Estudo experimental sobre a disseminação linfática do tumor de Ehrlich na forma sólida em camundongos

Metastasis to regional lymph nodes is an important step in the dissemination of cancer. The mechanisms of this dissemination are poorly understood, probably due to the paucity of authentic experimental models. The aim of the present study was to characterize the Ehrlich tumor as a model of lymphatic metastasis in mice. Animals were inoculated into the footpad and the popliteal lywph nodes were collected at several times post-inoculation in order to evaluate their weight, histopathological aspects,and mast cells quantitation, since these cells are reported to be implicated in host's response to tumor. The migration of tumor cells was detected by a biological assay as early as 1 hour post-inoculation. The solid tumor growth in the footpad was measured until day 30 post-inoculation and the histological alterations during this period were also studied. Ehrlich tumor was considered as a suitable model for the study of lymphatic metastasis.As metástases para linfonodos regionais representam fase importante na disseminação neoplásica. Os mecanismos que concorrem para este processo são pouco conhecidos, devido provavelmente à escassez de modelos experimentais adequados. O objetivo do presente estudo é o de caracterizar o tumor de Ehrlich como modelo para o estudo da disseminação linfática em camundongos. Para tanto, animais foram inoculados com células tumorais no coxim plantar e seus linfonodos poplíteos foram colhidos vários tempos após a inoculação, com a finalidade de avaliar seu peso, aspectos histopatológicos e quantificar os mastócitos, já que estas células parecem estar implicadas na resposta do hospedeiro ao tumor. A migração das células tumorais para os linfonodos poplíteos foi detectada a partir de 1 hora após a inoculação. 0 crescimento do tunor sólido no coxim plantar foi acompanhado até 30 dias após a inoculação, e as alterações histopatológicas foram estudadas durante esse período. 0 tumor de Ehrlich foi considerado un modelo experimental adequado para o estudo da disseminação linfática

The effect of soft-laser (diodes) radiation on wound healing in cats

The main objective of this investigation was to evaluate the improvement in skin wound healing in cats with the use of soft laser (diodes) Ga-As-SHLD radiation (904 nm). Ovariohisterectomised cats were divided into a control group and a laser-treated group. Anatomopathological observations were taken on days 2, 4 and 8, post-surgery along with macroscopic evaluation. We concluded that laser diode Ga-As-SHLD application ameliorated the surgical wound healing process by increasing its tensile strength.Verificou-se o valor do emprego do laser diodo Ga-As-SHLD para auxiliar o processo de cicatrizarão cutânea em felinos. Utilizaram-se 21 animais que foram submetidos à ovariohisterectomia, 9 pertencendo ao grupo controle e 12 submetidos à laserterapia. Os exames anatomopatológicos foram realizados nos dias 2, 4 e 8 de pós-operatório, juntamente com avaliação macroscópica. Concluiu-se que a aplicação do laser diodo Ga-As-SHLD auxiliou o processo cicatricial da ferida cirúrgica por aumento de resistência à tensão

Genetically modified animals for use in research and biotechnology

Transgenic animals are used extensively in the study of in vivo gene function, as models for human diseases and in the production of biopharmaceuticals. The technology behind obtaining these animals involves molecular biology techniques, cell culture and embryo manipulation; the mouse is the species most widely used as an experimental model. In scientific research, diverse models are available as tools for the elucidation of gene function, such as transgenic animals, knockout and conditional knockout animals, knock-in animals, humanized animals, and knockdown animals. We examined the evolution of the science for the development of these animals, as well as the techniques currently used in obtaining these animal models. We review the phenotypic techniques used for elucidation of alterations caused by genetic modification. We also investigated the role of genetically modified animals in the biotechnology industry, where they promise a revolution in obtaining heterologous proteins through natural secretions, such as milk, increasing the scale of production and facilitating purification, thereby lowering the cost of production of hormones, growth factors and enzyme

