Participación del ácido hialurónico en enfermedad trofoblástica gestacional

Gestational trophoblastic disease (GTD) comprises a heterogeneous group of entities related to trophoblast as complete hydatidiform mole (CHM), choriocarcinoma (CC) and placental site trophoblastic tumor (PSTT). Hyaluronic acid (HA) is the main glycosaminglycan in the extracellular matrix. CD44 and RHAMM are the main receptors to which HA interact and modulate biological processes in cancer. The aim of this Thesis project was to study the role of HA in GTD pathophysiology. We demonstrated a differential expression pattern of HA, CD44 and RHAMM in trophoblast populations from CHM, CC and PSTT. Using human choriocarcinoma cell line JEG-3 as in vitro model, we demonstrated that HA induce a biochemical differentiation to extravillous phenotype. Also HA was able to induce cell migration. Such effect was dependent of endogenous hCG level. Besides, HA-induced migration involved an elevated ERK activation dependent of PI3K and was mediated by the receptor RHAMM. This Thesis represent an important contribution into the HA field research. The relevance of knowledge of dialogue between stroma and this tumor associates with the chance to develop new therapeutic strategies in those cases with recurrent and chemoresistance disease.Fil: Mascaró, Marilina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, ArgentinaLa Enfermedad Trofoblástica Gestacional (ETG) comprende un grupo heterogéneo de entidades asociadas al trofoblasto como mola hidatiforme completa (MHC), coriocarcinoma (CC) y tumor trofoblástico de sitio placentario (TTSP).\nEl ácido hialurónico (AH) es el principal glicosaminoglicano presente en la matriz extracelular. Los principales receptores con los cuáles interactúa y modula procesos biológicos en neoplasias son CD44 y RHAMM. El objetivo general de este trabajo de Tesis fue estudiar la implicancia del AH en la fisiopatología de ETG. Se demostró que existe una expresión diferencial de AH, CD44 y RHAMM, en las poblaciones trofoblásticas MHC, CC y TTSP. Empleando como modelo in vitro la línea celular de coriocarcinoma humano JEG-3, demostramos que el AH induce la diferenciación bioquímica de las células hacia un fenotipo extravelloso. Además es capaz de inducir migración celular. Dicho efecto depende del nivel de hCG endógena. Además, este efecto del AH sobre la migración involucra un aumento en la activación de ERK dependiente de PI3K y es mediado por el receptor RHAMM. Esta Tesis representa una importante contribución en el campo de las ciencias del AH. La importancia del conocimiento del diálogo entre el estroma y este tumor radica en la posibilidad de generar nuevas estrategias terapeúticas en aquellos casos que presenten recidiva y quimioresistencia.\

Expression of CD44 and RHAMM Hyaluronic Acid Receptors: Activation of signaling pathways in Gestational Trophoblastic Disease

