovaginais para a realizacao de citologia por ambos os metodos, seguidas de colposcopia e de biopsia se necessario. A avaliacao citologica pelos dois metodos foi separadamente feita. A concordancia entre os dois metodos citologicos foi verificada pela estatistica Kappa. Sensibilidade, especificidade e valores preditivos com intervalos de confianca de 95°lo foram calculados para ambos os metodos. O teste de McNemar foi empregado para determinar o nivel de coincidencia entre os dois procedimentos citologicos. Resultados: A concordancia entre os dois metodos em relacao ao diagnostico relatado mostrou um valor de Kappa de 0,774 (p < 0,0001). Apos ajuste para cada categoria de diagnostico histologico, o valor de Kappa encontrado para cada uma delas foi o seguinte: normal =0,733 (p < 0,0001); LSIL = 0,654 (p < 0,0001); HSIL = 0,735 (p < 0,0001). A sensibilidade e a especificidade da citologia UCM foram de 75,3 por cento e 86,2 por cento respectivamente, estatisticamente nao significante quando comparados aos 80,8 por cento e 85,0 por cento observados na citologia convencional. Conclusao: Este estudo demonstrou que nao houve diferenca entre a citologia em meio liquido UCM e o esfregaco convencional de Papanicolaou na deteccao de lesoes intra-epiteliais escamosas e do cancer do colo do uteroBV UNIFESP: Teses e dissertaçõe
Aide à la mise en place d’un système d’assurance qualité en anatomie et cytologie pathologiques: l’outil informatique
Performance of 3 methods for quality control for gynecologic cytology diagnoses
Prova tipográfica (In Press)ObjectiveTo evaluate performance and viability of internal quality control QC) strategies in a public health laboratory of the state of Sao Paulo.Study DesignA retrospective study was per formed with 3 QC strategies to improve internal cytologic diagnoses: morphologic guided-list criteria (MGLC), 100% rapid-rescreening (100% RR) of negative slides ("turret" method) and 10% rescreening (10% R) of negative slides. Cases were examined at Adolfo Lutz Institute, Sao Paulo, Brazil, from 2002 to 2004. Histopathologic results, when available, were considered gold standard; cytologic consensus diagnosis was by 2 pathologists when histologic results were unavailable.ResultsMGLC selected 20.7% samples with cytologic atypias, 10% R selected 0.6% and RR selected 2.5%. Cytologic/histologic initial concordance was 57.4%, low-grade squamous intraepithelial lesion false negative rate was 34.9% and high-grade squamous intraepithelial lesion false negative rate was 12.2%. After diagnosis, consensus concordance was 97.2%.ConclusionThe 100% RR and 10% R QC strategies detected more false negative cases in liquid-based cytology than in conventional Pap smears. The 100% RR strategy reduced the false negative results and allowed evaluation of individual staff performance. The 10% R strategy did not offer significant results. We concluded that association of MGLC and 100% RR strategies might improve cytologic diagnostic quality
How accurate is cytological diagnosis of cervical glandular lesions?
Gynecological cytology has some inaccurate morphological categorization and poor interobserver reproducibility especially for glandular lesions. Liquid-based cytology (LBC) preparations are presumed to reduce artifacts that interfere in diagnosis performance, but its value to correctly identify glandular alterations has not been sufficiently reported. The objective of this study was to compare the diagnostic performance and interobserver agreement of LBC and conventional Pap smear to identify histologically confirmed glandular lesions according to five cytologists. Sensitivity ranged from 55.8 to 73.1% and 32.7 to 48.1% for Pap smear and LBC, respectively. Specificity ranged from 66.1 to 87.1% and 69.4 to 94.4%, respectively. In general, agreement between pairs of cytologists was poor with kappa-values around 0.45. In conclusion, relying entirely on cervical cytology to rule out glandular lesions may be risky. The use of HPV DNA test alone or combined to screening glandular lesions may contribute to minimize the limitations of both conventional and LBC preparations to diagnose glandular abnormalities