Tumor de células da granulosa com metástases numa gata

The clinical, gross and microscopical features of a granulosa cell tumour in the ovary of a 2-year-old cat are described. This is a rare tumour in cats, moreover because of the animal’s age. It was diagnosed clinically by ultrasound examination. The tumour, a cystic mass in the region of the left ovary, metastasized to the epiplon and lungs. Tumour cells expressed vimentin and were arranged in a diffuse sarcomatous pattern, supported by a fine fibrovascular stroma. The presence of hair loss and repeated oestrus as clinical signs are indicative of orthoendocrine paraneoplastic syndrome, due to excessive oestrogen stimulation. This tumour should be considered in the differential diagnosis of behavioural disturbances in female cats.As características clínicas, macroscópicas e microscópicas de um tumor de células da granulosa no ovário de uma gata de 2 anos de idade são descritas neste trabalho. Essa neoplasia é rara em gatos, principalmente devido à idade apresentada pelo animal. O diagnóstico foi feito clinicamente através de exame ultra-sonográfico. O tumor, uma massa cística na região do ovário esquerdo, metastatizou para o epíploo e para os pulmões. As células tumorais expressaram vimentina e arranjavam-se num padrão sarcomatoso e difuso, sustentado por fino estroma fibrovascular. A presença de sinais clínicos, como perda de pêlos e repetição de estros, é indicativa de síndrome paraneoplásica ortoendócrina, devido à excessiva estimulação estrogênica. A existência desse tipo de tumor deve ser considerada no diagnóstico diferencial de distúrbios comportamentais em gatas

"Paracoccidioidomicose-infecção" em Primatas brasileiros, mantidos em cativeiro

The aim of this study was to verify the possible occurrence of paracoccidioidomycosis-infection in animals that belong to the Order Primates, once they are phylogenetically closest to the only naturally susceptible host of the disease, the human being. This research was essayed using paracoccidioidin delayed hypersensitivity test in 33 Cebus apella, "weeping-capuchin". Paracoccidioidin positive skin reactions were detected at a rate of 33.33%. The humoral immunological response was detected by complement fixation test in 10% of the performed sera. Histological examinations of the intradermic test biopsies showed the presence of focal or nodular dermatitis deep in the dermis, prevailing the polymorphonuclear neutrophils both at 24 and 48 hours after inoculation, with oedema, congestion, and mild vasculitis. The results obtained in this study indicated that Cebidae are susceptible to natural "paracoccidioidomycosis - infection" and are suitable to be used in epidemiological surveys.O objetivo deste trabalho foi estudar alguns aspectos da epidemiologia desta micose, pesquisando a ocorrência de paracoccidioidomicose-infecção em animais da Ordem Primata, uma vez que são filogeneticamente os mais próximos ao homem, único hospedeiro naturalmente susceptível a esta micose sistêmica, no atual estágio de conhecimento. Foram realizados testes de hipersensibilidade do tipo tardio com paracoccidioidina em 33 exemplares de Cebus apella (macaco prego), obtendo-se 33,33% de positividade. Foram também executadas biópsias de reações intradêrmicas para exame histológico, testes sorológicos, de fixação de complemento e precipitação em meio líquido no soro destes animais. Os resultados obtidos permitiram verificar a ocorrência de paracoccidioidomicose-infecção em primatas não humanos, sugerindo a possível participação destes animais na epidemiologia da paracoccidioidomicose

Blood-brain barrier breakdown following gliotoxic drug injection in the brainstem of Wistar rats