La enfermedad trofoblástica gestacional (ETG) comprende un grupo heterogéneo de entidades interrelacionadas en las que se observa un crecimiento anormal de células en el útero. Están asociadas al trofoblasto y poseen características clínicas, morfológicas y patogenia específicas. Algunas de ellas representan lesiones benignas, como mola hidatiforme completa o parcial mientras que otras son neoplasias como coriocarcinoma y tumor trofoblástico de sitio placentario. Es de destacar que todas las variantes de ETG difieren genéticamente de la madre por lo tanto constituyen un aloinjerto dentro del tejido materno. El ácido hialurónico (AH) es el principal glicosaminoglicano lineal presente en la matriz extracelular. En neoplasias los principales receptores con los cuales interactúa son CD44 y RHAMM, modulando procesos biológicos tales como proliferación, diferenciación, adhesión, migración, invasión, resistencia a multidrogas, senescencia. La participación del AH ha sido estudiada en la progresión de varios tipos de tumores sólidos y nosotros, en particular, en enfermedades oncohematológicas. Sin embargo, su participación en neoplasias asociadas a trastornos gestacionales es prácticamente desconocida. En nuestro laboratorio evaluamos la función del ácido hialurónico y sus receptores en los procesos de proliferación, migración y diferenciación celular así como las vías de señalización involucradas, las que podrían ser utilizadas como blancos terapéuticos para el tratamiento de la neoplasia trofoblástica gestacional.Gestational Trophoblastic Disease (GTD) comprises a group of trophoblast-related disorders with abnormal growth of cells inside a woman´s uterus. GTD shows specific clinical and morphological characteristics as well as pathogenesis. Some of them are benign lesions such as complete or partial hydatiform mole while others are neoplasm like choriocarcinoma and placental-site trophoblastic tumors. It is noteworthy that all variants of GTD differ genetically from the mother and therefore constitute an allograft in maternal tissue. Hyaluronan (HA) is the major glycosaminoglycan present in the extracellular matrix. HA has been associated with many important functions such as proliferation, wound healing, inflammation, migration and invasion, multidrug resistance or senescence. HA exerts its functions upon interaction with several receptors such as CD44 or RHAMM (principal receptors in cancer). Although HA-receptor interaction has been studied in various types of tumors its participation in neoplasm associated with gestational disorders is virtually unknown. In our laboratory we evaluated the role of hyaluronan and its receptors in the processes of proliferation, migration and differentiation, including the signaling pathways involved, which could be used as therapeutic targets for the treatment of Gestational Trophoblastic Neoplasia.Fil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Pibuel, Matías Arturo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Hajos, Silvia Elvira. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; Argentin

Evaluation of Hyaluronic Acid in Cattle: Physiological Variations Related to Age, Periparturition and in Clinical Cases of Paratuberculosis

Hyaluronic acid (HA) serum levels have been related to various pathological conditions in both humans and animals. The involvement of HA in the pathogenesis of mycobacterial infections has been suggested. The aim was to evaluate serum levels and ilea tissue presence of HA in healthy bovines and in clinical paratuberculosis (PTB) cases. HA serum concentrations in bovines were found to be in the range of 130 to 617 ng/mL with a median value of 418 ng/mL. Significantly increased HA levels were detected in 1 month-old calves. Increased levels of HA were found at peripartum as compared to healthy control animals, with pre- parturition values significantly higher than post- parturition (p=0.02). Cows with clinical PTB showed higher serum levels and diminished ileal detection of HA than healthy animals. In serum, physiological variations in HA serum levels related to age and parturition were found in bovines. In addition, clinical PTB also affected the presence of HA in serum and ileum. These results might contribute to elucidate the clinical significance of HA evaluation in cattle and its involvement in PTB infection.Fil: Jolly, Ana. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Mascaró, Marilina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Ingratta, Giselle Gabriela. Universidad de Buenos Aires; ArgentinaFil: Pibuel, Matías Arturo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Hajos, Silvia Elvira. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Inmunología; ArgentinaFil: Mundo, Silvia Leonor. Universidad de Buenos Aires; Argentin

Human leukaemic cell lines synthesize hyaluronan to avoid senescence and resist chemotherapy

Hyaluronan (HA) is one of the major components of the extracellular matrix. Several solid tumors produce high levels of HA, which promotes survival and multidrug resistance (MDR). HA oligomers (oHAs) can block HA effects. However, little is known about the role of HA in hematological malignancies. The aim of this work was to determine whether HA or its oligomers can modulate the proliferation of leukemia cells as well as their effect on MDR. Receptors and signaling pathways involved were also analyzed. For this purpose, the human leukemic cell lines K562 and Kv562, which are sensitive and resistant to Vincristine (VCR), respectively, were used. We demonstrated that HA induced cell proliferation in both cell lines. On K562 cells, this effect was mediated by cluster differentiation 44 (CD44) and activation of both phosphoinositide 3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt) and mitogen-activated protein kinase kinase (MEK)/extracellular signal-regulated kinase (ERK) pathways, whereas on Kv562 cells, the effect was mediated by receptor for hyaluronan-mediated motility (RHAMM) and PI3K/Akt activation. The inhibition of HA synthesis by 4-methylumbelliferone (4MU) decreased cell line proliferation and sensitized Kv562 to the effect of VCR through P-glycoprotein (Pgp) inhibition, in both cases with senescence induction. Moreover, oHAs inhibited K562 proliferation mediated by CD44 as well as Akt and ERK down-regulation. Furthermore, oHAs sensitized Kv562 cells to VCR by Pgp inhibition inducing senescence. We postulate that the synthesis of HA would promote leukemia progression mediated by the triggering of the above-mentioned proliferative signals. These findings highlight the potential use of oHAs and 4MU as coadjuvant for drug-resistant leukemia.Fil: Lompardía, Silvina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; ArgentinaFil: Papademetrio, Daniela Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; ArgentinaFil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; ArgentinaFil: Alvarez Carbonetto, Elida M. del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; ArgentinaFil: Hajos, Silvia Elvira. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral "Profesor R. A. Margni"; Argentin

