Les protéines flagellaires flic et flid de clostridium difficile (caractérisation moléculaire et rôle dans la colonisation intestinale)

Clostridium difficile est une bactérie pathogène responsable des colites pseudomembraneuses et des diarrhées associées à une antibiothérapie. Les facteurs de virulence majeurs sont les toxines A et B, cependant d autres facteurs comme les flagelles sont impliqués dans la pathogénie de nombreuses espèces bactériennes. Le but de ce travail était de caractériser les protéines flagellaires et de déterminer le rôle des flagelles de C. difficile dans la colonisation intestinale. Les études d adhésion in vitro ont montré que ces protéines flagellaires adhèrent aux cellules Vero mais pas au mucus intestinal de souris. Des expériences d implantation de souches flagellées et non flagellées, réalisées chez la souris axénique, ont montré que la colonisation de l intestin par une souche flagellée est 10 fois supérieure à celle observée avec une souche non flagellée du même sérogroupe. Le flagelle pourrait ainsi favoriser la pénétration du mucus intestinal et adhérer aux cellules intestinales, par l intermédiaire de récepteurs spécifiques.Clostridium difficile is a pathogenic bacterium responsible for pseudo-membranous colitis and diarrhea associated with anti-biotherapy. The major factors of virulence are the toxins A and B. However, other factors as flagella are implied in the pathogenesis of many bacterial species. The aim of this study was to determine the role of flagella of C. difficile in intestinal colonization. The studies of in vitro adhesion showed that flagellar proteins adhere to Vero cells but not to the intestinal mucus of mice. Experiments with flagellated and not flagellated strains, realized in axénic mice, showed that colonization of gut with flagellated strains is 10 fold higher to those observed with not flagellated strains belonging to the same serogroup. Thus, bacterial flagellum could support the penetration of intestinal mucus and adhere to intestinal cells to specific receptorsCHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

Résurgence de la peste au 21ème siècle

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NOUVELLES TECHNIQUES DE DIAGNOSTIC DES CHLAMYDIOSES GENITALES

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Prévention des infections invasives à streptococcus pneumoniae et haemophilus influenzae type b chez le nourrisson avec des vaccins conjugués

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Utilisation de la tobramycine et de la colistiméthate sodique en aérosol dans le traitement des infections à Pseudomonas aeruginosa au cours de la mucoviscidose

L'aérosolthérapie de la tobramycine et de la colistiméthate sodique est une voie d'administration utile dans la mucoviscidose. Elle permet l'obtention rapide et sélective au site endobronchique de l'infection de fortes concentrations pulmonaires d'antibiotiques avec des taux sériques bas, garants d'une toxicité systémique limitée pour ces antibiotiques à index thérapeutique étroit. C'est une méthode imparfaite car le dépôt pulmonaire est à prédominance centrale et ne représente que 15 à 20 % de la dose d'antibiotique nébulisée avec un risque accru de bronchospasme, notamment pour la colistiméthate sodique. Néanmoins, le bénéfice de l'antibiothérapie inhalée est confirmé dans le traitement précoce de la primo-colonisation à P.aeruginosa, en relais d'une cure d'antibiotiques administrés par voie IV, et dans le traitement d'entretien des infections pulmonaires chroniques dues à P.aeruginosa. L'utilisation de la colistiméthate sodique inhalée est validée dans ces deux indications thérapeutiques, tandis que celle de la tobramycine inhalée est réservée au traitement de la colonisation bronchique chronique à P.aeruginosa. L'emploi de la tobramycine inhalée provoque une augmentation de la résistance de P.aeruginosa, préoccupante pour son usage systémique, ainsi qu'une colonisation plus importante à C.albicans et Aspergillus fumigatus. Par contre, la colistiméthate sodique a une activité antibiotique constante sur P.aeruginosa du fait de sa faible utilisation parentérale. Les aérosols de colistiméthate sodique et de tobramycine permettent une amélioration significative de la qualité de vie des patients. L'aérosolthérapie fait l'objet à l'heure actuelle de conférences de consensus, permettant ainsi à deux tiers des patients atteints de mucoviscidose de bénéficier de ces techniques.CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

Histoire et traitements actuels de la tuberculose

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Clostridium difficile Genotyping Based on slpA Variable Region in S-Layer Gene Sequence: an Alternative to Serotyping

Recent investigations of Clostridium difficile cell wall components have revealed the presence of an S-layer encoded by the slpA gene. The aim of this study was to determine whether slpA genotyping can be used as an alternative to serotyping. The variable regions of slpA were amplified by PCR from serogroup reference strains and various clinical isolates chosen randomly. Amplified products were analyzed after restriction enzyme digestion and DNA sequencing. The sequences of the variable region of the SlpA protein were found to be strictly identical within a given serogroup but divergent between serogroups. These preliminary results suggest that PCR-restriction fragment length polymorphism, in conjunction with DNA sequencing of the slpA variable region, could constitute an alternative typing method for determining C. difficile serotypes

Identification and characterization of a fibronectin-binding protein from Clostridium difficile

International audienceA 68 kDa fibronectin-binding protein (Fbp68) from Clostridium difficile displaying significant homology to several established or putative Fbps from other bacteria was identified. The one-copy gene is highly conserved in C. difficile isolates. Fbp68 was expressed in Escherichia coli in fusion with glutathione S-transferase; the fusion protein and the native Fbp68 were purified. Immunoblot analysis and cell fractionation experiments revealed that Fbp68 is present on the surface of the bacteria. Far-immuno dot-blotting demonstrated that Fbp68 was capable of fixing fibronectin. Indirect immunofluorescence and ELISA were employed to demonstrate that C. difficile could bind both soluble and immobilized fibronectin. With competitive adherence inhibition assays it was shown that antibodies raised against Fbp68 partially inhibited attachment of C. difficile to fibronectin and Vero cells. Furthermore, Vero cells could fix purified membrane-immobilized Fbp68. Thus Fbp68 appears to be one of the several adhesins identified to date in C. difficile