Ethidium bromide (EB) causes local astrocytic disappearance, with glia limitans disruption and supposed blood-brain barrier (BBB) breakdown The aim of this study was to investigate the BBB integrity after the injection of 0.1% EB (group E) or 0.9% saline solution (group C) into cisterna pontis of Wistar rats. Brainstem fragments were collected from 24 hours to 31 days post-injection for ultrastructural study and GFAP immuno-histochemical staining. Some animals received colloidal carbon ink by intravenous route at the same periods. In rats from group C, there was no sign of astrocyte loss and no leakage of ink from blood vessels in the injection site. In group E, astrocyte disappearance began at 48 hours and some areas were still devoid of astrocytic processes 31 days after. Leakage of carbon particles was seen from 48 hours to 7 days in the EB-induced lesions. Tight junctions did not show any detectable ultrastructural change due to the lack of perivascular astrocytes.O brometo de etídio (BE) determina desaparecimento astrocitário local, com ruptura da glia limitans e suposto dano na barreira hematoencefálica (BBB). Este estudo visou avaliar a integridade da BBB após injeção de solução de BE a 0,1% (grupo E) ou de salina a 0,9% (grupo C) na cisterna pontis de ratos Wistar. Fragmentos do tronco encefálico foram coletados das 24 horas aos 31 dias pós-injeção para estudo ultra-estrutural e marcação imuno-histoquímica para a GFAP. Alguns animais receberam carvão coloidal por via intravenosa nos mesmos períodos. Nos ratos do grupo C, não houve sinal de perda astrocitária, nem extravasamento vascular de carvão no sítio da injeção. No grupo E, o desaparecimento astrocitário começou às 48 horas e algumas áreas estavam ainda destituídas de processos astrocíticos 31 dias após. Extravasamento de partículas de carvão nas lesões foi visto de 48 horas até 7 dias, não sendo detectada qualquer alteração ultra-estrutural das junções oclusivas pela falta de astrócitos perivasculares.58258

Esporotricosis felina: aspectos clínicos e zoonóticos

La esporotricosis consiste en micosis profunda, de evolución subaguda o crónica decurrente de infección por el hongo dimorfico Sporothrix schenkii. Consiste en dermatopatia mucho frecuente en nuestro medio, resultante de la penetración de abrojos e de arañazos por espinos de plantas. El S. schenkii ha sido descrito, en S. Paulo, en perros, gatos, aseninos, bovinos, equinos y ratones. Todavía, el carácter de antropozoonosis de la enfermedad pocas veces ha sido descrito tanto en la literatura internacional como en la nacional, existiendo apenas una citación en lo Brasil, de probable transmisión gato/hombre. Se discrebió, en lo presente relato, caso clínico de esporotricosis felina con transmisión através de arañadura en propietario, tratador y médico veterinário. Un gato, sin raza definida, macho, con 3 años, mucho agresivo, con grave cuadro cutáneo (cefálico, torácico y de miembros torácicos) manifestado por lesiones ulceradas, exudativas de alopecia, deposición de crostas hemorrágicas, agraviado por síntomas de lo complejo respiratorio felino, donde por su temperamento agresivo habia arenado en corto espacio de tiempo 5 individuos, donde 3 de los individuos manifestaron sintomas de evolución y gravedad distintas. El diagnostico clínico presuntivo fue confirmado perlo examen histopatológico (H.E., PAS) de fragmentos de piel, linfonodos y amígdalas cogidos, "intra-vitam" y/o "post-morten", per lo aislamiento de lo agente, per la inoculación en testículos de ratas adultas y posterior nuevo aislamiento. Se confirmó la patologia por pruebas suerológicas (F.C., anticuerpos precipitantes) y prueba de intradermoreación (esporotriquina) en los pacientes acometidos.The sporotrichosis is a deep mycosis, its course is subacute or chronic, and is caused by the Sporothrix schenckii. It's a very common dermatopathy, generally arising from thorn wounds, insects stings as well as from splinters. The S. schenckii has been described in São Paulo, Brazil, in canines, felines, asinines, bovines, equines and murines. However, its antropozoonotic feature has seldom been mentioned in the international literature, and, in Brazil, there is only one report about a possible transmission cat-human being. The current approach describes a clinical case of feline sporotrichosis transmitted by cat scratch to the owner, the career and the veterinarian.' A very offensive three-year-old male mongrel cat showed severe cutaneous lesions in cephalic, thoracic regions and forelimbs. These lesions were ulcerations, exsudation, crusts, alopecia worsened by the symptoms of the feline respiratory complex. This cat wounded, in a short time, 5 persons. Three of them had shown symptoms of distinct severity and development. The presumptive clinical diagnosis was corroborated by histopathology (HE, PAS) of skin, lymphonodes, and tonsils fragments obtained "intra-vitam" and "post-morten". This was true by the isolation of the agent. Finally, this was confirmed as a result of serological (FC, precipitation antibodies) and immunocutaneous (sporotrichina, histoplasmina) tests made in affected patients