Hyaluronan oligomers sensitize chronic myeloid leukemia cell lines to the effect of imatinib

Chronic myeloid leukemia is a myeloproliferative syndrome characterized by the presence of the Philadelphia chromosome (Ph), generated by a reciprocal translocation occurring between chromosomes 9 and 22 [t(9;22)(q34;q11)]. As a consequence, a fusion gene (bcr-abl) encoding a constitutively active kinase is generated. The first-line treatment consists on BCR-ABL inhibitors such as Imatinib, Nilotinib and Dasatinib. Nevertheless, such treatment may lead to the selection of resistant cells. Therefore, finding molecules that enhance the anti-proliferative effect of first-line drugs is of value. Hyaluronan oligomers (oHA) are known to be able to sensitize several tumor cells to chemotherapy. We have previously demonstrated that oHA can revert Vincristine resistance in mouse lymphoma and human leukemia cell lines. However, little is known about the role of oHA in hematological malignancies. The aim of this work was to determine whether oHA are able to modulate the anti-proliferative effect of Imatinib in chronic myeloid leukemia (CML) cell lines. The effect on apoptosis and senescence as well as the involvement of signaling pathways were also evaluated. For this purpose, the human CML cell lines K562 and Kv562 (resistant) were used.We demonstrated that oHA sensitized both cell lines to the anti-proliferative effect of Imatinib increasing apoptosis and senescence. Moreover, this effect would be accomplished through the down-regulation of the PI3K signaling pathway. These findings highlight the potential of oHAwhen used as a co-adjuvant therapy for chronic myeloid leukemia.Fil: Lompardía, Silvina Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Díaz, Mariángeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Papademetrio, Daniela Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Pibuel, Matías Arturo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Alvarez Carbonetto, Elida M. del C.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; ArgentinaFil: Hajos, Silvia Elvira. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentin

Nuclear Localization of Heme Oxygenase-1 in Pathophysiological Conditions: Does It Explain the Dual Role in Cancer?

Heme Oxygenase-1 (HO-1) is a type II detoxifying enzyme that catalyzes the rate-limiting step in heme degradation leading to the formation of equimolar quantities of carbon monoxide (CO), free iron and biliverdin. HO-1 was originally shown to localize at the smooth endoplasmic reticulum membrane (sER), although increasing evidence demonstrates that the protein translocates to other subcellular compartments including the nucleus. The nuclear translocation occurs after proteolytic cleavage by proteases including signal peptide peptidase and some cysteine proteases. In addition, nuclear translocation has been demonstrated to be involved in several cellular processes leading to cancer progression, including induction of resistance to therapy and enhanced metastatic activity. In this review, we focus on nuclear HO-1 implication in pathophysiological conditions with special emphasis on malignant processes. We provide a brief background on the current understanding of the mechanisms underlying how HO-1 leaves the sER membrane and migrates to the nucleus, the circumstances under which it does so and, maybe the most important and unknown aspect, what the function of HO-1 in the nucleus is.Facultad de Ciencias MédicasCentro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicada

Vitamin D analogues exhibit antineoplastic activity in breast cancer patient-derived xenograft cells

Despite advances in breast cancer (BC) treatment, its mortality remains high due to intrinsic or acquired resistance to therapy. Several ongoing efforts are being made to develop novel drugs to treat this pathology with the aim to overcome resistance, prolong patient survival and improve their quality of life. We have previously shown that the non-hypercalcemic vitamin D analogues EM1 and UVB1 display antitumor effects in preclinical studies employing conventional cell lines and animal models developed from these cells. In this work, we explored the antitumor effects of EM1 and UVB1 employing BC cells derived from patient-derived xenografts (PDXs), which are a powerful preclinical tool for testing new drugs. We demonstrated that the analogues reduced the viability of HER2-positive and Triple Negative BC-PDXs. Moreover, using an in vitro model of acquired resistance to Trastuzumab-emtansine, UVB1 displayed anti-proliferative actions under 2D and 3D culture conditions. It inhibited both formation and growth of established organoids. In addition, a direct correlation between UVB1 antitumor effects and VDR expression in PDXs was found. In conclusion, all the results reinforce the potential use of these vitamin D analogues as antitumor agents to treat HER2-positive and Triple Negative BC.Fil: Ferronato, María Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Nadal, Serrano Mercedes. Universidad Autonoma de Barcelona. Hospital Vall D' Hebron. Instituto de Investigación Vall D'hebron; EspañaFil: Arenas Lahuerta, Enrique Javier. Universidad Autonoma de Barcelona. Hospital Vall D' Hebron. Instituto de Investigación Vall D'hebron; EspañaFil: Morales, Cristina Bernadó. Universidad Autónoma de Barcelona. Hospital Vall D' Hebron; EspañaFil: Paolillo, Giuliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Martinez Sabadell, Aliguer Alex. Universidad Autónoma de Barcelona. Hospital Vall D' Hebron; EspañaFil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Vitale, Cristian Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; ArgentinaFil: Fall, Yagamare. Universidad de Vigo; EspañaFil: Arribas, Joaquín. Universidad Autónoma de Barcelona. Hospital Vall D' Hebron; España. Universitat Autònoma de Barcelona; España. Centro de Investigación Biomédica en Red de Cáncer; España. Institució Catalana de Recerca i Estudis Avancats; EspañaFil: Facchinetti, María Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; ArgentinaFil: Curino, Alejandro Carlos. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentin

Early Detection of Pancreatic Intraepithelial Neoplasias (PanINs) in Transgenic Mouse Model by Hyperpolarized 13C Metabolic Magnetic Resonance Spectroscopy

While pancreatic cancer (PC) survival rates have recently shown modest improvement, the disease remains largely incurable. Early detection of pancreatic cancer may result in improved outcomes and therefore, methods for early detection of cancer, even premalignant lesions, may provide more favorable outcomes. Pancreatic intraepithelial neoplasias (PanINs) have been identified as premalignant precursor lesions to pancreatic cancer. However, conventional imaging methods used for screening high-risk populations do not have the sensitivity to detect PanINs. Here, we have employed hyperpolarized metabolic imaging in vivo and nuclear magnetic resonance (1H-NMR) metabolomics ex vivo to identify and understand metabolic changes, towards enabling detection of early PanINs and progression to advanced PanINs lesions that precede pancreatic cancer formation. Progression of disease from tissue containing predominantly low-grade PanINs to tissue with high-grade PanINs showed a decreasing alanine/lactate ratio from high-resolution NMR metabolomics ex vivo. Hyperpolarized magnetic resonance spectroscopy (HP-MRS) allows over 10,000-fold sensitivity enhancement relative to conventional magnetic resonance. Real-time HP-MRS was employed to measure non-invasively changes of alanine and lactate metabolites with disease progression and in control mice in vivo, following injection of hyperpolarized [1-13C] pyruvate. The alanine-to-lactate signal intensity ratio was found to decrease as the disease progressed from low-grade PanINs to high-grade PanINs. The biochemical changes of alanine transaminase (ALT) and lactate dehydrogenase (LDH) enzyme activity were assessed. These results demonstrate that there are significant alterations of ALT and LDH activities during the transformation from early to advanced PanINs lesions. Furthermore, we demonstrate that real-time conversion kinetic rate constants (kPA and kPL) can be used as metabolic imaging biomarkers of pancreatic premalignant lesions. Findings from this emerging HP-MRS technique can be translated to the clinic for detection of pancreatic premalignant lesion in high-risk populations.Fil: Dutta, Prasanta. University of Texas; Estados UnidosFil: Castro Pando, Susana. University of Texas; Estados UnidosFil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; Argentina. University of Texas; Estados UnidosFil: Riquelme, Erick. University of Texas; Estados UnidosFil: Zoltan, Michelle. University of Texas; Estados UnidosFil: Zacharias, Niki M.. University of Texas; Estados UnidosFil: Gammon, Seth T.. University of Texas; Estados UnidosFil: Piwnica-Worms, David. University of Texas; Estados UnidosFil: Pagel, Mark D.. University of Texas; Estados UnidosFil: Sen, Subrata. University of Texas; Estados UnidosFil: Maitra, Anirban. University of Texas; Estados UnidosFil: Shams, Shayan. University of Texas; Estados UnidosFil: McAllister, Florencia. University of Texas; Estados UnidosFil: Bhattacharya, Pratip K.. University of Texas; Estados Unido

Hemoxygenase-1 Promotes Head and Neck Cancer Cell Viability

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a remarkably heterogeneous disease with around 50% mortality, a fact that has prompted researchers to try new approaches to improve patient survival. Hemoxygenase-1 (HO-1) is the rate-limiting step for heme degradation into carbon monoxide, free iron and biliverdin. We have previously reported that HO-1 protein is upregulated in human HNSCC samples and that it is localized in the cytoplasmic and nuclear compartments; additionally, we have demonstrated that HO-1 nuclear localization is associated with malignant progression. In this work, by using pharmacological and genetic experimental approaches, we begin to elucidate the mechanisms through which HO-1 plays a role in HNSCC. We found that high HO-1 mRNA was associated with decreased patient survival in early stages of HNSCC. In vitro experiments have shown that full-length HO-1 localizes in the cytoplasm, and that, depending on its enzymatic activity, it increases cell viability and promotes cell cycle progression. Instead, HO-1 does not alter migration capacity. Furthermore, we show that C-terminal truncated HO-1 localizes into the nucleus, increases cell viability and promotes cell cycle progression. In conclusion, we herein demonstrate that HO-1 displays protumor activities in HNSCC that depend, at least in part, on the nuclear localization of HO-1.Centro de Investigaciones Inmunológicas Básicas y Aplicada