Carcinogenese quimica por DMBA (7,12-dimethylbenzanthracene) em camundongos femeas BALB/c: novos fatos

Polycyclic aromatic hydrocarbons are known carcinogens used in rodent experimental models. In this study, the carcinogen DMBA (7,12-dimethylbenzanthracene) was administered by gavage, diluted in corn oil, to female BALB / c mice at hebdomadary doses of 1 mg per animal for 1, 3, 6 or 9 weeks. Animals were weighed and monitored weekly until death. Remaining animals were euthanized at the age of 53 weeks. At necropsy, representative fragments of neoplasms were collected and routinely processed for histopathological analysis. Of all mice that received DMBA, 68.57% developed some type of tumor. Of the 70 mice treated with various doses of DMBA, 22 (31.43%) developed mammary tumors. The adenoacanthoma was the most commonly (18.75%) diagnosed histological type of breast cancer. Lung (15.71%), lymphoid tissue (11.43%), stomach (7.14%) and skin (2.86%) were also primary sites of tumor development. One third (33.33%) of the mice receiving 1 mg of DMBA developed lung cancer. Therefore, the administration of DMBA was shown to be an efficient model of carcinogenesis in mice, especially for the study of breast cancer, when using the highest dose, and lung, when using the lowest dose. Carcinogenesis models have been used for several purposes in cancer research. These results represent new facts for a classic carcinogenesis model.Hidrocarbonetos policíclicos e aromáticos são carcinógenos usados em modelos experimentais em roedores. Neste estudo, o carcinógeno DMBA (7,12-dimetilbenzantraceno) foi administrado por gavagem, diluído em óleo de milho, para camundongos BALB/c em doses hebdomadárias de 1 mg por animal por 1, 3, 6 ou 9 semanas. Os animais foram pesados e monitorados semanalmente até a morte. Os animais remanescentes foram eutanasiados com a idade de 53 semanas. Na necroscopia, fragmentos representativos das neoplasias foram colhidos e rotineiramente processados para exame histopatológico. De todos os animais que receberam DMBA, 68,57% desenvolveram algum tipo de tumor. Entre os 70 camundongos tratados com diferentes doses de DMBA, 22 (31,43%) desenvolveram neoplasias mamárias. O adenoacantoma foi o tumor mamário mais comumente diagnosticado (18,75%). Pulmões (15,71%), tecido linfoide (11,43%), estômago (7,14%) e pele (2,86%) foram também locais primários de desenvolvimento de neoplasias. Um terço (33,33%) dos camundongos que receberam 1 mg de DMBA desenvolveram neoplasias pulmonares. Portanto, a administração de DMBA foi considerada um modelo eficiente de carcinogênese em camundongos, especialmente para o estudo de neoplasias mamárias, quando a maior dose é utilizada, e de neoplasias pulmonares, quando utilizada a menor dose. Os modelos de carcinogênese química têm sido usados para diversos estudos na pesquisa em câncer, os resultados aqui apresentados mostram novos fatos para um modelo clássico de carcinogênese

Immunohistochemical staining of the macrophagic and astrocytic response in the brainstem of Wistar rats submitted to the ethidium bromide gliotoxic model and treated with cyclophosphamide