Rol del ácido hialurónico en Enfermedad Trofoblástica Gestacional

La enfermedad trofoblástica gestacional (ETG) comprende un grupo heterogéneo deentidades interrelacionadas y asociadas al trofoblasto con características clínicas,morfológicas y patogenia específicas. Algunas de ellas representan lesiones benignas, comomola hidatiforme completa (MHC); mientras que otras son neoplasias como coriocarcinoma(CC) y tumor trofoblástico de sitio placentario (TTSP). Es interesante destacar que todas lasvariantes de ETG difieren genéticamente de la madre y por lo tanto constituyen un aloinjerto.El ácido hialurónico (AH) es el principal glicosaminoglicano lineal presente en la matrizextracelular. Está compuesto por unidades disacarídicas de ácido-D-glucurónico y Nacetilglucosamina.Los principales receptores con los cuáles interactúa y modula procesosbiológicos en neoplasias son CD44 y RHAMM. Dichos procesos son proliferación,diferenciación, adhesión, migración, invasión, resistencia a multidrogas, senescencia.Ha sido ampliamente estudiada la participación del AH en la progresión de varios tumoressólidos y en nuestro en laboratorio en particular, en enfermedades oncohematológicas. Sinembargo, su participación en neoplasias asociadas a trastornos gestacionales esprácticamente desconocida. El objetivo general de este trabajo de Tesis fue dilucidar laimplicancia del AH en el proceso fisiopatológico de ETG.En este trabajo de Tesis se demostró que existe una expresión diferencial de AH y susreceptores, CD44 y RHAMM, en las poblaciones trofoblásticas de MHC, CC y TTSP asicomo también en placenta de primer trimestre empleando muestras de tejidos. Losresultados demostrados en el Primer Capítulo sugieren que el AH, CD44 y RHAMMparticipan tanto del proceso fisiológico de implantación y placentación asi como del procesofisiopatológico asociado a cada una de las entidades de ETG estudiadas.Para dilucidar esto último en el Segundo Capítulo se caracterizaron tres líneas celulares deCC humano ya que hasta el momento no existen modelos disponibles para el estudio deMHC y TTSP. En concordancia con los resultados hallados en muestras de pacientes conCC, donde demostramos expresión de AH en el estroma tumoral y expresión de RHAMM enla superficie de las células tumorales, encontramos que la línea celular JEG-3 constituiría elmejor modelo para estudiar la implicancia de AH en esta entidad. Esta línea expresaRHAMM en su superficie celular, no expresa CD44 y no secreta AH al medio extracelular.Posteriormente, en el Tercer Capítulo de este trabajo evaluamos el efecto del AH de diversopeso molecular en los procesos de migración, proliferación y diferenciación de células JEG-3y los mecanismos subyacentes.Demostramos que el AH-BPM , pero no el AH-APM, es capaz de inducir migración celularsin afectar la proliferación. También, que tanto AH-BPM como AH-APM inducen unamodulación de algunos marcadores trofoblásticos del linaje extravelloso (con capacidad de invasión celular): aumento en la expresión de HLA-G, disminución de hCG y de sincitina-2.Estos resultados sugieren que en un entorno donde co-existen fragmentos de AH de diversopeso molecular ambos tipos de AH podrían actuar de modo concertado favoreciendo ladiferenciación hacia un fenotipo extravelloso y la migración de las células JEG-3 hacia AHBPM.Del estudio de los mecanismos moleculares que subyacen al efecto del AH-BPM sobre lamigración celular demostramos que este efecto depende del nivel endógeno de hCG en elmedio extracelular ya que la capacidad de migración disminuye cuando se bloquea hCG.También demostramos que el AH-BPM induce la fosforilación de ERK. Esta activación esmodulada de modo temporal por las quinasas MEK y PI3K indicando que existe un crosstalkentre ambas vías. Sin embago, la migración frente a AH-BPM depende de la quinasa PI3Kpero no de MEK. Finalmente, también demostramos que la migración en estas condicionesdepende de la interacción con el receptor RHAMM.En resumen, demostramos que la línea celular de coriocarcinoma humano JEG-3 es unmodelo adecuado para estudiar el efecto del AH sobre la biología de estas células. En estemodelo, demostramos que el AH-APM y ?BPM inducen la diferenciación bioquímica de lascélulas JEG-3 hacia un fenotipo extravelloso. Sin embargo, el AH-BPM, pero no el AH-APM,es capaz de inducir migración celular sin afectar la proliferación y que dicho efecto dependedel nivel de hCG endógena. Asimismo, este efecto del AH sobre la migración de las célulasJEG-3 involucra un aumento en la fosforilación de ERK el cual depende de la participaciónde la quinasa PI3K y es mediado por el receptor RHAMM.Esta Tesis representa un importante aporte al campo de las ciencias del AH ya que suparticipación en procesos neoplásicos asociados a la gestación ha sido poco estudiada. Laimportancia del conocimiento del diálogo entre el estroma y este tumor radica en laposibilidad de generar nuevas estrategias terapeúticas para esta enfermedad en aquelloscasos donde fracase la quimioterapia convencional y se presente recidiva yquimioresistencia.Fil: Mascaró, Marilina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral Prof. Ricardo A. Margni; Argentina. Autor