The gliotoxic ethidium bromide (EB) was used to study morphologically the macrophagic and astrocytic response under immunosuppression by cyclophosphamide (CY). Astrocyte immunoreactivity to glial fibrillary acidic protein (GFAP) and vimentin (VIM) and macrophagic immunoreactivity to ED1 were investigated after EB injection. Male Wistar rats were injected with 0.9% saline solution (group I), 0.1% BE (group II) and 0.1% EB associated with CY treatment (group III). Brainstem samples were collected from the 1st to the 21st day post-injection for GFAP, VIM and ED1 immunostaining. In groups II and III, it was observed increased immunoreactivity to GFAP and reexpression of VIM. In group II, ED1-positive cells were noted after the 2nd day and in group III, after the 3rd day. On the 14th day post-injection, it was observed a greater quantity of ED1- positive cells in group III than in group II. Apparently, CY did not change the astrocytic response pattern.O gliotóxico brometo de etídio (BE) foi utilizado para o estudo da resposta macrofágica e astrocitária sob imunossupressão com ciclofosfamida (CY). Investigou-se a imunorreatividade astrocitária à proteína glial fibrilar ácida (GFAP) e à vimentina (VIM), e a imunorreatividade macrofágica ao ED1 após injeção do BE. Foram utilizados ratos Wistar adultos injetados na cisterna basal com salina a 0,9% (grupo I), BE a 0,1% (grupo II) e BE a 0,1%, imunossuprimidos com CY (grupo III). Fragmentos do tronco encefálico foram colhidos do 1º ao 21º dia pós-injeção para estudo imuno-histoquímico da GFAP, VIM e ED1. Nos grupos II e III, observou-se imunorreatividade aumentada para GFAP e re-expressão de VIM. No grupo II, células ED1-positivas foram observadas a partir do 2º dia e no grupo III, a partir do 3º dia. Aos 14 dias pós-injeção, havia mais células ED1-positivas no grupo III. A CY aparentemente não alterou a resposta astrocitária.78779

Remielinização em camundongos Knockout para conexina 32 desmielinizados experimentalmente

Este estudo visou avaliar o papel da conexina 32 (Cx 32) durante a remielinização no sistema nervoso periférico. Uma injeção local de 0,1% de solução de brometo de etídio foi realizada no nervo ciático de camundongos deletados para a Cx 32, com eutanásia dos animais aos 1, 2, 3, 7, 15, 21 e 30 dias pós-injeção. Avaliações histoquímicas, imunoistoquímicas, por imunofluorescência e por microscopia eletrônica de transmissão foram utilizadas na análise do desenvolvimento das lesões. Nos nervos ciáticos, células de Schwann mostraram inicialmente sinais de intoxicação e rejeitaram suas bainhas. Após sete dias, observaram-se finas bainhas neoformadas, com compactação desigual e alças redundantes (tomácula). Conclui-se que a regeneração de bainhas de mielina perdidas no SNP seguiu o padrão já relatado deste modelo em outras espécies de laboratório. Portanto, estes resultados sugerem que a ausência da Cx 32 não interferiu com o padrão normal de remielinização em camundongos jovens neste modeloThe aim of this study was to evaluate the role of connexin 32 (Cx 32) during remyelination of the peripheral nervous system, through a local injection of either 0,1% ethidium bromide solution or saline in the sciatic nerve of Cx 32 knockout mice. Euthanasia was performed ranging from 1, 2, 3, 7, 15, 21 to 30 days after injection. Histochemical, immunohistochemical, immunofluorescence and transmission electron microscopical techniques were used to analyze the development of the lesions. Within the sciatic nerves, Schwann cells initially showed signs of intoxication and rejected their sheaths; after seven days, some thin newly formed myelin sheaths with uneven compactness and redundant loops (tomacula) were conspicuous. We concluded that the regeneration of lost myelin sheaths within the PNS followed the pattern already reported for this model in other laboratory species. Therefore, these results suggest that absence of Cx 32 did not interfere with the normal pattern of remyelination in this model in young miceCNPq 475029/2004-6Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de Nivel Superior (CAPES